UNIVERSIDAD NACIONAL DE

FRONTERA DE SULLANA
FACULTAD DE INGENIERÍA DE INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS

“PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS”

INFORME DE PRACTICA N° 3
AUTORES:

CALLE CORDOVA, JOSE LUIS

REYES LA ROSA, MAYLI ADRIANA
ZAVALA DUEÑAS, LUCERO
YOSSI RAMOS CAMACHO
MARIBEL JUAREZ AGURTO

CÁTEDRA:
MICROBIOLOGÍA DE LOS ALIMENTOS
V CICLO
DOCENTE: BLGO. OSCAR JULIAN BERRIOS TAUCCAYA
SULLANA – PERÚ
2019
“PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS MICROBIOLÓGICOS”
 I. RESUMEN

Para el desarrollo de microorganismos es necesario brindarles las condiciones adecuadas, por ello en
esta práctica se han seleccionado diversos medios de cultivos como el agar; sustancia inerte
polisacárido que se extrae de las algas; esta sustancia no constituye ningún elemento nutritivo puesto
que no es digerido por las bacterias. Cada medio ha sido diluido según sus parámetros indicados y en
las cantidades exactas para evitar pérdidas o desperdicios luego se llevaron a la autoclave a una
temperatura 121 ºC a 15 libras de presión por una hora para su debida esterilización, seguidamente se
vertieron los contenidos en placas Petri y tubos de ensayo respectivamente, se dejaron enfriar para
solidificar finalmente se almacenaron teniendo como finalidad ser utilizados para sembrar muestras
posteriormente.
 II. INTRODUCCION
Se le denomina medio de cultivo a un material nutritivo preparado para el crecimiento de
microorganismos.
Este debe satisfacer la necesidad del inoculo por ejemplo debe contener los nutrientes adecuado para
el microorganismo especifico que desea desarrollar , también debe tener un pH ajustado de una
manera apropiada y una concentración conveniente de oxígeno, talvez ausente por completo.
Cuando se desea que las bacterias se desarrollen sobre un medio sólido, se agrega un agente
solidificante, como lo es el agar, que consiste en un polisacárido complejo proveniente de un alga
marina que se utiliza desde hace mucho tiempo como espesante de alimentos como jaleas y helados.
Existen amplia variedad de medios de cultivo para el crecimiento de microorganismos en el
laboratorio, casi todos estos medios disponibles en el comercio, están constituidos por componentes
mezclados con anterioridad y solo precisan el agregado de agua y medio de esterilización.
El medio que se va utilizar debe ser estéril, es decir, en un principio no debe contener
microorganismos viables, de modo que el cultivo contenga solo microbios (y su descendencia) que
se agregan al medio y debe incubarse a temperatura correcta
Los medios con agar suelen utilizarse en tubos de ensayo o placas Petri. Los tubos de ensayo se
denominan tubos en pico de flauta o inclinados cuando el medio se solidifica manteniendo el tubo en
un Angulo adecuado para lograr una gran superficie para el crecimiento. Cuando el agar se solidifica
en un tubo de posición vertical se denomina profundo.
Los cultivos en placas Petri, denominadas así en honor a su inventor se realizan en placas poco
profundas con una tapa que cubre perfectamente la base para evitar contaminación.
 III. OBJETIVOS

2.1. General

´Analizar y Dominar los fundamentos y técnicas de preparación de los diferentes medios de

cultivos para la microbiología de los alimentos.

2.2. Específicos

 Comprender las diferencias químicas de los diferentes medios de cultivo.

 Dominar técnicas de preparación.
 Dominar las técnicas de esterilización de medios de cultivos.
 Obtención del criterio para su elección, con base en las necesidades de cada
microorganismo y a los propósitos del laboratorio.
 IV. Marco teórico

Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros compuestos que

crean condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.
Este medio puede ser similar al sustrato natural en el cual normalmente las bacterias como suero
sanguíneo en el caso de patógenos animales, leche en bacterias lácteas.
La diversidad metabólica de los microorganismos es enorme, por ello, la variedad de los medios de
cultivo también lo es. No existe un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos pero en
cualquier caso, debe contener todos los componentes necesarios para el crecimiento; estos; aun
variando según el tipo de bacterias cuyo crecimiento se desea conseguir, deben incluir:

 Agua.

 Compuestos que contengan nitrógeno, como proteínas, aminoácidos o sales inorgánicas que
contengan sales.

 Fuentes energéticas, como carbohidratos o proteínas.

 Otros factores de crecimiento.

Las necesidades nutritivas de las bacterias varían desde sencillos compuestos inorgánicos de los
autótrofos hasta las diferentes vitaminas y factores de crecimiento necesitan algunas de las bacterias
más exigentes, como los patógenos y bacterias lácticas. Por tanto, resulta imposible formular un
medio que favorezca el crecimiento de todas las bacterias en general. No obstante; los medios
empíricos utilizados corrientemente y compuestos por un caldo nutritivo y agar nutritivo son capaces
de favorecer el crecimiento de muchos tipos de bacterias. Estos medios se pueden utilizar como bases,
a las que se les añade las sustancias necesarias para las exigencias de cada tipo de bacteria,
consiguiendo así que un medio de cultivo pueda llegar a ser un medio selectivo.
4.1. Requerimientos energéticos:
Son los nutrientes del medio de cultivo que va a ser utilizado por la bacteria para su crecimiento.
Van a ser fuentes de energía en un medio de cultivo, al menos, una fuente de carbono y una fuente de
nitrógeno.
1. Fuentes de carbono
Existen muchos tipos de fuentes de carbono, ya que esto está ligado al metabolismo energético de la
especie microbiana; generalmente se trata de sustancias orgánicas y en la mayor parte de los casos
son azucares en forma de monosacáridos más complejos como el almidón. Existen bacterias capaces
de utilizar el dióxido de carbono (bacterias foto sintetizadoras), metano.
2. Fuentes de nitrógeno
Es una fuente menos energética que la del carbono, pero necesaria para el metabolismo microbiano,
produciendo también energía. La van a formar las proteínas, péptidos o aminoácidos, se presentan en
peptonas. Otra fuente de nitrógeno son los nitratos, nitrógeno orgánico, sales de amonio.
4.2. Fuentes no energéticos
1. Fuentes de azufre: todos los microrganismos que utilizan en su metabolismo azufre lo hacen
mayoritariamente en forma de sulfatos, en otras ocasiones lo pueden obtener a partir de
aminoácidos.
2. Fuentes de fosforo: en general lo utilizar en forma de fosfatos.
3. Fuentes de agua: necesaria para la existencia de toda célula viva.
4. Iones metálicos: son utilizados a concentraciones muy bajas, por ejemplo, el sodio, hierro,
calcio. Son esenciales para el crecimiento microbiano y dependiendo de su concentración
pueden inhibir el crecimiento de otros microorganismos.
5. Factores de crecimiento: no todas las bacterias son capaces de crecen en medios donde se
encuentran cubiertas las necesidades elementales. Existen bacterias que crecen en estos
medios o lo hacen muy lentamente. A este tipo de bacterias les hace falta una serie de
componentes que no pueden fabricar por si solas para su crecimiento y corresponden a algún
tipo de aminoácido.
6. Factores de arranque: sustancias que permiten a la bacteria el estudio de salir de su fase de
latencia y comenzar su fase de crecimiento exponencial. Son fundamentalmente fuentes de
energía.
7. Factores inhibidores: componentes que van a impedir el crecimiento de algún tipo de
microorganismo por bloqueo de sus procesos metabólicos. Las sustancias inhibidoras son
muy útiles para la identificación de bacterias.
8. Factores solidificantes: como el agar.
4.3. Constituyentes habituales de los medios de cultivo
1. Agar: se utiliza como gelificante para la solidez a los medios de cultivo. Su componente
dominante es un polisacárido no puro y extraído de algas marinas.
2. Extractos: para su preparación ciertos órganos y tejidos animales o vegetales, son extraídos
con agua y calor para ser concentrados hasta pasta.
3. Peptonas: son mezclas complejas de componentes orgánicos nitrogenados y sales minerales
que se obtienen por digestión enzimática.
4. Fluidos corporales: estos no solo contribuyen con los factores de crecimiento sino también
con sustancias que neutralizan inhibidores del crecimiento de algunas bacterias. La sangre
desfibrilada, plasma o suero. La sangre, al no poder ser esterilizada, debe obtenerse
directamente del animal sano en condiciones asépticas.
5. Sistemas amortiguadores: algunos componentes son incorporados al medio de cultivo para
mantener el pH dentro del rango óptimo del crecimiento bacteriano. Los microorganismos
más comunes son los neutrófilos, las sustancias orgánicas como las peptonas, previenen la
desviación del pH.
6. Indicadores de pH: se añade, a veces indicadores de ácido-base con objeto de detectar las
variaciones del ismo después de un proceso de incubación.
 7. Agentes reductores: como la cisteína se añade para el desarrollo de germen anaerobios, puesto
que eliminar o minimizan la presencia de oxígeno en el medio.
8. Agentes selectivos: muy diversos como, sales biliares, violeta cristal, antibióticos, que
transformar un medio de cultivo general en más o menos selectivos.

4.4. Condiciones de crecimiento

Para que un microorganismo crezca en un medio de cultivo es, como mínimo, necesario, una
composición de nutrientes adecuada a las necesidades de ese microorganismo.
1. Condiciones fisicoquímicas apropiadas:
Temperatura óptima: apropiada a cada especie bacteriana. las bacterias psicrófilos crecen a mejor
temperatura inferiores a 20ºC, las bacterias mesófilas crecen a 20º y 45ºC y las termófilas crecen por
encima de los 45ºC.
Grado de humedad: corresponde a la cantidad de agua que va a necesitar la bacteria para su
crecimiento. Cualquier medio solido o líquido requiere una cierta porción de agua.
Valor de pH: en general en los medios de cultivo hay sustancias que van a estabilizar el pH del medio,
reciben el nombre de buffers o tampones; proporcionando al medio un pH que facilite el crecimiento
microbiano.
Presión osmótica: en general los medios son isotónicos; (quiere decir que la concentración de soluto
es igual a dentro o fuera de una célula) respecto a las bacterias.
Medio ambiente adecuado: en general lo fundamental es el oxígeno, su presencia o ausencia en forma
de aire condiciona el tipo de microorganismo, aunque algunos microorganismos tienen necesidades
de menos cantidad de oxigeno del que proporciona el aire (microaerófilos).
4.4. Clasificación según su origen
1. Empíricos o naturales: no se interviene directamente en su composición, son de origen natural y se
desconoce su composición específica, aunque demuestran su eficacia para algunos tipos de
microorganismos.
2. Sintéticos: de composición química conocida, aparecen sustancias químicas definidas. Son
los más utilizados y siempre deben contener en su composición una fuente de carbono
(azúcar), una fuente de nitrógeno en forma orgánica o inorgánica.
3. Semisintéticos: parte de su composición corresponde a extractos naturales y no tiene una
composición definida; a estos se añaden constituyentes sintéticos o químicamente definidos
para el crecimiento microbiano.
4. Complejos: fueron los primeros utilizados en bacteriología; en la actualidad su uso está más
restringido. Sin embargo; se utilizan mucho en parasitología y virología. Se preparan en
forma compleja a partir de tejidos animales y más raramente vegetales; su composición no
está definida como los sintéticos.
4.5. Clasificación según su estado físico
O según proporción de agua:
1. Líquidos: también se denominan caldos; su componente principal es el agua y no contienen
agar. En ellos los microorganismos crecen en todas las direcciones enturbiando el medio, son
de gran utilidad para la realización de pruebas bioquímicas.
2. Solidos: resultan de añadirles a los líquidos sustancias solidificantes como el agar y la
gelatina; en la actualidad el más utilizado es el agar ya que la gelatina se funde a 24ºC y
además existen numerosas bacterias gelatinasa-positiva que la hidrolizan.
3. Semisólidos: intermedios entre sólidos y líquidos, contienen menos de un 0.5% de agar. Se
suelen utilizar para ver la movilidad de los gérmenes y para la realización múltiple de pruebas
bioquímicas.
4.6 Clasificación según su uso
1. Medios generales: también denominados medios no selectivos o comunes y que permiten el
desarrollo de una gran variedad de microorganismos. Son medios de uso general. Con ellos
se favorece el crecimiento de la mayor parte de las bacterias, sin exigencias nutritivas
especiales, algunos ejemplos son agar de recuento en placa, caldo nutritivo.
2. Medios de enriquecimiento: favorecen el crecimiento de un determinado tipo de
microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto.
3. Medios electivos: son medios que satisfacen las necesidades nutritivas elementales de
microorganismos de características nutritivas poco comunes, por ejemplo, para aislar
levaduras salvajes se emplea agar lisina, sobre el cual pueden crecer las bacterias, salvo que
estas puedan utilizar la lisina como única fuente de nitrógeno.
4. Medios selectivos: permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos determinado
inhibiendo el desarrollo de los demás. Duele ser un medio básico que ha sido alterado uno o
más agentes inhibidores, limitando así el desarrollo de bacterias no interesantes. Como
agentes inhibidores se pueden emplear ácidos, álcalis, etc.
5. Medios diferenciales: son aquellos en los que se ponen de relieve propiedades de un
determinado tipo de microorganismo, generalmente formando colonias fácilmente
reconocibles, así, es fácil distinguir las especies hemolíticas de las no hemolíticas en agar
sangre , que no es un medio selectivo.
6. Medios de transporte o mantenimiento: se utilizan en la recogida, transporte y conservación
de muestras microbiológicas, esencialmente en medios solidos no nutritivos que inhiben las
reacciones enzimáticas.
7. Medios para filtros de membranas: son los medios específicos para las técnicas de recuento
de filtración de membrana, y que son líquidos pero que se utilizan en placa, no en tubo, al ser
distribuidos sobre un cartoné absorbente de la placa de filtración donde se deposita el filtro
utilizado.
4.7. Clasificación según su presentación
Las formas de expedición más usuales de los medios de cultivo son:
1. Deshidratados o liofilizados: se presentan tal cual y en el laboratorio se preparan añadiendo
la cantidad de agua correspondiente en condiciones totalmente asépticas, o una vez
preparados, sin estas condiciones, los esterilizamos en autoclave.
2. Preparados: elaborados por las casas comerciales presentando un control de calidad y
características específicas a cada tipo de cultivo.
3. Medios solidos de placa Petri: son medios solidos que ocupan una superficie lo
suficientemente grande como para poder visualizar perfectamente las colonias microbianas.
Es de los medios que mejor permiten el aislamiento de los microorganismos que pueden
crecer en él.
4. Medios sólidos en tubo: corresponden a tubos de agar inclinado y solidificado para aumentar
la superficie donde se va a producir el crecimiento bacteriano una vez sembrado. Sion útiles
para la conservación de cepas por ser la desecación menor que en los cultivos en placa.
5. Medios líquidos en tubos: no permiten visualizar colonias pero tienen muchas aplicaciones
como por ejemplo, pruebas bioquímicas, pueden servir para aumentar la concentración del
microrganismo inoculado.
6. Medios semisólidos en tubo: se siembran por picadura y corresponden a un término de medio
entre los líquidos y los sólidos. Se utilizan para ciertas pruebas bioquímicas como la de
movilidad.
7. Medios de doble fase en frasco: son frascos constituidos por una fase sólida y otra liquida,
por ejemplo, para la determinación rápida de microorganismos en sangre.
Preparación de los medios de cultivo
En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados, normalmente,
bajo la forma de liofilizados que es preciso rehidratar. En general, la preparación de un medio de
cultivo se reduce simplemente a pesar, en función de la cantidad deseada del mismo, y disolver en
agua destilada siguiendo las instrucciones del fabricante. Las sustancias termolábiles se esterilizan
por filtración y se añaden al resto de los componentes previamente esterilizados en autoclave.
Antes de su esterilización, los medios líquidos en caldo se distribuyen en los recipientes adecuados y
en algún caso la altura del líquido en el recipiente debe exceder un tercio del volumen total de este.
Si es un medio sólido, habitualmente se procede a fundir el agar en un baño María antes de
esterilizarlo. Los recipientes utilizados nunca deben estar cerrados en forma hermética. Una vez
fundido, se distribuye en caliente en tubos o matraces, se tapa y esteriliza.
En general la esterilización es suficiente utilizando la autoclave 121ºC durante unos 15 minutos. Hay
que tener en cuenta que existen medios que no se deben esterilizar.
Finalizada la esterilización en autoclave:
1. Los medios líquidos se dejarán enfriar a temperatura ambiente.
2. Los medios solidos contenidos en tubo deben inclinarse para al solidificarse adopten la forma
de agar inclinado si tal es su finalidad.
 V. MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRAS

5.1. Equipos:

1) Balanza analítica.
2) Autoclave.
3) pHmetro.
4) Baño María.
5) Mechero Bunsen.
6) Mecheros de Alcohol.
7) Estufa.

5.2. Materiales

1) Probeta de 250 ml.

2) Bagueta o agitador de cristal.
3) Espátula
4) Placas Petri .
5) Tubos de ensayo.
6) Vaso Beaker de 1000 ml .
7) Matraz de 1000 ml .
8) Plumón de tinta indeleble de punta gruesa.
9) Bolsas para descarte de basura.
10) Fósforos (Estudiante).
11) Toalla o tela de secado
12) Detergente.
13) Esponja o tela para el lavado de los materiales de vidrio.
14) Escobilla de lavado.
15) Papel Kraft.
16) Toruntas.

5.3. Reactivos

1) Diversos medios y caldos de cultivo microbiológico.

2) Medio de cultivo Agar Nutritivo Estandar MERCK.
3) Medio de cultivo Agar Citrato de Simmons MERCK.
4) Medio de cultivo Agar MacConkey MERCK.
5) Agua Peptonada
6) Agua Destilada Estéril.
7) Alcohol 96°.
8) Vial de indicador de esterilización y/o cintas indicadoras de esterilización.

5.4. Muestras Biológicas

No Cumple
 VI. PROCEDIMIENTO

Para la preparación de medios de cultivo de procedió a desinfectar la zona de trabajo con hipoclorito
al 5 % y esterilización de los materiales de vidrio (placas Petri y tubos de ensayo) luego procedemos
a preparar el Agar MacConkey.

Se procedió a aplicar el siguiente cálculo para obtener la cantidad necesaria de agar para 185 ml

35g ---------- 1000ml

x-------------185 ml

x= 6.47

Está cantidad es maceada en una balanza de precisión y después en un matraz de 250 ml se

vierte el Agar MacConkey para posteriormente agregarle 185 ml de agua destilada y diluirlo
exponiéndolo al calor producido por un mechero bunsen hasta que se diluya por completo

Luego se le coloca una torunta en el matraz y un capuchón para luego someterlo a un proceso
de esterilización en la autoclave a 121 C° por 15 lb de presión por 20 minutos después de
alcanzado los 121C°

Pasados los 20 minutos se apaga la autoclave y se le disminuye la presión abriendo la llave

de desfogue para luego retirar la canastilla y dejar enfriar el matraz a una temperatura de
40C° – 50C°

Se procedió a distribuir el agar a 5 placas Petri conteniendo 25 ml cada una y a 5 tubos de

ensayo conteniendo 12 mililitros cada uno.

Se colocan los tubos de ensayo con un Angulo de inclinación y las placa Petri en una mesa
hasta que se solidifique

Finalmente se almacenan con el fin de ser utilizados para sembrar los inóculos que
posteriormente estudiaremos.
 VII. RESULTADOS
.
7.1Comparación de las diferencias químicas de los medios de cultivo
MEDIOS CARACTERISTICAS USOS
MacConkey, agar Selectivo y diferencial Aislamientos de bacterias gran
negativas (enterobacterias). El
colorante cristal violeta
inhiben las gram positivas, las
sales biliares inhiben las gran
positivas y algunas gram
negativas( no las
enterobacterias).
Agra citrato de Simmons Diferencial se basa
El citrato de Simmons es un en la diferencia de color de las
medio colonias aisladas, como en el
cuya única fuente de carbono es agar con azul de metileno -
el citrato sódico, entonces en él eosina que
solo crecerán las bacterias permite diferenciar E. coli
capaces de (colonias oscuras y de brillo
desarrollarse utilizando como metálico) de Enterobacter
única fuente de carbono ese aerogenes (colonias
componente. rosadas de centro azul sin
brillo).
Agar nutritivo No es diferencial Medio rico para el cultivo de
microorganismos en general,
crecen
una gran mayoría, excepto
algunos
muy exigentes
Agar clostridiun

Agra
 7.2 dominación de la técnica de preparación de medios de cultivos

Leer las instrucciones
de preparación del
medio
Quitamos del mechero Una vez que ya esté
bunsen y dejamos enfriado lo suficiente,
enfriar un poco. se le coloca al matraz
un capuchón,
colocamos el nombre
del medio de cultivo.

Determinar cuánto Se lleva a la autoclave a

medio de cultivo en Llevamos al mechero
bunsen, y se 121°c, 15 libras de
polvo (agra presión, por 15 o 20
mantiene calentando
MacConkey) se debe minutos.
emplear en relación a la para disolver bien.
cantidad total a
preparar.

Añadimos el medio de
Una vez hecho el cultivo en el matraz,
cálculo, se pesa en la agitando con la Bagueta
balanza, la cantidad de constantemente, para
medio de cultivo evitar que se formen
necesaria. grumos. Sacamos del autoclave
para dejarlo enfriar por
11 minutos para luego
verterlos en tubos de
ensayo y en placas Petri
respectivamente.

Medimos en la probeta Esterilizamos un

180ml de agua destilada matraz Erlenmeyer
a usar. limpio, en el mechero
bunsen. Dejamos
enfriar para luego
colocar el agua
destilada de la
probeta.
 VIII. ANALISIS Y DISCUSIONES

Realizamos los medios de cultivo siguiendo el procedimiento, la técnica indicada, aprendimos a

realizar paso a paso un medio de cultivo para conocer más acerca de la forma de reproducción de los
microorganismos.
Para los microorganismos es importante interactuar en un entorno o espacio con las condiciones
debidas para poder realizar sus funciones, pues requieren de nutrientes especiales tanto para su
metabolismo como su reproducción.
Para poder adquir buenos resultados es necesario que se les proporcione un buen medio de cultivo en
donde ellos puedan desarrollarse en tal forma que puedan realizar bien sus funciones, también para
ello es necesario que se haga una buen seguimiento de la manipulación de los materiales y el ambiente
en el que se coloquen.
Para realizar las técnicas de preparación de medios de cultivos es necesario seguir tal cual se nos
indica, ya que par a preparar un medio de cultivo se requiere de hacer cálculos para determinar la
cantidad de medio que necesitamos para trabajar y de esa manera no se desperdicie.
 IX. CONCLUSIONES

 Comprendimos que cada medio presenta diferentes necesidades y por lo tanto su

composición química varia como el agar que es un polisacárido compuesto de
galactosa, obtenido de las algas, se disuelve a altas temperaturas y al dejarse enfriar
se vuelve una sustancia gelatinosa y finalmente se solidifica.
 En esta práctica de laboratorio logramos dominar la técnica por calor húmedo, para
la esterilización del medio de cultivo
 Es de vital importancia la limpieza del material que utilizaremos, ya que podría presentar o
tener algún residuo. u otra cosa que pueda afectar al medio de cultivo.
Describir cada uno de los. componentes de medios de cultivos
 Evitar que el medio de cultivo se sobresalga y empiece a hervir, de esa manera evitaremos la
pérdida del tanto las azucares.
 X. CUESTIONAMIENTOS

1) ¿Qué entiendes por Medios de Cultivo microbiológico?

un medio de cultivo microbiológico es una técnica de laboratorio que consta de un gel o una solución
que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura,
el crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. El
objetivo ultimo del cultivo es variado: antibiograma, identificación, multiplicación

2) ¿Cuál es la clasificación de los medios de cultivo y de sus ejemplos de cada uno de ellos?

Por su origen

Químicamente definidos o sintéticos Naturales o complejos

Se preparan a partir de sustancias

Su composición química se naturales de origen animal o
conoce con exactitud, cada vegetal de composición química
componente es de alta pureza no rigorosamente constante:
analítica y realiza un aporte leche, suero, macerado de maíz,
especifico. etc.
Ejemplo: medios para autótrofos Ejemplo: medios para
quimioterotrofos
 Por su consistencia

solidos Semisólido o
Líquidos
blando

No contienen
solidificante y Incluye agar en
Incluye agar al
no permite el concentraciones
0.3%
aislamiento de de 1.5 a 2%
colonias
3) ¿Qué nutrientes son necesarios para el crecimiento de los microorganismos?

los nutrientes que requiere una célula para su crecimiento se puede clasificar en los siguientes grupos:
1. Macronutrientes: carbono, hidrogeno, oxígeno y nitrógeno
2. Micronutrientes: fosforo, potasio, azufre, magnesio
3. Vitaminas
4. Elementos traza: zinc, cobre, magnesio, cobalto.

4) ¿Cuáles son las características ambientales que contribuyen al desarrollo de microorganismos?

las características ambientales son la temperatura, humedad, acidez y nutrientes para desarrollarse.
cuando estas son las características una bacteria puede producir más de 2 millones en 7 horas

5) ¿Cuál son los pasos a seguir para la esterilización de los medios de cultivo?

1. Disolver los componentes del medio en agua destilada. En muchos casos se parte de un
preparado comercial con todos los componentes deshidratados. Siguiendo las instrucciones
del profesor, añadir la cantidad del agua adecuada para conseguir la concentración deseada
de los mismos. Si el medio contiene un agente solidificante(agar-agar) hay que calentarlo
para que se disuelva totalmente agitando de vez en cuando para asegurar una completa
disolución del agar (medios sólidos y semisólidos), para medios líquidos no es necesario
calentar, únicamente se agita la mezcla hasta la completa disolución de la misma.

2. Esterilizar la disolución. - una vez disuelto el medio se debe esterilizar para evitar el
crecimiento de contaminantes. Dependiendo de la forma en que vayas a utilizarse el medio,
el procedimiento será diferente:

a) Medios sólidos en placa-. Tapar el matraz con una torunta. Llevar a utilizar la
autoclave (121°c) durante 15-20 minutos. Una vez estéril repartir en placas de Petri
estériles y dejar reposo para que solidifique.
 b) Medios líquidos.- una vez disueltos los componentes repartir en tubos de ensayo a
razón de unos 2-4ml por tubo, y dejar que solidifiquen.

6) Mencione cuales son los puntos críticos en la preparación de medios de cultivo.

Los principales puntos críticos durante la preparación de los medios de cultivo son:
 La limpieza del material al usar, ya que de presentarse algún residuo en alguno de los
frascos este afectaría las propiedades del medio.
 La determinación de la cantidad adecuada de polvo del medio de cultivo a usar para la
cantidad que requerimos de medio a preparar.
 Disolver el medio de cultivo de forma adecuada, empleando calor para facilitar la
disolución y evitar la formación de grumos.
 Evitar que el medio de cultivo se sobrecaliente y empiece a hervir, ya que esto
ocasionaría que las proteínas y azucares se descompongan y variaría la concentración de
la solución preparada.
 Describir cada uno de los componentes de los medios de cultivo.

7) ¿Qué norma mexicana nos indica el procedimiento para la realización de medios de cultivo?

NOM -065 SSA

8) ¿Qué pasa si el medio de cultivo se excede en el calentamiento?

produce una falla cambiando el PH, presenta turbidez ennegramiento, produce un crecimiento
escaso microorganismos

9) ¿Qué entiendes por Medios de Cultivo microbiológico?

un medio de cultivo microbiológico es una técnica de laboratorio que consta de un gel o una solución
que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura,
el crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. El
objetivo último del cultivo es variado: antibiograma, identificación, multiplicación
10) ¿Cuál es la clasificación de los medios de cultivo y de sus ejemplos de cada uno de ellos?

Por su origen

Químicamente definidos o sintéticos Naturales o complejos

Se preparan a partir de sustancias

Su composición química se naturales de origen animal o
conoce con exactitud, cada vegetal de composición química
componente es de alta pureza no rigorosamente constante:
analítica y realiza un aporte leche, suero, macerado de maíz,
especifico. etc.
Ejemplo: medios para autótrofos Ejemplo: medios para
quimioterotrofos
 Por su consistencia

solidos Semisólido o
Líquidos
blando

No contienen
solidificante y Incluye agar en
Incluye agar al
no permite el concentraciones
0.3%
aislamiento de de 1.5 a 2%
colonias

11) ¿Qué nutrientes son necesarios para el crecimiento de los microorganismos?

los nutrientes que requiere una célula para su crecimiento se pueden clasificar en los siguientes
grupos:
  Macronutrientes: carbono, hidrogeno, oxígeno y nitrógeno
 Micronutrientes: fosforo, potasio, azufre, magnesio
 Vitaminas
 Elementos traza: zinc, cobre, magnesio, cobalto.

12) ¿Cuáles son las características ambientales que contribuyen al desarrollo de microorganismos?

las características ambientales son la temperatura, humedad, acidez y nutrientes para desarrollarse.
cuando estas son las características una bacteria puede producir más de 2 millones en 7 horas

13) ¿Cuál son los pasos a seguir para la esterilización de los medios de cultivo?

3. Disolver los componentes del medio en agua destilada. En muchos casos se parte de un
preparado comercial con todos los componentes deshidratados. Siguiendo las instrucciones
del profesor, añadir la cantidad del agua adecuada para conseguir la concentración deseada
de los mismos. Si el medio contiene un agente solidificante(agar-agar) hay que calentarlo
para que se disuelva totalmente agitando de vez en cuando para asegurar una completa
disolución del agar (medios sólidos y semisólidos), para medios líquidos no es necesario
calentar, únicamente se agita la mezcla hasta la completa disolución de la misma.

4. Esterilizar la disolución. - una vez disuelto el medio se debe esterilizar para evitar el
crecimiento de contaminantes. Dependiendo de la forma en que vayas a utilizarse el medio,
el procedimiento será diferente:

c) Medios sólidos en placa-. Tapar el matraz con una torunta. Llevar a utilizar la
autoclave (121°c) durante 15-20 minutos. Una vez estéril repartir en placas de Petri
estériles y dejar reposo para que solidifique.

d) Medios líquidos.- una vez disueltos los componentes repartir en tubos de ensayo a
razón de unos 2-4ml por tubo, y dejar que solidifiquen.

14) Mencione cuales son los puntos críticos en la preparación de medios de cultivo.

Los principales puntos críticos durante la preparación de los medios de cultivo son:
 La limpieza del material al usar, ya que de presentarse algún residuo en alguno de los
frascos este afectaría las propiedades del medio.
 La determinación de la cantidad adecuada de polvo del medio de cultivo a usar para la
cantidad que requerimos de medio a preparar.
 Disolver el medio de cultivo de forma adecuada, empleando calor para facilitar la
disolución y evitar la formación de grumos.
 Evitar que el medio de cultivo se sobrecaliente y empiece a hervir, ya que esto
ocasionaría que las proteínas y azucares se descompongan y variaría la concentración de
la solución preparada.
 Describir cada uno de los componentes de los medios de cultivo.
15) ¿Qué norma mexicana nos indica el procedimiento para la realización de medios de cultivo?

NOM -065 SSA

16) ¿Qué pasa si el medio de cultivo se excede en el calentamiento?

produce una falla cambiando el PH, presenta turbidez ennegramiento, produce un crecimiento
escaso microorganismos
 XI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Tortora, funke y case, INTRODUCION A LA MICROBIOLOGIA, novena edición.

XII. LINKOGRAFIA

https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-i/pb-i-2-variedad.htm

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf

https://www.ugr.es/~cjl/medios%20de%20cultivo.pdf
 XIII. ANEXOS

Fig. 1.Se masea el medio,

6.47gr de agar MacCconkey Fig. 2. Se volumetra 185 ml
de agua destilada para
disolver el medio.

Fig. 3. Una vez maseado el Fig. 4. se vierte los 1q85ml de

medio se vierte en un matraz de agua destilada después del
250ml para ser diluido. medio y se agita hasta diluir.
Fig. 5. Para finalizar la dilución se lleva Fig. 6. Se le coloca una torunta y
el matraz al mechero bunsen durante capuchón de papel Kraft al matraz
unos minutos. y se rotula antes de llevar al
autoclave.

Fig. 7. Se llevan los diferentes

medios al autoclave para ser
esterilizados.