CARACTERIZACION (REPASO TOTAL POR CAPITULOS).

CURSO CARACTERIZACION DE MATERIALES PARA ING - MAT

POR: ING. JORGE ENRIQUE GARCIA MONSALVE.

CEL: 321 783 22 57

Contenido Detallado

1.Análisis Químico

Conceptos introductorios
Espectroscopia de absorción
Espectroscopia de emisión
Espectroscopia de fluorescencia

2.Análisis estructural 16 horas

Espectroscopia infrarroja - IR
Espectroscopia Mössbauer
Espectroscopias XPS, Auger y EDX
Difracción de rayos X - DRX
Espectroscopia Raman
Resonancia magnética nuclear - RMN

3.Análisis microscópico 10 horas

Microscopia óptica
Microscopia electrónica de barrido-SEM
Microscopia electrónica de transmisión-TEM y STEM
Microscopia de efecto túnel-STM - Microscopia de fuerza atómica-AFM

1.Análisis Químico

Conceptos introductorios

Absorcion: el electrón en este átomo absorbe radiación electromagnética de una longitud

de onda específica para saltar a un nivel de energía más alto.

Emision: después de que el electrón gira alrededor del nivel de energía más alto por un
tiempo, lo que entonces puede emitir la misma longitud de onda de la radiación para saltar
de nuevo a la ventana de nivel inferior.

CUESTIONARIO POR CAPITULOS.

PARCIAL 1.

CAPITULO 5. PROPIEDADES DE LA RADICION ELECTROMAGNETICA

1. Radiación electromagnética: Energía que se transmite por el espacio, la cual se
describe por el modelo de onda sinusoidal y no necesita un medio para transmitirse,
posee un componente eléctrico y magnético en fase.

2. Espectroscopia: Descomposición de todos los tipos de radiación de energía en

longitudes de onda, para generar un espectro.

3. Campo eléctrico y campo magnético: Eléctrico: Responsable de los fenómenos

transmisión, reflexión, refracción y absorción.
Magnético: Responsable de absorción de ondas de radio frecuencia y la resonancia
magnética nuclear.

4. Diferencia entre potencia e intensidad radiante. Potencia: Energía de un haz que

llega a un área por segundo, depende más de la fuente.
Intensidad: Potencia por unidad de ángulo solido, no importa a que distancia se mida
siempre se refiere a una área equivalente.
Angulo sólido: Angulo que abarca el area, proyectado desde una fuente.

5. Superposición de ondas: Se evalúa un punto determinado del espacio y allí se

determina si la superposición de la onda es constructiva o destructiva. Constructiva si
la magnitud resultante es mayor que cualquiera de las ondas que tienen igual longitud
de onda, están en fase; en caso contrario es destructiva… cuando varias ondas de
diferente amplitud, frecuencia, ángulo de fase coinciden en el tiempo y en el
espacio…se representan como la suma algebraica de cada una.

6. Polarización de la radiación: Absorber toda la radiación que esta en todas las

direcciones y se obliga a salir en cierto plano para que tenga una dirección, dejarla en
un sentido…restringir la radiación en un solo plano

 Deformación de enlaces es proporcional a la polarizabilidad.

7. Dispersión de la radiación: Podríamos decir que es la variación del índice de

refracción con la longitud de onda y frecuencia; la llamamos normal cuando hay
cambio gradual en el indice de refraccion y anomala, cuando hay cambio brusco en el
indice de refraccion.

la dispersion sucede cuando un foton choca un electron y rebota. el foton pierde una
fraccion de energia, la cual es absorbida por el electron.

Retención momentánea de la energía radiante en todas las direcciones cuando las

partículas vuelven a su estado inicial. Es mayor cuando el ángulo tiende a 90° y también
es proporcional con el tamaño de la partícula, debido a que no coinciden las señales en
un mismo punto en el espacio, no hay superposición.
Dispersión scatering: La intensidad de la radiación dispersada aumenta con el tamaño
de partícula (es decir hay pérdida de energía).
Dispersión rayleigh: Es aquella que se genera al pasar una onda electromagnética
(radiación), por un medio que contiene partículas que son mucho menores que la longitud
de onda. es dispersada de regreso sin pérdida de energía.
Dispersión raman: Parte de la radiación dispersada que sufre cambios de frecuencia al
interactuar con las partículas del medio.
8. Refracción de la radiación: Cambio de la dirección del haz como consecuencia de la
diferencia de velocidades de radiación de dos medios. Se aplica la ley de Snell.

9. Difracción de la radiación: Proceso por el cual un haz paralelo se curva cuando pasa
por un obstáculo puntiagudo o una abertura estrecha. Ej: tanque de agua.

10. Transmisión de la radiación: Cambio de velocidad cuando pasa de un medio a otro.

También retención momentánea de la radiación pero vuelve y la entrega. No involucra
una transferencia permanente de energía.

11. Polarizacion de la radiación: Puede ser polarizada en una dimensión, en un plano o

en un eje.

12. Reflexion: Parte de la radiación que se refleja cuando hay un cambio de medio.

Efecto fotoeléctrico: Cuantiza la energía que necesita un electrón para pasar de la

banda de valencia a la banda de conducción. Cuando un haz de luz de frecuencia
constante brilla en el ánodo a potenciales bajos, se observa una corriente instantánea que
es proporcional a la intensidad de la radiación….

Consiste en un tubo donde de ha hecho el vacío. Se colocan dos electrodos metálicos

conectados a una fuente de voltaje variable y a un amperímetro. Se hace incidir la luz
sobre el electrodo positivo y se observaba en el amperímetro una variación del voltaje. Se
va aumentando el voltaje, llega un momento que al incidir la luz no varia la corriente, lo
que sucede que los electrones que “salen” de la placa por el efecto de la luz no son
capaces de superar el voltaje en contra que hace la fuente. A este potencial se le llama
potencial umbral.

13. Diferencias entre absorción atómica y molecular: Atómica: Fuente monocromática,

espectros de línea, para partículas monoatómicas, excitación de electrones internos o
externos, para materia inorgánica.
Molecular: Fuente policromática, espectros continuos, para moléculas, energía es la
sumatoria de energía electrónica, vibracional y rotacional. Para materia orgánica.

14. Emisión de la radiación: La perdida de energía permite que los electrones pasen de
un nivel superior a uno inferior a través de saltos cuantizados emitiendo calor o
radiación.

15. Principio de incertidumbre: La energía de una partícula puede conocerse con

incertidumbre cero solo si se observa durante un periodo infinito. Si los procesos se
hacen muy rápido o si los tiempos de medida son muy cortos la incertidumbre
aumentara.

16. Fluorescencia vs Fosforescencia: Fluorescencia: Necesita una fuente de energía

para estar irradiando.
 Fosforescencia: Requiere mas tiempo para absorber radiación, pero al retirar a fuente
sigue irradiando.

17. Que variable influye en cada uno de los modelos que explican los modelos
de radiación electromagnética?.
Modelo ondulatorio (modelo sinusoidal).
Modelo corpuscular – las partículas se mueven con energía.

17. Parámetros ondulatorios: Amplitud, longitud de onda, periodo, frecuencia.

Frecuencia: numero de oscilaciones del campo por segundo (1/p)

Periodo p: El tiempo, en segundos necesarios para el paso de sucesivos máximos o
mínimos por un punto fijo en el espacio.

18. Radiación coherente: igual longitud de onda y diferente ángulo de fase, y que no
cambie en el tiempo.
19. Índice de refracción: Es la relación de la velocidad del vacío y la velocidad del
medio.

CAPITULO 6. INSTRUMENTOS PARA MICROSCOPIA ÓPTICA

1. Selectores de longitud de onda: Filtro: Deja pasar solo una longitud de onda,
existen de absorción y de interferencia… el filtro es un sistema que no dispersa la
radiación. Monocromador: Separa espacialmente la longitud de onda, realizan
barridos espectrales. La capacidad de un Monocromador de separar diferentes
longitudes de onda depende de su dispersión… el monocromador además es capaz
de descomponer la luz visible en todas sus longitudes… el monocromador es un
sistema que dispersa la radiación.

2. Diferencias entre filtro de interferencia y de absorción: Absorción: para la región

visible, absorbe longitud de ondas y solo deja pasar la de interés.
Interferencia: para visible, U.V e IF. Selecciona la longitud de onda y destruye las
demás, además proporciona bandas de radiación bastante estrechas.

3. Efecto de la anchura de rendija en la resolución: Una menor abertura proporciona

una mejor diferenciación de los picos (mejor resolución), pero baja la intensidad de
estos. Para análisis cualitativo la rendija debe ser más estrecha para que de una
mayor precisión y, para análisis cuantitativo, debe ser más ancha para tener una
mayor cantidad de energía.

4. Detectores de radiación: Transductores: que convierten la energía radiante en una

señal eléctrica. Deben trabajan en un amplio intervalo de longitudes de onda, debe ser
sensible a la relación señal/ruido y tener una respuesta constante.
Fotoeléctricos: Respuesta a fotones individuales, permite medir radiaciones UV,
Visible o IF cercana. Clases: células fotovoltaicas, fototubos, fotomultiplicadores,
fotoconductividad, fotodiodos de silicio.
Caloríficos: Respuesta al Calor, permiten medir radiación IF.

 Corriente oscura. En ausencia de radiación se genera una respuesta pequeña y

constante, en el detector. Es constante para periodos cortos.
5. Diferencia entre instrumentos temporales, espaciales y multiplex: Diseño
temporal: Tiene un solo canal, requieren de la variable tiempo para hacer el barrido.
Se puede utilizar un monocromador para hacerlo dispersivo.
Diseño espacial: Tiene muchos canales. Es no dispersivo cuando utiliza filtros y es
dispersivo cuando utiliza un monocromador del cual salen señales.
Diseños Multiplex: Dispositivo de un solo canal en los que todos los elementos de la
señal se observan de manera simultanea, requiere modular la señal del analito, por lo
tanto depende de las transformadas de Fourier para descodificar la señal.

6. Ventajas de los equipos que utilizan transformada de Fourier.

 Mayor rendimiento al no utilizar rendijas que atenúan la radiación (Ventaja
Jaquinot).
 Mayor potencia de radiación y una relación señal/ruido alta.
 Elevadísima exactitud en longitud de onda y en precisión. Todos los elementos de
la fuente llegan al detector a la vez permitiendo un espectro completo en un corto
tiempo. (Ventaja Fellgett)
La transformada de fourier es la descomposición de ondas complejas.

7. Espectroscopia de frecuencia y de dominio.

La espectroscopia convencional se denomina espectroscopia de frecuencia, en la que
los datos de potencia radiante se registran en función de la frecuencia.
La espectroscopia de dominio de tiempo, puede conseguirse por medio de la
transformada de Fourier, la cual relaciona la potencia radiante con el tiempo.

 Los dos tipos de espectroscopia contienen la misma información.

8. Diferencia entre fuentes de línea y fuentes continuas: Fuente de línea: Cuando

utilizo una fuente monocromática y no tengo necesidad de utilizar filtro o
monocromador, ademas el ancho de la banda tiende a cero.
Fuente continua: Cuando utilizo una fuente policromatica y puedo utilizar varios
monocromadores en serie o uno antes de la muestra y otro después para purificar la
señal.
Laser: Tipo de fuente especial (son fuentes de linea), pero con alta intensidad
9. Interferómetro de Michelson: Dispositivo que divide un haz de radiación en dos
haces de casi igual potencia y, a continuación, los recombina de tal forma que las
variaciones de intensidad del haz recombinado pueden medirse en función de las
diferencias de longitud de las trayectorias de las dos mitades.

10. Dominio de frecuencia: la intensidad varía dependiendo de la frecuencia. grafico I vs

LONGITUD DE ONDA
Dominio de tiempo: La intensidad varia es con el tiempo. grafico I VS TIEMPO.
la espectroscopia de dominio de tiempo, puede conseguirse por transformada de fourier,
la cual realciona la potencia radiante con el tiempo

CAPITULO 7. ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION MOLECULAR ULTRAVIOLETA

/VISIBLE Y DE INFRAROJO CERCANO

1. Términos empleados en espectroscopia de absorción.

 Transmitancia vs absorbancia: La primera es la fracción de radiación incidente
transmitida por la solución T=P/P0, mientras que la absorbancia es el logaritmo inverso de
la transmitancia, log P0/P. A mayor atenuación mayor absorbancia.

2. Aspectos cuantitativos de las mediciones de absorción.

Ley de Beer A = a b c
A – Absorción.
a – Absortividad, depende del material y de la longitud monocromática de onda
(constante).
b – Espesor, longitud, camino recorrido, depende del instrumento (constante).
c – Concentración absoluta.

3. Limitaciones de la Ley de Beer.

 Se aplica a soluciones diluidas.
 Las concentraciones menores que 0.1M implican mayor distribución de cargas.
 Aplica a soluciones que contengan más de una clase de especie absorbente.
 La fuente tiene que ser monocromática, implicando radiación monocromática.
 Se busca que la relación entre absorbancia y concentración sea lineal.

 Desviaciones químicas, cuando un analito se disocia, asocia o reacciona con el

disolvente.

4. Efecto de la anchura de rendija en las medidas de absorción. Una menor abertura

proporciona una mejor diferenciación de los picos, pero baja la intensidad de estos.
Para análisis cualitativo la rendija debe ser mas estrecha para que de una mayor
precisión. Para un análisis cuantitativo debe ser más ancha para tener una mayor
cantidad de energía.

5. Instrumentos característicos.

Características de los fotómetros y espectrofotómetros.

Fotómetro: Presentan características de elevados rendimientos energéticos, por lo
tanto buena relación señal/ruido, pero solo se puede detectar una sola longitud de
onda.
Espectrofotómetro: Analiza varias longitudes de onda, se utiliza para análisis
cuantitativo, se pueden utilizar con un solo haz o con dos haces. debe ser capaz de
proporcionar una anchura de banda lo suficientemente estrecha para que pueda
aislar.
6. Radiación parásita: Escape de radiación, se puede dar por pequeños defectos del
instrumento, se esta llendo por el camino que no es. (radiación).

CAPITULO 8. APLICACIÓN DE LA ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION

MOLECULAR ULTRAVIOLETA /VISIBLE Y DE INFRAROJO CERCANO

La absorción de radiación U.V /visible proviene de la excitación de los electrones

enlazantes y como consecuencia, las longitudes de onda de los picos de absorción
pueden correlacionarse con los tipos de enlaces que existen en las especies.

1. Tipos de especies absorbentes y no absorbentes.

 Absorbentes: Grupos cromóforos orgánicos (limitados grupos funcionales), algunas
especies inorgánicas como: metales de transición, iones nitrito, nitrato, cromato, iodo
molecular y el ozono.
No Absorbentes: Requieren aditivos para absorber radiación. Agentes complejantes
para especies inorgánicas, agentes quelantes para especies orgánicas.

2. Análisis cuantitativo: Cuanto de cada elemento esta presente en la muestra

(mediciones de las intensidades de las energías emitidas)
Aplicaciones de la técnica para análisis cuantitativo.
Aplicables a sistemas orgánicos e inorgánicos que tienen grupos absorbentes,
sensibilidad, poca selectividad, buena precisión, fácil y adecuada adquisición de datos.
Aplicaciones en todos los campos que demandan información química cuantitativa y
grupos funcionales de una molécula.

3. Analisis cualitativo: Cuales elementos están presentes (medición de energías, de la

radiación emitida)
Aplicaciones de la técnica para análisis cualitativo
Aplicación limitada ya que el número de máximos y mínimos de absorción es
relativamente pequeño.

4. Variables que influyen en la absorbancia: Se incluye la naturaleza del disolvente, el

pH de la disolución, la temperatura, las concentraciones elevadas de electrolito y la
presencia de sustancias interferentes.

5. Para que se hace la curva de calibración: Para verificar si la relación entre

concentración del analito y la absorbancia, es lineal y si cumple la ley de Beer. Se
hacen medidas de absorbancia y se determinan las concentraciones, luego se verifica
la linealidad sacando la pendiente en el rango requerido. Se debe utilizar el mismo
disolvente, la misma cubeta y el mismo equipo (fuente).

6. Método de la adición estándar: Idealmente, los estándares de calibrado deben

aproximarse a la composición de las muestras a analizar, con el objeto de minimizar
los efectos de los diversos componentes de la muestra en la medida de la
absorbancia.

El método implica la adición de uno o mas incrementos del mismo tamaño de la

solución estándar a las alícuotas de la muestra, cada solución se diluye a un volumen
fijo antes de la medida de la absorbancia.

CAPITULO 9. ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA, FOSFORESCENCIA Y

QUIMIOLUMINISCENCIA MOLECULAR

En los tres métodos las moléculas de analito son excitadas dando una especie cuyo
espectro de emisión suministra información para el análisis cualitativo y cuantitativo. Se
conoce el grupo como procedimientos luminiscentes.

La fluorescencia y la fosforescencia se parecen en que la excitación tiene lugar por

absorción de fotones (fotoluminiscencia), las variables que las afectan son la estructura
molecular, el entorno químico, el aumento de temperatura, disolventes con átomos
pesados. La quimioluminiscencia se basa en el espectro de emisión de una especie
excitada que se ha formado en el curso de una reacción química.
Los espectros fluorescentes y fosforescentes implican excitación a una longitud de onda
fija mientras se registra la intensidad de emisión como función de la longitud de onda. Las
bandas fosforescentes se encuentran a longitudes de onda más altas que las bandas de
fluorescencia.

Se aplica en la determinación cuantitativa de una variedad importante de especies

inorgánicas y orgánicas a nivel traza. Los métodos luminiscentes tienen una sensibilidad
inherente, tienen un gran intervalo de concentraciones y poseen una mejor selectividad.
Los métodos luminiscentes son menos aplicables debido al número limitado de especies
que producen luminiscencia.

1. Estados excitados que producen fluorescencia y fosforescencia (singulete y

triplete).
Estado singulete: Estado electrónico molecular en el cual todos los espines de los
electrones están apareados, por lo cual no tiene lugar un desdoblamiento del nivel de
energía cuando la molécula se expone a un campo magnético.

Estado doblete: Estado fundamental para el radical libre, el electrón desapareado

puede tomar dos orientaciones en un campo magnético, lo que comunica energías
ligeramente diferentes al sistema.

Estado triplete: Cuando uno de los electrones de una molécula es excitado a un

nivel de energía superior da lugar a un singulete excitado si el spin del electrón esta
apareado, de lo contrario están paralelos y estarán en el estado triplete. Este estado
es menos energético, la molécula es paramagnética. Una transición de este tipo es
menos probable. Los picos de absorción son menos intensos.

2. Procesos de desactivación de fluorescencia y fosforescencia.

Relajación vibracional: El exceso de energía vibracional se pierde inmediatamente
como consecuencia de interacción (coaliciones) entre las moléculas de las especies
excitadas y las del disolvente, generando una transferencia de energía y un aumento
de temperatura del disolvente. El tiempo de relajación es mucho menor que el tiempo
de excitación electrónica.

Conversión Interna: Proceso intermolecular por el que la molécula pasa a un estado

electrónico de más baja energía sin emisión de radiación. Se da más fácilmente
cuando dos niveles de energía electrónicos están suficientemente próximos para que
haya solapamiento de los niveles de energía vibracional. Las moléculas del mismo
tipo se excitan unas a otras.

Conversión externa: Interacción y transferencia de energía entre la molécula

excitada y el disolvente u otros solutos. Se da entre especies diferentes

Cruzamiento entre Sistemas: El espín de un electrón excitado se invierte y da lugar

a un cambio en la multiplicidad de la molécula. El estado vibracional singulete mas
bajo se superpone con uno de los niveles vibracionales triplete mas elevados y así es
probable el cambio de espín. Es cuando un nivel vibracional singulete excitado pasa a
triplete generando fosforescencia y disminuyendo la fluorescencia.
Multiplicidad: se da en las moléculas, un mismo estado energético tiene diferentes
niveles de energia.
Las reacciones que producen quimioluminiscencia son pocas, lo que limita el
procedimiento a un número pequeño de especies. Este método cuenta con una alta
selectividad, tiene mayor simplicidad y es de extrema sensibilidad (ausencia de ruido),
además evita la atenuación de la radiación al no utilizar filtros o monocromadores. Se
produce cuando una reacción química da una especie electroquímicamente excitada, la
cual emite radiación para volver al estado fundamental.

CAPITULO 10. ESPECTROSCOPIA ATOMICA BASADA EN LA ATOMIZACION CON

LLAMA Y ELECTROTERMICA

 Hay 2 regiones del espectro que dan información atómica: ultravioleta / visible y rayos
x
 Los componentes de una muestra se convierten en átomos o iones elementales
gaseosos (atomización de la muestra).
 La emisión, absorción o fluorescencia de la mezcla resultante sirve para determinar
cualitativa y cuantitativamente los elementos presentes en la muestra.
 Fluorescencia de resonancia, recibe la misma energía que entrega.

1. Atomizadores de la muestra (continuos y discretos).

Continuos: La muestra se introduce en el atomizador a velocidad constante. La señal
espectral es constante con el tiempo. Siempre hay el mismo volumen y concentración
de la muestra. El ensayo termina cuando termina la alimentación, algunos de estos
son chispa eléctrica, llama, plasma de argón acoplado inductivamente, plasma de
argón de corriente continua.

Discretos: Se introduce una cantidad medida de líquido o solido. La señal espectral

alcanza un valor máximo y luego cae a cero cuando el vapor atómico abandona la
región calentada. La muestra está disuelta, el ensayo termina cuando termina la
muestra. Entre estos tenemos el arco eléctrico, electrotérmicos, son mas escasos y
mas baratos.

2. Anchura de las líneas espectrales (picos).  Ideal línea espectral alta.

Efecto de incertidumbre: Los tiempos de vida de uno o de los dos estados
(fundamental y excitado) son finitos por lo que conlleva a incertidumbre en los tiempos
de transición y un ensanchamiento de la línea. La energía de una partícula puede
conocerse con incertidumbre cero solo si se observa durante un periodo infinito.

Efecto doppler: La longitud de onda de la radiación emitida o absorbida por un átomo

que se mueve rápidamente, disminuye si el movimiento es hacia un detector y
aumenta si el átomo se aleja del mismo. El máximo desplazamiento doppler lo
presentan aquellos átomos que se mueven con las velocidades más altas y en línea
recta acercándose o alejándose del detector. El receptor captara una señal diferente
de acuerdo al movimiento de las partículas, a mayor movimiento mayor
ensanchamiento de línea, esta afectado por la temperatura y la velocidad de las
partículas.

Ensanchamiento de Presión: Se produce por las colisiones de las especies, que

emiten o que se absorben con otros átomos o iones presentes en el medio calorífico.

Efectos por campos magnéticos o eléctricos:

3. Espectroscopia de absorción atómica.
Fuentes: Lámparas de cátodo hueco, lámparas de descarga sin electrodos.

Preparación de la muestra: La muestra se debe introducir disuelta, por lo general en

agua. Esto hace que muchas muestras requieran un tratamiento previo laborioso para
disolverla y además estas etapas de descomposición y disolución introducen más
errores que las propias medidas espectroscópicas.

Instrumentos: Espectrofotómetros de un solo haz y de doble haz.

Interferencias espectrales: Se producen cuando la absorción o emisión de una

especie que interfiere se solapa o aparece muy próxima a la absorción o emisión del
analito de modo que su resolución por el monocromador resulta imposible. Forma
picos no regulares implicando una corrección de fondo.

Interferencias químicas: Generada por una reacción química, formación de

compuestos poco volátiles, equilibrios de disociación, ionización de llamas.
se produce como consecuencia de diversos procesos quimicos que ocurren durante la
atomizacion y que alteran las características de absorcion del analito.
Ambas interferencias disminuyen la potencia del haz transmitido.

4. Espectroscopia de fluorescencia atómica.

Es útil para la determinación cuantitativa de un numero razonable de elementos, pero
sus ventajas no superan la de las técnica de absorción y emisión por lo cual se ha
visto muy opacada.

Comparación entre las técnicas de absorción atómica y emisión de llama

Espectroscopia de
Emisión Absorción
llama
la llama actúa como fuente
La calidad del monocromador no
tiene que ser tan alta para alcanzar
el mismo grado de selectividad,
debido a la estreche de las líneas
Ventajas emitidas por la lámpara de cátodo
hueco
La precisión y exactitud se puede
lograr con personal menos experto
La corrección de los espectros se
realiza con mayor facilidad
Requiere mayor habilidad del Necesita de una fuente
operador debido a la criticidad de los diferente para cada
Desventajas
ajustes d L.de Onda, zona de llama, elemento o grupo de
y relación combustible-oxidante elementos

La inversión del pico se ve originada en la auto absorción debido a que una partícula
excitada entra en contacto con una que no lo esta, esto se da por un calentamiento
poco uniforme de la muestra.
 atomización: la muestra se lleva a vapor, atomos o iones

Espectroscopia de emisión de llama: Su principal aplicacion es la determinacion de

sodio, potasio, litio y calcio, especialmente en fluidos biologicos.
Por razones de conveniencia, rapidez y por la relativa falta de interferencias, la
espectroscopia de emision de llama se ha convertido en el metodo de eleccion para el
analisis de estos elementos, que suelen ser dificiles de determinar por medio de otras
tecnicas.

CAPITULO 11. ESPECTROSCOPIA DE EMISION BASADA EN LA ATOMIZACION

CON PLASMA Y CHISPA

Son las fuentes de atomización mas energéticas, en un orden creciente se tiene: plasma
acoplado inductivamente, plasma de corriente continua, arco eléctrico y chispa eléctrica.

1. Ventajas respecto a métodos de llama y electrotérmicos.

Menor interferencia entre elementos debido a su elevada temperatura.

Es posible registrar simultáneamente los espectros para muchos elementos con las
mismas condiciones de excitación.

Permiten la detección de bajas concentraciones de elementos que tienden a formar

compuestos refractarios.

Las fuentes de plasma permiten la detección de no metales como cloro, bromo, yodo y
azufre, los cuales son aplicables a intervalos de concentración de varios órdenes de
magnitud, la fuente de plasma presenta mayor reproducibilidad de las condiciones de
atomización con respecto a los métodos de emisión con arco y chispa.

La mayor ventaja de arco y chispa es que se adaptan más fácilmente a la atomización

directa de muestras difíciles como materiales refractarios, minerales vidrios y
aleaciones, sin necesidad de un tratamiento laborioso de la muestra.

2. Espectros obtenidos
Se obtienen tres tipos de espectros superpuestos: Continuo, de bandas y de líneas.
Las fuentes de arco, chispa y plasma son por lo general más ricas en líneas que las
de llama y electrotérmicas.

3. Espectroscopia de emisión con fuente de plasma.

Se utiliza mas la fuente de plasma acoplada inductivamente, que utiliza un potente
campo de radiofrecuencias a través del cual fluye el argón, esta ofrece mayores
ventajas en relación con la sensibilidad y la ausencia de interferencias. La atomización
es más completa y hay menos probabilidad de interferencias químicas. La
interferencia por ionización es pequeña o no se produce. La atomización tiene lugar en
un medio inerte por lo cual se aumenta el tiempo de vida del analito al evitar la
formación de óxidos.

La fuente de plasma proporciona datos analíticos mucho mejores que otras fuentes de
emisión, esta calidad radica en la estabilidad, bajo ruido, poca radiación de fondo y en
la ausencia de interferencias de las fuentes. La técnica de acoplamiento inductivo es
 la mejor, que la de corriente continua, pero esta última es más barata y satisface
también los requerimientos para muchos casos.

El plasma (gas ionizado) necesita como mínimo un gas y un campo eléctrico. Utiliza
dos corrientes de argón, una en el interior que arrastra el analito, el cual debe estar
pulverizado, y otra en el exterior que regula la temperatura, ayuda a enfriar las
paredes exteriores. El gas oxidante es el que regula la temperatura.

La llama se atomiza y se excita, la emisión se da por fotones.

La intensidad es proporcional al tamaño de la muestra.
Utiliza un solo canal, si requiero obtener la señal de todo el espectro, necesito un
interferómetro (Michelson) para utilizar las transformadas de Fourier y un
monocromador para separar espacialmente la longitud de onda.
4. Espectroscopia de emisión basada en fuentes de arco y chispa.
Muestras: Pueden ser sólidos pero sin rugosidad, líquidos o gases.

Modo de Operación de la fuente: Dos electrodos de grafito o de metal separados

unos pocos milímetros. El arco se pone en ignición mediante una chispa que provoca
y mantiene una corriente entre los electrodos.

En un arco la electricidad se produce por el movimiento de los electrones y los iones

que se forman por ionización térmica, la elevada temperatura resulta por la resistencia
de los cationes a este movimiento en el espacio donde se produce el arco. La
temperatura depende de la composición del plasma, de la velocidad de formación de
las partículas atómicas y de los electrodos.

La precisión es menor en el arco y es mas sensible a las trazas de un elemento que

los otros métodos, pero la interferencia química es menos frecuente debido a su
elevada temperatura.

Una chispa intermitente que siempre se propague en la misma dirección proporciona

mayor precisión y menor deriva que una chispa de corriente alterna. Los espectros
iónicos en una chispa de alto voltaje son mas pronunciados que en un arco.

Instrumentos: Requieren instrumentos multicanal (espectrógrafo) en el cual la

detección de la radiación dispersada se realiza mediante una película o placa
fotográfica situada en el plano focal del monocromador.

Aplicaciones cualitativas: Identificación de componentes elementales de la materia,

control de calidad y de producción en la industria metalúrgica (detectores
fotoeléctricos).

5. Si en la atomización tengo átomos o iones en que me afecta el ensayo.

Afecta el ancho de banda, el espectro cambia.

6. Que características debe tener la solución estándar.

La concentración de la muestra y en los patrones debe ser siempre la misma.
No reaccione con el analito
Que sea de la misma naturaleza que el analito
Que absorba la misma T que el analito
MAS PREGUNTAS…
1) Diferenciación entre instrumentos de un haz, doble haz y multicanal: 1 haz:
sencillo – menor costo – óptica sencilla – limitaciones: variación de la potencia –
cambio de cubeta a muestra – ajuste de referencia, salvo al inicio.
2. doble haz: todo el tiempo lo que mido es realmente lo que pasa en la muestra – la
referencia esta presente todo el tiempo – el ajuste en cero es permanente – divide por
medios ópticos la radiación. – la lectura se hace a igual tiempo.
3. multicanal: posee varios detectores – varios canales – puede ser dispersivo (con
monocromador) y no dispersivo (filtro). – simultaneo en el tiempo.

2) Diferencia entre ∏ enlazante y ∏ antienlazante: Los ∏ antienlazantes son

orbitales de mayor energia, donde los electrones desestabilizan la molécula, se
encuentre en estado de excitación y repulsión. Los ∏ enlazantes son los orbitales
de menor energia, estan en estado de atracción.

3) patron interno: es el que se le agrega al analito y se analiza conjuntamente con la

muestra.

4) 3 principios de ensanchamiento de línea: Principio de incertidumbre (a mayor

energia cinetica de las particulas mayor velocidad, entonces voy a tener menor
teimpo para determinar la longitud de onda) – efecto doppler (a mayor movimiento
mayor ensanchamiento de linea) - presion (oiginado por las colisiones entre las
particulas de las diferentes especies)

A mayor todo mayor el ancho de linea.

5) Equipos que usen el principio de interferencia: todos aquellos que usen

monocromadores o filtros (1 haz, 2 haz – multicanal), porque estos instrumentos lo
que hacen es separar – seleccionar (interferir en la radiación inicial) –
interferometro de michelson.
6) Proceso de relajación: Es cuando la molécula absorbe energia (se excita), y
vuelve a su estado fundamental mediante procesos de desactivacion que son:
conversión interna – conversión externa – fluorescencia- fosforescencia –
vibracional.
7) En que caso se aplica la adicion estandar? Y para que sirve?: Se utiliza
cuando se tiene una muestra compleja; y sirve para determinar por medio de la
curva de calibración de la especia compleja, ademas tambien se utiliza para
patrones no conocidos.
8) Que especies presentan cambios vibracionales: Son los cromoformos, los
cuales son grupos funcionales que contienen electrones con energias de
excitación relativamente bajas.
9) Si se tiene una sustancia no conductora que se va a analizar por arco, como
hago para que sea conductor?: Para volverlas conductoras se utilizan:
electrodos de carbono – varillas de plata y cobre como soporte a la muestra – para
muestras pulverizadas, la compactacion de la muestra con polvo de grafito, cobre
u otras sustancias conductoras y comprensibles.
 Técnica Mecanismo observación

Porque la frecuencia de radiación

iguala exactamente la frecuencia de
vibración natural de la molécula
entonces ocurre una transferencia
INFRAROJO Absorción (moléculas)
neta de energía que da lugar a un
cambio en la amplitud de la vibración
molecular y como consecuencia
absorbe radiación

Radiación dispersada La diferencia entre la longitud de onda

por algunas entre la radiación incidente y la
moléculas. Es como radiación dispersada corresponde a
máximo un 0.001% de las T de la región del Infrarrojo medio.
la intensidad de la
fuente. las línea de resonancia Raman son
mucho mas intensas.
Una radiación laser
sobre la muestra
RAMAN genera una radiación
igual a la que se
introdujo (rayleigh) y
otra radiación que es
diferente en cuanto a la
T y esta es la que se
denomina Raman. La
radiación rama se
divide en Stokes y
Antistokes

Igualar las condiciones de

movimiento. Es decir la radiación que
RESONANCIA se proporciona debe tener una
MAGNETICA Absorción (Núcleo) frecuencia y una velocidad angular
NUCLEAR característica y cuando una
componente de la radiofrecuencia
irradiada iguala en frecuencia y
 dirección de giro al núcleo, en ese
momento se da la absorción

EMISION Y Se da cuando el núcleo A de un

ABSORCION estado excitado de energía decae a
(absorción y emisión su estado fundamental de energía
por resonancia de emitiendo un rayo gama y a
rayos gamma por parte continuación un núcleo B semejante
MOSSBAUER de ciertos núcleos en sus estado fundamental absorbe el
atómicos contenidos rayo gama pasando al estado
en un sólido). excitado.

Es un fenómeno a nivel
átomo

Se puede dar por bombardeo de un

blanco metálico con una haz de
electrones de elevada energía

Utilizando una fuente radioactiva cuyo

proceso de desintegración da lugar a
una emisión de rayos X.

Uno de los métodos se basa en el

EMISION hecho de que los rayos X emitidos por
un elemento excitado tienen una
longitud de onda característica de
dicho elemento y una intensidad
proporcional al número de átomos
excitados. Por lo tanto, estos métodos
RAYOS X de emisión pueden usarse tanto para
el análisis cualitativo como el
cuantitativo

ABSORCION debido a la anchura de los picos de

absorción de rayos x, los métodos de
absorción directa son generalmente
útiles solo cuando se determina un
único elemento con un numero
atómico alto en una matriz que consta
solo de elementos ligeros.

DIFRACCION DE Cuando la energía del fotón es

RAYOS X exactamente igual a la energía
necesaria para llevar un electrón justo
 a la periferia del átomo.

Un método basado en los rayos X es

la difracción de los mismos en los
planos de un cristal (análisis por
difracción). Este método depende de
las característica ondulatoria de los
rayos X y del espaciamiento uniforme
de los planos de un cristal. Aunque
las técnicas de difracción pueden
usarse para análisis cuantitativos, su
mayor utilidad radica en la
identificación cualitativa de fases
cristalinas

Fluorescencia Por exposición de una sustancia a un

haz primario de rayos x con el
objetivo de generar un haz secundario
de fluorescencia de rayos X.

por irradiación del material con rayos

X de longitud de onda más corta
(análisis por fluorescencia).

ESPCTROSCO La señal producida por Se registra la energía cinética de los

PIA excitación del analito electrones emitidos y el espectro es
es un haz de una grafica del numero de electrones
electrones más que un en función de la energía de los
haz de fotones y se electrones emitidos.
mide la potencia de
este haz en función de
le energía o frecuencia
de los electrones.

Técnica Fuente observación

 Son Policromaticas.
Consisten en sólidos inertes
que se calientan
eléctricamente a una
temperatura de 1500 y 2200
K.

Emisor de nerst: óxidos de

las tierras raras

Fuente Globar: Varilla de

INFRAROJO
CSi

Fuente de filamento de
tungsteno, Arco de
mercurio, fuente laser de
dióxido de carbono, fuente
de filamento
incandescente(espiral Ni-
Cr)

RAMAN Fuente laser de radiación La magnitud de los

monocromática visible o desplazamientos Raman es
infrarroja independiente de la longitud de
onda de excitación.

RESONANCIA MAGNETICA Radiación de

NUCLEAR radiofrecuencias que es
introducida perpendicular al
campo magnético aplicado.
Es una radiación polarizada
circularmente y la
frecuencia dependerá del
núcleo a analizar.

MOSSBAUER Irradiación con rayos

gamma

Tubo de rayos X:
Bombardeo de rayos x con
un filamento de W como
RAYOS X
cátodo y el blanco metálico
es el ánodo.

Fuentes fluorescentes
 secundarias: El espectro de
fluorescencia de un
elemento que ha sido
excitado por radiación de un
tubo de rayos x sirve como
fuente para estudios de
absorción y fluorescencia.

Radioisótopos: sustancias
radioactivas

ESPECTROSCOPIA DE La excitación del analito se

ELECTRONES lleva a cabo por irradiación
de la muestra con un haz de
rayos X, con radiación
ultravioleta de onda corta, o
bien de electrones

Espectroscopia La irradiación se hace con

fotoelectronica de radiación X monocromática
rayos X (XPS) o ESCA:

Espectroscopia de Frecuentemente se excita

Electrones AUGER por un haz de electrones
aunque también se utiliza
los rayos X

Técnica preparación de la Muestra Observación

Gases: la muestra se
coloca en una cubeta a la
que se la ha hecho vacio
previamente para evitar la
humedad y las colisiones

INFRAROJO Líquidos: se toma una gota

del liquido y se comprime
entre 2 placas, luego se
coloca en la trayectoria del
haz.

Sólidos: el tamaño de
partícula del solido debe ser
 menor que la T del haz de
infrarrojo. Generalmente se
trituran las partículas y se
utiliza un hidrocarburo
pesado o se forma un disco
con la muestra para
proceder a realizar el
ensayo.

RAMAN Líquidos: Se introduce la Es posible obtener espectros de

muestra en tubo capilar
Gases: Solo se coloca la
muestra en una cubeta,
entre los espejos de la
fuente laser
disoluciones acuosas (el agua no
interfiere).
Se pueden utilizar cubetas de
vidrio o cuarzo

Sólidos: se pulveriza la
muestra

RESONANCIA MAGNETICA Normalmente se utilizan

NUCLEAR muestras en estado liquido
no viscoso. Los viscosos se
diluyen.

Los sólidos no son tan

utilizados por que las
mediciones en el detector
no son tan eficaces y
resulta demasiado costoso
el ensayo.

MOSSBAUER Solo se usa para sólidos. En los gases los núcleos no se

pueden amarrar porque las fuerzas
de enlace son mínimas, en los
líquidos también hay mucho
movimiento, pero los sólidos(sobre
todo sólidos cristalinos) poseen
altas fuerzas de enlace y por ende
se elimina en gran medida la
energía de retroceso permitiendo
así comparar lo que emite la fuente
con lo que absorbe la muestra.
 RAYOS X DRX: La muestra se
convierte en un polvo fino
homogéneo. Las muestras
se colocan en tubos
capilares de paredes finas
de vidrio o de celofán y
estos se introducen en el
haz

ESPECTROSCOPIA DE
ELECTRONES

Técnica Aplicaciones Observación

Identificación de
compuestos orgánicos, sin
INFRAROJO embargo también en
compuestos inorgánicos y
biológicos

RAMAN Análisis cuantitativo y Es posible analizar moléculas

cualitativo de sistemas homonucleares como H2, N2.., en
inorgánicos, orgánicos y IR no es posible.
biológicos

RESONANCIA MAGNETICA Identificación de moléculas

NUCLEAR orgánicas, organometalicas
y bioquímicas

MOSSBAUER Alta resolución ( 1 parte en

10 12 partes)

Permite estudiar parámetros

cristalográficos de la
muestra

RAYOS X Absorción: determinación

del plomo en gasolina,
determinación de azufre y
halógenos en Hidrocarburos

Difracción: (para sólidos

cristalinos) elucidación de
 estructuras de productos
naturales complejos tales
como esteroides, las
vitaminas y antibióticos.

Identificación cualitativa de
compuestos cristalinos.

El método de DRX de polvo

cristalino es el único método
analítico que es capaz de
suministrar información
cualitativa y cuantitativa
sobre los compuestos
presnetes en una muestra
solida.

ESPECTROSCOPIA DE Identificación de todos los análisis cualitativo de sólidos como

ELECTRONES elementos de la tabla metales, aleaciones,
periódica con excepción del semiconductores y catalizadores
H y del He. heterogéneos.

Permite la determinación el análisis cuantitativo presenta

del estado de oxidación de aplicaciones limitadas.
un elemento y las especies
a las que esta unido.

proporciona información útil

sobre la estructura
electrónica de las moléculas

Técnica Equipos utilizados Observación

INFRAROJO

RAMAN de transformada de Fourier

RESONANCIA MAGNETICA Espectrómetros de onda

NUCLEAR continua: se registra la
señal de absorción al variar
la frecuencia de la fuente.

Espectrómetros de impulso
o de transformada de
Fourier: Son bandas de
 radiación de radio
frecuencia los cuales
atraviesan la muestra
perpendicular al campo
magnético.

MOSSBAUER

RAYOS X DRX:

ESPECTROSCOPIA DE
ELECTRONES

RESUMEN PARCIAL II
Capitulo 12: Espectroscopia de absorción en el infrarrojo.
Es una técnica cuantitativa y cualitativa de especies organicas mas que todo, se basa en
la bipolaridad de las moléculas, y lo que mide es la absorción.
Se grafica en el eje x numero de longitud de onda, eje y absorbancia (baja) transmitancia
(sube).
Para que halla absorción en el infrarrojo debe haber un cambio neto en el momento
dipolar en la molecula, por consecuencia de la rotación y la vibración, el rotacional no es
tan influyente en solidos y liquidos.
La frecuencia de la fuente tiene que ser igual a la frecuencia natural de vibración de la
molecula, para que abosrba aumentado la amplitud de vibración. (aquí absorbe la
radiación).
IR permite identificar grupos funcionales por la intensidad de las bandas estrechas que se
presentan y la longitud de onda donde se encuentran, consta de tres regiones del
espectro denominadas:
 Cercano. Comprende el rango del espectro que esta entre 0.78 a 2.5 um, útil para
gasesy para cuantificar compuestos organicos.
 Medio. Es el más utilizado para la identificación de moléculas orgánicas, el espectro
se encuentra en el rango 2.5 a 50 um. Cubre los niveles vibracionales del primer nivel
electrónico, encima de la banda de valencia y entre ellos los niveles rotacionales.
 Lejano. El espectro se encuentra en el rango de 50 a 1000 um. No se recomienda
para identificar grupos funcionales inorgánicos, pero se puede realizar en este rango
de longitud de onda con fuentes de alta radiación.
Grados de libertad representan las dimensiones en el espacio donde se puede analizar la
molécula.
IR sirve para realizar un análisis cualitativo, para cuantificar se requiere un estándar de
referencia y se da en un porcentaje.
Desviaciones de la ley de Beer: El infrarrojo requiere una radiación monocromática, las
bandas de absorción son más estrechas implicando mayores desviaciones, debido a que
se genera una relación no lineal entre la banda de absorción y la concentración, además
por que se presentan espectros más complejos con picos superpuestos.
Momento dipolar: Se presenta por un cambio en la distribución de carga en el espacio y
por cambio en la distancia de los centros de carga a diferentes tiempos. Por lo general se
genera por un cambio vibracional molecular.
Tipos de vibraciones moleculares.
 Tensión. Cambio continuo de la distancia interatómica a lo largo del enlace entre dos
átomos, se puede presentar cambios simétricos, cuando es en el mismo sentido ˄ ˄, o
asimétricos, cuando se presenta el movimiento en sentidos contrarios ˄˅. (estos dos
no provocan cambio alguno en el dipolo).
 Flexión. Cambio en el ángulo entre dos enlaces, se puede presentar en forma de
tijereteo cuando hay un movimiento al interior presentando una disminución del ángulo
que forman, balanceo en el plano cuando se presenta un movimiento de los enlaces
hacia el exterior aumento el ángulo que formaban, aleteo cuando se presenta un
movimiento de dos enlaces hacia el mismo plano, y torsión cuando el movimiento de
los enlaces se lleva a cabo en planos diferentes.
Acoplamiento vibracional: Desplazamiento o cambio en la forma del pico, debido a que
un grupo funcional se encuentra unido a otro, para confirmarlo es necesario validarlo con
otros espectros.

Modos de vibración: Representan el máximo de vibraciones que tiene la molécula, se

pueden encontrar lineales (3N - 5) o complejas (3N - 6), cada una de estas se denomina
un modo normal. Se debe tener en cuenta que N representa el número de átomos
presentes y que 3N son los grados de libertad.
Picos de sobre tono: Se presentan cuando se generan cambios de dos o tres niveles de
energía, por lo general y de acuerdo a la regla de selectividad, las transacciones
vibracionales se realizan por cambios en una unidad de niveles de energía.
Huella digital: Representa un compuesto en específico, por lo general se presentan en
un número de onda inferior a 1000 cm-1 y es más difícil de identificar con precisión.
Espectros de reflectancia: Cantidad que el haz penetra en la muestra, no necesita
preparación de la muestra debido a que es un análisis superficial, si la muestra es
diferente en el interior no seria representativa.
Tipos de Fuentes.
 Emisor de Nerst: Se hace pasar corrientes a través de los conductores generando
calentamientos entre 1200 – 2200 k, poseen menor coeficientes de resistencia, y
menor hay que sostenerlos a energía externa para sostener la temperatura.
 Fuente global: Su funcionamiento es igual al de Nerst, solo que el coeficiente es
positivo y no necesita de una fuente externa para sostener el calentamiento.
 Filamento incandescente: la intensidad es baja, en comparación que las otras dos
fuentes anteriores, es una bobina de alambre de nicromo
 Arco de mercurio: Esta fuente es la mas indicada para el infrarrojo lejano. Consiste
en un gas de mercurio en un tubo de cuarzo que al pasar a travez de el se genera un
plasma.
 Filamento de tungsteno: Es para IR cercano
 Laser de dióxido de carbono: Es útil para determinar contaminantes en gas y
liquidos.
Preparacion de la muestra: En general es muy difícil, la muestra se hace polvo, para
enbeberla en una matriz de KBr, este es transparente en el IR.
La preparación de la matriz es muy larga porque se debe dejar secar de 2 a 3 dias a 60
grados. El KBr es higroscópico por lo que se tiene que hacer inmediatamente.
Espectroscopia infraroja de reflexión interna (ATR): La preparación de la muestra es
muy fácil, solo se hace incidir el haz sobre la muestra , es una técnica superficial de un
alto costo, y bajo tiempo para el ensayo
Tipos de detectores.
 Fotoconductores: Instrumentos multiplex y de trnasformada de Fourier
 Térmicos: térmicos de diferente potencial y balometros de diferente resistencia
 Piroeléctricos: son materiales dieléctricos los cuales son aislantes.
Cuando una molécula no es activa por el infrarrojo se genera un espectro lineal.
Acerca del agua: (limitante para el infrarrojo), el agua es muy activa por lo que se
requiere que las muestras que se analicen con infrarrojo se encuentren sin humedad,
debido a que las bandas del agua son muy anchas lo cual implica un espectro poco
definido. Esto se da por que se forma un momento dipolar al tener una distribución de
cargas heterogéneas.

Por lo general se analizan sustancias organicas que tienen enlaces covalentes que son de
menor energía, si se requiere analizar sustancias inorgánicas se utilizan fuentes de alta
energía o se tratan por RAMAN.

Para el análisis cuantitativo los instrumentos son dispersivos o FTIR, siendo mejor el
FTIR.

Capítulo 13: RAMAN

Raman se da es por dispersión, la radiación cambia es de dirección.
La intensidad de los picos dependen es de la polarizabilidad de la molecula, de la
intensidad de la fuente, y de la concentración de grupos activos presentes.
El fenómeno se parece mas es a la fluorescencia que a la absorción, donde la relación
intensidad, C es logarítmica.
Polarizacion: es una propiedad del haz de radiación y describe el plano en el que vibra.
Polarizabilidad: Propiedad molecular que esta relacionada con la deformación elástica
del enlace.
Si el haz incidente es polarizado la molecula vibrara mas.
Despolarizacion: le sucede al haz al salir de la muestra generando una nueva
componente.

Cuando una radiación pasa a través de un medio transparente, una fracción del haz se
dispersa en todas las direcciones. Raman descubrió que la longitud de onda de una
pequeña fracción de la radiación dispersada por ciertas moléculas, difiere del haz
incidente y además que los desplazamientos de la longitud de onda dependen de la
estructura química de las moléculas responsables de la dispersión. Utiliza una fuente de
radiación monocromática visible o infrarroja.
El agua no produce interferencias y por lo tanto es posible obtener espectros Raman de
disoluciones acuosas, pero si causa interferencia la fluorescencia de la muestra o las
impurezas. Esto es debido a la diferencia de electronegatividad entre el hidrogeno y el
oxigeno, lo que hace que los enlaces sean muy fuertes (Puentes de hidrogeno).
Depende de la naturaleza geométrica o química de la molécula.
Se cuantifican los estados vibracionales de la materia.
En RAMAN se requieren menores cantidades de energía para deformar los enlaces, si
una muestra requiere mas energía debe tratarse por IR.
Para aumentar la intensidad debo incrementar la temperatura, para que los electrones se
concentren en mayor cantidad en los estados vibracionales.
La diferencia que se presenta entre Stokes y antistokes es la posición del estado
fundamental, debido a que en Stokes es el nivel de valencia, mientras que en antistokes
esta en los niveles vibracionales.
Se presenta fluorescencia cuando las muestras se encuentran por debajo de la cantidad
de energía que entrega la fuente monocromática del laser, para corregir esto se cambia el
laser o se utilizan filtros para disminuir la intensidad del laser.
Direccion preferencial de polarización da una mayor intensidad, cuando la vibración va en
el mismo sentido del plano de polarización Se tiene una influencia en la orientación de las
moléculas.
Una superficie aumentada implica una dispersión mas intensa, cuando tengo películas
delgadas con superficies activas aumenta la intensidad.
RAMAN utiliza fuentes de mayor energía por lo tanto es mas selectiva.
Estados virtuales: Estados vibracionales entre el estado fundamental y el primer estado
electrónico excitado.
Acerca del agua: Una ventaja del raman es que el agua no interfiere, es posible tener
espectros de disoluciones acuosas, porque el enlace es altamente energético ya que el
oxigeno es altamente electronegativo y el hidrogeno altamente positivo, el enlace no se
deforma fácilmente.
Ocurre 3 tipos de radiación dispersada: rayleight: La longitud de onda coincide con la
de la fuente, es la mas intensa; Stoke: delta de E menor que delta de Eo; antistoke: delta
de E mayor que delta de Eo.
La dispersión se da es por la química de la muestra.
Fuentes: fuente laser helio/neon: Distancia mayor para eliminar interferencia parasita.
Fuente laser de iones argón: Mayor intensidad y mayor sensibilidad.
Fuente laser Nd:Yag: utiliza transformada de Fourier para señales débiles.
Espectrometro raman: Utiliza doble monocromador que evita radiación parasita, además
tambien tubos detectores multiplicadores filtros y rendijas.
Espectroscopia raman de resonancia: se da cuando la energía de la fuente se da casi
igual a la energía de absorción electrónica. La intensidad de líneas aumenta.
Espectroscopia raman activada por superficie aumentada: Es muy útil para partículas
que se abosorben en la supericie de un metal coloidal o superficies porosas de etas
moléculas.
Espectroscopia no lineal: Es una tecnica empleada para algunos analitos que presentan
inconvenientes al raman normal.

Capitulo 14: Espectroscopia de resonancia magnética nuclear.

En este fenómeno NMR esta asociado el proceso de absorción que implica un cambio de
giro (spin). del nucleo de los atomos.
La radiación es de radiofrecuencia.
Para que el dipolo realice el movimiento brusco debe haber una fuerza magnética
perpendicular al campo fijo.
La materia cargada que gira crea es un campo magnético que depende es del giro del
nucleo.
La radiación de radiofrecuencia debe estar polarizada circularmente en dirección de
precesión, para que esta entre en resonancia y absorba con un delta E necesario.
Precesión: Trayectoria circular alrededor de un campo magnético.
NMR es para análisis de estructura y ambiente quimico
La resonancia magnética nuclear se basa en la medida de la absorción de la radiación
electromagnética en la región de radiofrecuencias (4 a 600 mhz) donde están implicados
los núcleos de los átomos de los elementos y su relación con el resto de la materia, para
identificar estructuras de especies orgánicas como inorgánicas, análisis de suelos y
mezclas, determinación cuantitativa de isotopos y estudio químico de especies
absorbentes cuando se tienen espectros de líneas anchas.

Tipos de espectrómetros.
 Onda continúa. Son semejantes a los instrumentos ópticos de absorción, se registra
la señal de absorción a medida que varía lentamente la frecuencia de la fuente.
 Impulsos de transformada de Fourier. La muestra se irradia periódicamente con
bandas de radiación de radiofrecuencia, las cuales atraviesan el campo
 perpendicularmente, y producen una señal de dominio de tiempo la cual se transforma
con Fourier a una señal de dominio de frecuencia para obtener un espectro análogo.
Descripción cuántica: Los núcleos giran alrededor de un eje y poseen momento
magnético, implicando que tengan (2I +1) estados discretos, que en ausencia de un
campo magnético externo los distintos estados tienen la misma energía, por lo tanto se
considera que los núcleos tienen dos números cuánticos magnéticos, m = + ½ estado
fundamental o estable y m = - ½ estado excitado o metaestable.
Cuando un núcleo con números cuánticos magnéticos m = + ½ y m = - ½ es sometido a
un campo magnético externo Bo su momento magnético tiene a orientarse al estado de
menor energía (m = + ½), cuando el campo es muy grande el vector resultante estaría en
la misma dirección o en la dirección contraria al campo magnético aplicado.
Precesión de los núcleos: Cuando una partícula rotatoria se mueve en una trayectoria
circular alrededor del campo magnético debido a una fuerza aplicada por el campo sobre
el eje de rotación.

Proceso de absorción: Es necesario colocar el analito en un campo magnético intenso

para que aparezcan los estados de energía de los núcleos que pueden absorber, como
consecuencia de un desdoblamiento de los niveles de energía o cambio brusco en el
momento magnético que esta orientado en la dirección del campo a un estado opuesto.
Por lo tanto cuando un núcleo absorbe energía de radiofrecuencias el Angulo de
precesión cambia, implicando que sea necesaria una fuerza perpendicular al campo
magnético fijo que se mueva en fase con el dipolo magnético y con su misma frecuencia
para poder cambiar el espín.
La orientación de este campo magnético define la dirección de giro del núcleo, en donde
para pasar de un estado magnético a otro, se requiere de una diferencia de energía
potencial especifica para cada núcleo, con un ambiente químico determinado, que es
distinto para cada grupo funcional.
La radiación polarizada circularmente (Radiación de radiofrecuencias) es la única capaz
de ser absorbida por un núcleo, la cual debe tener la misma frecuencia angular y el mismo
radio de giro y debe girar en la misma dirección de precesión. Por costos, por lo general
se utilizan campos magnéticos altos y se varía la frecuencia.
Sistema saturado: Cuando todos los núcleos se encuentran excitados, por ende no hay
absorción, y esto se da por que la velocidad de excitación es rápida y la velocidad de
relajación es lenta.
Ensanchamientos de línea: Se presenta cuando se tienen velocidades de relajación
altas o tiempos de vida cortos, los cuales implican baja resolución.

Relajación.
 Longitudinal o Espín – Red. El nucleo le transfiere su energía a la red. Se da en gases
y liquidos. Los núcleos que absorben forman parte de un conjunto mayor de átomos
que constituyen la muestra, y contiene un número infinito de componentes
magnéticas, las cuales proporcionan relajación. Depende de la relación giromagnética
y de la movilidad de la red. Se requiere que la materia no sea viscosa para
favorecerla, debido a que aumenta el tiempo de relajación.
 Transversal o Espín – Espín. Un nucleo excitado le pasa su energía a otro nucleo que
este cerca. Aumenta la viscosidad. Interacción entre moléculas vecinas que tienen la
misma velocidad de precesión pero un estado cuántico magnético diferente,
conduciendo a un intercambio de los estados cuánticos de los núcleos, mientras unos
se excitan otros se relajan, disminuyendo el tiempo de vida promedio y generando
ensanchamiento de línea. Es favorecida por material viscoso.
Transformada de Fourier: Los núcleos que están en un intenso campo magnético, se
someten periódicamente a impulsos muy cortos de una radiación de radiofrecuencia
intensa, los núcleos retornan a sus estados originales emitiendo una señal de
radiofrecuencia de dominio de tiempo (señal de caída de libre inducción). Esta señal
puede detectarse con una bobina radioreceptora que esta perpendicular al campo, se
analizan los datos en un ordenador y la resultante se convierte en una señal de dominio
de frecuencia con una transformada de Fourier.
Caída de libre inducción: Al producirse la relajación, la señal disminuye
exponencialmente y se aproxima a cero a medida que el vector magnético se aproxima al
externo. Esta señal que es una señal de dominio de tiempo, y se modula por una función
seno de frecuencia.
Tipos de espectros RMN. Intensidad (Absorción) vs Desplazamiento químico.
Existen varios tipos de espectros de resonancia magnética nuclear, pero por lo general se
clasifican como de línea ancha o de alta resolución:
 En función de la clase del instrumento utilizado.
 En función del tipo de núcleo implicado
 En función del estado físico de la muestra.
 En función del entorno del núcleo en el analito.
 En función del uso que se le de a los datos.
Espectros de líneas anchas: Son aquellos en que la anchura de banda de la fuente de
líneas es suficientemente grande como para enmascarar la estructura fina debida al
entorno químico. Son útiles para determinación cuantitativa de isotopos y para estudiar el
entorno químico de las especies absorbentes. El campo lo genera un iman. El equipo es
mas barato.
Espectros de alta resolución: Se utilizan instrumentos capaces de distinguir diferencias
de frecuencia muy pequeñas, que producen picos como consecuencia de los efectos del
entorno químico. Se ve afectada fuertemente por su entorno químico, por el núcleo y
electrones vecinos. Iman de alta fuerza
Desplazamiento químico: Posición de los picos de absorción de los diferentes grupos
funcionales, los cuales están medidos unos a otros de derecha a izquierda. El
desplazamiento químico depende del movimiento de los electrones, puesto que estos
generan campo magnético ba, y son los responsables de que ocurra absorción en un
punto diferente al de referencia, todo depende del ambiente químico.
Cuando se presenta un desplazamiento hacia la izquierda, el campo ba se suma al campo
magnético externo implicando que se requiera menos energía para la absorción del grupo
funcional. Cuando el desplazamiento se da hacia la derecha, el campo ba se resta al de
referencia, necesitando mayor energía para generar el pico de absorción.
Protones equivalentes: Tienen desplazamientos químicos idénticos y de igual forma
idénticas constantes de acoplamiento. Si hay mas de un protón de hidrogeno en el mismo
grupo funcional estos serian equivalentes al estar en el mismo ambiente químico. CH3
Desdoblamiento espín – espín: De acuerdo a la orientación de los espines de los
protones, se presenta un apantallamiento en los picos de los grupos funcionales,
implicando que si están en la misma dirección del campo externo, se genera un pico hacia
la derecha, si están en dirección contraria, se forma un pico antes, y los espines que se
encuentran en direcciones contrarias estarían en un pico central y se sumaria.
Multiplicidad  Numero de picos = n + 1, n numero de protones equivalentes.
En un espectro magnético de varios grupos funcionales, los picos de un grupo vecino son
los que afectan al que estamos analizando, por lo tanto la cantidad de picos que se tienen
ayudan a formar la estructura química de la muestra que estamos analizando.

La multiplicidad del CH2 es 2+1, por lo

tanto se formaran 3 picos en el grupo OH
y CH3.
Pero para analizar el grupo CH2 debo
tener en cuenta a los dos vecinos, por lo
tanto la multiplicidad del OH es 1+1 y del
CH3 3+1, lo que implica que la cantidad
de picos que tendrá el CH2 es 2*4=8
El agua acelera la cinética implicando que se distorsione el efecto de los vecinos, por lo
tanto en la muestra anterior si tuviera humedad, se formaría un singulete en el pico del
OH.
Para el análisis de muestras solidas se requiere un campo magnético muy grande de
modo que permita identificar claramente los picos, de lo contrario el espectro quedaría
con los picos muy pegados, poco desplazamiento.
Constante de apantallamiento: Se determina por la densidad de electrones y la
distribución alrededor del núcleo, la densidad electrónica depende de la estructura del
compuesto que contiene el núcleo.
Espectroscopia Mossbauer
Es una medida cualitativa y cuantitativa de la superficie de la muestra.
Esta basada en los nucleos y transiciones entre niveles de energia nucleares que
dependen del momento dipolar eléctrico y magnetico
Mossbauer descubrió la emisión sin retroceso de rayos gamma y la absorción por los
núcleos. Se cree que debido a la conservación del momento, cuando los núcleos emiten y
absorben pierden parte de la energía del rayo gamma por retroceso, pero si los átomos
de absorción y de emisión están integrados en una red (desde el punto de vista de la
mecánica cuántica de un sólido) el retroceso, debido a los rayos gamma de hecho, puede
ser absorbido por el sólido entero, haciendo que la pérdida de energía insignificante.
El efecto Mossbauer indica que cuando algunos átomos se mantienen firmemente en
estructuras cristalinas atómicas (amarrar el núcleo), la radiación gamma emitida por sus
núcleos está muy cerca de ser el retroceso libre. Esto implica que el fotón gamma emitido
tiene la frecuencia exacta para producir la excitación de otro núcleo de estructura
cristalina cuando lo choca, y de esta forma entran en resonancia.
Se puede dar información muy precisa sobre el producto químico, estructural, magnética y
el tiempo dependen de las propiedades de un material. Sin embargo, dos obstáculos
principales en la obtención de esta información: los hiperfinos de las interacciones entre el
núcleo y su entorno son muy pequeñas, y el retroceso del núcleo como el de rayos
gamma emitido o absorbido evita la resonancia.
Energía de retroceso: Se genera por la ley de acción – reacción. Cunado un nucleo
reactivo inmovilemite radiación se mueve al lado contrario de esta, esta radiación la
absorbe un nucleo vecino moviéndose en dirección de la radiación.
En otras palabras, Un núcleo, durante la emisión o absorción de un rayo gamma,
retrocede debido a la conservación del momento. El rayo gamma emitido tiene menos
energía que la transición nuclear, pero para ser absorbida resonantemente debe ser
mayor que la energía de transición debido a la retracción del núcleo absorbente. Para
lograr la resonancia de la pérdida de la energía de retroceso debe ser superado de alguna
manera.

Para disminuir la energía de retroceso se disminuye la temperatura para restringir la

movilidad y de esta forma hacer más rígidos los enlaces los cuales afectan el núcleo y
permite la caracterización con una mayor resolución, si aumento la temperatura, relajo los
enlaces y aumenta la energía de retroceso.

A medida que los átomos se mueven debido al movimiento térmico aleatorio la energía de
rayos gamma tiene una extensión de los valores de energía causados por el efecto
Doppler. Esto produce un perfil de energía de rayos gamma para producir una señal de
resonancia, la cual se da a una aceleración constante, por lo tanto la variación se realiza
en la velocidad a cualquier tiempo, y por ende una variación en la longitud de la onda
(conocida), permitiendo que la radiación pase de monocromática a policromatica.
Delata emisión igual a delta de absorción, hay resonancia por lo tanto absorción. (Ver
color rojo)

Cuando los átomos están dentro de una matriz sólida la masa efectiva del núcleo es
mucho mayor, implicando que la energía de rayos gamma sea lo suficientemente
pequeña como para el retroceso del núcleo, haciendo que la energía de retroceso
prácticamente nula. Si el emisor y los núcleos absorbentes son en una matriz sólida de la
emitida y absorbida de rayos gamma es la misma energía de resonancia.
Si emitiendo y absorbiendo los núcleos son idénticos en entornos cúbicos, entonces las
energías de transición son idénticas y esto produce un espectro.

Como resonancia sólo se produce cuando la energía de transición del emisor y el núcleo
absorbente coincidir exactamente el efecto es isótopo específico. El número relativo de
retroceso libres de eventos es fuertemente dependiente de la energía de rayos gamma y
por lo que el efecto Mossbauer sólo se detecta en isótopos con muy bajos estados
excitados.
La espectroscopia Mossbauer solo se utiliza en solidos, debido a que poseen altas
fuerzas de enlace que permiten eliminar en gran medida la energía de retroceso,
permitiendo comparar lo que emite la fuente con lo que absorbe la muestra. En los gases
los núcleos no se pueden amarrar porque las fuerzas de enlace son mínimas y en los
líquidos hay mucho movimiento.

Interacciones nucleares hiperfinas: Todas estas alteraciones del medio ambiente

nuclear que producen un efecto observable, variaciones minúsculas de energía, de los
campos magnéticos en el núcleo e incluso deformaciones o asimetrías en la forma de la
red que encierra el átomo.
 Desplazamiento isómero.
El cambio isómerico surge debido al volumen del núcleo y la densidad de carga de
electrones dentro de ella, conduciendo a un monopolo (Culombio) alterando los
niveles de energía. Esto desplaza el espectro positiva o negativamente dependiendo
de la densidad de electrones que tenga el ambiente químico (+ menor volumen del
núcleo, - mayor volumen del núcleo, mayor densidad). El cambio isómero es útil para
determinar los estados de valencia, unión de ligandos, blindaje de electrones y la
energía de electrones de grupos electronegativos.
 División de cuadrupolo.
Los núcleos con un momento angular número cuántico I> 1/2 tiene una distribución de
carga no esférica. Esto produce un momento cuadrupolar nuclear. En presencia de
un campo eléctrico asimétrico producido por una distribución de carga asimétrica se
dividen los niveles de energía nuclear, produciendo un doblete de la misma intensidad,
la separación entre estos corresponde al ∆E de los espines.

 División magnética.
En presencia de un campo magnético, el momento de espin nuclear experimenta una
interacción dipolar con el campo magnético es decir desdoblamiento Zeeman, por lo
tanto se tiene en cuenta la magnitud y la dirección del espin produciendo un sexteto.
El total de campo magnético efectivo: B ef = (B + B orbital de contacto + B dipolar) + B aplicada
B es debido a la rotación en los electrones polarizantes de la densidad de espín en el
núcleo, B orbital es debido al momento orbital en esos electrones, y B dipolar es el campo
dipolar debido a la rotación de los electrones.
 Un lado de espectro es el espejo de otro
 La superposición de picos implica una decombolucion del envolvente para identificar
que se tiene, por lo tanto se realiza una comparación con la literatura.
 Alta resolución.
 Permite estudiar parámetros cristalográficos de la muestra.
 Se puede realizar la técnica por transmitancia, o por reflexión (CEMS) cuando se
realiza sobre alguna superficie.
Formas de hacer mossbauer: transmisión: Mide lo que se transmite, la preparación de
la muestra se coloca en una pelicula delgada de la muestra sobre una superficie no
absorbente.
CEMS REFLEXION: Capas superficiales, la muestra es sólida.

ESPECTROSCOPIA DE RAYOS X
Dan información sobre estructura y composición a través de la medida de la emisión,
absorción, dispersión, fluorescencia y difracción de la radiación electromagnética.

PREGUNTAS TIPO PARCIAL 2

SEM:Información Morfológica, Superficial, Topográfica, Composición.
Modos de Operación:
 Electrones electrodispersos, alta energía.
 Electrones secundarios, baja energía.
Preparación de la Muestra
 La muestra debe ser seca.
 Muestra conductora para que no se acumule energía electrostática, si no es
conductora se recubre con una película delgada de oro
 La muestra debe ser solida para mantener el vacio de la columna.

TEM Mayor resolución, se puede ver la imagen en tiempo real.

Información Estructural, Morfologia interna de la muestra, Composicion, Analisis Quimico.
Modos de Operación:
 Contraste por Difusion. A mayor densidad menor numero de electrones que atraviesan
el material, no depende de la topografía.
 Contraste por Difraccion. Depende de la cristalinidad de la muestra, solo difractan los
planos que cumplen la ley de Bragg.
Preparación de la Muestra
 Metodo electroquímico. Inestable.
 Metodo Ionico. A través de un plasma se van quitando capas de la muestra para
disminuir el espesor.
 FIB. Haz ionico empujado, realiza un desvaste en profundidad.
 Ultramicroatomico. Muestras biológicas, utiliza una cuchilla de diamante, genera
cortes finos y uniformes.

STEMLa información va al detector y por medio de pixeles forma la imagen.
Información Estructural, Morfologia interna de la muestra, Composicion, Analisis Quimico.
Preparación de la Muestra
 Metodo electroquímico. Inestable.
 MetodoIonico. A través de un plasma se van quitando capas de la muestra para
disminuir el espesor.
 FIB. Haz ionico empujado, realiza un desvaste en profundidad.
 Ultramicroatomico. Muestras biológicas, utiliza una cuchilla de diamante, genera
cortes finos y uniformes.

AFMRequiere de un laser y un detector de los rayos incidentes de este, para captar las
intensidades que representan el movimiento del Cantiliever.
Imágenes topográficas, superficial, fuerzas interatómicas.
Modos de Operación:
 Altura constante (Contacto). Base del Cantiliver constante, varia la posición de la
punta.
 Fuerza constante (Contacto). Deflexion constante, la variación la realiza el Cantiliver.
 Fuerza lateral (Contacto). Permite tomar información diferente de la muestra con un
barrido lateral. El detector se encuentra dividido en cuatro partes.
 No contacto. No daña la muestra, oscila a una distancia mayor la punta y la muestra,
puede utilizar una película de agua.
 Modulacion de la frecuencia (No contacto).
 Semicontacto – Contacto intermitente. Punta con oscilación senoidal que entra en
contacto temporal con la muestra, no la afecta.
 Barrido de Fase. Se cuenta con dos ondas, una del controlador y la otra que sale de la
muestra, cuando se presenta un desfase implica un cambio en la naturaleza del
material, debidas por lo general por inclusiones.

Preparación de la Muestra
 No es necesaria, lo único es que no sean demasido rugosas.

STM
Propiedades superficiales, Aprovecha la ley de Ohm.0
Efecto túnel, voltaje aplicado debe ser suficiente para vencer la resistencia del aire y
permitir el paso de corriente, y por ende paso de electrones a través de los atomos del
aire.
Modos de Operación:
 Altura constante. A menor distancia mayor corriente, altura entre a y b diferente.
 Corriente constante. Altura entre a y b constante

Preparación de la Muestra
 La muestra debe ser conductora.

Microscopía electrónica

La potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda

de la luz visible. El microscopio electrónico utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado
que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz pueden
mostrar estructuras mucho más pequeñas. La longitud de onda más corta de la luz visible
es de alrededor de 4.000 ángstroms (1 ángstrom es 0,0000000001 metros). La longitud
de onda de los electrones que se utilizan en los microscopios electrónicos es de alrededor
de 0,5 ángstroms.

Todos los microscopios electrónicos cuentan con varios elementos básicos. Disponen
de un cañón de electrones que emite los electrones que chocan contra el espécimen,
creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnéticas para crear campos que
dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los
microscopios ópticos no funcionan con los electrones. El sistema de vacío es una parte
relevante del microscopio electrónico. Los electrones pueden ser desviados por las
moléculas del aire, de forma que tiene que hacerse un vacío casi total en el interior de un
microscopio de estas características. Por último, todos los microscopios electrónicos
cuentan con un sistema que registra o muestra la imagen que producen los electrones.

Hay dos tipos básicos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de

transmisión (Transmission Electron Microscope, TEM) y el microscopio electrónico de
barrido (Scanning Electron Microscope, SEM).

Microscopio electrónico de transmisión (TEM): permite la observación de muestra en

cortes ultrafinos. Un TEM dirige el haz de electrones hacia el objeto que se desea
aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo
atraviesan formando una imagen aumentada del espécimen. Para utilizar un TEM debe
cortarse la muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de ángstroms. Se
coloca una placa fotográfica o una pantalla fluorescente detrás del objeto para registrar
la imagen aumentada. Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar
 un objeto hasta un millón de veces.
SEM Un microscopio electrónico de barrido crea una imagen ampliada de la
superficie de un objeto. No es necesario cortar el objeto en capas para observarlo con
un SEM, sino que puede colocarse en el microscopio con muy pocos preparativos. El
SEM explora la superficie de la imagen punto por punto, al contrario que el TEM, que
examina una gran parte de la muestra cada vez. Su funcionamiento se basa en recorrer
la muestra con un haz muy concentrado de electrones, de forma parecida al barrido de
un haz de electrones por la pantalla de una televisión. Los electrones del haz pueden
dispersarse de la muestra o provocar la aparición de electrones secundarios. Los
electrones perdidos y los secundarios son recogidos y contados por un dispositivo
electrónico situado a los lados del espécimen. Cada punto leído de la muestra
corresponde a un píxel en un monitor de televisión. Cuanto mayor sea el número de
electrones contados por el dispositivo, mayor será el brillo del píxel en la pantalla. A
medida que el haz de electrones barre la muestra, se presenta toda la imagen de la
misma en el monitor. Los microscopios electrónicos de barrido pueden ampliar los
objetos 200.000 veces o más. Este tipo de microscopio es muy útil porque, al contrario
que los TEM o los microscopios ópticos, produce imágenes tridimensionales realistas
de la superficie del objeto.

Un microscopio electrónico de barrido y transmisión (Scanning Trasnmission Electron

Microscope, STEM) combina los elementos de un SEM y un TEM, y puede mostrar los
átomos individuales de un objeto.

Microscopio electrónico de transmisión

Un microscopio electrónico de transmisión (TEM, por sus siglas en inglés, o MET, en

español) es un microscopio que utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto,
debido a que la potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la
longitud de onda de la luz visible. Lo caracteristico de este microscopio es el uso de una
muestra ultrafina y que la imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra.
Estructura

Debido a que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz
visible, pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas.

Las partes principales de un microscopio electrónico son:

 Cañón de electrones, que emite los electrones que chocan o atraviesan el

espécimen (dependiendo que tipo de microscopio electrónico es), creando una
imagen aumentada.
 Lentes magnéticas para crear campos que dirigen y enfocan el haz de
electrones, ya que las lentes convencionales utilizadas en los microscopios ópticos
no funcionan con los electrones.
 Sistema de vacío es una parte muy importante del microscopio electrónico.
Debido a que los electrones pueden ser desviados por las moléculas del aire, se
debe hacer un vacío casi total en el interior de un microscopio de estas
características.
 Placa fotográfica o pantalla fluorescente que se coloca detrás del objeto a
visualizar para registrar la imagen aumentada.
 Sistema de registro que muestra la imagen que producen los electrones, que
suele ser una computadora.

El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de electrones dirigido hacia el

objeto que se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por
el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra.

Cañón de electrones

De arriba a abajo, el TEM consiste en una fuente de emisión, que puede ser un filamento
de tungsteno o bien una fuente de hexaboruro de lantano (LaB6). Para el caso del
tungsteno el filamento puede ser o bien en la forma de una horquilla de pelo o bien
pequeño y en forma de púa. Las fuentes de LaB6 utilizan un pequeño monocristal.
Conectando dicho cañón a una fuente de alto voltaje (~120kV para muchas aplicaciones)
comenzará a emitir electrones hacia el vacío. Esta extracción de electrones suele
reforzarse con la ayuda de un cilindro Wehnelt. Una vez extraídos, las lentes de la parte
superior del TEM manipulan los haces de electrones permitiendo su focalización al
tamaño deseado y su localización sobre la muestra.

La manipulación de los electrones se consigue mediante la combinación de dos efectos

físicos. La interacción de los electrones con un campo magnético hace que estos se
muevan de acuerdo a la regla de la mano derecha. Este efecto permite que los electrones
emitidos puedan ser manipulados por medio de electroimanes. Esta técnica permite la
formación de una lente magnética de distancia focal variable, dependiendo de la
distribución del flujo magnético. Además un campo eléctrico puede deflectar la trayectoria
de los electrones en un ángulo fijo. Mediante dos deflexiones seguidas pueden
desplazarse lateralmente las trayectorias de los electrones. Esta técnica permite el
desplazamiento lateral de los haces de electrones el el TEM, siendo esta operación
especialmente importante para el barrido de los haces en la variante STEM. De la
combinación de estos dos efectos así como del empleo de un sistema de visualización (tal
como una pantalla de fósforo) se obtiene el nivel de control de los haces requerido para la
operación del TEM.

Las lentes del TEM permiten realizar la convergencia de los haces y el control del ángulo
de la misma. Dicho control se ejerce modificando la cantidad de corriente que fluye a
traves de las lentes cuadrupolares y hexapolares y permite modificar los aumentos del
TEM. La lente cuadrupolar consiste en un conjunto de cuatro bobinas situadas en los
vértices de un cuadrado. La lente hexapolar simplemente incrementa el grado de simetría
del campo resultante.

Tipicamente un TEM contiene tres conjuntos de lentes con muchas posibles variantes en
la configuración de las lentes, en particular la de TEM con filtrado energético o EFTEM.
Los conjuntos se denominan respectivamente lentes condensadoras o condensador,
lentes de objetivo o simplemente objetivo y lentes de proyección o proyector. Las lentes
condensadoras se encargan de la formación inicial del haz tras la emisión de los
electrones. Las lentes de objetivo focalizan el haz sobre la muestra y finalmente las lentes
de proyección se encargan de expandir el haz reflejado hacia la pantalla de fósforo u otro
dispositivo de visualización tal como película. Los aumentos del TEM vienen dados por la
razon de las distancias entre la muestra y el plano imagen del objetivo.

Es de apreciar que la configuración de un TEM varía significativamente según su

implementación. Así algunos fabricantes usan configuraciones especiales de lentes, tales
como en instrumentos corregidos de aberración esférica, en particular en aplicaciones de
alto voltaje en TEM de emisión de campo.

El sistema de visualización en un TEM puede consistir en una pantalla de fósforo para

observación directa por el operador y opcionalmente en un sistema de registro de
imágenes tales como película o una retina CCD combinada con una pantalla de fósforo.
Normalmente estos sistemas de visualización pueden ser intercambiados a conveniencia
del operador.

Sistema de vacío

Para conseguir el flujo ininterrumpido de electrones, el TEM debe operar a bajas

presiones, tipicamente en el orden de 10 − 4 a 10 − 8 kPa. La necesidad de esto se debe a
dos razones: primero, permitir una diferencia de voltaje entre el cátodo y tierra sin que se
produzca un arco voltáico. Segundo, reducir la frecuencia de las colisiones de los
electrones con los átomos del aire a niveles despreciables. Ya que el TEM,
contrariamente a un CRT, es un sistema que debe permitir la reposición de componentes,
la inserción de muestras y, particularmente en modelos antiguos, el cambio de carrete de
película, se hace imprescindible la posibilidad de reproducir el vacío regularmente. Por
ello los TEMs están equipados con sistemas de bombeo completos y su sellado de vacío
no es permanente.

Procedimiento para su uso

Para utilizar un microscopio electrónico de transmisión debe cortarse la muestra en capas

finas, no mayores de un par de miles de ángstroms. Los microscopios electrónicos de
transmisión pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces.
Base teórica

Teóricamente la resolución máxima d alcanzable con un microscopio óptico se encuentra

en principio limitada por la longitud de onda λ de la luz que se utiliza para examinar la
muestra, y por la apertura numérica NA del sistema.

Los físicos de principios del siglo XX teorizaron sobre posibles maneras de superar las
limitaciones impuestas por la relativamente grande longitud de onda de la luz visible (de
400 a 700 nm) mediante el uso de electrones. Como toda la materia los electrones
exhiben propiedades tanto de onda como de partícula (como ya propuso Louis-Victor de
Broglie. Como consecuencia se puede hacer que un haz de electrones se comporte como
un haz de radiación electromagnética. La longitud de onda del electron se obtiene
igualando la ecuación de de Broglie a la energía cinética de un electrón. Debe introducirse
una corrección relativista adicional, ya que los electrones en un equipo TEM alcanzan
velocidades próximas a la de la luz c.

En un microscopio electrónico los electrones se producen generalmente en un filamento,

normalmente de tungsteno, parecido al de una bombilla, mediante un proceso conocido
como emisión termoiónica o bien mediante emisión de campo. Los electrones emitidos se
aceleran entonces con ayuda de un potencial eléctrico (medido en V, o voltios) y se
focalizan mediante lentes electrostáticas o electromagnéticas.

Microscopio electrónico de barrido (SEM)

El Microscopio electrónico de barrido (o SEM, de Scanning Electron Microscopy), es

aquel que usa electrones en lugar de luz para formar una imagen. Tiene una gran
profundidad de campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la
muestra. También produce imágenes de alta resolución, que significa que características
espacialmente cercanas en la muestra pueden ser examinadas a una alta magnificación.
La preparación de las muestras es relativamente fácil pues la mayoría de SEMs sólo
requieren que estas sean conductoras.

En el microscopio electrónico de barrido la muestra es recubierta con una capa de metal

delgado, y es barrida con electrones enviados desde un cañón. Un detector mide la
cantidad de electrones enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra, siendo
capaz de mostrar figuras en tres dimensiones, proyectados en una imagen de TV. Su
resolución está entre 3 y 20 nm, dependiendo del microscopio. Inventado en 1931 por
Ernst Ruska, permite una aproximación profunda al mundo atómico. Permite obtener
imágenes de gran resolución en materiales pétreos, metálicos y orgánicos. La luz se
sustituye por un haz de electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen
conductoras metalizando su superficie. Los electrones secundarios se asocian a una
señal de TV.

Antecedentes

Los primeros instrumentos desarrollados para este propósito, fueron microscópios ópticos,
que van desde una simple lupa, hasta un microscopio compuesto. Sin embargo, aún en el
mejor instrumento óptico, la resolución está limitada a la longitud de onda de la luz que se
utilice, que en este caso es la luz violeta, cuya longitud de onda es de aproximadamente
400 nanómetros; por lo tanto, los detalles más pequeños que pueden resolverse, deberán
estar separados no menos de esta longitud. En términos de amplificación, esto quiere
decir que no podemos amplificar más de 1,000 veces.

Una salida inmediata a esta limitante de resolución, es utilizar alguna radiación de longitud
de onda más corta que la de la luz violeta. Los candidatos inmediatos son los rayos X,
que se caracterizan por una longitud de onda del orden de 0.15 nanómetros;
desafortunadamente éstos tienen la gran desventaja de ser absorbidos rápidamente por
lentes de vidrio y de no poder ser desviados por lentes magnéticas (Además de las
precauciones que debería tener el operador).

Otra posibilidad es aprovechar el comportamiento ondulatorio de los electrones

acelerados por alguna diferencia de potencial. Sea el caso, por ejemplo, de electrones
acelerados en un campo de 100,000 voltios que presentan comportamiento ondulatorio
con una longitud de onda de 0.0037 nm (3.7 picómetros), lo que en principio permitiría
tener un aparato que resolviera detalles del mismo orden, lo cual es más de lo que se
necesita para resolver detalles atómicos, puesto que los átomos en un sólido están
separados en un orden de 0.2 nm. Sin embargo, en la práctica, detalles inherentes a la
técnica de observación, o defectos en el maquinado de las piezas polares que producen
aberraciones.

Funcionamiento

En el microscopio electrónico de barrido es necesario acelerar los electrones en un campo

eléctrico, para aprovechar de esta manera su comportamiento ondulatorio, lo cual se lleva
a cabo en el cañón del microscopio, donde se aceleran por una diferencia de potencial de
1,000 a 30,000 voltios. Los electrones acelerados por un voltaje pequeño son utilizados
para muestras muy sensibles, como podrían ser las muestras biológicas sin preparación
adicional, o muestras muy aislantes. Los altos voltajes se utilizan para muestras
metálicas, ya que éstas en general no sufren daños como las biológicas, y de esta
manera se aprovecha la menor longitud de onda para tener una mejor resolución. Los
electrones acelerados salen del cañón, y son enfocados por las lentes condensadora y
objetiva, cuya función es reducir la imagen del filamento, de manera que incida en la
muestra un haz de electrones lo más pequeño posible (para así tener una mejor
resolución). Con las bobinas deflectoras se barre este fino haz electrones sobre la
muestra, punto por punto y línea por línea.

Cuando el haz incide sobre la muestra, se producen muchas interacciones entre los
electrones del mismo haz, y los átomos de la muestra; puede haber por ejemplo,
electrones rebotados como las bolas de billar. Por otra parte, la energía que pierden los
electrones al "Chocar" contra la muestra puede hacer que otros electrones salgan
despedidos (electrones secundarios), y producir rayos X, electrones Auger, etc. El más
común de éstos es el que detecta electrones secundarios, y es con el que se hacen la
mayoría de las imágenes de microscopios de barrido.

Podemos también adquirir un detector de Rayos X, y aprovechar la característica de que

los rayos X tienen la "firma" del elemento que los produjo, y por lo tanto podemos hacer
un análisis químico.

Utilización

Son ampliamente utilizados en la biología celular. Aunque permite una menor capacidad
de aumento que el microscopio electrónico de transmisión, este permite apreciar con
mayor facilidad texturas y objetos en tres dimensiones que hayan sido pulverizados
metálicamente antes de su observación. Por esta razón solamente pueden ser
observados organismos muertos, y no se puede ir más allá de la textura externa que se
quiera ver. Los microscopios electrónicos sólo pueden ofrecer imágenes en blanco y
negro puesto que no utilizan la luz.

Este instrumento permite la observación y caracterización superficial de materiales

inorgánicos y orgánicos, entregando información morfológica del material analizado. A
partir de él se producen distintos tipos de señal que se generan desde la muestra y se
utilizan para examinar muchas de sus características. Con él se pueden realizar estudios
de los aspectos morfológicos de zonas microscópicas de diversos materiales, además del
procesamiento y análisis de las imágenes obtenidas.

Microscopio de fuerza atómica

El Microscopio de fuerza atómica (AFM, de

sus siglas en inglés Atomic Force Microscope)
es un instrumento mecano-óptico capaz de
detectar fuerzas del orden de los piconewtons. Al
rastrear una muestra, es capaz de registrar
continuamente su topografía mediante una
sonda o punta afilada de forma piramidal o
cónica. La sonda va acoplada a un listón o
palanca microscópica muy flexible de sólo unos
200 µm. El microscopio de fuerza atómica ha
sido esencial en el desarrollo de la
nanotecnología, para la caracterización y
visualización de muestras a dimensiones
nanométricas (1x10 − 9m = 1nm).

Comparación del AFM con otros

microscopios
Microscopio Óptico

El microscopio óptico es una herramienta muy útil para obtener imágenes de muestras
orgánicas e inorgánicas, pero está limitado para una resolución de 1mm a 1 micra.

Microscopio electrónico

El microscopio electrónico tiene una resolución entre 1mm y 1nm. Es, por lo tanto, idóneo
para la determinación de estructuras a nivel molecular y atómico. La resolución no está
limitada por la difracción, pero sí por las lentes. El microscopio de campo cercano tiene
una resolución todavía mayor: entre 1µm y 1A.

TEM

El Microscopio electrónico de transmisión, tiene las siguientes características que lo

hacen muy útil:

 Resolución atómica.
 Puede determinarse estructuras en 2 dimensiones.
 Interacción electrones a electrones.

SEM

El Microscopio electrónico de barrido tiene las siguientes características:

 Resolución atómica.
 Requiere vacío.
 Debe cubrirse a menudo el espécimen.
 Permite características superficiales.

STM

El microscopio de efecto túnel (STM) es un instrumento que permite visualizar regiones de

alta o baja densidad electrónica superficial, y de ahí inferir la posición de átomos
individuales o moléculas en la superficie de una red. La “observación” atómica se ha
vuelto una tarea común en muchos laboratorios debido al bajo costo de este tipo de
microscopía en comparación con la microscopía electrónica.

Las técnicas de microscopía de barrido por sondeo (SPM: Scanning probing microscopy)
que incluyen al STM y al AFM se utilizan en áreas de la ciencia que van desde la biología
hasta la física del estado sólido.

Consideraciones

 Las muestras deben ser conductoras.

 Algunas superficies parecen demasiado lisas al STM, la altura aparente o
corrugación es de 1/100 a 1/10 diámetros atómicos.
  Entonces, para resolver átomos individuales la distancia entre punta y muestra
debe mantenerse constante a menos de 1/100 de diámetro atómico o hasta 0.002
nm., por ello el STM debe aislarse de las vibraciones.
 Debe tomarse en cuenta que el resultado es una visualización que permite
conocer características de la muestra.
 No es una fotografía de los átomos en la superficie. Los átomos parecen tener
superficies sólidas en las imágenes de STM, pero en realidad no las tienen.
 Sabemos que el núcleo de un átomo está rodeado de electrones en constante
movimiento. Lo que parece una superficie sólida es en realidad una imagen de un
conjunto de electrones.
 Las imágenes también dependen de ciertos mecanismos de interacción punta-
muestra que no se entienden bien hasta la fecha.
 Aún cuando no necesita alto vacío para su operación, es deseable para eliminar
contaminación y además una cámara de vacío aisla de vibraciones externas.

Instrumentación

Diagrama de un microscopio de
fuerza atómica

Los componentes de un AFM son:

 Diodo láser: Fuerza normal,

Fn=A+B-(C+D), y Fuerza
lateral, Fl=A+C-(B+D).
 Micropalanca
 Fotodiodo
 Tubo piezoeléctrico

Micropalanca

Históricamente las primeras palancas

tenían un tamaño de varios mm y
solían fabricarse con metal, por
ejemplo a partir de un hilo de
tungsteno con un extremo afilado y
doblado en ángulo recto para producir
la punta. Más tarde se hizo necesario,
para mejorar la velocidad de barrido
sin perder resolución, que las palancas
tuvieran masas cada vez menores y
simultáneamente frecuencias de
resonancia mayores. La solución a este problema se halló en la microfabricación de las
palancas.

Las micropalancas se producen en la actualidad empleando métodos de microfabricación

heredados inicialmente de la industria microelectrónica como litografía de superficie y
grabados reactivos de plasma de iones (RIE y DRIE siglas en inglés de Reactive Ion
Etching y Deep Reactive Ion Etching). Las puntas suelen fabricarse a partir de
deposiciones de vapor de algún material idóneo sobre la palanca ya fabricada, en cuyo
caso el resultado suele ser una punta cónica o más comúnmente, cuando el silicio es el
material de elección, recurriendo a técnicas de grabado anisótropo. El grabado anisótropo
involucra el uso de una solución grabadora que excava el material sólo o preferentemente
en ciertas direcciones cristalográficas. De esta manera, es posible producir puntas
piramidales limitadas por planos cristalográficos del material.

La fuerza de la micropalanca viene dada por el fabricante y se determina por la ley de

Hooke. En este caso, la ley de Hooke se representa por la ecuación del resorte, donde se
relaciona la fuerza F ejercida por el resorte con la distancia adicional x producida por
alargamiento, del siguiente modo:

, siendo

El ruido de Johnson-Nyquist, también conocido como ruido térmico, es un factor

importante en la calibración de la micropalanca, pues está a su frecuencia de resonancia
por la temperatura.

Sensores de flexión

Existen actualmente distintos sistemas para medir la flexión del listón. El más común en
instrumentos comerciales es el llamado óptica en éste la flexión del listón se registra
mediante un haz láser que se refleja en la parte posterior de la micropalanca para luego
alcanzar un fotodetector. A este efecto, la mayor parte de las micropalancas (listones) de
AFM se fabrican actualmente con una capa de oro de unas decenas de nm de espesor en
su parte posterior para optimizar su reflectancia al haz del láser. Sin embargo
históricamente el primer sistema de detección usado fue un microscopio de STM (efecto
túnel). En este sistema una punta de STM era ajustada al listón siendo la flexión de este
medida a través de la variación en la corriente de túnel, ya que dicha corriente es
sensible a cambios subnanométricos en la distancia entre punta de STM y listón. La razón
de que se pensara inicialmente en este sistema es que en su origen el microscopio de
AFM se concibió como modificación del microscopio de STM para ser usado con
muestras electricamente aislantes ya que el microscopio de STM sólo funciona con
conductores. Posteriormente se pasó a sustituir este sistema de detección por un
interferómetro y finalmente se introdujo la palanca óptica. Más recientemente se han
incorporado nuevos métodos de detección basados en piezorresistividad o en medidas de
capacitancia. Sin embargo ninguno de estos métodos "electrónicos" alcanza los niveles
de resolución tanto espacial como temporal de la palanca óptica.

Por otra parte la palanca óptica presenta un problema de calibración que afecta
especialmente a las medidas de fuerza. Este se debe a la necesidad que se da en las
medidas de fuerza de registrar de forma precisa la flexión de la palanca en su extremo
libre. Ya que el fotodiodo solamente registra el desplazamiento del punto de laser sobre
su superficie es necesario calibrar este desplazamiento con una flexión real de la palanca
para poder obtener medidas de flexión. Este procedimiento conocido como calibración de
la sensibilidad se lleva a cabo imprimiendo una flexión conocida al extremo de la
micropalanca mientras simultaneamente se registra la señal del fotodiodo. La forma más
común de obtener una flexión conocida es presionar verticalmente el extremo de la
palanca contra una superficie rígida, asegurando así que el desplazamiento vertical de la
palanca equivale a flexión en su extremo.

Los métodos interferométricos o de efecto túnel no requieren de este procedimiento.

Unos de los aspectos más importantes en la resolución de las imágenes obtenidas por
AFM es la agudeza de la punta. Las primeras utilizadas por los precursores del AFM
consistieron en pegar el diamante sobre pedazos de papel de aluminio. Las mejores
puntas con radio de curvatura se encuentran alrededor de los 5nm.

Existen tres tipos de influencias para formar las imágenes:

 Ensanchamiento
 Compresión
 Interacciones punta-muestra: En no contacto, fuerzas electrostáticas y
magnéticas; en casi contacto, fuerzas de van der Waals; en contacto, capilaridad y
fuerzas de contacto.
 Aspecto del radio

Precisión

La resolución vertical del instrumento es de menos de 1 nm, y permite distinguir detalles

tridimensionales en la superficie de la muestra con una amplificación de varios millones de
veces.

Tipos de medidas, modos de operación y aplicaciones

El microscopio de AFM puede realizar dos tipos de medidas: imagen y fuerza.

 En el modo de imagen la superficie es barrida en el plano de la superficie (X-Y)

por la punta. Durante el barrido la fuerza interatómica entre los átomos de la punta
y los átomos en la superficie muestral provoca una flexión del listón. Esta flexión
es registrada por un sensor adecuado (normalmente balanza óptica) y la señal
obtenida se introduce en un circuito o lazo de realimentación. Este último controla
un actuador piezoeléctrico que determina la altura (Z) de la punta sobre la muestra
de forma que la flexión del listón se mantenga a un nivel constante (Normalmente
introducido por el operador). Representando la altura de la punta (Z) frente a su
posición sobre la muestra (X,Y) es posible trazar un mapa topográfico de la
muestra Z=Z(X,Y). La fuerza interatómica se puede detectar cuando la punta está
muy próxima a la superficie de la muestra.
 En medidas de fuerza la punta se hace oscilar verticalmente mientras se registra
la flexión del listón. La medida se expresa entonces representando fuerza (F)
frente a altura (Z) sobre la muestra. Las medidas de fuerza son útiles en estudios
 de fuerzas de adhesión y permiten estudiar a nivel de una sola molécula
interacciones específicas entre moléculas (ej: interacción antígeno-anticuerpo,
interacción entre hebras complementarias de ADN) o interacciones estructurales
de las biomoléculas (plegado de proteínas) así como caracterizar la elasticidad de
polímeros. También es útil en estudios de indentación de materiales blandos
(polímeros) que permitan caracterizar propiedades elásticas de la muestra como el
módulo de elasticidad o viscoelásticas.

Modos de operación en imagen

Modos de operación: a. Modo contacto, b. Modo de no contacto, c. Modo de repiqueteo

Modo contacto

En el barrido en modo contacto (figura a) la fuerza entre punta y muestra se mantiene

constante, manteniendo una constante de deflexión. La deflexión de la punta estática se
utiliza como una señal de retroalimentación.

La fuerza de adhesión es una fuerza fundamental en el modo contacto:

Fadh = 4πRγLcosθ

Donde γL es la tensión superficial del agua, θ es el ángulo del menisco entre punta y
muestra, y R hace referencia al radio de la punta y de la muestra.

En condiciones normales, la fuerza de adhesión es de unos 7nN. La fuerza de adhesión

es uno de los mayores inconvenientes del modo contacto en aire. En el modelo de Hertz
se asume que la superficie es suave y continua, que el área de contacto es pequeña, y
que no existen fuerzas de fricción ni adhesión. Sin embargo, la fuerza de adhesión es muy
importante a escala nanométrica, afectando especialmente a la resolución lateral. Para
superar este inconveniente, se utiliza el el Jumping mode, un modo de contacto en el
que se evitan las fuerzas laterales. El AFM en líquido supera también este problema, pues
en líquido no existen fuerzas de adhesión.

El principal problema del modo contacto es que las muestras biológicas (blandas y
delicadas) pueden dañarse. De ahí que funcione especialmente bien con muestras
fuertemente adheridas a la superficie. En cristales de proteína, por ejemplo, las fuerzas
laterales no modifican la muestra, pero sí en moléculas individuales.

Modo dinámico

En los modos dinámicos se hace vibrar la micropalanca a su frecuencia de resonancia

valiéndose para ello del actuador piezoeléctrico. La interacción punta-superficie modifica
la amplitud, frecuencia y fase de la resonancia, mientras el lazo de realimentación
mantiene constante alguna de estas tres propiedades. Qué propiedad sea ésta es el
criterio que determina el modo concreto de operación:

 En el Modo de no contacto o de frecuencia modulada (FM-AFM) (figura b) se

mantiene constante la frecuencia de resonancia. La principal aplicación del FM-
AFM es levantar topografías de superficies duras a escala atómica y operando en
vacio extremo o UHV (de sus siglas en inglés Ultra High Vacuum)
 En el Modo de repiqueteo (del inglés "tapping mode") o de amplitud modulada
(AM-AFM) (figura c) se mantiene constante la amplitud. Se usa principalmente en
medio líquido para obtener imágenes de muestras biológicas que sólo son
estables en soluciones acuosas.

Originalmente el uso del modo de no contacto implicaba que la punta se encontraba

siempre a distancia constante de la superficie, mientras que en el modo de repiqueteo la
punta golpeaba intermitentemente la superficie. Posteriormente se ha demostrado que
ambos modos pueden ser operados tanto a distancia de la muestra como en contacto con
ella.

Modos dinámicos en líquido

En el modo dinámico en líquido existen dos formas de hacer oscilar la micropalanca:

 En los modos acústicos se sitúa el piezoeléctrico, o bien en la parte trasera de la

celda líquida, o bien bajo la muestra. En este caso, el movimiento de la muestra
induce el de la micropalanca. La principal desventaja de este modo es que resulta
en resonancias muy sucias.
 En los modos electrostático y magnético, la micropalanca se hace oscilar
mediante un campo eléctrico o electrostático. La principal desventaja de este
modo es que hay que metalizar las micropalancas.

El modo dinámico en líquido, además de tratarse de una técnica todavía en desarrollo,

presenta fundamentalmente dos problemas:

1. Es menos sensible a las fuerzas de la interacción punta-muestra que el modo en

aire. Esto es debido a la reducción en agua de la constante de amortiguamiento, lo
que provoca que los cambios de la frecuencia de resonancia se manifiesten en la
amplitud con menor sensibilidad.
2. Al existir contacto entre punta y muestra, se necesitan micropalancas más blandas
con frecuencias de resonancia más altas.

Las aplicaciones del AFM en líquido son muy variadas: permite la resolución de
problemas estructurales y la caracterización mecánica de proteínas, detectar el
funcionamiento de proteinas in situ (como el desplegamiento de proteínas) y manipular
proteínas individuales.

Microscopio de efecto túnel (STM)

 El microscopio de efecto túnel
(Scanning Tunneling Microscope
STM) es un poderoso
instrumento que permite
visualizar superficies a escala del
átomo.

El efecto túnel

Desde el punto de vista de la

mecánica clásica un electrón no
puede superar una barrera de
potencial superior a su energía.

Sin embargo, según la mecánica

cuántica, los electrones no están
definidos por una posición
precisa, sino por una nube de
probabilidad. Esto provoca que
en ciertos sistemas esta nube de
probabilidad se extienda hasta el otro lado de una barrera de potencial. Por tanto el
electrón puede atravesar la barrera, y contribuir a generar una intensidad eléctrica.

Esta intensidad se denomina intensidad de túnel y es el parámetro de control que nos

permite realizar la topografía de superficie.

Este efecto cuántico aparece también en otras ramas de la física. Gamow lo aplicó para
dar explicación a la desintegración mediante emisión de partículas alfa en núcleos
inestables. En electrónica, hay transistores que basan parte de su funcionamiento en el
efecto túnel.

Esquema de funcionamiento de un microscopio de efecto túnel

En una instalación cuyo fin es tomar medidas en escala atómica es necesario que el
elemento que se usa como sonda de medida tenga una resolución de esa misma escala.
En un microscopio de efecto túnel la sonda es una punta conductora, por ejemplo, de
Wolframio. La punta se trata para eliminar los óxidos y para que sea lo más afilada
posible. En condiciones ideales hay un solo átomo en el extremo de la sonda.

La instalación consiste en un circuito eléctrico en el que están incluidos la muestra y la

punta de medida. Como se ha apuntado anteriormente, el parámetro de medida es la
intensidad de corriente túnel. Esta intensidad apenas alcanza los nanoamperios y,
además, es muy sensible tanto a la distancia, como a la diferencia de tensión entre la
punta y la muestra. Debido a esta sensibilidad todo el sistema debe estar controlado
electrónicamente. Así, la toma de medidas y los movimientos de la punta (realizados
mediante un dispositivo piezoeléctrico con precisiones que pueden llegar a los 0.05 nm)
son controlados por el usuario, a través de las interfases correspondientes, por ejemplo:
mediante un PC de sobremesa.
La punta no toca la muestra, sino que se queda a una distancia equivalente a un par de
átomos (del orden de angstroms) de la superficie. El PC registra la trayectoria de la punta
y entonces se puede desplegar la información como una imagen en escala de grises a
manera de mapa de densidades o mapa topográfico. A la imagen se le puede agregar
color sólo para mejorar el contraste y así observar mejor los cambios detectados.

Aplicaciones

Microscopia con resolución atómica

En esencia, el proceso consiste en realizar una topografía a intensidad de túnel constante

sobre una zona de la superficie de la muestra. El sistema busca los parámetros en los que
es capaz de medir una intensidad de túnel prefijada y, a partir de estos, calcula la
distancia a la que se encuentra la punta de la superficie. Repitiendo el proceso mientras la
punta recorre una determinada área de la superficie problema se obtiene, finalmente, una
imagen relacionada con la topografía y la estructura electrónica de dicha área.

Caracterización de dominios magnéticos a nivel atómico

La topografía de superficies se realiza mediante una punta de wolframio. Si cambiamos

esta punta por una compuesta por un material magnético seremos capaces de realizar
caracterizaciones de dominios magnéticos a escala atómica. Además, debido a la
especial capacidad de algunos microscopios de trabajar a temperaturas muy bajas se
pueden realizar caracterizaciones en función de la temperatura. Este tipo de medidas
proporcionan información adicional sobre las propiedades magnéticas de los materiales
en relación con sus características a escala atómica, en lugar de con sus propiedades
macroscópicas.

Nanolitografía

Esta técnica permite manejar átomos sobre superficies como elementos independientes.
Las posibilidades de esta tecnología son inmensas dado que prácticamente se pueden
crear las estructuras atómicas que se deseen, es decir, la posibilidad de diseñar
materiales "a la carta".

En la imagen se observa un "corral" cuántico creado mediante el desplazamiento de

átomos de hierro sobre una superficie de cobalto.

Desde 1989 Donald Eigler y Erhard Schweizer del Centro de investigación Almaden de
IBM comenzaron a utilizar el STM para manipular átomos individuales, logrando "escribir"
las siglas de la compañía con 35 átomos de xenón sobre una superficie de níquel.

. Microscopias de sonda de barrido (SPM).

• La microscopia SPM consiste en una familia de formas de microscopia donde una

sonda puntiaguda barre la superficie de una muestra, monitorizándose la interacciones
que ocurren entre la punta y la muestra.
• Es una herramienta de imagen con un amplio rango dinámico, que abarca los reinos de
los microscopios óptico y electrónico. También se le considera como un perfilador con
una resolución 3-D.

• Las aplicaciones son muy diversas: medidas de propiedades como la conductividad

superficial, distribución de carga estática, fricciones localizadas, campos magnéticos, y
modulación elástica.

• Las dos principales formas de microscopias SPM son: - Scanning Tunneling

Microscopy (STM). Desarrollada por Binning y Roher en los laboratorios IBM (Suiza),
descubrimiento por el que recibieron el Premio Nobel de Física en 1986 - Atomic Force
Microscopy (AFM). (Binning y col., 1986). En esta se distinguen tres modos principales: i)
Modo de contacto, ii) Modo de nocontacto y, iii) Tapping Mode.

• Otros tipos de microscopia SPM son: Lateral Force Microscopy (LFM), Force
Modulation Microscopy, Magnetic Force Microscopy (MFM), Electric Force Microscopy
(EFM), Surface Potential Force Microscopy, Phase Imaging, Force Volume,
Electrochemical STM & AFM (ECM), Scanning Thermal Microscopy (SThM), etc.2

9.2 Técnicas SPM.

• Las técnicas de microscopia SPM tienen en común: - Una punta. - Un sistema de

nanodesplazamiento. - Una muestra. - Un dispositivo de acercamiento punta/muestra. -
Una electrónica y/o informática de control.

• Los desplazamientos se realizan gracias a cerámicas piezoeléctricas que aseguran el

movimiento de la punta o de la muestra en los tres ejes. • Toda interacción χ que se
pueda medir entre la punta y la muestra puede dar lugar a una forma de microscopia
SPM. La resolución de cada tipo de microscopia dependerá, en última instancia, de la
dependencia de la interacción χ medida con la distancia punta-muestra.

• Durante el barrido de la punta sobre la muestra, se crea una imagen que da las
variaciones de χ en función de la posición en la superficie. Generalmente, se representa
la medida obtenida por una imagen en contraste de color.

• Cualquiera que sea la naturaleza de χ que se mide, se distinguen dos modos de

trabajo: - Interacción χ constante. - Distancia punta-muestra constante. 3

• Las características generales de las técnicas SPM son: - Desplazamientos de hasta

150 µm en el plano, y 10 - 15 µm en altura. - Resolución de hasta 0.01 Å, resolución
teórica de las cerámicas

piezoeléctricas. - Permiten trabajar en medios muy variables: al aire, en atmósfera

controlada, en vacío y ultra-alto vacío, altas/bajas temperaturas, líquidos.

9.3 Microscopia de Efecto Túnel (STM).

• En esta técnica se utiliza una punta muy aguda y conductora, y se aplica un voltaje
entre la punta y la muestra.

• Cuando la punta se acerca a unos 10 Å a la muestra, los electrones de la muestra

fluyen hacia la punta, “túnel”, o viceversa según el signo del voltaje aplicado.

• Para que ocurra una corriente túnel tanto la muestra como la punta han de ser
conductores o semiconductores.

• La imagen obtenida corresponde a la densidad electrónica de los estados de la

superficie.

• La corriente túnel es una función que varía de modo exponencial con la distancia. Esta
dependencia exponencial hace que la técnica STM tenga una alta sensibilidad,
pudiéndose obtener imágenes con resoluciones de sub-ansgtrom.

• Esta técnica se puede utilizar en modo de altura o corriente constante. 4

• La principal ventaja de esta técnica es la resolución a escala atómica que ofrece. Para
conseguir este tipo de resolución se ha de trabajar sobre muy buenos conductores (Pt,
Au, Cu, Ag).

• Se ha de trabajar in-situ (evitar oxidación-contaminación de la superficie), al vacío o a

baja temperatura, donde el ambiente permite una adecuada preparación de las muestras.

• La principal limitación de la técnica está en la imposibilidad de trabajar con muestras

aislantes.

• Las puntas que se utilizan son de W (pulidas electroquímicamente), Pd, Pt-Ir.

9.4 Microscopia de Fuerza Atómica (AFM).

• La microscopia AFM sondea la superficie de una muestra con una punta muy aguda,
de un par de micras de largo y menos de 100 Å de diámetro. La punta se localiza al final
del brazo del cantilever de 100 a 200 micras de largo.

• La fuerza entre la punta y la superficie de la muestra hace que el cantilever se doble o

flexione.

• Un detector mide esta flexión que ocurre conforme la punta barre la superficie y con
ello se obtiene un mapa topográfico.

• Este tipo de medida puede ser aplicada tanto a materiales aislantes, semiconductores o
conductores.

• Varias son las fuerzas que contribuyen a la flexión del cantilever siendo la más común la
fuerza de van der Waals. 5

9.4.1 AFM de contacto.

• En este modo de aplicación de la técnica AFM la punta mantiene un contacto físico
suave con la muestra.

• La punta se une al final del cantilever con una baja constante de resorte, menor que la
constante de resorte efectiva que mantienen los átomos de la muestra. Conforme la
punta barre la superficie, la fuerza de contacto origina la flexión del cantilever de modo
que éste se adapta a la superficie topográfica de la muestra.

• Como resultado, en el modo de AFM de contacto, la fuerza de van der Waals se

equilibra con cualquier otra fuerza que intente mantener juntos a los átomos. Por tanto,
cuando el cantilever empuja a la punta contra la muestra, este se flexiona forzando a los
átomos de la punta y muestra a permanecer juntos.

• Otras dos fuerzas han de considerarse también en la AFM de contacto: i) La fuerza de

capilaridad ejercida sobre una delgada lámina de agua que a menudo está presente en el
medio ambiente. ii) La fuerza ejercida por el mismo cantilever.

• La fuerza total que ejerce la punta sobre la muestra es la suma de las fuerzas de
capilaridad y del cantilever, y debe equilibrar a la fuerza repulsiva de van der Waals. La
magnitud de la fuerza total que se ejerce sobre la muestra varía entre 10

• Para obtener una imagen gráfica de la superficie, se detecta la posición del cantilever,
mediante el empleo de técnicas ópticas. Una radiación láser incide sobre el dorso
especular del cantilever, y de ahí se refleje sobre un fotodetector sensible a la posición.

• La relación entre la longitud del camino recorrido por la radiación láser entre el
cantilever y el detector, y la longitud propia del cantilever origina una amplificación
mecánica. Como resultado el sistema puede detectar movimientos verticales de la punta
del cantilever inferiores a los Å. 6

• Se puede trabajar en modo de fuerza constante o modo de altura constante.

• Entre las ventajas y desventajas de la técnica AFM de contacto, se encuentran:

- Ventajas: amplia gama de muestras a analizar; se pueden realizar medidas de

elasticidad; se pueden realizar medidas in situ en una celda líquida o en la celda
electroquímica; las resoluciones verticales y horizontales son muy elevadas.

- Desventajas: la punta está en contacto con la superficie; problemas de destrucción de la

punta o modificación de la superficie, arrastre de partículas, las capas de agua absorbida
generan problemas de importantes fuerzas de capilaridad; carga electrostáticas de
superficie.

9.4.2 AFM de no-contacto (NC-AFM).

• En esta técnica se excita cantilever cerca de su frecuencia de resonancia de modo que

vibre cerca de la superficie de la muestra, a una distancia comprendida entre 10 y 100 Å.
• La técnica NC-AFM se utiliza cuando no se quiere deteriorar la superficie a medir. La
fuerza que ejerce la punta sobre la muestra es muy baja, 10 -12 N.

• El trabajo con fuerzas tan débiles hace imposible usar el modo de fuerza constante, y
además estas son difíciles de medir.

• La sensibilidad de la técnica proviene de la frecuencia de resonancia del cantilever.

• El cantilever vibra a frecuencias de 100 a 400 kHz y amplitudes de 10 a 100 Å, y

conforme se acerca la punta a la superficie se detectan cambios 7 en la frecuencia de
resonancia o en la amplitud, con una resolución vertical por debajo de los Å.

• Ventajas: no existe modificación ni contaminación de la superficie de la muestra; se

pueden medir diferentes gradientes de fuerza (magnética, electrostática, etc.).

• Desventajas: resoluciones altas requieren que la punta se sitúe muy cerca de la

superficie; el barrido ha de ser muy lento para no perder el “contacto” con la superficie; la
oscilación de la punta se puede ver frenada por la existencia de capas de
agua/contaminación; las gotas de agua se confunden con la topografía de la muestra.

9.4.3 AFM de contacto intermitente (Tapping Mode).

• Uno de los problemas que presenta la técnica AFM es el deterioro que ocasiona en
algunas muestras por el arrastre continuo de la punta sobre la superficie de la muestra. •
Para solventar este problema se utiliza una variante de la técnica AFM conocida
popularmente como Tapping Mode. En esta aplicación, la punta está en intermitente
contacto con la superficie a la vez que la barre. • La variación de la amplitud de
oscilación de la punta, debida a la amortiguación sobre la superficie es lo que se utiliza
como señal de control.

• Esta técnica evita las fuerzas de laterales y de fricción que ocurren en la AFM, y en
general solventa algunas de las limitaciones de la técnicas AFM y NC-AFM.

• Ventajas: medida muy estable; fuerza de presión muy débil; resolución elevada;
proporciona las mejores prestaciones para la medida topográfica de alta resolución; evita
imágenes artificiales que ocurren en AFM. 8

• Desventajas: no puede trabajar en medio líquido; no se llega a resolución atómica;

barridos más lentos.

9.5. Aplicaciones de las microscopias STM y AFM.

• En poco más de diez años, la microscopía de proximidad (SPM) se ha impuesto como

herramienta indiscutible de caracterización de materiales y superficies.

• De hecho, esta tecnología está convirtiéndose en preponderante en el desarrollo de las

“nanotecnologias”, así como en la comprensión de los fenómenos relacionados con lo
infinitamente pequeño.
• Entre los distintos campos en que se aplican estas técnicas se pueden citar:

a) Microelectrónica Es el punto de partida de esta técnica, lo cual explica que las

aplicaciones

en este campo sean muy numerosas. Medida de semiconductores al vacío y ultra-vacío,

cristalografía, estructura, etc.

Nanolitografía, utilización de la punta, no para analizar sino para modificar las superficies.

Al aire, utilización industrial en substratos con: dimensión crítica; epitaxias (dislocación,

defectos, ángulos, etc.); rugosidad del substrato; seguimiento de los procesos de limpieza
y de los diferentes tratamientos relacionados con el proceso; etc.

b) Capas finas Todas las capas finas se pueden analizar. Se obtienen medidas de tamaño
de grano, distribución, rugosidad y perfil. 9De la misma manera, se puede analizar
cualquier partícula aislada sobre una superficie. Así, podemos observar agregados,
compuestos en polvo, etc., y acceder también por ejemplo, a informaciones importantes
en catálisis

c) Caracterización de materiales orgánicos e inorgánicos. Cálculos de parámetros de

celda unidad, orientación cristalina, defectos puntuales, crecimientos de monocapas,
absorción de moléculas, etc.

d) Aplicaciones relacionadas con polímeros y composites. Se pueden conseguir

resoluciones muy elevadas sin preparación particular de las muestras. Además de las
medidas de estructura, son accesibles medidas de elasticidad y de fricción local.

e) Biología. Las medidas de muestras en biología son de gran interés gracias a la

posibilidad de análisis en medio líquido, que permite la visualización de células vivas. La
resolución lograda nos permite acceder a informaciones muy importantes para la
comprensión del mundo viviente. Se han realizado grandes progresos sobre este tipo de
medidas, dónde los problemas encontrados están principalmente relacionados con las
técnicas de preparación de las muestras.

Principio de un elemento piezoeléctrico: el voltaje aplicado origina la elongación o

acortamiento del elemento. La combinación de tres elementos permite el movimiento

en las tres direcciones espaciales. Los microscopios STM emplean piezoeléctricos de

geometría tubular.