PRÁCTICA N° 2 BIOMATERIALES SEMESTRE 2019-1

DOCENTE: CLAUDIA PATRICIA OSSA OROZCO

PROGRAMA DE BIOINGENIERÍA
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FABRICACIÓN DE MICROESFERAS DE FOSFATO DE CALCIO

1. OBJETIVOS
1.1 Evaluar un protocolo para la obtención de microesferas de fosfato de calcio.
1.2 Verificar la influencia de la técnica de secado en la morfología de las microesferas.

2. MATERIALES
Fosfato tricálcico
Alginato
Cloruro de Calcio
Jeringa

3. EQUIPOS
Estufa
Agitador magnético
Microscopio óptico
Estereomicroscopio.

3. TEORIA
La encapsulación de un fármaco se usa para controlar su proceso de liberación durante un
tiempo requerido, llegando al tejido u órgano de interés en cantidades que causen el
menor efecto secundario. Para minimizar dichos efectos y potencializar la interacción del
antibiótico de manera eficiente, se debe tener en cuenta el lugar de aplicación y dosis de
este, debido a que el alcance de acción terapéutico debe ser tal que no cause un efecto
tóxico o deje de ser efectivo, lo cual depende de la dosificación y concentración del
fármaco [1].

La microencapsulación de compuestos de actividad biológica (ADN, fármacos, proteínas,

probióticos, enzimas), desde el punto de vista tecnológico, podría definirse como el
proceso de recubrimiento de dichos compuestos, bajo la forma de moléculas, partículas
sólidas o glóbulos líquidos, con materiales de distinta naturaleza, para dar lugar a
partículas de tamaño micrométrico. El producto resultante de este proceso tecnológico
recibe la denominación de “microesfera” ó “microcápsula”, dependiendo de cuál sea su
morfología y estructura interna [2].

Las microcapsulas se diferencian de las microesferas principalmente por el tipo de

estructura interna (Figura 1). Para las microcapsulas, el principio activo, que puede ser de
naturaleza líquida o sólida, se encuentra incluido en una especie de reservorio recubierto
por una fina película de material. En el caso de las microesferas, el principio activo se
encuentra altamente disperso bajo la forma de diminutas partículas o de moléculas en una

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matriz de material que puede ser lo mismo del recubrimiento. La obtención de un tipo de
estructura u otro, depende de las propiedades fisicoquímicas del principio activo y del
material de recubrimiento, así como del proceso tecnológico utilizado [2].

Figura 1. Estructura de microesferas y microcapsulas [1].

Para los procesos de encapsulación se han utilizado diversos materiales de naturaleza

cerámica y polimérica. El fosfato tricálcico (Ca3(PO4)2) es uno de los cerámicos
implementados a la fecha, este material pertenece a la familia de los fosfatos de calcio,
tiene una fase mineral similar en un 70%, a la del hueso humano, con propiedades
osteconductoras que permiten la fijación de células formadoras de hueso y el desarrollo de
redes vasculares. También proporciona un equilibrio estructural similar al del hueso del
paciente, con reabsorción y remodelación similar al proceso fisiológico, sin reacciones
adversas; por lo cual se ha usado como vehículo temporal para la administración de
medicamentos, generalmente antibióticos o para reemplazo óseo [3].

4. PROCEDIMIENTO
4.1 Preparar 2 mL de solución de alginato al 3% w/v.
4.2 Realizar la mezcla de dicha solución con el polvo de fosfato tricalcico a una
concentración de 3% w/v (Solución 1).
4.3 Preparar 5 mL de una solución de CaCl2 al 0.1M (Solución de reticulación)
4.4 Posteriormente la solución 1 se extruye gota a gota en la solución de reticulación CaCl2,
usando jeringas milimétricas con aguja hipodérmica. Tenga cuidado con la distancia entre
la punta de la aguja y la solución para obtener forma esférica de las microesferas.
4.5 Dejar endurecer por 15 minutos las microesferas y eliminar el exceso de CaCl2. Lavar
las microesferas dos veces con agua destilada.
4.6 Medir algunas de las microesferas usando el calibrador.
4.6 Tomar la mitad de las esferas y secar en estufa por 12 horas a 30 °C. La otra mitad de
las esferas serán secadas usando el método de liofilización.
4.7 Observar en el estereomicroscopio, verificando la forma y el tamaño de las
microesferas.

5. DATOS A REPORTAR
5.1 Reporte el protocolo usado para la fabricación y caracterización de las microesferas de
su grupo de trabajo. Utilice imágenes del proceso y las observaciones realizadas.

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5.2 Reporte las imágenes obtenidas con el estereomicroscopio.
a. ¿Qué puede concluir sobre la forma y tamaño de las microesferas?
b. ¿Cuál es el porcentaje de contracción de las microesferas alcanzado por estas?
c. ¿A qué se debe dicha contracción? ¿Cómo influye el proceso de secado?

5.3 En caso de que las microesferas tuvieran un antibiótico en su interior, ¿Qué técnica
usaría para determinar la liberación en el tiempo de dicho componente? Puede basarse en
los reportes de artículos científicos.

Recuerde que los informes de laboratorio deben contener conclusiones

obtenidas a partir de lo realizado en el laboratorio, además de referencias
bibliográficas.

6. AGRADECIMIENTOS
A las estudiantes Mariana Correa Herrera, Juliana Ossa Berrio y Maria Pia Villalba
Moreno por la colaboración en el desarrollo de la metodología de síntesis [4].

7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

[1] Lopretti, M. Barreiro, F. Fernandes, I. Damboriarena, A. Ottati, C. Microencapsulación

de compuestos de actividad biológica. Publicación anual del laboratorio tecnológico del
Uruguay. 2, 2007. 19 - 23.

[2] Neira Carrillo, A. Yáñez Muñoz, D. Aguirre Zazzali, P. Amar Marini, Y. Vidal Vilches,
S. Egaña Palma, R. Encapsulación de biomoléculas usando polímeros naturales: “Un
nuevo enfoque en la entrega de fármacos en medicina”. Avances en Ciencias Veterinarias.
28(2), 2013. 31 - 40.

[3] Osthues, R. M. Desenvolvimento e caracterização de microesferas de fosfato de cálcio

bifásico. Tesis de doctorado. Universidad de Campinas. Brasil. 2012.

[4] Correa, M. Ossa, J. Villalba, M. P. Síntesis de microesferas de fosfato de calcio para

encapsulación y liberación controlada de antibióticos. Proyecto Integrativo de Semestre
2014-2. Asesor Claudia Patricia Ossa Orozco. Programa de Bioingeniería. Universidad de
Antioquia. 2015.