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CAPACIDAD
ANTIOXIDANTE DE
PLANTAS MEDICINALES
La Investigación etnobotánica y
etnofarmacológica de las especies
vegetales para su posible utilizaciòn
fitoterapèutica, exige un delicado
protocolo de trabajo que incluye toda
la escala de pruebas y ensayos que
van desde la selección de una
determinada planta de acuerdo a
ciertos criterios hasta una exhaustiva
gama de ensayos farmacològicos,
químicos fitoquímicos, toxicológicos y
clínicos.
Manual de Técnicas Experimentales . Proyecto
X.10 . CYTED
¿Ensayos Clínicos en Plantas Medicinales?
A
ESTUDIOS U
T ESTUDIOS
TOXICOLÓGICOS O
R FASE I
I
D ESTUDIOS
ESTUDIOS A FASE II
D
FARMACÓLOGICOS
R ESTUDIOS
E FASE III
G
ESTUDIOS U
QUIMICO-FARMACÉUTICOS L AUTORIDAD REGULADORA
A
D
O ESTUDIOS
ESTUDIOS R FASE IV
ETNOBÓTANICOS, A
AGRONÓMICOS
FASES D E ESTU D IO D E U N N U EVO
M ED IC AM EN TO
PROCESO DE VALIDACIÓN
BOTÁNICA CONTROL DE CALIDAD
(BOTANICOS, TAXONOMOS FARMACEUTICOS; BIOLOGOS, ETC)
FITOMEDICAMENTOS
EFICACIA SEGURIDAD
PLANTA MEDICINAL
Síntesis química de
NUEVOS
derivados activos
MEDICAMENTOS
Fracciones purificadas
Extracto total de la planta Principios activos aislados e
identificados
INCIDENCIA DE ENFERMEDADES
DE CRONICO DEGENERATIVAS
Numerosos estudios en nutrición humana
demuestran una estrecha correlación entre el
consumo de frutas y verduras y la menor
incidencia de enfermedades crónico
degenerativas debido a su bajo contenido en
calorías, colesterol y a la presencia de
vitaminas, fibras, antioxidantes naturales y
minerales.
Así mismo el estrés oxidativo ha sido
asociado a la patogénesis de muchas
enfermedades humanas, como
arterioesclerosis, artritis, demencia, cáncer,
etc; es por ello que el uso de antioxidantes
en farmacología es estudiado de forma
intensiva, particularmente en el tratamiento
de accidentes cerebrovasculares y
enfermedades neurodegenerativas.
INCIDENCIA DE ENFERMEDADES
DE CRONICO DEGENERATIVAS
✦ El principio activo
mayoritario se conoce
como silimarina, y está
constituido por una
mezcla de silibina,
silicristina y silidianina. Silibina, silicristina, silidianina
OTROS PRODUCTOS CON ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
199 3.0
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
Procedimiento:
✦ 1. Se preparó 100 ml una solución de DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazilo) en metanol
de 20 mg/L.
✦ 2. Luego se preparó una solución metanólica de los extractos en una concentración
de
300 ug/ml (Solución A) y de 600 ug/mL (Solución D)
✦ 3. El Blanco se preparó con metanol agua 2:1 para ajustar el espectrofotómetro a
cero.
✦ 4. El Blanco de muestra se preparó con 0.75 mL de muestra (solución A) y 1.5 mL de
metanol.
✦ 5. Se preparó el patrón de referencia con 1.5 mL de DPPH y 0.75 mL de agua.
✦ 6. Luego se procedió a preparar la muestra con 0.75 mL de solución A y 1.5 mL de
DPPH, obteniéndose una concentración final de 100 ug/mL, dejándose x 5 min. Y
se
leyó a 517 nm en un espectrofotómetro.
✦ 7. Se midió la absorbancia del patrón de referencia y del blanco de la muestra.
✦ 8. Luego se diluyó la solución A con metanol en una proporción 1:2 (solución B) para
obtener una concentración final de 50 ug/mL, y en una proporción de 1:10 (solución
C) para obtener una concentración final de 1 ug/mL.
✦ 9. Con las soluciones B, C y D se procedió igual a los puntos 6 y 7.
Actividad Antioxidante un
DPPH DPPH
(Forma radicalaria) (Forma reducida)
Compuesto Compuesto
N N
N
oxidado
HN
O 2N O2N
NO2 NO 2
O 2N
O2N
Violeta Amarillo
✦ Los extractos fueron evaluados por triplicado a diferentes
concentraciones de 1, 25, 50, 100 y 200 ug/mL utilizando como
fármaco control, vitamina C.
✦ Posteriormente con los valores de las absorbancias obtenidas
se determinó el % de captación de radicales libres (DPPH)
mediante la siguiente formula:
✦ Donde:
✦ A1= Absorbancia del patrón de referencia
✦ A2= Absorbancia de la muestra
✦ A3= Absorbancia del blanco de muestra
✦
Preparación de soluciones antioxidantes
Medición de absorbancias de las soluciones en el Espectrofotómetro
% CAPTACION DE RADICAL
MUESTRA Extracto LIBRE (R.L.)
VITAMINA C (Control )
(Acido Ascórbico) ----- 92,82
Canela, corteza
(Cinnamomum zeylanicum) 10% Etanol 97.59 a
Lagarto, hoja
(Calophyllum brasiliense) 20% Metanol 99.76 b
Muña, hoja
(Minthostachys mollis) 10% Acuoso 92.41 b
Hiporuro, hoja
(Alchornea castaneifolia) 10% Metanol 75.96 b
Lagarto, hoja
(Calophyllum brasiliense) 10% Acuoso 110.56 c
Yacón, hoja
(Smallanthus sonchifolius) 10% Etanol 103.19 d a 1 ug/mL,
b 50 ug/mL
MACA KOKEN, hipocótilo c 100 ug/ mL
(Lepidium peruvianum) 10% Acuoso 95.55 d d 200 ug/ mL
120 111
100 103
98 98 96
100 93 92 88
76
80
% 60
40
20
0
Vit C C AN - ET LAG - M ET C AM - M ET M U Ñ - AC H IP -M ET LAG - AC YAC - ET M AC - K - M AC - A -
1 u g/m L 5 0 u g/m L 50 u g/m L 5 0 u g/m L 50 u g/m L 1 00 u g/m L 200 u g/m L AC AC
200 u g/m L 2 00 u g/m L
Concentración
AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
PRINCIPIOS ACTIVOS DE PLANTAS
CON ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
LAGARTO CASPI , CALOPHYLLUM BRASILIENSE
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
(ESPAÑA)
LAGARTO CASPI , CALOPHYLLUM BRASILIENSE
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
(ESPAÑA)
LAGARTO CASPI , CALOPHYLLUM BRASILIENSE
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
(ESPAÑA)
Lepidium peruvianum Ch. “MACA”
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
(ESPAÑA)
Lepidium peruvianum Ch. “MACA”
UNIVERSIDAD DE SALAMANCA
(ESPAÑA)
MUCHAS GRACIAS
✦ http://www.usal.es
(BECAS INTERNACIONALES)
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