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LABORATORIO DE BIOLOGIA

Facultad de Ciencias Agrarias y Recursos Naturales

UNIDAD ACADEMICA:
Programa de Ingeniería Agronómica
CURSO: Biología celular
PRACTICA Nº 3: Macromoléculas

1. OBJETIVOS

 Identificar los compuestos orgánicos (biomoléculas) que componen cada uno de los
alimentos problema.
 Adquirir habilidad en la detección de carbohidratos, lípidos y proteínas.
 Examinar la presencia de carbohidratos, lípidos y proteínas en diferentes alimentos
2. PRE INFORME

 ¿Qué otras técnicas se usan para detectar carbohidratos, lípidos y proteínas se

conocen?
 ¿Cuál es la función de los carbohidratos en los seres vivos?
 Explique el proceso de desnaturalización en las proteínas
3. FUNDAMENTO TEORICO
El reconocimiento e identificación de los tipos de Biomoléculas que constituyen los seres vivos
en el laboratorio y con la aplicación de métodos y reactivos le permitirán al estudiante indagar,
observar y evaluar en un sentido práctico y teórico los conceptos previos adquiridos en la teoría
desarrollando de esta forma habilidades, destrezas y criterio científico que será necesario
para la enseñanza de la Biología con énfasis en el sector agrícola y pecuario.
Las sustancias inorgánicas son insuficientes para la nutrición de los seres humanos cuya dieta
también debe incluir sustancias orgánicas fabricadas por otros seres vivos.
Carbohidratos: los más sencillos, como la glucosa y la maltosa, tienen sabor dulce; por eso se
conocen como azucares. La glucosa es un azúcar que no puede descomponerse en otros más
sencillos. La maltosa se forma por la unión de dos moléculas de glucosa.
El almidón y la celulosa son carbohidratos complejos que no tienen sabor dulce. Sus moléculas
son muy grandes (macromoléculas) producto de la unión de cientos o miles de moléculas de
glucosa.
Los lípidos, como las grasas o colesterol. Son sustancias que se disuelven poco o nada en
agua. Las de origen vegetal o grasas insaturadas son líquidas a temperatura ambiente y se
denominan aceites. En cambio, las de origen animal o grasas saturas, como la mantequilla,
son sólidas y se conocen como sebos.
Una molécula de grasa puede descomponerse en sustancias más sencillas: el glicerol y los
ácidos grasos. Los lípidos al igual que los carbohidratos, son una fuente importante de energía
almacenada. Los lípidos son componentes importantes de las membranas celulares, de
algunas vitaminas, de ciertas hormonas y del colesterol. Los lípidos son solubles en solventes
no polares y son muy poco solubles en agua porque se componen principalmente de cadenas
de hidrocarburos. Las proteínas, como la hemoglobina (presentes en la sangre) o la
ovoalbúmina (proteína del huevo). Son macromoléculas formadas por la unión de centenares
o miles de moléculas más simples, los aminoácidos. Hay 20 aminoácidos (proteínicos)
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distintos. Existen, pues, muchas proteínas diferentes, las cuales se diferencian entre sí en el
número, tipo, y disposición de los aminoácidos que las forman.
Las proteínas son componentes estructurales de las células, controlan sus procesos
metabólicos y actúan como mensajeros químicos. Además son parte importante de los
anticuerpos, enzimas y receptores células. Las proteínas están formadas por cadenas de
aminoácidos. Debido a la presencia de los grupos amino y carboxilo, los aminoácidos resisten
cambios de pH y son amortiguadores importantes en soluciones biológicas.

FUNDAMENTO TEORICO DE LOS REACTIVOS

Prueba de Yodo o Lugol: la prueba de yodo se usa para detectar almidón. El almidón es un
polímero de glucosa producido por las plantas y es una fuente importante de energía
almacenada. La molécula de almidón forma hélices entre las cuales se inserta el yodo, tiñendo
el almidón de azúcar oscuro a negro.

Prueba para carbohidratos Fehling: Se trata de una reacción redox en la que el grupo
aldehído (reductor) de los azúcares es oxidado a grupo ácido por el Cu2+ que se reduce a
Cu+. Tanto los monosacáridos como los disacáridos reductores reaccionan con el Cu2+ dando
un precipitado rojo de óxido cuproso.

Prueba de Benedict: permite el reconocimiento de carbohidratos reductores, al igual que el

reactivo de Felhing. Los dos reactivos contienen un ion cúprico en medio alcalino que se reduce
hasta óxido cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo hemiacetálico libre. SI la prueba
es positiva debe dar un color amarillo naranja indicando la presencia de grupos reductores
libre.

Prueba de Sudán para identificación de grasas o lípidos: Detecta las cadenas de

hidrocarbonos. El reactivo de Sudán produce una reacción hidrofóbica donde los grupos no-
polares (los hidrocarbonos) se agrupan y son rodeados por moléculas del reactivo. La prueba
de Sudán tiñe los hidrocarburos de rojo.

Prueba de Biuret para proteínas: El reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio y

sulfato de cobre. El grupo amino de las proteínas reacciona con los iones de cobre del reactivo
de Biuret y el reactivo cambia de azul a violeta.
4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos

Baño maría 10 tubos de ensayo por grupo Jugo de cebolla ***
Mechero Pipetas plásticas Pasteur Jugo de papa ***
Pinzas de madera Jugo de uva ***
Guantes de látex o cirugía *** Caldo de pollo ***
Papel absorbente*** 1 huevo ***

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Encendedor*** Pan***
Aceite vegetal ***
Leche entera ***
Reactivo de Yodo/Lugol
Reactivo de Benedict
Reactivo de Sudan III
Reactivo de Biuret
Ácido nítrico
Agua destilada

Nota: ***Estos materiales/elementos deben ser llevados al laboratorio por parte de los estudiantes.

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
Actividad N 1. Prueba de yodo/Lugol para almidón

Marque cinco tubos de ensayo de 1 a 5

1. Tubo 1: Añada 1mL de jugo de cebolla
2. Tubo 2: Añada 1 mL de jugo de papa
3. Tubo 3: Añada 1 mL de agua destilada
4. Tubo 4: Añada 1 pequeño trozo de pan
5. Tubo 5: Añada 1 mL de leche
Luego añada entre 3 y 4 gotas de yodo/lugol a cada tubo
Anote los resultados en la tabla N 1.

Actividad N 2. Prueba de Benedict para carbohidratos

1. Marque cuatro tubos de ensayo de 1 a 4
2. Tubo 1: Añada 1mL de agua destilada
3. Tubo 2: Añada 1mL de jugo de uva
4. Tubo 3: Añada un pequeño trozo de pan
5. Tubo 4: Añada 1 mL de leche
6. Luego añada 0,5 mL del reactivo de Benedict a cada uno de los tubos.
Tome los tubos con las pinzas de madera y llévelos al baño maría.
La prueba será positiva si el contenido del tubo cambia de color.

A qué color debe cambiar si la prueba es positiva: ___________________________________

Que otras pruebas se pueden utilizar para determinar azucares reductores en muestras
desconocidas.
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________

Nota: Anote los resultados en la tabla N 2.

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Actividad N 3. Prueba de Sudán III para lípidos

Marque cuatro tubos de ensayo de 1 a 4
1. Añada 1mL de agua y 1mL de aceite al tubo 1.
2. Añada 2 mL de agua al tubo 2.
3. Añada 1 pequeño trozo de pan en el tubo 3
4. Añada 1 mL de leche en el tubo 4
5. Añada una gota del reactivo de Sudán III a cada tubo y mezcle.
6. Anote resultados. (Esquematice)

Preguntas a contestar:
- ¿Qué capa de la mezcla tiñó de rojo?
- ¿Se formaron capas? Investigue que son micelas y como se forman.

Actividad N 4. Prueba de Biuret para proteínas

1. Marque cinco tubos de ensayo de 1 a 5
2. Tubo 1: Añada 1 mL de albúmina.
3. Tubo 2: Añada 1 mL de caldo de pollo.
4. Tubo 3: Añada 1 mL agua destilada.
5. Tubo 4: Añada 1 mL de leche
6. Tubo 5: Añada 1 pequeño trozo de pan en el tubo
7. Añada 1 mL del reactivo de Biuret a los cinco tubos.
Anote los resultados en la tabla N 4.

Preguntas
- Consulte las características y funciones de la albúmina.
- ¿Podemos concluir por los resultados que hay proteínas en el caldo de pollo? Explique
porque.

Actividad N 5. Prueba de Ácido Nítrico con proteínas

1. Marque un tubo de ensayo con el nombre Acido Nítrico
2. Agregue 1 ml de clara de huevo.
3. Observe y anote los resultados.

Como este alimento es rico en proteínas, se debe formar un precipitado. ¿De qué color?
________________________________________________________________________
Luego de unos segundos este debe cambiar
________________________________________________________________________

4. Lleve al baño maría el tubo, anote los resultados obtenidos

___________________________.
Esquematice la actividad realizada y describa los cambios de color obtenidos.

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6. BIBLIOGRAFIA
 Harper, M., 2001, Bioquímica manual moderno, Mc Graw Hill, México D.F.
 Horton, H., Hidalgo, M., 1995, Bioquímica, Prentice Hall, Madrid.
 López, C., 1999, Bioquímica y biología molecular, Mc Graw Hill, México D.F
 Robinson, D., 1991, Bioquímica y valor nutritivo de los alimentos, Editorial Acribia,
Zaragosa

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7. RESULTADOS
Tabla N 1. Resultados de la prueba de yodo/lugol para almidón

Tubo contenido Positivo (descripción) Negativo (descripción)

1 jugo de cebolla

2 jugo de papa

3 agua destilada

4 Pan

5 Leche

Tabla 2. Anote los resultados de la prueba de Benedict para carbohidratos.

Tubo Contenido Positivo (Descripción) Negativo (Descripción)

1. Agua destilada +
Reactivo

2. Jugo de uva + Reactivo

3. Pan + Reactivo

4. Leche

Tabla 3. Anote los resultados de la prueba de Sudan III para lípidos.

Tubo Contenido Positivo (Descripción) Negativo (Descripción)

1. Aceite

2. Agua

3. Pan

4. Leche

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Tabla 4 Anote los resultados de la prueba de Biuret para proteínas

Tubo Contenido Positivo (Descripción) Negativo (Descripción)

1. Albúmina

2. Caldo de pollo
3. Agua destilada

4. Leche

5. Pan

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