Programa de biología, facultad ciencias naturales, exactas y de la educación

Universidad del Cauca

Laboratorio de biología celular

1 Recuento de Leucocitos y Preparación muestras y observación Microscopia electrónica

Agosto 28 del 2017

Septiembre 25 del 2017

1) Objetivos

 Entender algunos conceptos básicos de microscopía tales como poder de resolución,

poder de aumento y campo visual con relación a las lentes utilizadas.

 Adquirir destreza para calcular mediciones aproximadas de células y otras estructuras

 Conocer las unidades de medida de mayor uso en micrometría y las utilice resolviendo

algunos problemas comunes en este campo.

2) posibles resultados de un conteo para una leucopenia y para una leucocitosis.

2.1) La leucopenia es un trastorno de la sangre caracterizado por la disminución del número

de leucocitos (glóbulos blancos) en la sangre. Los glóbulos blancos constituyen el sistema

inmunológico del cuerpo humano, por lo que la inmunidad puede verse severamente afectada,

dejando al cuerpo en una situación de alto riesgo de infecciones.

La cantidad de glóbulos blancos en el organismo se mide a través de un análisis de sangre

denominado conteo sanguíneo completo o CSC.

Conteo sanguíneo completo (CSC) prueba de sangre

 Un hemograma o conteo sanguíneo completo (CSC) mide lo siguiente:

 La cantidad de glóbulos rojos (conteo de GR)

 La cantidad de glóbulos blancos (conteo de GB)

 La cantidad total de hemoglobina en la sangre

 La fracción de la sangre compuesta de glóbulos rojos (hematocrito)

El examen del conteo sanguíneo completo brinda también información de las siguientes

mediciones:

 El tamaño promedio de los glóbulos rojos (VCM)

 La cantidad de hemoglobina por glóbulo rojo (HCM)

 La cantidad de hemoglobina relativa al tamaño de la célula (concentración de hemoglobina) por

glóbulo rojo (CHCM)

Resultados normales

Los conteos sanguíneos pueden variar con la altitud. En general, los resultados normales son:

Conteo de GR:

 Hombres: 4.7 a 6.1 millones de células/mcL  4,500 a 10,000 células/mcL

 Mujeres: 4.2 a 5.4 millones de células/mcL

Hematocrito:

Conteo de GB: (glóbulos blancos)

 Hombres: 40.7% a 50.3%
 Mujeres: 36.1% a 44.3%  VCM: 80 a 95 femtolitro

Hemoglobina:  HCM: 27 a 31 pg/célula

 CHCM: 32 a 36 gm/dL
 Hombres: 13.8 a 17.2 gm/dL

Conteo de plaquetas:
 Mujeres: 12.1 a 15.1 gm/dL

Índices de glóbulos rojos:  150,000 a 450,000/dL

Diagnóstico

El umbral para un recuento bajo de glóbulos varía de una práctica médica a otra. Algunas personas
sanas tienen un recuento de glóbulos blancos que son inferiores a lo que se considera normal. Un
conteo inferior
Un conteo a 4.000 leucocitos
de glóbulos pordebajo
blancos por microde
litro de sangre
lo normal se generalmente se considera leucopenia en
denomina leucopenia.
los adultos. El umbral para un conteo bajo de glóbulos blancos en los niños varía con la edad y el
sexo.

Esta disminución en los GB puede deberse a:

 Abuso del alcohol y daño hepático

 Enfermedades auto inmunitarias (como lupus eritematoso sistémico)

 Insuficiencia de la médula ósea (debido, por ejemplo, a infección, tumor, radiación o fibrosis)

 Medicamentos de quimioterapia usados para tratar el cáncer

 Enfermedad del hígado o del bazo

 Esplenomegalia
 Infecciones provocadas por virus, como mononucleosis o SIDA

 Medicamentos

2.2) La leucocitosis ocurre cuando el número de glóbulos blancos en la sangre supera los

niveles normales.

Partimos del conteo realizado anteriormente, pero esta vez notando el aumento de los glóbulos

blancos (GB).

Se dice que hay leucocitosis cuando la cifra

Conteo de GB: (glóbulos blancos)
de glóbulos blancos es superior a 11 000
 4,500 a 10,000 células/mcL
por mm³.

Clasificación

La leucocitosis puede ser subclasificada por el tipo de glóbulo blanco que se incrementa en

números. Hay cinco tipos principales de leucocitosis: neutrofilia (la forma más común),

linfocitosis, monocitosis, eosinofilia, y basofilia.

 Neutrofilia: es la leucocitosis en la que los neutrófilos están elevados.

 Linfocitosis: es la leucocitosis en la que el recuento de linfocitos es elevado.

 Monocitosis: es la leucocitosis en la que el recuento de monocitos es elevado.

 Eosinofilia: es la leucocitosis en la que el recuento de eosinófilos está elevado.

  Basofilia: es una afección en la que la cantidad de basófilos está anormalmente

elevada.

 Leucostasis: una forma extrema de leucocitosis, en la que el recuento de glóbulos

blancos excede los 100.000 / μL, es la leucostasis. En esta forma hay tantos glóbulos

blancos que grupos de ellos bloquean el flujo sanguíneo. Esto conduce a problemas

isquémicos incluyendo ataque isquémico transitorio y accidente cerebrovascular.

Tanto la leucopenia como la leucocitosis son alteraciones leucocitarias que comprenden un grupo

de enfermedades que afectan el número, forma o función de los glóbulos blancos,

predisponiendo a los pacientes a padecer infecciones bacterianas y fúngicas.

 En el caso de la leucopenia, el número de glóbulos blancos disminuye, debilitando en el

sistema inmune y dejando al cuerpo en una situación de alto riesgo de infecciones.

 La leucocitosis por el contrario, es el aumento en el número de glóbulos blanco. Por lo

general, esta condición puede ser causada tanto por procesos naturales como el embarazo

o porque nuestro cuerpo está intentando desechar algún virus o bacteria del organismo.

3) Cuestionario

 ¿Qué son los hemocitómetros y que otras aplicaciones tienen diferente al uso con

células sanguíneas?

Cámara de cristal empleada para examinar y contar el componente celular de

un volumen conocido de sangre a través de un microscopio: es un aparato utilizado para estimar

la concentración de células de una muestra de sangre. Característicamente, el hemocitómetro

consiste en una placa de cristal con una depresión central dividida en campos por una fina

cuadrícula, cada uno de ellos de unos 0,05 mm cuadrados. El cristal se coloca bajo el

microscopio y se mide la cantidad de células por cada cuadrícula, lo que permite calcular la

concentración de células hemáticas en la muestra estudiada: el hemocitómetros se utiliza también

para estimar el número de microorganismo que están presente en una muestra de agua u

otro fluido.

 ¿Qué causa los errores más comunes en la hemocitometría?

Error en la adquisición de la muestra: Normalmente, se extrae una cantidad reducida de una

muestra original para realizar el conteo. Esta muestra tendrá una concentración diferente que la

de la muestra original. Y es a partir de aquí, donde se pipetea a la cámara de recuento.

Error por carga incorrecta de la cámara de neubauer: Es bastante común cargar la cámara de

Neubauer con una cantidad de muestra ligeramente superior o inferior a 10 microlitros. En el

primer caso, el cubreobjetos se levanta ligeramente para alojar el exceso de líquido; en el

segundo caso, la cámara alojará menos de 10 microlitos introduciendo un error. Nuestra

estimación es que este error no supera el 3-5%.

Errores humanos:. Existen varios tipos de errores que son provocados por la persona que

realiza el recuento, directa o indirectamente.

 Posibles causas de alteraciones en la fórmula leucocitaria:

la fórmula leucocitaria suele solicitarse junto con el hemograma en el curso de exámenes

médicos rutinarios. Puede ser útil para hallar la causa de aumentos o disminuciones en
el recuento de leucocitos. También ayuda a diagnosticar y/o monitorizar otras enfermedades y

situaciones que afecten a un tipo o varios de leucocitos. Los cinco tipos de leucocitos incluyen:

neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. La fórmula leucocitaria o recuento

diferencial de leucocitos contabiliza cada uno de los tipos leucocitarios y pone de manifiesto si la

proporción entre los distintos tipos celulares se mantiene, si existen aumentos o disminuciones de

algún tipo de ellos o si existen células inmaduras o anómalas.

 Describa 2 técnicas de laboratorio diferentes al conteo celular para estimar la

densidad celular:

Recuento microscópico: Es una técnica común, rápida y barata que utiliza un equipamiento

fácilmente disponible en un laboratorio de microbiología. Para estos recuentos se utilizan

generalmente cámaras de recuentos, aunque también pueden realizarse a partir de muestras

filtradas en membranas y transparentadas o teñidas con colorantes fluorescentes. La mayor

dificultad del recuento en cámara es obtener reproducibilidad en el llenado de la cámara con

líquido. Otra dificultad es la adsorción de las células en las superficies del vidrio, incluyendo

pipetas. Esta adsorción es crítica en el proceso de dilución de la muestra y se minimiza al realizar

las diluciones en medios de alta fuerza iónica (solución fisiológica o medios mínimos sin fuente

de carbono).

Recuento electrónico: Los contadores electrónicos permiten realizar recuentos de bacterias,

levaduras no filamentosas y protozoarios.

Estos instrumentos constan básicamente de dos compartimientos comunicados a través de un

pequeño conducto. En ambos compartimientos hay electrodos que miden la resistencia eléctrica
del sistema, y como el orificio del conducto es muy pequeño y su resistencia es muy alta, la

resistencia eléctrica de cada compartimiento es independiente. El principio de funcionamiento de

estos instrumentos es el que se explica a continuación. Un volumen fijo de una suspensión

bacteriana es forzada a pasar desde un compartimiento al otro a través del pequeño conducto, en

un muy breve intervalo de tiempo. Cuando un microorganismo pasa al nuevo compartimiento, la

resistencia de éste se incrementa debido a que la conductividad de la célula es menor que la del

medio. Estos cambios en la resistencia son convertidos en pulsos o voltaje y contados.

 Describa tres aplicaciones de la microscopia electrónica:

Paleontología y Arqueología: Caracterización de aspectos morfológicos.

Control de Calidad: En este campo, el microscopio electrónico de barrido es de gran utilidad

para el seguimiento morfológico de procesos y su aplicación en el control de calidad de

productos de uso y consumo.

Geología: Investigaciones geomineras, cristalográficas, mineralógicas y petrológicas. Estudio

morfológico y estructural de las muestras.

Webgrafia

http://leucopenia.org/

http://www.medigraphic.com/pdfs/adm/od-2009/od096b.pdf

http://salud.ccm.net/faq/20268-causas-de-globulos-blancos-bajos-o-leucopenia

https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003642.htm