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LABORATORIO #9

IDENTIFICACION DE LA CROMATINA SEXUAL

Alvarez María A.1, Fuentes Karen1, Paternina


Alejandra1, Pedroza Michelle1, Primo Rosa1,
Sánchez Maria J.1

1. Estudiantes de la facultad de Odontología

Julio 2019
RESUMEN ABSTRACT

El número de cromosomas en las células The number of chromosomes in somatic cells


somáticas es específico de la especie y se is species specific and is called a genome,
denomina genoma, lo que es la constitución which is the total genetic constitution. In
genética total. En el ser humano, el genoma humans, the genome consists of 46
está constituido por 46 cromosomas que chromosomes that represent 23 homologous
representan 23 pares homólogos de pairs of chromosomes, one member of each
cromosomas, un miembro de cada uno de los of the pairs of chromosomes is derived from
pares de cromosomas se deriva de la madre, the mother, while the other is derived from
en tanto que el otro se deriva del padre. El the father. The microscopic study of the
estudio microscópico de los núcleos en nuclei in the interphase of the cells of the
interfase de las células de las mujeres women manifests a very inscribed and very
manifiesta un acúmulo muy enrollado y muy compact accumulation of chromatin, the so-
compacto de cromatina, la llamada cromatina called sexual chromatin (Barr body). In this
sexual (Cuerpo de barr). laboratory practice the objective was to
En esta práctica de laboratorio el objetivo fue recognize the body of barr in buccal mucosa
reconocer el cuerpo de barr en células de la cells and thus understand the importance of
mucosa bucal y así comprender la sexual chromatin and know that the
importancia de la cromatina sexual y saber difference between the sex chromatins of man
que la diferencia que existe entre las and woman to carry out is practical we had to
cromatinas sexuales del hombre y de la subtract the oral mucosa of a woman and a
mujer para llevar acabo está practica tuvimos man, fixed solution, aceto-orcein and observe
que sustraer la mucosa bucal de una mujer y under the microscope being able to observe
de un hombre, solución fijadora, aceto- the barr body.
orceína y observar en el microscopio
pudiendo observar el cuerpo de barr.
Keywords: Barr body, sexual chromatin, man
Palabras claves: cuerpo de barr, cromatina and woman.
sexual, hombre y mujer.
INTRODUCCIÓN METODOLOGIA
En el año de 1944 Barr observó un pequeño Limpie la mucosa de la cavidad oral con un
cuerpo de cromatina en las células de gato pedazo de gasa. El paciente debe mantener la
hembra, este corpúsculo no se observaba en boca abierta y disponer la lengua en el lado
las células del macho dela misma especie. A opuesto al que va a ser frotado.
partir de este hecho se formuló la pregunta
Para el frotis de la mucosa se utiliza la
del porqué de esta diferencia, extendió su
espátula. Este debe hacerse con presión
estudio a otro tipo de células y de otras
moderada, asegurándose de obtener una capa
especies. En la actualidad se conoce que en la
de material blanquecino.
especie humana las células de una hembra
normal contienen un cuerpo situado junto a la El material de la espátula se extiende delgada
membrana nuclear, que se tiñe de oscuro, y suavemente sobre una lámina y ésta se
llamado cuerpo de Barr o cromatina sexual, sumerge inmediatamente en la solución
que en este caso representa a uno de los dos fijadora. Pueden obtenerse tres láminas de
cromosomas sexuales X de la mujer. La cada lado de la boca. Las láminas pueden
cromatina del cuerpo de Barr no existe en las permanecer en el fijador entre un minuto y
células de los machos normales, aunque se ha una semana. Las láminas se colocan en una
observado que las células de individuos con cubeta de coloración y el colorante aceto-
constituciones anormales de cromosomas orceína se aplica por 10 minutos. Sí solo
sexuales. Por ejemplo, un individuo con cuenta con orceína en el laboratorio, entonces
cromosomas sexuales XXY, presenta un adicione a 1gramo de esta 45 ml de ácido
cuerpo de Barr de cromatina sexual, una acético concentrado; caliente hasta ebullición,
hembra X0, no tiene ningún cuerpo de Barr, deje enfriar y filtre para obtener la aceto-
pero una hembra XXX presenta dos cuerpos. orceína.
En esta práctica de laboratorio se podrá
observar la cromática sexual en células Se dispone una laminilla sobre la lámina y el
masculinas y femeninas e identificar el colorante en exceso se remueve aplicando
cuerpo de Barr en células de la mucosa bucal. papel de filtro y ejerciendo firme presión.

OBJETIVOS Observe inmediatamente con el objetivo de


menor aumento, para buscar áreas donde las
Objetivo general células estén bien extendidas.
• Observar la cromatina sexual en Observe con el objetivo de mayor aumento
células humanas masculinas y (o inmersión) e identifique las estructuras
femeninas. ligeramente alargadas o plano-convexas,
adyacentes a membrana nuclear de coloración
Objetivos específicos
oscura en comparación con el resto del
• Reconocer el cuerpo de Barr en núcleo.
células de la mucosa bucal.
• Comprender la importancia de la
cromatina sexual en aquellos MARCO TEORICO
síndromes que cursan con problemas
La cromatina es la sustancia que forma un
de diferenciación sexual.
cromosoma y consiste en la combinación de
ADN con proteínas. El ADN lleva consigo las nivel máximo de esta compactación. Dentro
instrucciones genéticas de la célula. Respecto del núcleo en interfase, la cromatina se
a las proteínas, la mayoría de las que organiza en territorios funcionales.(Tomado
componen la cromatina son las histonas, la de:
cuales ayudan a empaquetar el ADN en una http://geneticahumana.tripod.com/libros/page
forma compacta que cabe dentro del núcleo 187.html)
celular. Los cambios en la estructura de la
La cromatina se ha dividido en: Eucromatina
cromatina se producen cuando el ADN se
y heterocromatina.
duplica y durante la expresión génica.
(Tomado de: La heterocromatina ha sido definida como
https://www.genome.gov/es/genetics- una estructura que no altera su nivel de
glossary/Cromatina) condensación o compactación a lo largo del
ciclo celular, mientras que, por el contrario, la
El material genético de la célula eucariota
eucromatina se descondensa durante la
está organizado en una estructura compleja
interfase. La heterocromatina se localiza
compuesta de ADN y proteínas localizada en
principalmente en la periferia del núcleo y la
un compartimento especializado, el núcleo.
eucromatina en el interior del nucleoplasma.
Esta estructura se ha denominado cromatina
Además, podemos distinguir:
(de la palabra griega "khroma", que significa
heterocromatina constitutiva, que contiene
coloreado, y "soma", que significa cuerpo).
pocos genes y está formada principalmente
En total, dentro de un pequeño núcleo de
por secuencias repetitivas localizadas en
algunas mm de diámetro nos podemos
grandes regiones coincidentes con
encontrar con casi dos metros de ADN. A
centrómeros y telómeros, de la
pesar de este enorme grado de compactación,
heterocromatina facultativa compuesta de
el ADN debe ser accesible muy rápidamente
regiones transcripcionalmente activas que
para permitir su interacción con las
pueden adoptar las características
maquinarias proteicas que regulan las
estructurales y funcionales de la
funciones de la cromatina para la: replicación,
heterocromatina, como el cromosoma X
reparación y recombinación.
inactivo de mamíferos.
Por lo tanto, la organización dinámica de la
En resumen, la cromatina tiene influencia
cromatina tiene influencia, de manera
sobre la organización del genoma a nivel del
potencial, sobre todas las funciones del
núcleo.
genoma.
Masa condensada de cromatina, en el núcleo
La unidad fundamental de la cromatina,
interfase, que constituye un cromosoma X
denominada nucleosoma, está compuesta de
inactivado. cada cromosoma X que sobrepase
ADN e histonas. Esta estructura es la base del
la cifra de uno forma un cuerpo de cromatina
primer nivel de compactación del ADN en el
sexual (corpúsculo de Barr) en el núcleo de
núcleo. Los nucleosomas se encuentran
los mamíferos. (Tomado de:
separados de manera regular a lo largo del
https://www.udg.co.cu/cmap/botanica/Cromat
genoma para formar un nucleofilamento que
ina.htm)
puede adoptar niveles superiores de
compactación, resultando finalmente en el El ser humano tiene una constitución
cromosoma metafásico, que representa el cromosómica diploide de 46 cromosomas: 22
pares de autosomas y un par de cromosomas 3) El cromosoma inactivado puede ser
sexuales. Las mujeres representan el sexo indistintamente un X de origen paterno o un
homogamético (XX) y los varones el sexo X de origen materno, en diferentes células del
heterogamético (XY). El cromosoma X es un mismo individuo, pero todos los
cromosoma submetacéntrico perteneciente al descendientes clonales de dicha célula
grupo C, cuyos genes se conocen como tendrán inactivado el mismo cromosoma X.
ligados al sexo. En 1949 M. Barr y E.G. Por ello se dice que la inactivación del X es al
Bertram observaron una pequeña masa de azar, pero fija. Este proceso explica el hecho
cromatina en el núcleo de células nerviosas de que el producto génico de los genes
de gato, la cual según lo constataron, era más ligados al X es igual en ambos sexos. Los
frecuente en hembras y muy rara en los individuos con una constitución cromosómica
machos. Esta es la llamada Cromatina Sexual anormal en que se incluyen X
o Cuerpo de Barr que consiste en un supernumerarios Ej. Síndrome de Klinefelter,
cromosoma X inactivado, altamente presentan mayores anomalías fenotípicas
condensado. Así, se dice que los individuos mientras más cromosomas X extras posean, a
son cromatina positiva cuando esta estructura pesar de que todos ellos suelen estar
se encuentra presente y cromatina negativa inactivados formando cuerpos de Barr.
cuando falta. Más tarde, la cromatina sexual
La cromatina se puede encontrar de dos
fue hallada e identificada en células de
formas: Heterocromatina, es una forma
hembras de la mayoría de las especies de
inactiva condensada localizada sobre todo en
mamífero incluyendo al hombre.
la periferia del núcleo, que se tiñe
Por muchos años los investigadores se fuertemente con las coloraciones. La
preguntaron, cómo era posible que las heterocromatina puede ser de dos tipos
mujeres al tener dos cromosomas X formen diferentes: la constitutiva, idéntica para todas
igual cantidad de producto génico que los las células del organismo y que carece de
varones con un solo cromosoma X. Al información genética, y la facultativa,
parecer debía existir un mecanismo de diferente en los distintos tipos celulares y que
"compensación de dosis". En 1961 Mary contiene información sobre todos aquellos
Lyon, a la par de muchos otros científicos que genes que no se expresan. Eucromatina,
estudiaban este tema formuló una hipótesis diseminada por el resto del núcleo y no
conocida como la "Hipótesis de Lyon", visible con el microscopio de luz. Representa
basada en una serie de experimentos llevados la forma activa de la cromatina en la que se
a cabo en ratones. Esta teoría establece que: está transcribiendo el material genético de las
moléculas de DNA a moléculas de RNAm.
1) En las células somáticas de las hembras de
Los núcleos en interfase de las células de
mamíferos sólo un cromosoma X es activo y
mujeres presentan un acúmulo muy compacto
el segundo cromosoma X está condensado o
de cromatina, llamada cromatina sexual (o
inactivado y aparece en interfase como
corpúsculo de Barr), que es la parte inactiva
cromatina sexual.
de los dos cromosomas X. Por eso, esta
2) La inactivación se inicia a comienzos de la cromatina resulta de interés para determinar
vida embrionaria (blastocisto). el género a partir de células epiteliales
obtenidas de las mucosa oral y neutrófilos
sanguíneos. (Tomado de:
http://atlasgeneticsoncology.org/Educ/Cromat
inaSpID30017SS.html)
RESULTADOS
En esta práctica de laboratorio de
identificación de cromatina sexual se observó
la presencia del crepúsculo de barr en la placa
realizada en la mujer, además que en la placa
del hombre no existe el corpúsculo, porque el
hombre no tiene un cromosoma adicional, en
la siguientes imágenes se puede apreciar la
presencia de la cromatina sexual en la mucosa
bucal y los demás procedimientos dados

Fig 3. Solución fijadora.

Fig 1. Papel de filtro.


Fig 4. Porta-objetos y cubre-objetos.

Fig 2. Colorante Aceto-orceína Fig 5. Cubeta de coloración.


Fig 9. Paleta con material blanquecino en
Fig 6. Aceite de inmersión. su superficie.

Fig 10. Material blanquecino hombre en


Fig 7. Paciente No. 1 mujer haciendo frotis porta objeto.
para la obtención del material blanquecino.

Fig 8. Paciente No. 2 hombre haciendo frotis Fig 11. Cubeta de coloración con porta
para la obtención del material blanquecino. objeto.
Fig 12. Cubeta con porta objeto y solución fijadora Fig 15. Cubeta con portaobjetos y coloración aceto-
en su interior. orceína.

Fig 13. Porta objeto con material blanquecino


después de extraerlo de la cubeta de coloración con
solución fijadora.
Fig 16. Introduciendo porta objetos en cubeta de
coloración con aceto-orceina.

Fig 17. Porta objetos en papel filtro después de


reposar en cubeta de coloración.
Fig 14. Introduciendo porta objetos en Aceto-
orceina.
Fig 21. Agregando aceite de inversión al cubre
Fig 18. Porta objetos después de remover exceso de objeto para su visualización en objetivo 100x.
colorante con papel filtro.

Fig 19. Porta objeto con material blanquecino del Fig 22. Mucosa bucal del hombre objetivo
hombre. 100x.

Fig 23. Porta objeto con material


blanquecino de la mujer.
Fig 20. Mucosa bucal del hombre con objetivo 40x.
Fig 24. Mucosa bucal de la mujer con objetivo 40x.
Fig 27. Mucosa bucal de la mujer con objetivo
100x.

DISCUSION
En este laboratorio de identificación de
cromatina sexual, se observó que esta solo
está presente en la mujer. Para comprobar
eso, se extrajo una muestra de mucosa bucal
de un hombre y una mujer, haciendo un
proceso de tinción en cada una de las
muestras y así poder apreciar las diferencias
mediante el microscopio. En la muestra de la
Fig 25. Mucosa bucal de la mujer con objetivo 40x.
mujer si se observó el corpúsculo, lo cual
confirma la inactivación de uno de sus
cromosomas x, ya que el corpúsculo de barr
es un cromosoma inactivo que se puede ver
en la interface de algunas células como un
pequeño punto adherido a la membrana
nuclear. Esta cromatina X, como en los casos
normales, no se observó en la muestra del
hombre, ya que este no posee un cromosoma
X adicional sino que es un sujeto XY normal.
Se puede decir que si tuviera un cromosoma
adicional presentaría el síndrome de
Klinefelter (47 XXY) lo cual indica a
individuos con fenotipo masculino y con
cromatina X.
Fig 26. Mucosa bucal de la mujer con objetivo
100x.
CONCLUSIÓN 48,XXXX (tetra-X) y 49,XXXXX (penta-X).
Los síndromes asociados con estos cariotipos
Con esta práctica y la investigación de esta,
son similares, pero más pronunciados que los
pudimos determinar en qué tipo de personas
del síndrome 47,XXX. Así, en muchos casos,
se dan los corpúsculos de Barr y por qué en
la presencia de un cromosoma X adicional
algunos que no deben de tener se da;
parece trastornar el delicado equilibrio de
comprendimos la definición de la cromatina x
información genética esencial para el
así como los corpúsculos de Barr que actúan
desarrollo normal de una mujer.
en los diferentes tipos de cromatinas sexuales.
Y por último pudimos observar por medio del Condición 47,XYY: Otra situación que
microscopio el corpúsculo de Barr. implica a los cromosomas sexuales es la
47,XYY. Los estudios de esta condición, en
En cuanto a la cromatina sexual, aprendimos
donde la única desviación de la diploidía es la
a reconocer los síndromes que cursan en la
presencia de un cromosoma Y extra en un
diferenciación sexual, como por ejemplo
cariotipo masculino que por lo demás es
cuando en el hombre existe un cromomoma
normal fueron iniciados en 1965 por Patricia
adicional se presenta el síndrome de
Jacobs. Esta investigadora descubrió que 9 de
klinefelter y cuando una mujer presenta un
los 315 varones de una prisión de máxima
solo cromosoma X está presenta el síndrome
seguridad escocesa tenían el cariotipo
de Turner.
47,XYY. Estos varones eran
CUESTIONARIO significativamente más altos que el promedio
y habían sido encarcelados por actos
1. Consulta, que otras patologías criminales antisociales (no violentos). De los
diferentes a los síndromes de Turner y nueve varones estudiados, siete tenían una
klinelfelter, están relacionados con la inteligencia por debajo de lo normal y todos
cromatina sexual. sufrían desórdenes de personalidad. Otros
R/ El síndrome 47,XXX: La presencia estudios dieron resultados similares. La
anormal de tres cromosomas X junto con una posible correlación entre esta composición
dotación normal de autosomas (47,XXX) da cromosómica y un comportamiento criminal
lugar a diferenciación femenina. El síndrome provocó un considerable interés y exhaustivas
altamente variable que acompaña a este investigaciones del fenotipo y de la
genotipo, a veces denominado triplo-X, se frecuencia de la condición 47,XYY resultante
presenta en aproximadamente 1 de cada 1000 en las poblaciones criminal y no criminal. En
nacimientos femeninos. Frecuentemente, las general, se ha verificado una estatura por
mujeres 47,XXX son perfectamente normales encima del promedio (normalmente por
y pueden no ser conscientes de su encima de 1,80 metros) y una inteligencia por
anormalidad en cuanto al número debajo de lo normal, y la frecuencia de
cromosómico, a menos que se realice un varones que presentan este cariotipo es
cariotipo. En otros casos, se puede dar un realmente mayor entre las personas que se
menor desarrollo de las características encuentran en instituciones penales y
sexuales secundarias, así como esterilidad, mentales que entre la población no
retrasos en el desarrollo del lenguaje y de las encarcelada. (Tomado de: Klug William S.,
capacidades motoras, y retraso mental. En Cummings, Michael R., Spencer, Charlotte
casos raros, se han encontrado cariotipos
A., Palladino, Michael A. Genética, Décima y se le denomina herencia seudoatosómica,
edición.) pero los genes localizados en el resto del
cromosoma Y segregan solo a través de los
2. ¿Cuál es el patrón de herencia de las
varones que presentan la mutación. Se
patologías consultadas?
conocen 45 loci en el cromosoma Y y se han
R/ Cuanto mayor es la aneuploidía (de reportado al menos 27 genes mutados, con
XXYY a XXXXY) mas grave son los efectos en el fenotipo. Ejemplos de estos son:
retrasos del crecimiento, el hipogenitalismo y la retinosis pigmentaria ligada al cromosoma
otras manifestaciones. Y; el factor azoospermia-1; el
gonadoblastoma; antígeno de
47,XXX: Aunque son frecuentes los histocompatibilidad Y (HY); el receptor de la
trastornos menstruales y la fertilidad esta interleuquina-3; el factor determinante
disminuida, los hijos de estos pacientes testicular (TDF); la región del cromosoma Y
suelen ser normales. (SRY), que determina el sexo y otros
XXXX: No hay la fertilidad de estos caracteres con consecuencias fenotípicas
pacientes. menos delineadas. La herencia de rasgos
cuyos loci se encuentran en el cromosoma Y,
47,XYY: En su mayoría son fértiles y tienen también recibe el nombre de herencia
hijos con cromosomas normales, no obstante, holándrica.(Tomado de: Introducción a la
se ha sugerido un aumento de tener hijos con genética médica; 2ª. ed. / Araceli Lantigua
anomalías cromosómicas, así como de Cruz et al. La Habana: Editorial Ciencias
abortos y muerte perinatal.(Tomado de: Médicas, 2011.)
Jones, K., L. Smith (2006): Patrones
reconocibles de malformaciones humanas. 4. ¿Qué otros métodos diferentes al
Jones. 6ta.edición. Elsevier Saubders) utilizado en esta práctica, se pueden utilizar
para identificar cromatina sexual?
3. Investiga acerca de los genes holándricos
y su importancia Biomédica. R/ La relación del número de cuerpos de Barr
con el de cromosomas X tuvo un nuevo y
R/ Los genetistas han identificado varios valioso soporte en los estudios de German
genes en el cromosoma Y que están sobre replicación tardía de uno de los
implicados en la determinación del sexo cromosomas X en la mujer, utilizando el
masculino. El gen del sexo invertido en Y método de timidina marcada con tritio, La
(SRY), es el gen principal que determina el explicación a la función del cuerpo de
sexo masculino en el cromosoma Y, actúa cromatina fué dada por Mary Lyon con la
como un “interruptor genético” que causa el hipótesis que lleva su nombre, según la cual
desarrollo de los testículos en el feto. (tomado tempranamente en la vida embrionaria (12 -
de: Solomon, Eldra P., Linda R. Berg y Diana 16 días de desarrollo embrionario) uno de los
W. Martin Biología, Novena edición ) cromosomas X en la mujer se inactiva,
La transmisión de los genes que se ocurriendo esta inacti vación al azar.
encuentran en la región seudoautosómica que Siguiendo el comportamiento de algunas
permite la sinapsis de los cromosomas X y Y enzimas cuyo locus están localizados en el
en la profase de la meiosis I, no se diferencia cromosoma X, esta hipótesis ha tenido amplia
de la estudiada en las herencias autosómicas, confirmación. el reciente hallazgo de
Caspersson de que los cromosomas toman un En un alegato de abuso sexual la ausencia de
patrón específico de fluorescencia al tratarlos evidencias no es necesariamente prueba de
con mostaza de quinacrina, no solo permitió que el hecho que se denuncia no haya
un avance importante en las técnicas de existido, la identificación de la motilidad de
citogenética, sino que hizo posible un método los espermatozoides ó su sola identificación
para identificar el cromosoma Y. En efecto, aunque no estén aún móviles, la
estos autores encontraron que con el agente identificación de la elevación de la fosfatasa
mencionado la porción distal de los brazos ácida en las secreciones vaginales son
largos del cromosoma Y muestra la más usualmente las figuras Medico Legales que
intensa fluorescencia en el cario-tipo humano, pueden ser utilizados para confirmar una
a pesar de que otros cromosomas como el versión de abuso sexual. También se ha
número 3 y los cromosomas del grupo D estado traba ando en la búsqueda de la
(cromosomas 13-14-15) también fluorescen licoproteina P30 del semen, por ello el
intensamente, especialmente en las regiones obtener evidencias positivas al respecto
próximas al centrómero. La técnica se utilizó confirman un acto sexual reciente y la
para estudiar células en interfase empleando comprobación de estos elementos se ha vuelto
hidrocloruro de quinacrina y fueron Pearson una obsesión en las oficinas Medico
et al y George (12) los primeros en demostrar Forenses. (Tomado de: Tucker, S Claire, E
que la fluorescencia del cromosoma y Ledray , L.E. Werner, J.S. And Clalre, E, "
también se evidenciaba en las células que no Sexual Assault Evidence Collections, "
están en división (interfase), apareciendo Wisconsin Medical Journal, 1990, pp 407-
como un pequeño corpúsculo fluorescente 411.)
muy cerca de la membrana nuclear. (Tomado
de: Caspersson, T., Farber, S., Foley, G.E.,
Kuclynowslc/, J., lttocJest. E.J., Simonsson, BIBIOGRAFIA
E. Wagh, U., y Zech, L., Exptl. Cell Res., 49:
219, 1968.) • http://bdigital.unal.edu.co/24857/1/22
077-75780-1-PB.PDF
5. Investiga sobre las aplicaciones que en • http://www.bvs.hn/Honduras/Sexologi
medicina legal tiene la determinación de aForense/pdf/SexologiaForense-9.pdf
cromatina sexual. • https://www.genome.gov/es/genetics-
R/ En un estudio retrospectivo utilizando la glossary/Cromatina
técnica de la Fluorescencia Celular con el • http://geneticahumana.tripod.com/libr
cromosoma "Y" específico en DNA, os/page187.html
demostró la diferenciación de células • http://atlasgeneticsoncology.org/Educ/
espermáticas masculinas, de células de no CromatinaSpID30017SS.html
espermáticas masculinas- En una secreción • https://www.udg.co.cu/cmap/botanica/
cervico vaginal en un caso de alegado abuso Cromatina.htm
sexual.- Los resultados de esta investigación
preliminar ha hecho que la aplicabilidad de
ésta técnica sea considerada en las REFERENCIAS BIBIOGRAFICAS
investigación de los alegados asaltos
• Jones, K., L. Smith (2006): Patrones
sexuales.
reconocibles de malformaciones
humanas. Jones. 6ta. edición. Elsevier
Saubders
• Klug William S., Cummings, Michael
R., Spencer, Charlotte A., Palladino,
Michael A. Genética, Décima edición
• Introducción a la genética médica; 2ª.
ed. / Araceli Lantigua Cruz et al. —
• La Habana: Editorial Ciencias
Médicas, 2011.
• Solomon, Eldra P., Linda R. Berg y
Diana W. Martin. Biología, Novena
edición
• Caspersson, T., Farber, S., Foley,
G.E., Kuclynowslc/, J., lttocJest. E.J.,
Simonsson, E. Wagh, U., y Zech, L.,
Exptl. Cell Res., 49: 219, 1968.
• Tucker, S Claire, E Ledray , L.E.
Werner, J.S. And Clalre, E, " Sexual
Assault Evidence Collections, "
Wisconsin Medical Journal, 1990, pp
407-411.

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