Laboratorio de Biologia Molecular

TRABAJO DE LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
Estudiantes:
Erika Mildred Ruiz
Código:1075255955
Carolina Bolaños
Código: 1080266471
Jennifer Velásquez
Código: 1119215844
José David Prieto
Código:1054556191
Juan Guillermo España
Código:7715689
Presentado a:
Marilyn Paola Bernal
Tutora de Laboratorio
Universidad Nacional Abierta y a Distancia
ECISALUD
Sede Ibagué
27-28 de abril del 20
1
2
ÍNDICE
Unidad 1: Naturaleza de las ciencias
• Práctica No.1: Bioseguridad
Unidad 2: Célula
• Práctica No.2: Microscopía
• Práctica No.3: Célula: Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
• Práctica No.4: Permeabilidad selectiva del eritrocito
Unidad 3: Genética
• Práctica No.5: Mitosis y Meiosis
• Práctica No.6: Extracción de ADN
• Práctica No.7: Genética humana
3
INTRODUCCIÓN
Para la realización del presente trabajo han participado los alumnos; Erika Mildred Ruiz,
Carolina Bolaños, Jennifer Velásquez, José David Prieto y Juan Guillermo España; en este
trabajo tocaremos temas muy importantes en cuanto la biología celular y molecular tanto de los
seres vivos como de las plantas, El presente trabajo está conformado por 7 practicas presenciales.
En la primera practica hablaremos de los métodos de bioseguridad, como son los utensilios de
seguridad personal como es la tapa bocas, gorro, gafas de seguridad y guantes desechables, por
otro lado, también hablaremos del paso a paso que se debe realizar a la hora de realizarnos el
lavado de manos para realizar cualquier procedimiento en el laboratorio.
En la segunda, tercera y cuarta practica hablaremos acerca del uso del microscopio y de la
funcionalidad de cada una de las partes que lo componen, también tocaremos de cómo se
observan las células animales como vegetales en tres tipos de visión del microscopio como son
4x, 10x y 40x, también observaremos el cambio de la estructura de cada una de las células al
interactuar con otros componentes químicos.
Por último en la quinta, sesta y séptima practica tocaremos como tema la mitosis y meiosis
celular tanto vegetal como animal, realizaremos extracción del ADN animal y vegetal y por
ultimo daremos una pequeña descripción de genotipo humano.
4
OBJETIVO
Objetivo general
• Dar a conocer la importancia de la Biología Celular y Molecular en la composición de la
estructura genética de los seres vivos y de las plantas.
Objetivos Específicos
• Aprender sobre cada una de las partes del microscopio.
• Observa sobre la estructura genética de los seres vivos y las plantas.
• Comprender cada uno de las genotipos y alelos de los seres vivos.
• Distinguir cada uno de los poderes de aumento de un microscopio.
• Conocer que es la bioseguridad y los diferentes elementos de protección.
• Aprender de los diferentes tipos de lavado de manos y como realizar el paso a paso del
procedimiento.
5
DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 1
“Bioseguridad”
Introducción
El significado de la palabra bioseguridad se entiende por sus componentes: “bio” de bios (griego)
que significa vida, y seguridad que se refiere a la calidad de ser seguro, libre de daño, riesgo o
peligro. Bioseguridad en el Laboratorio de biología es el conjunto de normas y procedimientos que
debe seguirse, para conservar la salud y seguridad del personal que labora en el laboratorio y de la
comunidad frente a los riesgos de infección para evitar contaminarse y contaminar a los demás con
agentes potencialmente patógenos. Los microorganismos pueden entrar al huésped por diferentes
mecanismos: contacto directo con la sustancia infectada (saliva, sangre, pus, lesión); salpicaduras
de sangre o saliva, secreciones nasofaríngeas sobre la piel o mucosa sana o erosionada, contacto
directo con objetos contaminados y, por aerosoles contaminados.
Objetivo
Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Material que debe llevar al laboratorio
Elementos de protección personal (Bata, gorro, guantes, tapabocas y gafas de bioseguridad),
Toallas desechables, jabón antiséptico.
6
Material que le será proporcionado en el Laboratorio
Hipoclorito de sodio.
Procedimiento:
1. Normas de Bioseguridad
• Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes
de salir del laboratorio.
• Usar guantes para manipular muestras, evitar contaminar el área de trabajo y los
implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en
la caneca roja.
• Dar uso adecuado a los guantes, ya que son un “arma de doble filo”
• Utilizar mascarillas de respiración, la cual debe encajar cómoda y adecuadamente
sobre el puente de la nariz para evitar el empañamiento de las gafas protectoras.
Esta protege sobre todo la mucosa nasal que es más susceptible a infecciones que
la bucal, debido a que esta última tiene mayor cantidad de flora normal que la
protege contra infecciones.
• Utilizar anteojos de protección para evitar lesiones oculares causadas por
partículas proyectadas hacia el rostro del operador, a la vez que protege contra
infecciones considerando que muchos gérmenes de la flora oral normal son
patógenos oportunistas.
7
• No entrar al Laboratorio implementos que no tengan que ver con la práctica.
• No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el
Laboratorio.
• Jamás llevarse el lapicero, bolígrafo o cualquier otro implemento a la boca.
• No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del Laboratorio.
• Hablar lo mínimo mientras está trabajando en el Laboratorio.
• No pipetear con la boca.
• No usar jeringas o agujas para manipular líquidos o especímenes clínicos.
• Utilizar únicamente mecheros comerciales, NUNCA improvisados.
• Mantener el Laboratorio limpio y aseado.
• Descontaminar las áreas de trabajo antes de iniciar la práctica de laboratorio, cada
vez que se derrame una sustancia y, una vez terminada la práctica.
• Descartar todo el material contaminado en los recipientes destinados para ello.
• Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de
abandonar el Laboratorio.
• Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos.
• Leer y entender los pasos de cada procedimiento antes de proceder a realizarlo.
• Preguntar al docente cualquier duda sobre los procedimientos a seguir.
8
• No permitir el ingreso de personas ajenas a las áreas de trabajo.
Notificar de inmediato al docente cualquier accidente.
2. Desinfección del área de Trabajo.
• Prepare una dilución de hipoclorito de sodio al 0.5%.
• Impregnar el área de trabajo y dejar actuar durante 5 minutos.
• Pasado este tiempo limpiar con toallas de papel, del centro hacia la periferia y
descartar el papel en la caneca correspondiente.
Nota: este procedimiento se debe realizar antes y después de las prácticas
3. Manejo de elementos de protección personal.
El docente le indicará la manera adecuada de colocar, usar y retirar todos y cada uno de los
elementos de protección (bata, anteojos, mascarilla respiratoria o tapabocas, guantes, etc.) a
utilizar en el laboratorio.
9
Tabla 1. Elementos de Bioseguridad y sus características
EQUIPO CARACTERÍSTICAS DE
PELIGRO EVITADO
SEGURIDAD
Abertura trasera
Bata Contaminación de ropa
Cubren la ropa de calle
Gafas de Lentes resistentes a los impactos

Impactos
seguridad Protección Lateral
De látex, vinilo o nitrilo, aprobados

Contacto directo con fluidos
Guantes para uso microbiológico, desechables
y/o microorganismos
Protección de las manos
Varios diseños disponibles

Tapabocas/Masca
Inhalación de aerosoles Desechables
rillas
De cara entera o media cara
Fuente: Elaboración propia, 2017
10
4. Lavado de manos.
• Abrir la llave del agua con una toalla desechable o un trozo de papel y descartar
ese papel en la caneca.
• Humedecer las manos con agua de chorro.
11
• Aplicar jabón antiséptico en la palma de la mano.
• Frotar las palmas de las manos entre sí.
12
• Frotar la palma de la mano derecha contra el dorso de la mano izquierda
entrelazando los dedos y viceversa.
• Frotar las palmas de la mano entre sí, con los dedos entrelazados.
13
• Frotar el dorso de los dedos de una mano con la palma de la mano opuesta,
agarrándose los dedos.
• Frotar con un movimiento de rotación el pulgar izquierdo, atrapándolo con la
palma de mano derecha y viceversa.
14
• Frotar la punta de los dedos de la mano derecha contra la palma de la mano
izquierda, haciendo un movimiento de rotación y viceversa.
• Colocar las manos debajo del chorro y dejar que corra el agua, hasta eliminar
completamente el jabón.
15
• Secar perfectamente las manos con toallas desechables y con la misma cerrar la
llave.
• Ahora sus manos son seguras.
Importante: Siempre lavar sus manos al ingresar y antes de salir del laboratorio
Fuente: http://www.who.int/gpsc/information_centre/gpsc_lavarse_manos_poster_es.pdf?ua=1
16
2. Manejo de residuos
• Residuos infecciosos o de riesgo biológico
Muchas enfermedades infecciosas se propagan a través de la sangre y otros fluidos corporales,
de manera que es importante tomar las precauciones necesarias para no exponerse a ellas
innecesariamente. Los fluidos corporales incluyen la orina, heces, sangre, saliva, leche materna,
secreciones nasales y oculares, y secreciones segregadas por heridas o tejidos. La segregación en
la fuente es la base fundamental de la adecuada gestión de residuos y consiste en la clasificación
y disposición de los residuos en las canecas y contenedores adecuados, de acuerdo con el código
de color adoptado por la legislación vigente. Los residuos se deben depositar en los recipientes
adecuados, los cuales deben ser del color correspondiente a la clase de residuos que se va a
depositar en ellos y deben estar marcados e identificados de acuerdo con la siguiente tabla:
Fuente: Plan-de-gestion-integral-de-residuos-hospitalarios-y-similares-en-su-componente-
interno
17
3. Uso de Reactivos
Todos los reactivos que se utilizan en las operaciones y reacciones en el laboratorio son
potencialmente peligrosos por los que, para evitar accidentes, deberán trabajarse con cautela.
Numerosas sustancias orgánicas e inorgánicas son corrosivas o se absorben fácilmente por la piel,
produciendo intoxicaciones o dermatitis, por lo que se ha de evitar su contacto directo; si este
ocurriera, deberá informar inmediatamente al docente.
Para la manipulación de los reactivos se debe tener en cuenta:
• Los reactivos del laboratorio deben permanecer en su lugar respectivo.
• Si necesita de un reactivo tome la cantidad que necesite del envase sin introducir
sustancias o utilizar las espátulas, que no hayan sido previamente limpiadas, dentro del
mismo.
• Al finalizar coloque el envase en su sitio respectivo.
• No devuelva material que ha sido sacado del envase al mismo, si no está seguro de que no
se encuentra contaminado o mezclado con otras sustancias
4. Uso Equipos
Para la manipulación de los equipos se debe tener en cuenta:
• Los equipos deben ser mantenidos completamente limpios después de haber sido
utilizados.
18
• Si no sabe cómo opera un equipo, solicite el catálogo de funcionamiento o que se le
enseñe a operarlo.
Microscopio:
Cuando hay necesidad de movilizar el microscopio de un sitio a otro, éste debe sostenerse en
posición vertical, y tomarlo por el brazo y por la base, que son las partes más sólidas del equipo.
Balanza:
• Verificar siempre la nivelación de la balanza.
• Limpie la balanza de derrames y salpicaduras, estando apagada.
• Al encender la balanza déjela estabilizar por 10 minutos como mínimo.
• Utilice siempre un recipiente para pesar, no ubique las sustancias o especímenes
directamente en el platillo.
• Al pesar mantener las puertas cerradas para mejorar la estabilidad.
• No pese sustancias corrosivas, calientes o que puedan degradar el interior de la balanza.•
• No mover bajo ninguna circunstancia las balanzas de su posición.
• Revise la capacidad máxima del equipo.
Espectrofotómetro:
• Estos equipos son muy delicados por lo cual es conveniente leer las instrucciones de uso
antes de ser utilizados.
• Permitir que el instrumento se caliente antes de hacer algún procedimiento.
19
• Verificar el 0 y el 100% T cada vez que se vaya a hacer lecturas y cuando varíe la
longitud de onda.
• Asegurarse de que las cubetas estén limpias y libres de ralladuras y huellas digitales. Esto
debe hacerse cada vez que va a usarse.
• Mantener cerrada la tapa del portamuestras durante el proceso de medición, para asegurar
una lectura adecuada.
5. Uso Material de Vidrio
• El material de vidrio se debe dejar limpio.
• Cualquiera que sea el sistema que se utilice se debe enjuagar muy bien el material de
vidrio con agua corriente varias veces y finalmente con agua destilada.
• El material de vidrio graduado, como probeta, bureta, pipetas, matraz aforado, nunca debe
ser sometido a calentamiento.
• Se pude calentar el material de contención, como: vaso de precipitado, balón, tubos de
ensayo, erlenmeyer.
• Descartar el material de vidrio roto en el contenedor dispuesto para tal fin.
Presentación de resultados y Cuestionario:
1. Defina los conceptos de bioseguridad, limpieza, contaminación, desinfección,
descontaminación y esterilización:
20
• Bioseguridad:
Son todas las normas y controles que debemos tener en cuenta cuando manipulamos
sustancias químicas y residuos biológicos, bien sea en los procesos industriales, o
experimentos de laboratorio; esto para evitar el contacto directo con estas sustancias y
residuos, así prevenir el contagio de enfermedades y su posible propagación hacia fuera del
lugar donde se producen.
• Limpieza:
Se refiere al proceso por el que se elimina cualquier tipo de suciedad por medios mecánicos
y/o físicos de la suciedad depositada incluida la materia orgánica.
• Contaminación:
Es la introducción de sustancias en un medio que provocan que este sea inseguro o no apto
para su uso.
• Desinfección:
Es la reducción, disminución o destrucción de microorganismos patógenos, hongos, virus y
bacterias por medios de agentes químicos y/o físicos, a un nivel que no sea dañino para el ser
humano.
• Descontaminación:
Es el proceso por el que cualquier superficie, material o equipo se limpia con sustancias
especificas (desinfectantes), que lo vuelven seguro para el uso deseado.
21
• Esterilización:
Se define como la ausencia de cualquier microorganismo viviente, incluidos bacterias, virus y
esporas. El propósito de este es reducir la probabilidad de transmisión de la enfermedad.
2. ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud?
• Uso de la bata especialmente blanca, porque se convierte en un indicador visual de
que alguna sustancia, bien sean reactivos o colorantes, nos han salpicado.
• Atendiendo y respetando las normas de bioseguridad.
• No se debe consumir alimentos, ni consumir bebidas, porque éstos están expuestos
permanentemente a riesgo de contaminación.
• Lavado de manos, especialmente después de manipular material infeccioso y al
terminar la práctica del laboratorio.
• Usar zapato cerrado, guantes y tapabocas, con el fin de cubrir toda nuestra piel y
proteger posibles heridas del riesgo de infección. Al finalizar se deben desechar los
guantes.
• Manipular sustancias y reactivos con conocimiento, para ello es preciso observar
cuidadosamente las etiquetas de las sustancias y rotular las láminas del experimento.
• Si existen mecheros de gas, debemos de asegurarnos de cerrar las llaves de paso.
• Desechar cada cosa en el envase apropiado.
• Dejar organizado el sitio de trabajo después de realizar la práctica.
22
3. Teniendo en cuenta la fórmula V1xC1=V2xC2; en una tabla presente diluciones al
0.5%, 1%, 1.5% y 5% de hipoclorito de sodio que tiene una concentración inicial de
10% y un volumen inicial de 1 litro, indicando la concentración inicial,
concentración final, volumen inicial de hipoclorito, volumen de agua y volumen final
para cada dilución.
Hipoclorito al 0.5%:
X= 0.5% x 50.000 ppm =2500 ppm
10%
Vb: 2500 ppm x 1000 ml = 50 ml
50.000 ppm
Debemos de adicionar 950 ml de agua destilada.
Hipoclorito al 1%:
X= 1% x50.000 ppm = 5000ppm
10%
Vb: 5000 ppm x 1000 ml = 100 ml
50.000 ppm
23
Hipoclorito al 1.5%:
X= 1.5% x50.000 ppm = 7500ppm
10%
Vb: 7500 ppm x 1000 ml = 150 ml
50.000 ppm
Hipoclorito al 5%:
X= 5% x50.000 ppm = 25000ppm
10%
Vb: 25000 ppm x 1000 ml = 500 ml
50.000 ppm
4. En una tabla, compare e identifique las características principales tales como
descripción, uso, cuidados y breve fundamento científico de su funcionamiento de los
equipos espectrofotómetro, balanza y microscopio.
24
Nombre Descripción Uso Gráfico
es un instrumento
usado en el análisis
químico que sirve
para medir, en
función de
es un instrumento con la longitud de onda,
el que se apoya la relación entre
la espectrofotometría pa valores de una
ra medir la cantidad de misma magnitud

espectrofotómetro
intensidad de luz fotométrica
absorbida después de relativos a dos
pasar a través de una haces
solución muestra. de radiaciones y
la concentración o
reacciones
químicas que se
miden en una
muestra.
25
se emplean en
los laboratorios par
a pesar pequeñas
es un instrumento
cantidades de masa
utilizado en
del
balanza el laboratorio, que sirve
proveniente reactiv
para medir la masa de
os para
objetos.
realizar análisis
químicos o
biológicos
A) ocular,
Instrumento óptico
B) objetivo,
para ampliar la
C) portador del objeto, imagen de objetos
D) lentes de la o seres, o de
microscopio
iluminación, detalles de estos,
tan pequeños que

E) sujeción del objeto,
no se pueden ver a
F) espejo de la
simple vista
iluminación.
26
5. En una tabla identifique el nombre, uso y elabore el gráfico de los siguientes
materiales de uso en el laboratorio de Biología celular y molecular:
Se utiliza mayormente como
recipiente de líquidos y
sólidos, con los cuales se

Objeto cilíndrico,
realizan mezclas o se les
hueco y alargado que
Tubo de ensayo somete a variaciones de
está abierto por uno o
temperatura u otras pruebas,
por los dos extremos.
algunos se podrían utilizar
para medir volúmenes de
todo tipo.
Se utiliza para el armado de

Frasco con Base
aparatos de destilación o
redonda, la cual posee
para hacer reaccionar
una estructura cónica
Erlenmeyer
sustancias que necesitan un
en la zona del medio y
largo calentamiento.
en la zona superior se
También sirve para contener
aprecia una boca con
líquidos que deben ser
cuello estrecho.
conservados durante mucho
27
tiempo o que no se ven
afectados directamente por
la luz del sol
Los aceites de
En general el aceite de
inmersión son
inmersión sirve para
sustancias transparentes
aumentar la resolución de un
con las propiedades
Aceite de microscopio mediante la
ópticas y las
inmersión inmersión del lente objetivo
características
y el espécimen en un aceite
de viscosidad necesaria
transparente de alto índice
s para su uso en
de refracción.
microscopía.
Un embudo es una El embudo es un
pieza cónica de vidrio o instrumento empleado para
plástico que se utiliza canalizar líquidos y
para el trasvasijado de materiales sólidos

Embudo
productos químicos granulares en recipientes
desde un recipiente a con bocas angostas y
otro. Tambien es calentar muestras
utilizado para realizar Es decir, es utilizado para
28
filtraciones. evitar el derrame del líquido
al moverlo de un envase a
otro.
Un instrumento o
varilla cilíndrica,
que se conecta a un
soporte o rejilla
mediante una doble
nuez. Este
sirven para sujetar los
acoplamiento
tubos de ensayo mientras
proporciona la
Pinzas se calientan o
posibilidad de
manipulan.
ajuste en el soporte,
tanto vertical como
horizontalmente.
También puede
hacerse girar un
cierto ángulo para
facilitar el montaje
29
del aparato.
es una herramienta que
forma parte del material de
Las gradillas se laboratorio (principalmente
fabrican en madera, en laboratorios de biología
Gradilla plástico o metal; las molecular, genética y
más comunes son las de química), y es utilizada para
plástico. sostener y almacenar gran
cantidad de tubos de
ensayo o tubos Eppendorf.
Es de porcelana.Está se usa para calentar
elaborada con silicato soluciones a temperaturas

Cápsula
potásico con alta muy altas para obtener
acidez, por lo que es sustancias sólidas o cenizas
30
muy resistente a altas o para evaporar el exceso de
temperaturas.Es de solvente de una muestra.
color blanco
brillante.Es un
contenedor semiesféric
o.Tiene fondo redondo,
aunque en ocasiones
puede ser plano.Tiene
un pico en el
costado.El diámetro má
s habitual es de
aproximadamente 10
cm.Existen más
tamaños que van hasta
los 34,5 cm con una
capacidad de 10 ml
hasta 100 ml.
31
na vasija de paredes
gruesas y un pequeño
garrote o barra con la es una herramienta que se
que se tritura el utiliza para moler y mezclar
ingrediente. Este sustancias, incluidos los

Mortero
instrumento puede productos químicos en un
variar en su laboratorio o también la
composición, ya que comida en la cocina.
existen muchos tipos de
morteros.
Es Su objetivo principal es
un recipiente cilíndrico contener líquidos o
de vidrio sustancias químicas diversas
borosilicatado fino que de distinto tipo. Como su
se utiliza muy nombre lo dice permite

Vaso de
comúnmente en obtener precipitados a partir
precipitado
el laboratorio, Es cilínd de la reacción de otras
rico con un fondo sustancias. Normalmente es
plano; se le encuentra utilizado para trasportar
de varias capacidades, líquidos a otros recipientes.
desde 100 mlhasta de También se puede utilizar
32
varios litros. para calentar, disolver, o
Normalmente es preparar reacciones
de vidrio, de metal o de químicas.
un plástico en especial
y es aquel cuyo
objetivo es
contener gases o
líquidos.
Está formado por un
tubo generalmente
transparente de unos es un
centímetros de instrumento volumétrico que
diámetro y tiene una consiste en un cilindro
graduación desde 5 ml graduado de vidrio

Probeta
hasta el máximo de la borosilicatado que permite
probeta, indicando contener líquidos y sirve
distintos volúmenes. En para medir volúmenes de
la parte inferior está forma exacta.
cerrado y posee una
base que sirve de apoyo
33
se utiliza para fijar muestras
que posteriormente serán
examinadas con un
es una pieza delgada
microscopio. El
plana de vidrio de
procedimiento a seguir es
diferentes dimensiones
Laminas colocar la muestra (tejido,
(típicamente 75 por 25
portaobjetos células, microorganismos,
mm y
etc.) en la diapositiva o
aproximadamente 1
portaobjetos, y luego ambos
mm de espesor)
se insertan juntos en el
microscopio para ser
observados.
Se coloca sobre un objeto

es una fina hoja de
que va a ser observado
material transparente (n
bajo microscopio, el cual se
Laminas ormalmente 20 mm x
suele encontrar sobre
cubreobjetos 20 mm) o rectangular
un portaobjetos, se suele
(de 20 mm x 40 mm
usar en campos como la
habitualmente).
química y la biología.
34
aplique aceite de inmersión
Fabricado en celulosa y frote suavemente las lentes
Papel de arroz o de arroz, útil en la con papel de arroz hasta
papel para limpieza de los lentes y verificar que han quedado
limpieza de lentes objetivos del libres de aceite; ó realize el
microscopio. mismo procedimiento con
xilol.
35
“Microscopía”
Introducción
El microscopio es un instrumento que permite aumentar el tamaño de un objeto un número
determinado de veces. Existen dos grandes tipos de microscopio: el microscopio óptico (que usa
luz) y el microscopio electrónico (que usa electrones). El microscopio óptico fue el instrumento
que llevó al descubrimiento de la célula, mientras que el microscopio electrónico, dado su
enorme poder de resolución, permitió establecer una descripción detallada de las estructuras
subcelulares (como por ejemplo los organelas celulares).
El microscopio óptico funciona en base a lentes de vidrio convergentes, que como su nombre
lo indica, provocan que los rayos de luz converjan en un punto, al cual se le llama foco. Al lograr
que un número de rayos de luz que normalmente veríamos separados, enfoquen en nuestra retina,
podemos interpretar esa imagen (que es una imagen virtual) como una ampliación de la imagen
real.
Fuente: Karp, 2009
36
Su sistema óptico posee un lente condensador (que concentra la luz proveniente de la fuente),
una serie de lentes objetivos (que recogen los rayos difractados por la muestra), con diferentes
poderes de aumentos (usualmente 4x, 10x, 40x y 100x) y uno o dos lentes oculares (cerca de los
ojos) que generalmente proporcionan un aumento de 10x. Los términos de aumento se expresan
en x, de tal forma que un aumento de 10x (“diez por”) significa que una imagen está aumentada
10 veces el tamaño original. El aumento total del microscopio es el producto de los aumentos del
lente objetivo más el lente ocular.
Objetivos
• Comprender el funcionamiento del microscopio y reconocer los diferentes poderes del
microscopio mediante diferentes montajes.
• Observar algunos tipos de células tanto animales como vegetales.
• Observar estructuras celulares como pared celular, cloroplastos, núcleo, mitocondrias y
ribosomas.
• Determinar algunas semejanzas y diferencias entre la célula procariota y la eucariota.
• Determinar la importancia de ciertos colorantes y soluciones en la identificación de
estructuras y sustancias celulares.
• Verificar que las células tienen formas y tamaños variables.
37
Material que le será proporcionado en el Laboratorio
• Microscopio.
• Goteros.
• Beakers o frascos pequeños con agua.
• Aceite de inmersión.
• Lugol al 1%
• Azul de metileno.
• Placas con sangre humana.
Material que debe llevar al laboratorio
• Agua estancada
• Papel milimetrado (media hoja)
• Hilos de colores (2 cm cada uno)
• Tela de cuadros (2 cm)
• Recorte de periódico con la letra asimétrica
• Bulbos de cebolla
• Elodea (Anacharis sp.)
• Papa (Solanum tuberosun).
• Laminas portaobjetos
• Laminillas
38
• Elementos de protección personal (Bata, gorro, guantes, tapabocas, gafas de
bioseguridad).
• Palillos de dientes
• Bisturí
Procedimiento:
1. Identificación de las partes del microscopio
• Tome el microscopio asignado e identifique las partes, escribiéndolas en el recuadro
correspondiente.
PARTES DEL MICROSCÓPIO ÓPTICO
1 OCULARES
2 REVOLVER O PORTAOBJETIVOS
3 OBJETIVOS
4 PLATINA
5 DIAFRAGMA
6 CONDENSADOR
7 PIE O BASE
8 TORNILLO CONDENSADOR
9 TORNILLO MICROMÉTRICO
10 TORNILLO MACROMÉTRICO
11 TORNILLO CARRO MÓVIL
12 BRAZO
13 TUBO O CABEZAL
39
1. Funciones del Microscopio
Partes del Función
microscopio
Fuente de Luz Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. Puede tener una especie
de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización.
Condensador Lentes que concentran los rayos luminosos sobre la preparación se
encuentra ubicado bajo la platina.
Diafragma Cortinilla que controla la cantidad de luz que entra en el condensador.
Platina y pinza La platina es la plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que
se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de
la fuente de iluminación situada por debajo.
La pinza sostiene el portaobjetos o la preparación sobre la platina.
Objetivos Lentes que amplían la imagen de la preparación, se sitúan cerca de esta.
Generan una imagen real invertida y aumentada. Los más frecuentes son
los de 4, 10, 40 y 100 aumentos. El de 100x o de inmersión utiliza aceite
de cedro sobre la preparación para observar laminas coloreadas.
Oculares Captan y amplían la imagen formada por el objetivo, se sitúan cerca al
ojo.
Tornillo Permite un enfoque aproximado o grueso de la muestra al alejar o acercar
Macrométrico el tubo y la platina moviéndola de arriba hacia abajo y viceversa.
40
Tornillo Da claridad a la imagen al lograr un ajuste fino y preciso.
Micrométrico
Revolver Pieza metálica ubicada en la parte inferior del tubo, inserta los objetivos,
al girarla permite el cambio del objetivo.
2. Realización de Montaje húmedo
• Tome con un gotero una muestra de agua estancada.
• Coloque la gota de agua estancada sobre una lámina porta-objeto.
• Tome una laminilla cubreobjetos, en posición oblicua, (45 grados) y apoyando una arista
sobre la lámina al lado de la gota, déjela caer suavemente.
• Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente
3. Manejo del Microscopio
Antes de iniciar verifique que el microscopio y sus partes se encuentren limpias.
• Encienda el microscopio.
• Coloque el objetivo de menor aumento 4X.
• Baje la platina completamente girando el tornillo macrométrico.
• Tome la lámina con la preparación.
• Coloque la lámina con la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas.
41
• Procure que la preparación quede centrada, girando el tornillo para desplazamiento
del carro móvil.
• Gire el tornillo Macrométrico en sentido contrario a las agujas del reloj para subir
la platina hasta el tope.
• Debe hacerlo mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el
riesgo de incrustar el objetivo en la preparación.
• Cierre o abra el diafragma hasta una posición intermedia, accionando su perilla en
sentido contrario a las agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni
demasiado tenue.
• Inicie la observación con el objetivo de 4X.
• Mirando a través de los oculares, separe lentamente el objetivo de la preparación
con el tornillo macro métrico en sentido de las agujas del reloj hasta ver la imagen.
• Cuando se observe algo nítido la muestra, gire el tornillo micrométrico hasta
obtener un enfoque fino.
• Gire el revólver.
• Coloque el objetivo de 10X
• Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras
• Gire el revólver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con el tornillo
micrométrico y detalle las estructuras.
• Al finalizar las observaciones, apaga la luz del microscopio y deje el microscopio
en posición de reposo; es decir con el objetivo de menor aumento y la platina en su
posición más baja.
42
4. Observación con el objetivo de inmersión 100X
Este objetivo se utiliza para la observación de muestras fijadas, no para muestras frescas.
• Coloque el objetivo de inmersión de manera que el orificio de la platina quede entre el
objetivo de 100X y el de 40X.
• Suba totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habrá que aplicar el aceite.
• Coloque una gota de aceite de inmersión sobre la preparación en el círculo de luz.
43
• Coloque una lámina coloreada sobre la platina.
• Ubique el objetivo de 100x.
• Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite.
• Observe la imagen con aumento de 100X.
• En esta preparación se muestran los glóbulos blancos, glóbulos rojos y plaquetas
coloreados con colorante de Wright.
• Cuando termine limpie el objetivo de inmersión con un papel especial para óptica y
alcohol isopropílico.
• Deje el microscopio en objetivo de menor aumento.
5. Comprobación de los poderes o capacidades del microscopio
• Realice un montaje húmedo con la letra asimétrica y obsérvela al microscopio siguiendo
los pasos anteriores.
Letra asimétrica al 4x Letra asimétrica al 10x Letra asimétrica al 40x
Se observa más grande Se observa más cerca la Se observa cada partícula
las letras y se observan letra y se ve más definida de la tinta expuesta en el
los poros del papel. la tinta de la letra. papel.
44
• Realice un montaje húmedo con una hebra de hilo y obsérvela al microscopio siguiendo
los pasos anteriores.
Hilo al 4x Hilo al 10x Hilo al 40x
Se ven pequeños Se observan más claros y Se observa más cerca los
filamentos de hilos cerca los filamentos del filamentos del hilo
saliendo de la hebra más hilo y se distingue su color
grande no se logra
distinguir su color
6. Cálculo del diámetro del campo de visión
• Realice un montaje húmedo con un centímetro cuadrado de papel milimetrado y
obsérvelo al microscopio.
45
Papel milimetrado 4x Papel milimetrado 10x Papel milimetrado 40x
El campo de visión de los Se aumenta mas el campo Se observa la estructura de
cuadros se amplia un poco de visión y se ve mejor la tinta de los cuadros que
mas a lo que se puede definido los cuadros componen el papel
observar con el ojo milimetrado
humano
7. Células vegetales.
a. Cebolla
Tome una cebolla y divídala en ocho partes. Note que consta de varias partes o escamas. Cada
capa está recubierta, en ambas superficies por una membrana transparente formada por células
epidérmicas o epiteliales. Separe una porción pequeña de la membrana externa (que es más
pigmentada y coloreada que la interna). Extiéndala sobre un portaobjetos, agregue una gota de
agua y póngale un cubreobjetos tratando de evitar la formación de burbujas. Dibuje
varias células en 10X y en 40X. ¿Qué forma tienen las células?
46
Cebolla al 4x Cebolla al 10x Cebolla al 40x
Las células de la cebolla de ven Se observa mejor la Se ven muy ven definidas cada una
de forma rectangular y ordenadas agrupación de la célula de las células vegetales y su unión
Agregue una gota de solución de Lugol a un lado del cubreobjetos y al lado opuesto ponga un
pedazo de papel absorbente para facilitar la entrada del colorante a la muestra.
Observe nuevamente en 10x y en 40x. ¿Qué diferencia encuentra en relación con la observación
que hizo anteriormente?
Cebolla con Lugol al 40x
Se ven más visibles el celular y se tornan de un color verde claro y no pierden su
forma rectangular
47
b. Elodea
Ponga una hoja de la planta acuática sobre un portaobjetos, agregue una gota de agua y colóquele
un cubreobjetos. Esquematice varias células en 10x y en 40x. ¿Se ve le núcleo celular? ¿Se nota
en ellas algún movimiento? ¿Si es así, ¿Cómo se llaman las estructuras que permiten darse cuenta
de ese movimiento? ¿Qué nombre recibe este fenómeno?
Elodea al 4x Elodea al 10x Elodea al 40x
Se observa celular de forma Se observa mejor cada una Se resalta mejor su color
cuadradas y de un tamaño de las células que verde y se observan micro
muy minúsculo y agrupadas conforman la elodea y se le células en el interior de las
las unas a las otras observa un color verde claro células
de las células
48
Elodea con lugol al 10x y al 40x
Se observa que la elodea al contacto con el Lugo no pierde su estructura
celular, pero si cambia su color verde a un color marrón, se sigue
visualizando las micro células que están dentro de las células.
c. Papa
Con una cuchilla quítele la cascara a un pedazo de papa. A continuación, saque porciones en
forma de palitos de aproximadamente medio centímetro de ancho. Luego haga un corte muy
delgado, transparente, en uno de los extremos y deposítelo sobre un portaobjetos, agregue una
gota de agua y póngale un cubreobjetos. Observe que hay un gran número de estructuras
transparentes, de tamaños variables y formas más o menos ovaladas. Estas estructuras también
son plastidios, como los cloroplastos. ¿Cómo se llaman?
49
Papa al 4x Papa al 10x Papa al 40x
Se observa miles de células En esta se observan mas En esta imagen se observan
unidas. visibles las células las cuales más claramente la
se notan que son de una conformación de amiloplasto
estructura ovalada y de agrupados los unos a los otros
diferentes tamaños de y de una estructura
ovalada.
50
Coloree una preparación de Lugol. ¿Qué coloración toman los plastidios? ¿Por qué?
Papa con Lugo al 10x y al 40x
Se observa que la papa al contacto con el Lugo no pierde su estructura
celular, pero los amiloplastos se tornan de un color negro y su
estructura celular mejora en su definición y conformidad.
8. Células animales
a. Epitelio de Mucosa oral humana
Ponga una gota de agua sobre un portaobjeto. Enjuáguese la boca y con un palillo de dientes haga
un raspado suave sobre la pared interna de las mejillas. Mezcle el raspado con la gota de agua,
espárzalo sobre el portaobjetos, póngale un cubreobjetos y observe con los objetivos de 10x y de
40x. ¿Qué estructuras observa en estas células?
51
Coloree la preparación con azul de metileno. ¿Qué diferencias encuentra entre esta observación y
la inmediatamente anterior? Dibuje algunas de las organelas observadas (membrana celular,
núcleo, nucléolo, citoplasma).
b. Sangre humana
La sangre está compuesta de diferentes tipos de células que se encuentran suspendidas en un
líquido llamado plasma. Cada centímetro cubico de sangre puede contener millones de estas
células. Las tres formas de células sanguíneas son los eritrocitos o glóbulos rojos, los leucocitos o
glóbulos blancos y los trombocitos o plaquetas.
Para observar estas células tome una placa permanente de extendido de sangre, que ha sido
tratada con colorante de Wright, y enfóquela con los objetivos de 40x y de 100x.
• ¿Cuántas clases diferentes de células hay?
52
• ¿Qué función tiene cada uno de los diferentes tipos de células sanguíneas? Dibuje lo
observado con el objetivo de 40x y con el de 100x.
Los glóbulos blancos o leucocitos son la defensa del cuerpo contra las infecciones y las
sustancias extrañas que pudieran entrar en él. Para defender el cuerpo adecuadamente, es
necesario que exista una cantidad suficiente de glóbulos blancos capaces de dar una respuesta
adecuada, llegar a un sitio en el que se necesitan y luego destruir y digerir los microrganismos y
sustancias perjudiciales. Al igual que todas las células sanguíneas, los glóbulos blancos son
producidos en la médula ósea. Se forman a partir de células precursoras (células madre) que
53
maduran hasta convertirse en uno de los cinco tipos principales de glóbulos blancos:
los neutrófilos, los linfocitos, los monocitos, los eosinófilos y los basófilos. Una persona produce
aproximadamente unos 100.000 millones de glóbulos blancos al día.
Los glóbulos rojos, también llamados hematíes o eritrocitos, se ocupan de transportar el oxígeno
desde los pulmones a los tejidos, y de llevar de vuelta el dióxido de carbono de los tejidos hacia
los pulmones para su expulsión. Los hematíes dan a la sangre su color rojo característico.
Las plaquetas o trombocitos colaboran en la coagulación de la sangre cuando se produce la
rotura de un vaso sanguíneo.
54
Sangre al 4x sangre al 10x sangre al 40x
c. Observación de organismos unicelulares
En los cuerpos de agua dulce como estanques, humedales, lagos y lagunas habitan un sin número
de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias y hongos hasta protistas como algas
microscópicas. Descubra como en una gota de agua de un ecosistema acuático habitan diversas
formas de vida celular.
• Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna.
• Cúbrala con una laminilla.
• Observa a menor y mayor aumento, diferenciando los organismos unicelulares.
• Dibujar lo observado.
Presentación de resultados
• Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las preparaciones.
• Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las distintas estructuras
celulares que se observen.
55
Cuestionario
1. Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las preparaciones.
2. Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las distintas estructuras
celulares que se observen.
3. Investigue qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada, incluya nombre,
descripción y figura.
RTA/ Se observan protozoarios y algas.
4. ¿Son todos de igual tamaño y forma? Explique su respuesta.
RTA/ No, los protozoarios son de forma ovalada y las algas son más bien alargadas.
5. ¿Se observan organismos móviles o estáticos? Explique su respuesta.
RTA/ Ambos organismos están en continuo movimiento.

56
6. Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine:
• ¿Cómo se manifiesta el poder de resolución?
RTA/ En los dos casos, en la letra se observan espacios blancos entre la tinta negra que a simple
vista no se ve. Y en la hebra de hilo se observan varias fibras a menor longitud de onda mayor
resolución de los objetos.
• ¿Cómo se manifiesta el poder de aumento?
RTA/ Podemos decir que cada sistema de lente es capaz de producir una imagen aumentada,
cuyo valor se enuncia con la letra X por eje: 10X significa que la imagen aumentada es 10 veces.
• ¿Cómo se manifiesta el poder de definición?
RTA/ Es la capacidad del microscopio para formar imágenes nítidas y con contornos definidos.
• ¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad?
RTA/ Permite visualizar los diferentes planos de una preparación y está dado por el ajuste de
precisión que se logra con el tornillo micrométrico.
7. ¿Cuál es la utilidad del microscopio en el campo de la biología y las ciencias en general?
57
RTA/ El microscopio es sin duda el elemento más importante en cualquier laboratorio. Nos
permite, por ejemplo, ver células, microorganismos y bacterias, lo cual es imposible de observar
a simple vista.
Con el microscopio hemos descubierto infinidades de cosas que nos han ayudado a evolucionar
como por ejemplo hemos descubierto enfermedades que serían imposible de detectar sin la ayuda
del microscopio también hemos descubierto las cura para esas y muchas más enfermedades.
El microscopio ha sido una de las herramientas esenciales para el estudio de las ciencias de la
vida. Abrió el ojo humano hacia una nueva dimensión. Tanto es así que actualmente, el
microscopio nos permite observar el "corazón" mismo de la materia: los átomos.
8. Fuera de las estructuras u organelas que se observaron, hay otras que no se hicieron visibles,
explique ¿Por qué y cómo podrían observarse?
RTA/ en nuestra montura no encontramos mas estructuras fueras a las visualizadas.
9. Enuncie al menos 5 diferencias generales entre las células animales y vegetales.
RTA/
• Tanto la célula vegetal como la animal poseen membrana celular, pero la célula vegetal
cuenta, además, con una pared celular de celulosa, que le da rigidez.
• La célula vegetal contiene cloroplastos: organelos capaces de sintetizar azúcares a partir
de dióxido de carbono, agua y luz solar (fotosíntesis) lo cual los hace autótrofos
58
(producen su propio alimento) , y la célula animal no los posee por lo tanto no puede
realizar el proceso de fotosíntesis.
• Pared celular: la célula vegetal presenta esta pared que está formada por celulosa rígida,
en cambio la célula animal no la posee, sólo tiene la membrana citoplasmática que la
separa del medio.
• Una vacuola única llena de líquido que ocupa casi todo el interior de la célula vegetal, en
cambio, la célula animal, tiene varias vacuolas y son más pequeñas.
• Las células vegetales pueden reproducirse mediante un proceso que da por resultado
células iguales a las progenitoras, este tipo de reproducción se llama reproducción
asexual.
• Las células animales pueden realizar un tipo de reproducción llamado reproducción
sexual, en el cual, los descendientes presentan características de los progenitores pero no
son idénticos a él.
10. ¿Tienen todas las células observadas la misma forma? ¿En general qué factores podrían
determinar la forma de las células?
RTA/
Las células observadas en la práctica del laboratorio cada una de ellas tienen diferentes formas,
por consiguiente el factor de que determina la forma de las células son:
El tamaño y la forma de las células depende de sus elementos más periféricos (por ejemplo, la
pared, si la hubiere) y de su andamiaje interno (es decir, el citoesqueleto). Además, la
competencia por el espacio tisular provoca una morfología característica.

59
Las células presentan una gran variabilidad de formas, e incluso, algunas no ofrecen una forma
fija. Pueden ser: fusiformes (forma de huso), estrelladas, prismáticas, aplanadas, elípticas,
globosas o redondeadas, etc. Algunas no tienen una pared rígida y otras sí, lo que les permite
deformar la membrana y emitir prolongaciones citoplasmáticas (pseudópodos) para desplazarse o
conseguir alimento. Hay células libres que no muestran esas estructuras de desplazamiento, pero
poseen cilios o flagelos que son estructuras derivadas de un orgánulo celular (centriolo) el cual
dota a estas células de movimiento.
11. ¿La morfología, el tamaño y ubicación del núcleo es igual en todas las células? ¿Habrá
células con más de un núcleo? ¿Pueden existir células sin núcleo? Justifique su respuesta.
RTA/El núcleo es la estructura que caracteriza a las células eucariotas. Es el compartimento
donde se encuentra el ADN y toda la maquinaria necesaria para transcribir su información a
ARN. Normalmente aparece un solo núcleo por célula, aunque en algunos casos hay más de uno,
como ocurre en los osteoclastos, en las fibras musculares esqueléticas o en los epitelios de
algunos invertebrados. La forma nuclear suele ser redondeada y adaptada a la forma celular,
aunque no siempre es así y puede ser muy variable.
Forma: generalmente esférica, puede ser lenticular o elipsoide, en algunos casos lobulado.
Tamaño: generalmente entre 5-25 µm, visible con microscopio óptico. En hongos hay
núcleos de 0.5 µm, visibles solamente con microscopio electrónico. En las ovocélulas de Cycas y
coníferas alcanza más de 500 µm: 0.6 mm, es decir que resulta visible a simple vista.
60
Posición: es característica para cada tipo celular, en células embrionales ocupa el centro, en
células adultas generalmente está desplazado hacia un costado porque el centro está ocupado por
una o más vacuolas.
Número: la mayoría de las células de plantas superiores son uninucleadas, aunque ciertas
células especializadas pueden ser multinucleadas: cenocitos, durante un período de su existencia
o toda la vida (fibras liberianas, tubos laticíferos, endosperma).
Constancia: normalmente todas las células vivas tienen núcleo, aunque hay excepciones. Los
tubos cribosos del floema carecen de núcleo a la madurez, sin embargo reciben la influencia del
núcleo de las células acompañantes.
12. ¿En células como la cebolla, elodea y papa, puede observarse la membrana celular? ¿Qué
se observa realmente?
RTA/: en la cebolla Se lograron diferenciar las células vegetales en forma de celdas en cada una
de ellas, se lograron notar de forma sencilla el núcleo, la pared celular, la membrana nuclear y el
citoplasma celular. En la papa se puede determinar más claramente dichas divisiones
considerándolas ya como una célula independiente cada una de la otra, logrando apreciar el núcleo,
el citoplasma, la membrana nuclear y la pared celular. En la elodea lograba notar la pared celular,
se logra ver también las micro células que conforman cada una de sus células y resalta su color
verde.
61
13. ¿Qué función desempeñan los cloroplastos en las células que los poseen? ¿Todas las
células vegetales presentan cloroplastos?
RTA/
Los cloroplastos son orgánulos aún mayores y se encuentran en las células de plantas y algas,
pero no en las de animales y hongos. Su estructura es aún más compleja que la mitocondrial:
además de las dos membranas de la envoltura, tienen numerosos sacos internos formados por
membrana que encierran el pigmento verde llamado clorofila. Desde el punto de vista de la vida
terrestre, los cloroplastos desempeñan una función aún más esencial que la de las mitocondrias:
en ellos ocurre la fotosíntesis; esta función consiste en utilizar la energía de la luz solar para
activar la síntesis de moléculas de carbono pequeñas y ricas en energía, y va acompañado de
liberación de oxígeno. Los cloroplastos producen tanto las moléculas nutritivas como el oxígeno
que utilizan las mitocondrias.
62
“Célula: crenación, hemólisis, plasmólisis y turgencia”
Introducción
La membrana plasmática de las células vegetales y animales es muy permeable al agua, siendo
pocas las sustancias que la atraviesan con igual facilidad, esto ocasiona que cuando exista entrada
y salida de ella, la célula también se altere en su forma, ya que ésta, en parte está determinada por
el estado de hidratación de los coloides celulares. De tal manera, que la cantidad de iones del
interior de la célula, hace que la célula se regule de acuerdo con la cantidad de iones en el exterior
o medio al cual la sometemos. En el caso de la célula vegetal, por ejemplo, los cloroplastos, los
plastos dedicados a la fotosíntesis, son fundamentales para guiar la observancia de la membrana
celular bajo el microscopio, pues como durante la práctica, no se usarán colorantes, serán estos,
los cloroplastos, los que indiquen la forma de la célula por estar normalmente adheridos a la
membrana celular.
Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=GxrttjDkmWs
63
Objetivo
Observar los fenómenos de hipotonía, isotonía e hipertonía en células animales y vegetales.
Material
• Microscopio compuesto.
• 6 portaobjetos y 6 cubreobjetos.
• Vasija con agua destilada.
• Pipeta Pasteur.
• Solución de NaCl al 0.2%

64
• Solución de NaCl al 0.9%
• Solución de NaCl al 20%
No realice las preparaciones al mismo tiempo, para obtener resultados satisfactorios es muy
importante que concluya con la observación de una muestra antes de preparar la siguiente.
Células sanguíneas
1. Empleando una lanceta estéril obtenga una gota de sangre, colóquela en un portaobjetos
limpio y seco
2. Lámina 1 - Ponga el cubreobjetos y realice la observación correspondiente al microscopio
4x, 10x y 40x.
Nota 1. Evite cualquier tipo de contaminación de su muestra, por ejemplo, con alcohol,
agua, etc.
3. Lámina 2 - Repita el paso 1 pero ahora agregando a su muestra de sangre 2 gotas de agua
destilada.
4. Lámina 3 - Repita el paso 1, y adicione a la muestra gotas de la solución de NaCl al 0.2%
5. Lámina 4 - Repita el paso 1, y adicione a la muestra gotas de la solución de NaCl al 0.9%
6. Lámina 5 - Repita el paso 1, y adicione a la muestra gotas de la solución de NaCl al 20%.
65
Células vegetales
7. Seleccione una hoja de Elodea en buen estado y colóquela sobre un portaobjetos limpio y
seco, y con el envés de la hoja hacia arriba.
8. Lámina 6 - Adicione gotas de agua de su medio, suficientes para cubrir la hoja totalmente
y ponga con cuidado el cubreobjetos. Realice las observaciones correspondientes al
microscopio en objetivo 4x, 10x y 40x.
9. Lámina 7 - Repita el paso 7, retire el exceso de agua con ayuda de papel absorbente y
agregue gotas de agua destilada.
adicione a la muestra, gotas de NaCl al 0.2%.
adicione a la muestra, gotas de NaCl al 0.9%.
adicione a la muestra gotas de NaCl al 20%.
66
Presentación de resultados y cuestionario
A. Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las preparaciones. Cada esquema
debe incluir: título, aumento y además señalar las distintas estructuras celulares que se
observen.
Montaje de las muestras estudiadas por el microscopio
67
B. En un cuadro presente los resultados de las soluciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas
para los dos tipos de células.
Muestra de sangre
Sangre hipo x4 sangre hipo x 10 sangre hipo x 40
Sangre hiper x 4 sangre hiper x 10 sangre hiper x 40
68
Sangre iso x 4 sangre iso x 10 sangre iso x 40
Elodea hipo x 4 elodea hipo x 10 elodea hipo x 40
elodea hiper x4 Elodea hiper x 10 elodea hiper x 40
69
Elodea iso x 4 elodea iso x 10 elodea iso x 40
C. En un cuadro presente los resultados de las soluciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas
para los dos tipos de células.
D. Mencione las diferencias observadas entre el comportamiento de la célula vegetal y animal de
acuerdo con cada una de las soluciones (medios a los cuales se expusieron las células).
Explique.
RTA/ Las diferencias entre las células es que: el color de la célula animal es rojizo y la vegetal es
verde, el aumento del tamaño en la célula animal se notó más que en la célula vegetal por que la
célula vegetal presenta una pared celular que le proporciona más rigidez, la célula vegetal tenía
una forma más alargada que la célula animal.
E. Describe lo que sucede en una célula cuando se coloca en un medio:
a) Hipotónico.
70
RTA/ “una solución de este tipo es aquella que tiene menor concentración de soluto en el
medio externo en relación al medio citoplasmático de la célula y por lo tanto menor presión
osmótica.”
Las células vegetales están rodeadas de paredes celulares rígidas, cuando las células vegetales
se exponen a medios hipotónicos, el agua se precipita dentro de la célula, y la célula se
hincha, pero no se rompe por la capa rígida de la pared. La presión de la célula empujando
contra la pared es llamada presión de turgencia, y es el estado ideal para la mayor parte de los
tejidos vegetales.
Las células animales carecen de la rigidez de las paredes celulares y cuando se exponen a
medios hipotónicos, el agua penetra dentro de la célula y la célula se infla. Eventualmente si
el agua no es quitada de la célula, la presión puede exceder la fuerza de tensión de la célula, y
estalla.
b) isotónico.
RTA/ “Son aquellas donde la concentración del soluto es la misma ambos lados de la
membrana de la célula, por lo tanto, no altera el volumen de las células”.
Cuando las células están en una solución isotónica, el movimiento de agua hacia afuera está
balanceado con el movimiento de agua hacia adentro. Un 0.9% de solución de NaCl es
isotónica para las células animales. Cuando se exponen tejidos animales a soluciones, para
prevenir efectos osmóticos y el daño consecuente a las células.
c) hipertónico.
RTA/ “Es aquella que mantiene mayor concentración de soluto en el medio externo, por lo que
una célula en dicha solución pierde agua”.
71
Hipertónica viene del griego "hyper," que significa sobre y "tonos".
Si las concentraciones de solutos disueltos son mayores fuera de la célula, la concentración de
agua es correspondientemente menor. Como resultado, el agua dentro de la célula sale para
alcanzar el equilibrio, produciendo un encogimiento de la célula. Al perder agua las células
también pierden su habilidad para funcionar o dividirse.
F. Explique en qué consisten los fenómenos de ósmosis y de difusión.
En la membrana de la célula semipermeable, se da el paso de agua que sucede del área de mayor
concentración de agua (con menor concentración de soluto) al área de menor concentración de
agua (con mayor concentración de soluto), a este proceso se le conoce como OSMOSIS.
La DIFUSION es un mecanismo de transporte, es el fenómeno de una sustancia que se encuentra
concentrada en el medio externo y este pasa al medio interno sin gasto de energía.
G. ¿Por qué los sueros fisiológicos que se aplican a pacientes intravenosamente deben ser
isotónicos?
RTA/ La osmolaridad del líquido isotónico se aproxima a la osmolaridad del plasma suero (285--
-295 mOsm/l).
Los líquidos isotónicos se utilizan para hidratar el compartimiento intravascular en situaciones de
perdida de líquido importante, como deshidratación, hemorragias, etc. Las soluciones isotónicas
utilizadas frecuentemente son cloruro sódico al 0,9% (conocido también como suero fisiológico o
salino).
72
“Permeabilidad selectiva de la membrana del eritrocito”
Introducción
Cuando un eritrocito es colocado en una solución isotónica, que contiene moléculas que
pueden atravesar la membrana, la molécula penetrante entra en la célula ocasionando que ésta
estalle. Este estallamiento de los eritrocitos es llamado hemólisis y puede ser detectado por medio
de un espectrofotómetro, que mide el cambio en la absorción de la luz, debido al paso de la
hemoglobina hacia el exterior.
Objetivo
Visualizar y determinar el porcentaje de hemólisis en eritrocitos causada por diferentes
moléculas.
Material
• 4 vasos de precipitados de 100 ml.
• 6 vasos de precipitado de 250 ml.
• Una pipeta de 1 ml.
• 6 pipetas de 10 ml.
• Un agitador de vidrio.
• Una pizeta con agua destilada.
73
• Espectrofotómetros.
• Celdas para espectrofotómetro.
Reactivos
• Solución de NaCl 0.17 M
• Solución de Glicerol 0.32 M
• Solución de Metanol 0.32 M
• Solución de Butanol 0.32 M
• Solución de Oxalato de amonio 0.12 M
• Solución de Fructuosa 0.25 M
• Solución de Ácido cítrico 0.26 M
• Material biológico Sangre desfibrinada (10 ml) por grupo de trabajo.
• Sangre de cordero
Procedimiento
Preparar una solución “STOCK” de la siguiente manera: Coloque con una pipeta 5 ml de
sangre desfibrinada en un vaso de precipitados, adicione 45 ml de solución isotónica de NaCl
0.17 M. Se agita levemente para homogenizar. Para preparar la solución al 100% de
HEMOLISIS, coloque en un vaso de precipitados 0.5 ml de solución “STOCK” y agregue 3
ml de agua destilada; y luego adicione 26.5 ml de solución de NaCl 0.17 M. Agite.
Para preparar la solución de 0% de HEMOLISIS, coloque en un vaso de precipitados 0.5 ml
de solución “STOCK” y 29.5 ml de solución de NaCl 0.17 M. Se agita ligeramente.
74
75
76
77
Resultados del espectrofotómetro con las diferentes soluciones utilizadas.
Solución utilizada resultado
Solución de NaCl 0.17 M 0.18
Solución de Glicerol 0.32 M 0,18
Solución de Metanol 0.32 M 0,18
Solución de Butanol 0.32 M 0.27
Solución de Oxalato de amonio 0.12 M 0,18
78
Solución de Fructuosa 0.25 M 0,18
Solución de Ácido cítrico 0.26 M 0,18
RESULTADOS
0.27
0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18
SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE SOLUCIÓN DE

NACL 0.17 M GLICEROL METANOL BUTANOL OXALATO DE FRUCTUOSA ÁCIDO
0.32 M 0.32 M 0.32 M AMONIO 0.12 0.25 M CÍTRICO 0.26
M M
reulados
Para calibrar el espectrofotómetro primero ajuste a 0% de Transmitancia a una longitud de onda
de 525 nm, y luego llene una celda con la solución de 100% de HEMOLISIS y calibre a 100% de
Transmitancia a la misma longitud de onda. Una vez calibrado el espectrofotómetro, se obtiene la
lectura de Transmitancia para la solución de 0% de HEMOLISIS.
Nota
- Los datos obtenidos servirán para realizar la curva estándar para Hemólisis de la sangre,
graficando % de Transmitancia contra % de Hemólisis.
79
*Posteriormente en un vaso de precipitados coloque 29.5 ml de una de las soluciones
(Oxalato de amonio, Metanol, Fructosa, Butanol, Glicerol o Ácido cítrico), en seguida
adicione 0.5 ml de solución “STOCK”, agitando suavemente y llenando una celda con la mezcla.
Ponga la celda en el espectrofotómetro calibrando de antemano y tome las lecturas cada 60
segundos hasta los 5 minutos o bien hasta obtener una lectura de 100% de Transmitancia.
Cuando haya terminado con la primera solución problema repita el último paso (*) utilizando
las soluciones problemas restantes.
Utilizando su curva estándar para Hemólisis, obtenga los valores equivalentes de hemólisis de
cada una de las lecturas de Transmitancia de las soluciones problema. Para cada solución
problema realice dos gráficas: a) % de Transmitancia contra % de Hemólisis. b) % de Hemólisis
contra Tiempo, presentando los valores en forma de barras.
De acuerdo a tus resultados presenta el ordenamiento de las diferentes moléculas según su
velocidad de penetración al interior de los eritrocitos.
80
Cuestionario
¿Describa en detalle la estructura de la membrana plasmática según el modelo actual
Esquematícelo?
RTA/ La membrana plasmática es una bicapa continua de moléculas lipídicas entremezcladas
con proteínas, a su vez contiene una barrera de permeabilidad entre el citoplasma y el líquido
extra celular. Esta barrera permite el mantenimiento de grandes diferencias de concentración
entre estos medios para muchas sustancias. Entre las funciones según karp se encuentran las de
transporte de solutos, respuesta a señales externas, transducción de energía e interacción celular.
¿Explique las características que debe presentar una molécula para que pueda atravesar
fácilmente la membrana plasmática?
RTA/ Las moléculas no polares, oxigeno, dióxido de carbono, atraviesan directamente la bicapa
por su liposolubilidad.
Las moléculas polares atraviesan canales formados por las proteínas. Algunas proteínas
transmembrana presentan una estructura tridimensional en la cual los radicales polares de ciertos
aminoácidos se disponen formando un canal hidrofílico que puede ser atravesado por
agua(osmosis) y por iones hidratados como el sodio, potasio. Algunos canales se mantienen
permanentemente abiertos otros solo lo hacen cuando llega una molécula mensajera que se une a
una zona receptora especifica e induce a una variación de la configuración que abre el canal, o
bien cuando ocurren cambios en la polaridad de la membrana.

81
¿Con qué finalidad se usa sangre en los experimentos?
La sangre desfibrinada y estéril de diversos animales, se ha utilizado desde el siglo XIX como
enriquecimiento para el cultivo de diversas bacterias patógenas. El agar sangre como se utiliza
hoy en día, fue introducido por primera vez en Francia en 1903, por Bezançon y Griffon.
Posteriormente en 1919, Brown demostró la exactitud de la sangre ovina para clasificar al género
Streptococcus según el tipo de hemólisis. Actualmente, en vista de la comprobada utilidad de la
sangre de carnero en los Laboratorios de microbiología Clínica, es conveniente conocer las
características de la sangre en la especie Ovis aries (oveja: hembra / carnero: macho). Para este
propósito, debe compararse con la sangre humana. El peso específico, viscosidad relativa, presión
osmótica y punto de congelación son idénticos a la sangre humana. Las principales características
hematológicas de la sangre de carnero completan, son: hemoglobina 9-15 g/dl; hematocrito 27-
45%; glóbulos rojos 9-15 millones/mm3; leucocitos 4,000-12,000/mm3; linfocitos 62%;
velocidad de sedimentación 0.5 mm/hr. Los valores de hemoglobina y hematocrito disminuyen
con la edad y se elevan cuando el animal está excitado. Los glóbulos rojos ovinos son más
pequeños que los humanos. La membrana celular de los pequeños eritrocitos de carnero es muy
susceptible a la acción de las hemolisinas bacterianas. Esto es especialmente cierto en el caso de
las estreptolisinas O y S de Streptococcus pyogenes. Esta característica aunada a su fragilidad
ligeramente mayor en comparación a los eritrocitos humanos, hace que los eritrocitos ovinos sean
excelentes indicadores de hemólisis in vitro. La sangre de carnero presenta velocidad de
sedimentación mucho menor en comparación con la sangre humana. Esta característica es
deseable, ya que los eritrocitos de la sangre desfibrinada, suspendidos en su propio suero y
almacenados en refrigeración durante menos de 21 días, no se compactan tanto como en el caso
de la sangre humana. Esto permite que se preserven mejor. Se sabe que el aumento de glucosa en
82
el suero de la sangre desfibrinada utilizada para enriquecer medios de cultivo sólidos, es
inversamente proporcional al diámetro de los halos de hemólisis. Por este motivo su bajo
contenido de glucosa (de 30 a 57 mg/dl) es la característica bioquímica que hace a la sangre ovina
ideal para demostrar los amplios y típicos halos de hemólisis alrededor de las colonias
productoras de hemolisinas. El resto de los valores químicos es muy similar a la sangre humana,
excepto en el caso del ácido úrico, que es muy bajo en los carneros (entre 0.05 y 1.9 mg/dl). Debe
usarse sangre de carnero para preparar el agar al 5% y obtener las siguientes ventajas técnicas: (1)
se incrementan considerablemente las hemólisis de tipo beta, (2) se evitan reacciones hemolíticas
dudosas, pues en agar sangre de carnero se diferencian perfectamente las hemólisis verdosas de
tipo alfa, de las reacciones de hemólisis completa tipo beta, (3) la sangre de carnero desfibrinada
asépticamente, no contiene anticoagulantes (como la sangre vencida de Banco), ni anticuerpos
contra las bacterias patógenas del hombre o antibióticos, por lo que en general permite mejores
crecimientos y (4) se evita manipular volúmenes considerables de sangre humana, por lo que se
anula el riesgo de contraer SIDA, hepatitis B y otras infecciones humanas, durante la preparación
del agar sangre.
4. Si hubiéramos utilizado sangre de otro animal mamífero, ¿esperaríamos los mismos
resultados?, explíquelo en función de la permeabilidad de la membrana.
Muchos animales, incluyendo todos los vertebrados, tienen esencialmente los mismos glóbulos
que los seres humanos. Otros tipos de sistemas circulatorios, como los de los artrópodos y
moluscos, no usan sangre exactamente, pero comparten algunas similitudes. Los seres humanos y
otros vertebrados tienen tres tipos de células sanguíneas: glóbulos rojos o eritrocitos, glóbulos
83
blancos o leucocitos y plaquetas o trombocitos.
Los animales con un sistema circulatorio abierto tienen hemolinfa, un fluido que es la
combinacion de sangre y líquido intersticial, en lugar de sangre y contiene sólo un tipo de célula,
los hemocitos. Los hemocitos, al igual que los leucocitos de los seres humanos y otros animales,
son parte del sistema inmune. Son células fagocíticas que ingieren los patógenos y partículas
extrañas y sirven en la señalización dentro del cuerpo. Los animales con hemolinfa utilizan
hemocianina en lugar de hemoglobina para transportar oxígeno.
Las células sanguíneas humanas son muy similares a los de otros animales, aunque hay algunas
diferencias interesantes. Las células de sangre humanas y animales pueden tener antígenos A o B,
o los dos o ninguno, lo que resulta en la tipificación de la sangre en A, B, O o AB. También
pueden tener antígenos (Rh). Todos estos antígenos se unen a la superficie de los glóbulos rojos.
Los glóbulos rojos en los seres humanos difieren de los de muchos animales debido a que no
tienen núcleos. La mayoría de los animales, excepto los mamíferos, tiene núcleos en sus glóbulos
rojos maduros. Los glóbulos rojos de los mamiferos maduros pierden su núcleo y organelos para
llevar más hemoglobina. Los eritrocitos son redondos en todos los mamíferos, excepto los
camellos, que tienen eritrocitos ovales.
El pez cocodrilo de hielo es la única especie de vertebrados conocida que no tiene glóbulos rojos
o hemoglobina. Viven en aguas frías muy ricas en oxígeno, el cual es libremente disuelto en su
sangre en lugar de unirse a la hemoglobina de los glóbulos rojos.

84
Las plaquetas y leucocitos no difieren significativamente entre los seres humanos y otros
vertebrados. Existen cinco tipos de leucocitos: los neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y
monocitos. Los seres humanos tienen cinco en su sangre, pero algunos animales, como peces,
tienen menos. Los leucocitos son una parte importante del sistema inmunológico y ayudan a
combatir las enfermedades. Las plaquetas, que tampoco tienen núcleos, ayudan el coágulo
sanguíneo para prevenir el sangrado excesivo. Las plaquetas de diferentes animales pueden ser
más o menos adhesivas; las de los caballos son las más adhesivas.
85
“Meiosis y Mitosis”
Introducción
Los organismos crecen y se reproducen a través de la división celular. En las células eucariotas,
la producción de nuevas células se produce como resultado de la mitosis y la meiosis. Estos dos
procesos de división celular son similares pero distintos. Ambos procesos implican la división de
una célula diploide o una célula que contiene dos conjuntos de cromosomas (un cromosoma
donado de cada padre). En la mitosis, el material genético (ADN) en una célula se duplica y se
divide por igual entre dos células. Las células se clasifican en somáticas (del cuerpo) y
reproductivas (óvulos y espermatozoides en mamíferos, por ejemplo) y éstas células tiene un
ciclo de vida o ciclo celular dentro del cual, se lleva a cabo la reproducción celular que puede ser,
por mitosis, en el caso de las células somáticas o vía meiosis, para las células reproductivas. Cada
una de estas vías de reproducción celular se compone de varias fases en las que ocurren cambios
importantes en la célula.
86
Objetivo
Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.
Material
• Microscopio.
• Aceite de inmersión
• Acetocarmín
• Metanol
• Bisturí
• Micropreparados que ilustran los procesos de mitosis y meiosis.
Procedimiento
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o rosácea y lave con abundante
agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido
tratadas para inhibir o retardar la germinación de las raicillas.
Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres
palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.
Póngalo a germinar a 25°C o a temperatura ambiente durante 3 días, al cabo de estos
aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar
con agua cada 24 horas.
87
Cuando las raíces tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raíz de
aproximadamente 2 – 3 mm a partir del ápice.
Colóquelas en una lámina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante acetocarmín.
Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con ayuda de la punta de una
lanceta, de unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raíz quede
extendida.
Use papel absorbente para retirar el exceso de colorante realice una suave presión, evitando
que él cubre objetos resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por
mucha presión que se realice.
Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para evitar que se seque y de
esta manera conservar la preparación durante varios días.
Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el objetivo de 10x e
identifique las células.
Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los núcleos y cromosomas en
color rosáceo – morado.
Ubique el objetivo de 100 x y escriba sus observaciones anotando las diferencias en cada uno
de los aumentos mencionados.
Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga células en interfase y células en
división y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis.
88
Realice dibujos de todas las fases de la meiosis y mitosis.
Cuestionario
¿Qué etapas de la meiosis y mitosis observó?
RTA: Profase
La cromatina en el núcleo comienza a condensarse y se vuelve visible en el microscopio óptico
como cromosomas. La membrana nuclear se disuelve, marcando el comienzo de la prometafase.
Proteínas se adhieren a los centrómeros creando los cinetocoros y los cromosomas comienzan a
moverse.
89
.
¿Qué tipo de células observó?
RTA: células iniciales son las precursoras de todos los linajes celulares, las que realmente se
dividen para dar lugar a los tejidos de la raíz. Se encuentran rodeando al centro quiescente.
Cuando una célula incial se divide, una de las células nuevas permanece como inicial mientras
que la otra se desplaza hacia la zona de proliferación donde se dividirá repetidas veces y se
diferenciará en la zona de maduración para dar lugar a los diferentes tejidos que componen la
raíz. En la mayoría de los casos el tipo de tejido en el que se dividirá depende de la posición
espacial que ocupe entorno al centro quiescente
¿Cuántos cromosomas poseen las células en mitosis?
RTA: En la división celular por Mitosis, las dos células hijas resultantes siempre poseen el
mismo número de cromosomas que la célula madre de la cual proceden.
90
¿Cuántos cromosomas poseen las células en meiosis?
RTA/ La meiosis consigue mantener constante el numero de coromosomas de las células de la
especie, para mantener la información genetica.
¿Qué es la cromatina?
RTA: La cromatina es la forma en la que se presenta el ADN en el núcleo celular. Es la
sustancia de base de los cromosomaseucarióticos, que corresponde a la asociación de
ADN, ARN y proteínas que se encuentran en el núcleo interfásico de las células eucariotas y que
constituye el genoma de dichas células. Las proteínas son de dos tipos: las histonas y
las proteínas no histónicas
¿Qué es la interfase?
RTA: Se denomina así al período que transcurre entre dos fases M o divisiones sucesivas. Se
compone de varias etapas.
Fase G1
Fase S
Fase G2
91
¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada una de ellas?
RTA: las etapas del ciclo celular se dividen en dos fases importantes: la interfase y la fase
mitótica (M).
Durante la interfase, la célula crece y hace una copia de su ADN.
Durante la fase mitótica (M), la célula separa su ADN en dos grupos y divide su citoplasma
para formar dos nuevas células.
¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y por qué?
RTA: Fase S.- Es la fase en la cual se duplica por entero el material hereditarios, el
cromosoma pasa de tener un cromatidio a tener dos, cada uno de ellos compuesto por una doble
hélice de ADN producto de la duplicación de la original, como la replicación del ADN es
semiconservativa, las dos dobles hélices hijas serán exactamente iguales, y por tanto los
cromatidios hermanos, genéticamente idénticos.
¿Cuáles son las partes del cromosoma?
92
¿Qué es una célula diploide?
RTA: Las células diploides son las células que tienen un número doble de cromosomas (a
diferencia de los gametos), es decir, poseen dos series de cromosomas
¿Cómo se identifica el estado de Profase en una célula en mitosis?
RTA: En la profase los pares de centríolos se separan hacia los polos opuestos. A medida que se
separan, aparecen unas fibras que forman una estructura en forma de huso.
¿Qué es la metafase?
RTA: La metafase es la segunda fase de la mitosis y de la meiosis que sucede después de
la profase en donde esta pierde la envoltura y aparecen los microtúbulos del huso
acromático (también llamado meiótico o mitótico).
¿Cómo se identifica el estado de Anafase en una célula en mitosis?
RTA: Al inicio de la anafase las cromátidas hermanas son separadas totalmente y son
dirigidas hacia polos opuestos de la célula en división
93
¿En cuál tipo de tejido ocurre la meiosis y por qué?
RTA:
LOS MERISTEMOS (tejidos embrionarios)
Son tejidos formados por celulas con mucha capacidad de división, se dividen por meiosis con
mucha facilidad. Son los tejidos que controlan el crecimiento del vegetal. El crecimiento del
vegetal se produce de dos maneras, crecimiento en longitud (raices se hacen mas largas...) y en
anchura (el tronco del arbol se engorda...). Los meristemos de longitud se llaman primarios,
hacen que crezcan nuevas ramitas, que las que ya estaban se alarguen.
PARENQUIMA (tejido fundamental)
Es el que mas celula presenta en un vegetal, es un tejido indiferenciado, no tiene una funcion muy
definida, es un tejido para hacer masa. algunos hacen la fotosintesis, otros masa, otros guardan
sustancias. El mas diferenciado es el que tiene la funcion de la fotosintesis y reciben el nombre de
clorenquima, porque tienen cloroplastos
ESCLERENQUIMA Y COLENQUIMA (tejidos de sostén)
Nos encontramos estructuras que las producen las celulas, pero luego las celulas se mueren, y
queda la estructura, la pared celular, con lo que lleven dentro, y se llamaran celulas muertas.
Mucha parte de las celulas vegetales estan muertas, y son vitales como tejidos de sosten, aunque
no necesiten ser alimentadas, ni realizar ninguna funcion. Tienen mucha resistencia porque tienen
las paredes muy gruesas.
Tienen resistencia a los esfuerzos de cizalla, para esto necesitan mucha elasticidad. y tambien
tienen que tener resistencia a esfuerzos de carga.

94
Las celulas del colenquima tienen menos resistecia, y sus celulas son celulas vivas, por lo que si
que hay que alimentaras, no tienen tanto lignina.
TEJIDOS CONDUCTORES:
unos llevan las sabia que es bruta y tienen agua con sal, que van desde las raices a las hojas,
tienen un movimiento vertical ascendente, y que va a viajar por el XILEMA. Hay una sabia que
es la elaborada, agua con productos de las fotosintesis, y tienen un movimiento descendente. A la
parte inferior e internar a esos hay que llevaler los productos de la fotosintesis. esto constituye el
FLOEMA. Las celulas del xilema y floema son completamente disitintas. En el XILEMA
encontramos celulas muertas. a estas se les llama traqueas, Las del FLOEMA son todas vivas. y
se llaman traqueidas. En ambas celulas se encuentran tubos, son vias de distribucion de esa sabia.
en el floema estan rellenas de materia viva, de citoplamas, y los tubos de XILEMA son tubos
muertos. Por lo general en muichos vegetales se localizan canales, podemos encontrar muy cerca
el uno del otro.
TEJIDOS DE REVESTIMIENTO : EPIDERMIS, Y CORCHO.
Estan por la parte externa, y tienen dos funciones, evitar la deshidratacion, aportan una defensa
mecánica contra los repredadores, en las plantas herbaceas, solo hay epidermis, y es una capa de
celulas simples unidad perfectamente unas con otras, no le proporciona ninguna proteccion, tan
solo evita que se sequen. En las plantas leñosas, se van acumulando capas de un tejido mucho
mas resistente que va a formar lo que es la corteza. Eso hace que ya no se los coman los
animales. Siempre se comeran antes las partes verdes. Si se cierra con la epidermis la salida de
agua también se cierra la entrada sobre todo de aire, por eso en determinados lugares tanto la
95
epidermis como la peridermis tienen aperturas al medio externos, en la epidermis reciben el
nombre de estomas, y en el caso del corcho se llaman lenticelas. El aire la toman por la parte
aerea, por las hojas, a traves de la corteza y por algunas zonas de la corteza.
¿Cuántas fases comprende la meiosis? Identifíquelas.
RTA:
MEIOSIS 1
Antes de entrar en la meiosis I, una célula primero debe pasar por la interfase. Al igual que en
la mitosis, la célula crece durante la fase G_11start subscript, 1, end subscript, copia todos sus
cromosomas durante la fase S y se prepara para la división durante la fase G2.
MEIOSIS 2
Las células se mueven de la meiosis I a la meiosis II sin copiar su ADN. La meiosis II es un
proceso más corto y simple que la meiosis I, y podría resultarte útil pensar en la meiosis II como
“mitosis para células haploides.”Las células que entran en meiosis II son aquellas creadas en la
meiosis I. Estas células son haploides, tienen un cromosoma de cada par homólogo, pero sus
cromosomas todavía están formados por dos cromátidas hermanas. En la meiosis II, las
cromátidas hermanas se separan y producen cuatro células haploides con cromosomas no
duplicados.
¿En cuál fase de la meiosis ocurre la reducción del número de cromosomas en la célula
(pasa de condición diploide a haploide)?
RTA: Meiosis 2
96
“Extracción de ADN”
Introducción
Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de
DNA. Entre las cuatro biomoléculas principales que componen a los seres vivos, encontramos a
los ácidos nucleicos. Entre ellos, el ADN o Ácido desoxirribonucleico, es el material genético
que comprende las instrucciones que determinan todas las características y funciones de un
organismo y se puede transmitir a su descendencia (heredabilidad). Razón por la cual, la
extracción de ADN es un paso obligado hacia el ejercicio y práctica de la biología molecular.
Objetivo
Extraer ADN a partir de células animales y vegetales.
Materiales y reactivos
• 100 ml de agua embotellada (sin gas)
• 100 g de espinacas frescas
• 1 vaso de precipitado de 200 ml
• 1 vaso de precipitado de 100 ml
• 1 vaso desechable nuevo y limpio.
• Jabón líquido para lavar los platos
97
• 25 g de NaCl
• 100 ml de alcohol isopropílico
• Colorante líquido de color rojo o azul.
• Enzimas (también puede obtenerse del jugo natural y puro, de una porción de piña, recién
licuada y colada).
• 1 cuchara o espátula
Procedimiento
Obtención de ADN a partir de células animales
1. Mezclar el vaso desechable, el agua embotellada con NaCl. Agitar hasta disolver
completamente.
2. Uno de los estudiantes, deberá beber un sorbo de la solución salina preparada y beber (sin
tragar) para removerla en la boca durante un minuto, haciendo buches (esto se hace para
desprender células epiteliales de la boca y así poder extraer el ADN de ellas).
3. Escupir la mezcla en un vaso de precipitado.
4. Añadir una gota del detergente líquido para platos en la mezcla y remover con la espátula o
cuchara, despacio para no hacer burbujas (así rompemos las membranas celulares y podemos
extraer el ADN de estas).
5. Dejar reposar por 10 minutos.
6. Pasar la muestra a un tubo de ensayo, esto no debe superar la tercera parte del tubo.
7. Añadir 2 gramos de enzimas (si es en polvo) o 1 mL de jugo de piña.
98
8. Una vez tapado y asegurado el tubo, agitar suavemente girando el tubo 180º sobre su eje
vertical, repitiendo el giro 5 veces.
9. En otro vaso de precipitado, mezclar los 50 ml de alcohol isopropílico con tres gotas de
colorante.
10. Con cuidado verter el contenido del vaso con alcohol y colorante en el tubo de ensayo que
contiene la muestra, inclinando el tubo para que el alcohol genere una capa sobre la muestra.
11. Esperar 5 minutos, extraer los grumos y cadenas blancas con un palillo.
Obtención de ADN a partir de células vegetales
12. En un mortero, macerar las espinacas por 2 minutos e ir adicionando poco a poco 50 ml de
agua embotellada.
13. Colar en un vaso de precipitado y reservar
14. Adicionar 8 ml de detergente líquido lavaplatos y remover con la espátula o cuchara, despacio
para no hacer burbujas (así rompemos las membranas celulares y podemos extraer el ADN de
estas).
Repetir los pasos del 5 al 11 del procedimiento anterior.
99
Dibujar la estructura molecular del ADN y explicar brevemente sus características.
Cuestionario
1. ¿Para qué sirve extraer ADN?
RTA: Es un método por el cual se obtiene el ADN a partir de las células y puede provenir de
un cepillado bucal,vaginal, cervical, de fluidos como la saliva, la sangre o casi cualquier parte
de un organismo. La extracción consiste en separar el ADN de otros componentes celulares
(como la membrana o las proteínas) con el fin de poder estudiarlo o manipularlo. En la
investigación biomédica el ADN se utiliza para analizar a pacientes con diferentes
padecimientos como enfermedades genéticas, cáncer, infecciones, etc.
2. ¿Describa brevemente cuál es la importancia del ADN para la vida?
RTA: En la investigación biomédica el ADN se utiliza para analizar a pacientes con
diferentes padecimientos como enfermedades genéticas, cáncer, infecciones, etc.
3. ¿Para qué se utiliza el detergente y la sal?
RTA La sal común (NaCl), con esta concentración, es un medio hipertónico que provoca el
estallido de las células y los nucleos, quedando libre las fibras de cromatina.
100
4. Dibuje o esquematice la acción del detergente sobre las células
5. ¿Por qué se utiliza el alcohol?
RTA: Para separar el ADN de otros componenetes celulares, los cuales son dejado en la
solución acuosa.
6. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas formando la cromatina ¿En
qué etapa del experimento se separa el ADN de las proteínas?
RTA: Cuando adicionamos el alcohol
7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN? ¿qué se deduce sobre
la solubilidad de ADN en el agua salada y el etanol?
RTA: En la parte superior del tubo se observan los filamentos de ADN.
101
El producto de filamentos extraídos no es ADN puro, ya que entremezclado con el, hay
fragmentos de ARN.
8. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que requieren la extracción de
ADN? (Explique al menos 3 técnicas e incluya imágenes).
RTA/
• Preparamos una solución salina compuesta con 100 ml de agua (media taza), 10 ml de
detergente lavaplatos (1 cucharada) ,13 gr de NaCl o sal de cocina (una cucharada). Poner
en la boca una bocarada de agua y mover el agua de mejilla a mejilla por 1 minuto. En un
vaso de vidrio echar la bocarada de agua y sal.
• Colocamos dos centímetros de la extracción del ADN en un tubo de ensayo.
• luego agregamos 2 centímetros de jabón liquido, se debe echar el jabón cuidadosamente
que vaya resbalando por las paredes del tubo de ensayo.
• Luego echamos dos centímetros de alcohol en el tubo de ensayo también cuidadosamente
que vaya resbalando sobre las paredes del tubo.
102
103
104
105
“Genética humana”
INTRODUCCIÓN
En el laboratorio se estudiarán algunas características humanas conocidas, para demostrar la
herencia Mendelina simple. Con esta actividad práctica, los estudiantes investigarán acerca de la
herencia de las de características humanas y se fortalecerán los conocimientos teóricos de la
Unidad 3.
Fuente: http://criadeperiquitos.blogspot.com/2015/12/herencia-genetica-guia-basica.html
106
Objetivo
Determinar caracteres heredables en una población.
Procedimiento
1. Enrollamiento de lengua
Algunas personas tienen la capacidad de enrollar la
lengua en forma de U, cuando la sacan de la boca. Esta
capacidad conocida como enrollamiento de la lengua, es
causada por un alelo dominante U. La persona que no
posee este alelo sólo puede curvar la lengua.
Alelo dominante U (Mayúscula)
Alelo recesivo u (Minúscula)
Paso 1- Con la ayuda de un compañero(a) de laboratorio o de un espejo, determine cuál es su
característica y regístrela en la tabla al final.
2. Separación de los lóbulos de las orejas
Un alelo dominante L determina que los lóbulos de
las orejas estén separados, es decir que no estén
adheridas completamente a la cabeza. En algunas
personas los lóbulos, están adheridos totalmente a la
107
cabeza. El que estén los lóbulos de las orejas adheridas, es una condición homocigótica
determinada por un gen recesivo.
Alelo dominante L (Mayúscula)
Alelo recesivo l (Minúscula)
Paso 2 - Observe los rasgos de los lóbulos de sus orejas y los de sus compañeros y escriba sus
resultados.
3. Pulgar en escuadra
Algunas personas pueden separar el dedo pulgar hasta formar un ángulo de 90°. Esto se llama
“pulgar en escuadra”. Un alelo recesivo p determina esta cualidad. Un alelo dominante P, que se
encuentra en la mayoría de las personas, evita que esta separación sea mayor de 45°
Alelo dominante P (Mayúscula)
Alelo recesivo p (Minúscula)
Paso 3 - Determine si tiene esta cualidad y anote estas observaciones.
4. Pico de viuda
Algunas personas muestran la
característica de que su línea del pelo baja
hasta un punto definido en la mitad de la
frente. Esta se conoce como “pico de
viuda”. Este rasgo resulta de la acción de un
108
alelo dominante V. El alelo recesivo v determina la característica de una línea continua en el
pelo.
Alelo dominante V (Mayúscula)
Alelo recesivo v (Minúscula)
Paso 4 - Con un espejo determine su fenotipo y anote sus observaciones
5. Vello en las falanges de los dedos de la mano
Note la presencia o ausencia de vello sobre las falanges de los dedos. La presencia de vello se
debe a un gen dominante D. La ausencia se debe a un gen recesivo d. Otros alelos determinan se
crecerá vello sobre las falanges de los dedos, así como la cantidad del mismo.
Alelo dominante D (Mayúscula)
Alelo recesivo d (Minúscula)
Paso 5 - Para observar el vello, utilice una lupa y examine sus dedos con mucho cuidado.
Algunos individuos tienen muy fino sobre los dedos. Anote sus observaciones para este alelo
6. Dedo anular más corto que el dedo índice
Algunos genetistas creen que, si el dedo anular es más corto, se debe a un gen influido por el
sexo del individuo. De acuerdo con esta teoría, los varones poseen un gen dominante A y las
mujeres uno recesivo a.
Alelo dominante A (Mayúscula)
Alelo recesivo a (Minúscula)
Paso 6 - Extienda su mano hacia delante, con los dedos juntos. Su dedo anular ¿es más largo o
más corto que el índice? En caso de duda coloque su mano sobre un pedazo de papel blanco al
109
tope del papel. Asegúrese de que es la punta del dedo y no la uña la que se encuentra en el tope
del papel. Compare el tamaño del dedo anular con el tamaño del dedo índice y anote sus
observaciones.
Presentación de resultados y cuestionario
A. Explique el tipo de anormalidades cromosómicas existen y cuáles son los efectos en el
desarrollo del individuo.
RTA/
Aproximadamente uno de cada 200 bebés nace con una anomalía cromosómica.
Los cromosomas son estructuras microscópicas que se encuentran presentes en las células del
organismo. Contienen los genes que determinan rasgos como el color de los ojos y del cabello y
que controlan el crecimiento y el desarrollo de cada componente de nuestro sistema físico y
bioquímico. Los seres humanos tienen 23 pares de cromosomas, es decir 46 cromosomas en total.
Heredamos uno de los cromosomas de cada par de nuestra madre y el otro de nuestro padre. Uno
de estos pares está formado por los cromosomas que determinan el sexo. Las mujeres tienen dos
cromosomas X y los hombres un cromosoma X y un cromosoma Y.
Anomalías cromosómicas esctucturales: Se trata de alteraciones en la estructura de los
cromosomas. Dichas alteraciones pueden ser de dos tipos:
• Con ganancia o pérdida de material genético: esto tendrá una implicación a nivel
fenotípico para el portador. Ejemplo: deleción, inserción,…
110
• Sin ganancia ni pérdida de material: normalmente no tiene ninguna consecuencia para
el portador pero si tiene consecuencias a nivel reproductivo. Ejemplo: translocación
equilibrada, inversión,…
Anomalías cromosómicas numéricas: son la pérdida o la ganancia de uno o varios
cromosomas. Pueden afectar tanto a autosomas (cualquier cromosoma que no sea sexual) como a
cromosomas sexuales. Existen diferentes tipos:
• Monosomía: pérdida de un cromosoma. Por tanto, solamente quedará una copia del
cromosoma cuando en una situación de normalidad habrían dos.
• Trisomía: Existencia de tres copias de un cromosoma específico, en lugar de dos (en una
situación de normalidad). El síndrome de Down es un ejemplo de trisomía. Las personas
con síndrome de Down tienen tres copias del cromosoma 21.
¿Qué ocurre si un embrión presenta alguna anomalía cromosómica?
La gran mayoría de los embriones con anomalías cromosómicas no concluyen con embarazo o
bien acaban en abortos. Los embriones que evolucionan pueden resultar en el nacimiento de un
niño afectado de alguna patología.
B. ¿Cómo influye el ambiente en la expresión de los genes?
RTA/
Los mecanismos epigenéticos son un ‘traductor’ del medio ambiente y son capaces de modificar
la expresión de los genes al funcionar como un registro del entorno: son la memoria del medio
111
ambiente al que estuvieron expuestos. La palabra epigenética -lo que está sobre los genes- se
refiere al estudio de los cambios heredables en la expresión de los genes sin cambios en la
secuencia -letras o código- del ADN: las marcas se producen en la cromatina –formada por ADN
enrollado sobre proteínas y que contiene a los GENES antes de que sean interpretados-. Además
existen moléculas capaces de regular a los ARN mensajeros, que son el producto de los genes una
vez transcriptos. Así, tenemos el código genético y, superpuesto, el código epigenético –
marcación de la cromatina y moléculas que actúan sobre los ARN mensajeros. Estos mecanismos
podrían compararse con la instalación eléctrica de una casa, compuesta por cables y teclas o
interruptores para encender lámparas: el genoma sería la instalación eléctrica, siempre llevando la
misma información, las marcas epigenéticas serían los interruptores. Pero, ¿a qué nos referimos
cuando hablamos de medio ambiente o entorno? A todas las señales externas: la dieta, los rayos
UV, el estrés, los fármacos, las drogas, el alcohol y el tabaco, el cuidado materno, las relaciones
interpersonales, la actitud frente a la vida, entre otras
C. Mencione al menos 2 síndromes relacionados con anormalidades cromosómicas más
frecuentes y otras dos menos frecuentes o enfermedades huérfanas.
RTA/
• Síndrome de Down (trisomía 21)
• Síndrome de Patau (trisomía 13)
• Síndrome de Edwards (trisomía 18)
• Síndrome de Klinefelter (47, XXY)
112
• Síndrome de Turner (45, X)
• Mujeres XXX.
• Hombres XYY
síndromes relacionados con anormalidades cromosómicas menos frecuentes
Síndrome X Frágil.
Síndrome de Marfan.
Síndrome de Proteus.
Síndrome de Moebius o Möbius.
113
Estudiante No. 1 Estudiante No. 2 Estudiante No. 3 Estudiante No. 4
Característica Genotipo(s) Genotipo(s) Genotipo(s) Genotipo(s)

Fenotipo Fenotipo Fenotipo Fenotipo
posible(s) posible(s) posible(s) posible(s)
Enrollamiento de
U U U U
lengua
Separación de los
i I L L
lóbulos de las orejas
Pulgar en escuadra P P P P
Pico de viuda V v v V
Vello en las
falanges de los D d D D
dedos de la mano
Dedo anular más
corto que el dedo A A A A
índice
Sexo Hombre:X Mujer__ Hombre_ Mujer:x Hombre_ Mujer:x Hombre:X Mujer_ 114
Profe por espacio de la margen no pudimos llenar la planilla por eso adjuntamos imagen del ejercicio realizado en el
laboratorio.
115
116
BIBLIOGRAFÍA
Pérez Avila, J., Valenciaga Rodríguez, J. L., Acosta, A., Nicolau Mena, O., Turcios Tristá, S. E.
& Navaroli Fernández, F. (2012). Mecanismos de acción hormonal a través de receptores
ubicados en la membrana celular. Retrieved 11/27, 2013, from
http://www.cpicmha.sld.cu/hab/pdf/vol11_1_05/hab08105.pdf
Bruce, A., Lewis J, Raff, M, Roberts K.& Walter P. (2004). Biología Molecular De La Celula.
Editorial Omega. 4 Edición Campbell, Neil A., Reece Jane B. (2007). Biología.
España:Ed. Médica Panamericana. Curtis, H. (2009). Biología Educación Media. Editorial
Panamericana.
Derobertis, E., Hib, J. &Ponzio, R. (2009). Biología Celular y Molecular. Buenos Aires. Ed. El
Ateneo.
Freeman, Scott. (2009). Biología. Pearson Ediciones. 3 ediciones Pierce B.A. 2005. Genética: Un
enfoque conceptual. México. Editorial Médica Panamericana.
Wayne N. Becker, Lewis J. Kleinsmith Y Jeff Hardin. (2006). El Mundo De La Célula. Pearson
Educación. 6 edición
https://institutomarques.com/glosario/anomalias-cromosomicas/
117

Laboratorio de Biologia Molecular

Caricato da

Informazioni sul documento

Descrizione originale:

Titolo originale

Copyright

Formati disponibili

Condividi questo documento

Condividi o incorpora il documento

Opzioni di condivisione

Hai trovato utile questo documento?

Questo contenuto è inappropriato?

Copyright:

Formati disponibili

Laboratorio de Biologia Molecular

Caricato da

Copyright:

Formati disponibili

TRABAJO DE LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

Erika Mildred Ruiz

José David Prieto

Juan Guillermo España

Marilyn Paola Bernal

Universidad Nacional Abierta y a Distancia

27-28 de abril del 20

Unidad 1: Naturaleza de las ciencias

• Práctica No.1: Bioseguridad

• Práctica No.2: Microscopía

• Práctica No.3: Célula: Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia

• Práctica No.4: Permeabilidad selectiva del eritrocito

• Práctica No.5: Mitosis y Meiosis

• Práctica No.6: Extracción de ADN

• Práctica No.7: Genética humana

lavado de manos para realizar cualquier procedimiento en el laboratorio.

interactuar con otros componentes químicos.

ultimo daremos una pequeña descripción de genotipo humano.

• Dar a conocer la importancia de la Biología Celular y Molecular en la composición de la

estructura genética de los seres vivos y de las plantas.

• Aprender sobre cada una de las partes del microscopio.

• Observa sobre la estructura genética de los seres vivos y las plantas.

• Comprender cada uno de las genotipos y alelos de los seres vivos.

• Distinguir cada uno de los poderes de aumento de un microscopio.

• Conocer que es la bioseguridad y los diferentes elementos de protección.

peligro. Bioseguridad en el Laboratorio de biología es el conjunto de normas y procedimientos que

directo con objetos contaminados y, por aerosoles contaminados.

Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio.

Material que debe llevar al laboratorio

Elementos de protección personal (Bata, gorro, guantes, tapabocas y gafas de bioseguridad),

Toallas desechables, jabón antiséptico.

• Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes

de salir del laboratorio.

implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en

• Utilizar mascarillas de respiración, la cual debe encajar cómoda y adecuadamente

sobre el puente de la nariz para evitar el empañamiento de las gafas protectoras.

protege contra infecciones.

• Utilizar anteojos de protección para evitar lesiones oculares causadas por

infecciones considerando que muchos gérmenes de la flora oral normal son

• No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el

• Jamás llevarse el lapicero, bolígrafo o cualquier otro implemento a la boca.

• No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del Laboratorio.

• Hablar lo mínimo mientras está trabajando en el Laboratorio.

• No pipetear con la boca.

• No usar jeringas o agujas para manipular líquidos o especímenes clínicos.

• Utilizar únicamente mecheros comerciales, NUNCA improvisados.

• Mantener el Laboratorio limpio y aseado.

• Descontaminar las áreas de trabajo antes de iniciar la práctica de laboratorio, cada

vez que se derrame una sustancia y, una vez terminada la práctica.

• Descartar todo el material contaminado en los recipientes destinados para ello.

• Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de

• Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos.

• Leer y entender los pasos de cada procedimiento antes de proceder a realizarlo.

• Preguntar al docente cualquier duda sobre los procedimientos a seguir.

Notificar de inmediato al docente cualquier accidente.

2. Desinfección del área de Trabajo.

• Prepare una dilución de hipoclorito de sodio al 0.5%.

• Impregnar el área de trabajo y dejar actuar durante 5 minutos.

descartar el papel en la caneca correspondiente.

Nota: este procedimiento se debe realizar antes y después de las prácticas

3. Manejo de elementos de protección personal.

elementos de protección (bata, anteojos, mascarilla respiratoria o tapabocas, guantes, etc.) a