CONCLUSIONES

La fotocolorimetríaconsiste en medir la absorción de luz que produce una

determinada sustancia al paso de un color determinado. Para ello, se utiliza
un aparato llamado fotocolorímetro que utilizamos en el laboratorio y
nos permitió medir la absorción de la luz concretamente en una
proteína.

Se determinó la concentración de una muestra problema mediante factor de

calibración y curva de calibración. En la práctica, se determinó la
concentración de una muestra problema ploteando su lectura en el gráfico y en
el punto de intersección se trazó una perpendicular al eje de las abscisas donde
se leyó su concentración.

Se determinó que el reactivo cuya absorbancia era la mayor, fue el estándar,

ya que estuvo mayor concentrado con respecto a las demás soluciones. De esa
manera se comprobó que mientras más concentrada sea una solución, mayor
será la absorbancia. A pesar de haber tenido algunas desviaciones en la curva
de calibración.

En cuanto la curva de calibración, como se mencionó anteriormente se

pudieron haber presentado varios errores en el laboratorio (precisión,
limpieza, preparación de diluciones, etc.) que impidieron obtener como
resultado una gráfica lineal de los datos obtenidos experimentalmente,
evitando así un buen resultado y análisis del ejercicio

Algo muy importante a comprender en el laboratorio es la importancia de la

ley de Beer para hallar concentraciones desconocidas (una muestra
problema) midiendo la absorbancia de la muestra patrón.
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál crees que es el método más exacto para obtener la
concentración de una muestra problema, el método grafico o
analítico? ¿por qué?

El método analítico, La fotocolorimetría es un método óptico de

análisis, donde se utiliza el instrumento fotocolorímetro que sirve para
medir, en función a la longitud de onda, la relación entre valores de una
misma magnitud fotocalomerica relativos a radiaciones y la
concentración o reacciones químicas que se miden una muestra.

2. ¿Qué factores alteran la ley de LAMBERT y BEER?

La ley de Beer-Lambert sólo se cumple para concentraciones bajas, a

partir de una concentración 0,01M empieza a haber desviaciones de la
linealidad. Además, si la radiación utilizada no es monocromática,
también puede haber errores.
La existencia de otros equilibrios químicos en disolución, como ácido-
base, de precipitación, de formación de complejos, aunque no modifican
la ley en sí misma, sí que pueden modificar la concentración de la
sustancia que estamos midiendo, y puede producir un error en el
resultado.

3. ¿el color que exhibe una sustancia está determinada por la luz que
transmite o absorbe?

El color que exhibe una sustancia está determinada por la luz que transmite mas no
por la luz que absorbe. Por ejemplo, la clorofila, el pigmento que hace que las hojas
sean verdes, absorbe la luz en el espectro violeta y azul y también en el rojo, pero
puesto que transmite y refleja la luz verde, su aspecto es verde.

La absorbancia (A) es un concepto más relacionado con la muestra puesto que nos
indica la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de
1/T, en consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log It/ Io. Cuando la intensidad
incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del 100% e indica
 que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces A vale
log 1 = 0.

4. A fin de aprobar la validez de la ley BEER en la determinación de la vitamina

A, se prepararon soluciones de concentración conocida y se trataron por un
procedimiento normalizado con tricloruro de antimonio en cloroformo para
producir un color azul. El porcentaje de transmisión de los incidentes filtrada
para cada concentración expresada en 𝝁𝒈 𝒎𝒍−𝟏 , fue el siguiente.
Concentración 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0
−1
𝜇𝑔 𝑚𝑙
Transmisión , % 66 44 2 1 1

 BOHINSKI, R. 1991. Bioquímica. Editorial Addison Wesley.

Iberoamericana S.A. México.
 LAGUNA, J. & PIÑA, E. 1979. Bioquímica. 3a. Edición. México.