Departamento de ciencias naturales

Profesor: Jorge Soto Bravo

EXTRACCIÓN DE ADN EN CÉULUAS VEGETALES Y ANIMALES

OBJETIVO:
En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de células vegetales, poniendo de
manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el
empaquetamiento en el núcleo celular de las larguísimas cadenas de esta molécula.

INTRODUCCIÓN
Los ácidos nucleicos son moléculas orgánicas de gran importancia en la transmisión de los
caracteres hereditarios y en la síntesis de proteínas. Los avances científicos en este campo tienen
aplicaciones médicas, agrícolas, ganaderas e industriales. Gran parte de las investigaciones en
biología molecular actual se realizan sobre estas moléculas orgánicas

A nivel químico los ácidos nucleicos son polímeros lineales de

nucleótidos, quienes a su vez se componen de un azúcar de cinco carbonos,
bases nitrogenadas y un grupo fosfato.

Existen dos tipos de ácidos nucleicos:

 ADN: Ácido desoxirribonucleótidos

 ARN: Ácido ribonucleótidos

Los desoxirribonucleótidos monofosfato de adenina, guanina, citosina y timina forman parte

del ADN. Los ribonucleótidos monofosfato de adenina, guanina, citosina y uracilo forman parte de
los ARN.

El ADN contiene la información genética que determina el desarrollo del individuo y sus
características; esto es así en todas las especies, salvo en algunos virus que contienen la
información genética en el ARN.

La estructura del modelo actual de ADN fue descrita por primera vez por los investigadores F.
Crick y J. Watson, en 1953, quienes postularon que dos moléculas de ADN, conformadas, cada
una, por una cadena de polinucleotidos, se enrollaba bajo un mismo eje formando una hélice con
capacidad de rotación.
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Profesor: Jorge Soto Bravo

En las células eucariotas, el ADN se encuentra en el núcleo, y una pequeña cantidad en las
mitocondrias y los cloroplastos. En las células procariotas, la molécula de ADN es circular, y
además, estas células pueden tener otras moléculas más pequeñas de ADN llamadas plásmidos.

El ARN es un polirribonucleótido formado fundamentalmente por los ribonucleótidos de

adenina, guanina, citosina y uracilo (en vez de la timina del ADN). La pentosa es la ribosa, que tiene
un grupo hidroxilo en el carbono 2'.

FUNDAMENTO

El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unido a
proteínas para formar la cromatina. Para poder extraerlo es necesario romper las células y separar
el núcleo para después romper éste y liberar el ADN. Una vez liberado se debe separar de las
proteínas y precipitarlo para su extracción

MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales: Para la extracción de ADN:

 2 a 3 frutillas congeladas desde al menos una noche antes.

 20 mL de alcohol etílico (etanol) 90° frío (se recomienda refrigerar desde una noche previa
del experimento).
 1 bolsa pequeña de plástico con cierre (tipo Ziplock)
 tubos de ensayo
 1 gradilla
 1 vaso de precipitado 100 ml
 1 embudo pequeño
 1 pipeta de 5 mL
 1 ó 2 círculos de papel filtro
 2 palillos largos o varillas de vidrio
 Solución para extracción (30 mL)(detergente+ sal)
 Cubos de hielo para enfriar los extractos y el alcohol
 Marcador permanente o masking tape para etiquetar los tubos de ensayo
 1 cronómetro

Procedimiento: Extracción de ADN

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Profesor: Jorge Soto Bravo

1.- Tiempo antes de comenzar la práctica congelar las frutillas y enfriar el alcohol (es mejor meterlo
al refrigerador una noche antes de su uso).
2.- Colocar las frutillas en una bolsa plástica, agregar 20 mL de solución de extracción, sacar todo el
aire de la bolsa y cerrar ésta.
3.- Machacar las frutillas con los dedos durante 5 minutos.
4.- Coloca la bolsa al hielo por un minuto y repetir el machacado por otros 5 minutos.
5.- Filtrar el machacado usando un embudo y papel filtro de filtrado rápido, recibir el líquido en un
probeta o vaso precipitado.
6.- Colocar 2 mL de filtrado en un tubo de ensayo cuidadosamente agregar un volumen igual de
alcohol al 90% frío lentamente sin mezclar. Dejar reposar el tubo durante 5 minutos.
Es importante mantener el alcohol frío en la mesa de trabajo, colocando éste en un baño de hielo.
7.- Transcurrido ese tiempo notarás que aparece una sustancia viscosa. Introduce el palito de
madera y varilla y sácalo a la superficie.
8.- ¡Este es el ADN de las frutillas!
10.- Elimina los restos de alcohol mediante decantación. Ten cuidado ya que es fácil perder la
muestra.

CUESTIONARIO

1.- ¿Por qué es necesario moler o machacar las fresas?

2.- investiga la función de cada una de las sustancias en la extracción del ADN.
SUSTANCIA FUNCIÓN
Detergente
Sal
Alcohol
3.- ¿Por qué será importante realizar el experimento en un baño de hielo?
4.- ¿Qué función tiene llevar a cabo la filtración?