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INFORME FINAL N°2

IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS, PROTEINAS Y LIPIDOS POR


REACCIONES QUIMICAS, DE COLOR, Y MICROSCOPIA DE LUZ

MARIA ANGELICA VILLADIEGO CESPEDES


LUZ MABEL MARZOLA CHAUX
MAYELIS SAENZ MONTALVO
LUISA ESPITIA CANTERO
LUCAS HUMANEZ GALINDO

DOCENTE A CARGO: ESCILDA ROSA RODRIGUEZ CALONGE

UNIVERSIDAD DE CORDOBA
FACULTAD: CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA: QUIMICA

BIOLOGIA

MONTERIA-CORDOBA
2016

INTRODUCCION:
Según la naturaleza química, las biomoléculas pueden ser:

Biomoléculas inorgánicas: Son biomoléculas no formadas por los seres vivos, pero
imprescindibles para ellos, como el agua, la biomolécula más abundante, los gases
(oxígeno, dióxido de carbono) y las sales inorgánicas: aniones como fosfato (HPO4−),
bicarbonato (HCO3−) y cationes como el amonio (NH4+).

Biomoléculas orgánicas o principios inmediatos: Son sintetizadas solamente por los


seres vivos y tienen una estructura a base de carbono. Están constituidas
principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno, y con frecuencia están también
presentes nitrógeno, fósforo y azufre; otros elementos son a veces incorporados pero
en mucha menor proporción estas pueden agruparse en cuatro grandes tipos:
carbohidratos, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos.

OBJETIVOS
General: identificar de forma experimental carbohidratos, proteínas y lípidos
Específicos:
Reconocer las distintas reacciones que nos permiten identificar carbohidratos,
proteínas, lípidos y ácidos nucleicos
Utilizar de forma correcta el microscopio óptico compuesto
METODOLOGIA Y FASE EXPERIMENTAL
Materiales
 Orina
 Jugo de fruta sin azúcar
 Leche
 Pan
 Macerado de Fruta
 Huevo
 Gelatina sin sabor
 Grasa animal
 Aceite vegetal
 Papa
 Solución de glucosa
 Solución de sacarosa
 Solución de almidón
 Solución de lugol
 Solución de sudan III
 Solución de benedict
 Solución de Biuret ( CuS04 – NaOH )
 HCL
Equipo
 15 tubos de ensayo
 Gradilla
 Goteros
 Pinza para tubos de ensayo
 Cinta
 Agua destilada
 Cuchilla
 Porta y cubre objetos
 Microscopio compuesto
 Baño María ( estufa – beacker de 50 ml )
Preparación de muestras
Identificación de carbohidratos:
 Azucares reductoras se tomaron 7 tubos de ensayo y se rotularon con la cinta del
1 al 7, agregando a cada uno de ellos 1 ml de almidón, glucosa, jugo, orina,
sacarosa, macerado de frutas y leche respectivamente, y luego se procedió a
agregar 1 ml de solución de benedict a cada uno, y por último se sometieron los
7 tubos a calor en baño maría por 3 minutos.
 Polisacáridos se tomaron 2 ml de solución de almidón en un tubo de ensayo y se
le agrego 4 gotas de lugol, se sometió a calor en el baño maría y se luego se dejó
enfriar.
En otro tubo de ensayo se agregó macerado de pan equivalente a 3 ml y se le
agrego 4 gotas de lugol.
Identificación de proteínas:
 Se tomaron 4 tubos de ensayo y se rotularon con cinta del 1 al 4, a cada uno de
ellos se le agrego 3 ml de solución de yema, solución de clara, solución de gelatina
y solución de leche respectivamente, luego se procedió a agregar 1 ml de sulfato
de cobre (CuSO4) y 2 ml de hidróxido de sodio (NaOH) (lo que corresponde a 4
ml de solución de biuret) a cada uno de ellos y se dejó reposar.
 En beacker se agregó la clara de un huevo y se procedió a agregar 10 ml de ácido
clorhídrico (HCL) y se dejó reposar.
Identificación de lípidos:
 Se tomó un tubo de ensayo, se agregó 5 ml de agua destilada, más 2 ml de aceite
vegetal y luego se procedió a agregar 2 gotas de sudan III o IV, y se dejó reposar.
 En otro tubo de ensayo se agregó una pequeña cantidad de grasa animal, más 2
gotas de sudan III o IV y se dejó reposar.
Observación en el microscopio:
 Gránulos de almidón se tomó una papa y se le realizo un pequeño corte muy
delgado, luego el corte se colocó en un porta objetos, se agregó 1 gota de lugol,
se procedió a colocar un cubre objetos y se realizó la observación en el
microscopio.
 Tejido adiposo se tomó una pequeña cantidad de grasa animal y se colocó en un
porta objetos, se agregó 1 gota de sudan III o IV, se procedió a colocar un cubre
objetos y se realizó la observación en el microscopio.
RESULTADOS
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

TUBO DE ENSAYO PRUEBA DE BENEDICT

COLOR INICIAL COLOR FINAL

1° ALMIDON Azul cristalino turbio Azul cristalino turbio

2° GLUCOSA Azul cristalino oscuro Rojizo claro

3° JUGO Azul verdoso con Rojo oscuro color


gránulos amarillos. ladrillo

4° ORINA Azul turbio opaco Verde oscuro

5° SACAROSA Azul cristalino claro Azul cristalino claro

6° MACERASO DE FRUTA Verde claro Amarillo oscuro

7° LECHE Azul cielo cremoso Amarillo claro

Azucares reductores Tubos de ensayo con 1 ml de solución de benedict

2 3 5 Almidón, glucosa, jugo,


orina, sacarosa, macerado
de frutas y leche + 1 ml de
solución de benedict,
antes de someterse a calor
1 en al baño maría

3 4 6
Almidón, glucosa, jugo,
orina, sacarosa, macerado
de frutas y leche + 1 ml de
solución de benedict,
durante en el principio del
calentamiento a baño
maría

Almidón, glucosa, jugo,


orina, sacarosa, macerado
de frutas y leche + 1 ml de
solución de benedict,
después de 2 minutos en
el baño maría
2 4 6

1
Almidón, glucosa, jugo,
orina, sacarosa, macerado
de frutas y leche + 1 ml de
solución de benedict,
después de someterse a
3 5 7 calor por medio del baño
maría

Polisacáridos solución de almidón y macerado de pan + 4 gotas se lugol

1 – 2 ml de almidón
+ 4 gotas de lugol

2 – 2 ml de almidón
+ 4 gotas de lugol
al calentarse

3 – 2 ml de almidón
1 2 3 + 4 gotas de lugol al
enfriarse
Macerado de pan + 4
gotas de lugol

IDENTIFICACION DE PROTEINAS

1 2 3 4
1- Yema, 2- clara,
3- gelatina, 4-
leche

3 2 1 4
Yema, clara, gelatina y
leche organizados de
acuerdo a su color, de
menos a manos denso
Clara de huevo + 10
ml de HCL

IDENTIFICACION DE LIPIDOS

1- Agua destilada +
aceite
2- Agua destilada +
aceite + 2 gotas
de sudan III o IV

Grasa animal + 2 gotas


de sudan III o IV
OBSERVACION MICROSCOPICA

Corte de papa + gota


de lugol

Corte de grasa animal


+ gota de sudan III
ANALISIS DE RESULTADOS
Identificación de azucares Reductores :
Muestra Color inicial Color final Resultado
Almidón Azul Azul Negativo
Glucosa Azul Rojo ladrillo Positivo
Jugo Azul Rojo ladrillo Positivo
Leche Azul cremoso Amarillo Positivo
Orina Azul Verde Positivo
Sacarosa Azul Azul Negativo
Macerado Verde Amarillo Positivo

PRUEBA DE BENEDICT
Para lograr la identificación de azucares reductores en el laboratorio de biología, se
procedió a rotular 7 tubos de ensayo con diferentes muestras(Almidón,
glucosa,jugo,leche,orina, sacarosa y macerado de frutas ) ;a cada tubo de ensayo se le
agrego 1ml de la solución de benedict ,luego se sometió a calentamiento en baño maría
por 3 minutos donde cada muestra se tornó de un color diferente al inicial ,lo cual es
muestra de la presencia o ausencia de azucares reductores de la siguiente manera
según la tabla de resultados anterior :
 Almidón: Mantuvo el color azul inicial después de la prueba lo cual indica ausencia
de azucares reductores.
 Glucosa: Tomo un color rojo ladrillo, lo cual quiere decir que presenta un
porcentaje mayor de 2% de azucares reductores.
 Jugo: Se tornó de un color rojo ladrillo, la presencia de azucares reductores es
mayor al 2%.
 Leche: Adopto un color amarillo que nos indica un porcentaje aproximado de1. 5%
de azucares reductores.
 Orina: Igual que la leche contiene un1. 5% de azucares reductores con un color
pardo verdoso.
 Sacarosa: Igual que el Almidón mantuvo el color azul inicial lo que nos indica
ausencia de azucares reductores.
 Macerado de frutas: Se tornó de un color amarillo donde se identifica un
porcentaje aproximadode1. 5% de azucares reductores.
La reacción o prueba benedict como se observó anteriormente es utilizada para la
identificación de azucares reductores como la maltosa, lactosa, glucosa y celebiosa. El
reactivo benedict consta de sulfato cúprico, citrato de sodio, carbono anhídrido de sodio
y además emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento de esta reacción radica en que un medio alcalino del ion cúprico es capaz
de reducirse por efecto del grupo aldehído por azúcar (CHO) a su forma Cu+. Este nuevo
ion se observa como un precipitado de color rojo ladrillo correspondiente al oxido
cuproso. El medio alcalino facilita que el azúcar este de forma lineal, puesto que el azúcar
en solución forma un anillo, una vez este el azúcar lineal puede reaccionar su grupo
aldehído con el ion cúprico en solución, dicha reacción se manifiesta con un color rojo
ladrillo y algunas veces amarillo o verde pardo según la concentración de los azucares
reductores presentes.
Identificación de almidón:
PRUEBA DE LUGOL
Para esta prueba se rotularon 2 tubos de ensayo cada uno con una muestra diferente,
el primero contenía solución acuosa de macerado de pan y el otro solución de almidón,
a ambos se le agrego 4 gotas de lugol y luego se procedió a calentar en baño maría.
Observaciones:
 Macerado de pan: Este tenía como color inicial el color natural del pan al
agregarle lugol y proceder a calentar se obtuvo como resultado final un
color purpura indicando la presencia de almidón.
 Almidón: Igual que en el macerado de pan se obtuvo un color purpura al
agregarle 4 gotas de lugol, al colocarse en reposo esta solución de
almidón retoma su color inicial (incoloro).
Esta prueba de yodo es una reacción química utilizada para determinar la presencia o
alteración del almidones una solución de yodo-diyodo disuelta en una solución acuosa
de yoduro de potasio que reacciona con el almidón produciendo un color purpura; este
tipo de prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón.
IDENTIFICACION DE PROTEINAS
PRUEBA DE BIURET

Para la realización de esta prueba se rotularon 4tubos de ensayo cada uno con
diferentes pruebas (yema de huevo, clara de huevo, leche y solución) agregadas en 3
ml cada
Una respectivamente, los resultados de esta prueba fueron satisfactorios para la
identificación de proteínas en las 4 muestras, ya que cada una Al agregarle 3ml de
solución biuret se tornaron de una coloración violeta unos más intensos que otros
dependiendo de la concentraciones donde se concluyó que el violeta más cristalino fue
el de la gelatina por lo cual la presencia de proteínas estaba más concentrada en esta
muestra.
La reacción o prueba de biuret es una solución de 1ml de sulfato de cobre + 2ml de
hidróxido de sodio la cual es utilizada para la identificación de proteínas. Este reactivo
da un ensayo positivo con los enlaces peptídicos entre aminoácidos cuando la muestra
que se utiliza se torna de color violeta debido a la formación de un complejo de
coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno
que forma parte de los enlaces peptídicos.
IDENTIFICACION DE LIPIDOS
PRUEBA DE SUDAN III

En esta prueba se rotularon 3 tubos de ensayos cada uno con diferentes muestras (aceite
vegetal ,y grasa animal),para el primer procedimiento se le agrego 5ml de agua destilada
a un tubo de ensayo y luego 3ml de aceite vegetal dando como resultado una mezcla
heterogénea, continuamente se le agrego solución de sudan III dando como resultado
una mezcla homogénea entre el sudan y el aceite vegetal sin tocar el agua destilada
evidenciando la presencia de lípidos con una coloración roja en el aceite vegetal.
En el segundo tubo de ensayo se agregó grasa animal y sudan III, la grasa animal se
tornó de forma inmediata de un color rojo indicando la presencia de lípidos.
La técnica del Sudán III es un método utilizado generalmente para demostrar la
presencia de grasas mediante tinción de color rojo a los triglicéridos, aunque también
tiñe otros lípidos.
Pertenece al grupo de colorante sin diferentes, que son aquellos que no tienen afinidad
por estructuras ácidas o básicas .Son insolubles en el agua y tiñen aquellas
sustancias que tienen un poder de disolución superior al del líquido empleado para
preparar la solución.
Muestras microscópicas
 Papa y lugol: al agregar las 2 gotas de lugol directamente a la papa se pudo
observar su cambio de color inmediatamente se pudo analizar que la reacción fue
positiva porque la muestra se puso de color azul oscuro, es decir, hubo presencia
de almidón. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma
hélices donde se juntan las moléculas de yodo ,formando un color azul oscuro a
negro, esa coloración producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce
entre las espiras de la molécula de almidón.
 Sudan III y grasa animal: al bañar la grasa con la solución del colorante éste tiende
a disolverse en la grasa que se va cargando del colorante. El Sudán III produce
una coloración progresiva, es decir, que a más tiempo de exposición al colorante
mayor es la intensidad de tinción. La muestra del tejido animal a la cual se le
agrego sudan se tiñó de color rojo, esto quiere decir que hay presencia de lípidos

CUESTIONARIO
1. ¿Qué reactivos empleó para identificar?
a) almidones
b) azucares reductores
c) Proteínas
d) Lípidos
2. ¿Qué es un azúcar reductor? Cite ejemplos de azucares reductores y no
reductores. Explique la razón de esta clasificación y de ejemplos.

3. ¿Cuáles son los componentes del reactivo de Benedict? ¿Qué reacción se


produce cuando se calienta el tubo de ensayo que contiene el reactivo de Benedict
y glucosa? ¿Cuál es la naturaleza del precipitado de color rojo ladrillo que se
forma en la anterior reacción?

4. ¿A qué se debe la desaparición del color azul violáceo de la solución de almidón


cuando se calienta hasta ebullición? ¿Por qué aparece nuevamente el color
cuando la anterior solución se enfría?

5. De acuerdo a la coloración obtenida en la identificación de proteínas ¿Cuál de las


muestras estudiadas tiene mayor concentración de proteínas? Explique

Respuestas
1) Los reactivos empleados para esta práctica son :
a) Para identificar almidones utilizamos lugol
b) Para los azucares reductores utilizamos una solución de benedict
c) Para las proteínas utilizamos reactivo de biuret (1ml de sulfato de cobre más
2 ml de hidróxido de sodio )
d) Para lípidos utilizamos sudan III Y IV
2) Un azúcar reductor es un término químico para un azúcar que actúa como un
agente reductor y puede donar electrones a otra molécula. Específicamente, un
azúcar reductor es un tipo de carbohidrato o azúcar natural que contiene un grupo
aldehído o cetona libre. Los azúcares reductores pueden reaccionar con otras
partes de la comida, como aminoácidos, para cambiar el color o el sabor de la
comida.

Ejemplos
 azúcares reductores: El monosacárido más importante y el azúcar reductor es
glucosa. En el cuerpo, la glucosa se conoce como azúcar en la sangre, porque
es esencial para la función cerebral y la energía física. La fructosa es otro azúcar
reductor y es conocido como el más dulce de todos los monosacáridos. La
galactosa, otro azúcar reductor, es un componente de la lactosa que se encuentra
en los productos lácteos. La maltosa no se encuentra a menudo en la naturaleza,
sino que se produce durante la digestión cuando las moléculas de almidón se
descomponen.
 Azúcares no reductores: Algunos disacáridos, como la sacarosa, son azúcares
no reductores, lo que significa que no pueden donar electrones a otras moléculas.
La sacarosa se compone de dos azúcares reductores, glucosa y fructosa, y no
contiene grupos carbonilo libres. La sacarosa se encuentra naturalmente en
muchos alimentos y, a menudo se añade a muchos alimentos procesados
contribuir dulzura.

Clasificación: Los reductores y los no reductores. Los reductores se distinguen debido


a que sus grupos aldehídos o cetonas libres, poseen la propiedad de reducir fácilmente
las soluciones alcalinas de muchas sales metálicas, Clasificación de los azúcares Los
azúcares se clasifican tales como las de cobre, plata, bismuto, mercurio y hierro. El
reactivo más ampliamente utilizado para este propósito es la solución de Fehling. Los
reductores constituyen el grupo más grande. Los monosacáridos y muchos de sus
derivados reducen la solución de Fehling. Casi todos los disacáridos, entre ellos la
maltosa, lactosa y otros azúcares menos comunes como celobiosa, gentiobiosa.
melibiosa y turanosa también son reductores. El azúcar no reductor más conocido es el
disacárido sacarosa. Entre otros están el disacárido trehalosa, el trisacárido rafinosa y
melezitosa, el tetrasacárido estaquiosa y el pentasacárido verbascosa. Los azúcares
constan de cadenas de átomos de carbono, los cuales se unen unos a otros formando
un ángulo tetrahédrico de 109°28'. Un átomo de carbono, al cual se encuentran unidos
cuatro diferentes grupos, se llama asimétrico. Un azúcar o cualquier otro compuesto que
contenga uno o más átomos de carbono asimétricos posee actividad óptica; esto quiere
decir que hace rotar el plano de la luz polarizada hacia la derecha o la izquierda.
3) Componentes: los componentes de benedict son Sulfato cúprico, citrato de sodio,
carbonato anhidro de sodio
Reacción del reactivo de benedict y la glucosa al calentarse: La glucosa, al
someterse a la Reacción de Benedict dan un resultado positivo debido a que
presentan un precipitado de color rojo ladrillo o anaranjado (óxido cuproso) lo cual
es la evidencia de un azúcar reductor.
Naturaleza del precipitado: El fundamento de esta reacción radica en que en un
medio alcalino (dado por el carbonato anhídrido de sodio) , el ion cúprico (otorgado
por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído de
azúcar (CHO) a su forma de Cu. Este nuevo ion se observa como un precipitado
rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
4) Cuando el tubo está en una temperatura baja las espiras se reorganizan y se
vuelve a ver el color azul negro y al unirse dentro de estas cadenas provoca un
efecto de color de los enlaces en el rango del espectro de la luz de tonos naranjas,
que reflejados a nuestros ojos lo percibimos como color azul - negro, este
resultado también se debe a la formación de cadenas de poli yoduro a partir de la
reacción del almidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado
Lugol.
5) según las muestras estudiadas la que tiene mayor concentración de proteínas fue
la de la gelatina sin sabor ya que se produjo un color morado más cristalizado que
los demás, esto se debe a la reacción de un álcali concentrado con la proteína,
este álcali está presente en la solución de biuret.
Preguntas complementarias

1) Las plantas habitualmente almacenan reservas energéticas en forma de


polisacáridos, mientras que en la mayoría de los animales los lípidos son la
forma principal de almacenamiento de energía. ¿Por qué es ventajoso para los
animales tener su reserva de energía almacenada como lípidos y no como
polisacáridos?
2) Consulte que otros reactivos se pueden utilizar para identificar carbohidratos y
proteínas.

Respuestas

1) en realidad ambos solo usan glucosa, es problema es que la glucosa ocupa


mucho espacio en gran parte debido a que su molécula contiene 5 grupos HO que
bien podrían ser extraídos del agua. Así el primer paso para compactar un
monosacárido es transformarlo en disacárido y en esa unión se ahorra un grupo
HO y un H lo cual no parece ser mucho pero es un ahorro y las plantas apelan a
esa estrategia, pero si realmente se necesita ahorrar mucho espacio los vegetales
apelan a los polisacáridos y ya te ahorras dos grupos HO por cada molécula de
glucosa original. Cuando el vegetal necesita almacenar energía lo hace a través
del polisacárido almidón , también usa los polisacárido como elemento estructural
como en el caso de la celulosa Otra manera aún más compacta son los lípidos y
a ella recurren tanto vegetales como animales Los triglicéridos son la principal
reserva de energía de los animales ya que un gramo de grasa produce 9,4
kilocalorías en las reacciones metabólicas de oxidación, mientras que las
proteínas y los glúcidos sólo producen 4,1 kilocalorías por gramo En síntesis la
respuesta a tu pregunta es que si bien funcionan con glucosa necesitan
almacenarla de manera más compacta .
2) carbohidratos: El reactivo de Bradford, usualmente, se utiliza sólo para contar la
cantidad de proteínas en una solución. Sin embargo, hay dos casos específicos
en los que podrías usar el reactivo de Bradford para identificar carbohidratos:
cuando están bajo la forma de glicoproteínas (en otras palabras, azúcares unidos
a proteínas) y cuando sabes que tu solución consiste solamente de carbohidratos
o de proteínas
Proteínas Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el
agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70: C o al ser tratadas
con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un
proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados,
que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura
terciaria y cuaternaria.
CONCLUSION

Los Bioelementos principales y secundarios, que estudiamos se ensamblan entre sí o se


combinan para formar las Biomoléculas. Podemos decir entonces que los carbohidratos,
son lo que nos inyectan energía para trabajar o jugar, las grasas o lípidos, son nuestro
reserva energética, las proteínas, las vitaminas, actúan como estructura y soporte del
organismo y los ácidos nucleicos cumple su función de heredar el material genético, son
entonces estos, ejemplos de las llamadas Biomoléculas, es decir, son las famosas
moléculas de la vida. Su importancia es aún enorme si consideramos que ellas se unen
o agrupan de manera sorprendente para integrar la célula, que es la unidad más pequeña
que va a formar a todo ser vivo.

Por ende no debemos dejar pasar desapercibido que a diario estamos en contacto con
cada uno de estos compuestos, que sin ellos no seriamos individuos capaces de
desarrollarnos, ser aptos para llevar a cabo cualquier función, y que cada una de estas,
de manera independiente dan a sus distintos componentes las características que
definirán nuestro comportamiento.

BIBLIOGRAFIA
http://biomoleculasybioelementos.blogspot.com.co/p/en-conclusion.html
http://farmaciaulat.blogspot.com.co/p/identificacion-de-biomoleculas.html
http://es.slideshare.net/JorgePerez24/biologia-reacciones-quimicas

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