Unidad 1: Tarea 2 - Cuadro comparativo y aplicación de técnicas de biorremediación

(foro de discusión)

Procesos de Biorremediación

Presentador Por:
VIVIANA ANDREA BETANCOURTH OLAYA
CODIGO: 1117546769
Correo: vabetancourtho@unadvirtual.edu.co

Tutora:
Uriel Rodríguez Espinosa

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRÍCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE
INGENIERIA AMBIENTAL
FLORENCIA – CAQUETA
JUNIO - 2019
 CUADRO COMPARATIVO

Matriz
Técnica Definición Metodología Ventajas Desventajas Contaminantes de
aplicaci
ón
Esta técnica consiste en El aire se suministra en el sitio Altamente efectiva para tratar Tipo y concentración del Orgánicos o Suelo
suministrar aire al terreno contaminado a través de pozos de contaminaciones con contaminante. bien, la
contaminado para promover la extracción, por movimiento forzado compuestos con baja presión inmovilización Suarez
actividad de los (extracción o inyección), con bajas de vapor (menos de 1 mmHg), Perdida de nutrientes en el de Beltrán
microorganismos presentes en velocidades de flujo, con el fin de ya que su tasa de degradación subsuelo. contaminantes , R. M.
el subsuelo y biodegradar los proveer solamente el oxígeno es mucho mayor que la de inorgánicos in (2017).
hidrocarburos. volatilización (Matthews, Bajo contenido de humedad situ. Guía de
necesario para sostener la actividad
1993), Cuando los costos de del suelo y la dificultad de Suarez Beltrán, método
de los microorganismos
Bioventeo Suarez Beltrán, R. M. (2017). excavación son altos el lograr el caudal de aire a R. M. (2017). s de
Guía de métodos de degradadores. Bioventeo puede ser una través de la zona contaminada; Guía de biorrem
biorremediación para la Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía alternativa económicamente por ello requiere métodos de ediació
recuperación de suelos de métodos de biorremediación interesante. No requiere área características especiales del biorremediación n para
contaminados por para la recuperación de suelos adicional para llevar a cabo el suelo en cuanto a humedad, para la la
hidrocarburos. Recuperado de: contaminados por hidrocarburos. tratamiento, ni el uso de porosidad, conductividad recuperación de recuper
https://repository.unilibre.edu. Recuperado de: maquinaria pesada. hidráulica, etc. suelos ación
co/handle/10901/10607 https://repository.unilibre.edu.co/ha contaminados de
ndle/10901/10607 Suarez Beltrán, R. M. (2017). Requiere largos períodos de por suelos
Guía de métodos de tiempo para obtener la hidrocarburos. contam
biorremediación para la concentración final de Recuperado de: inados
recuperación de suelos hidrocarburo deseada. Los https://repositor por
contaminados por tiempos de limpieza pueden y.unilibre.edu.c hidroca
hidrocarburos. Recuperado de: durar de meses a años. o/handle/10901/ rburos.
https://repository.unilibre.edu. 10607 Recupe
Insitu co/handle/10901/10607 La descontaminación puede rado
llevarse a cabo por efecto de la de:
volatilización de compuestos https://r
más que por su eposito
Biodegradación. ry.unili
bre.edu
Suarez Beltrán, R. M. (2017). .co/han
 Guía de métodos de dle/109
biorremediación para la 01/106
recuperación de suelos 07
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607

Bioestimul En este sistema, el agua En el reactor en superficie se Esta técnica es muy útil en el El tipo de suelo no favorezca Orgánicos o Suelo,
ación subterránea es conducida a la agregan al agua: nutrientes, tratamiento de extensas zonas al crecimiento microbiano. bien, la agua
superficie por medio de un oxígeno, microorganismos contaminadas de centros inmovilización
sistema de pozos de previamente seleccionados y industriales donde no es Incremento en la movilidad de Suarez
extracción, se acondiciona en adaptados, y el efluente se retorna posible o conveniente parar el de los contaminantes. contaminantes Beltrán
un reactor para volverla a al subsuelo por medio de pozos de proceso operativo para realizar inorgánicos in , R. M.
inyectar y estimular la inyección, aspersores superficiales el tratamiento requerido. Obstrucción en los pozos de situ. (2017).
degradación bacteriana de los o galerías de infiltración (CUNNINGHAM, 2000) inyección. Guía de
contaminantes del subsuelo y distribuidas a lo largo y ancho del Suarez Beltrán, método
del acuífero. sitio que se requiere remediar. Suarez Beltrán, R. M. (2017). Suarez Beltrán, R. M. (2017). R. M. (2017). s de
Algunas veces esta técnica utiliza Guía de métodos de Guía de métodos de Guía de biorrem
Suarez Beltrán, R. M. (2017). biosurfactantes para ayudar al biorremediación para la biorremediación para la métodos de ediació
Guía de métodos de lavado de contaminantes del suelo. recuperación de suelos recuperación de suelos biorremediación n para
biorremediación para la Los suelos deben ser lo más contaminados por contaminados por para la la
recuperación de suelos homogéneos posible, con un valor hidrocarburos. Recuperado de: hidrocarburos. Recuperado de: recuperación de recuper
contaminados por de porosidad y permeabilidad al https://repository.unilibre.edu. https://repository.unilibre.edu. suelos ación
hidrocarburos. Recuperado de: aire adecuado (> 10 -10cm2). co/handle/10901/10607 co/handle/10901/10607 contaminados de
https://repository.unilibre.edu. Deben existir unas condiciones por suelos
co/handle/10901/10607 óptimas de pH (6 y 8), de humedad hidrocarburos. contam
(12-30% en peso), temperatura Recuperado de: inados
entre 0 y 40 ºC y los nutrientes del https://repositor por
suelo en relación N:P de 10:1. y.unilibre.edu.c hidroca
o/handle/10901/ rburos.
Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía 10607 Recupe
de métodos de biorremediación rado
para la recuperación de suelos de:
contaminados por hidrocarburos. https://r
Recuperado de: eposito
 https://repository.unilibre.edu.co/ha ry.unili
ndle/10901/10607 bre.edu
.co/han
dle/109
01/106
07

Bioaument Esta técnica funciona en Esta técnica funciona en No requiere área adicional El tamaño de la población de Orgánicos o Suelo
ación condiciones de laboratorio o condiciones de laboratorio o para llevar a cabo el microorganismos bien, la
biorreactor, pero en ambientes biorreactor, pero en ambientes tratamiento, ni el uso de degradadores crece inmovilización Suarez
externos (suelo o agua) su externos (suelo o agua) su maquinaria pesada. rápidamente como respuesta a de Beltrán
implantación depende de una implantación depende de una serie la contaminación del medio y contaminantes , R. M.
serie de factores. Presencia de de factores. Presencia de toxinas, Suarez Beltrán, R. M. (2017). es muy difícil, si no imposible, inorgánicos in (2017).
toxinas, nutrientes y nutrientes y condiciones Guía de métodos de incrementar la población situ. Guía de
condiciones ambientales, ambientales, movilidad y/o biorremediación para la microbiana más allá de esos método
movilidad y/o distribución de distribución de los recuperación de suelos valores. Suarez Beltrán, s de
los microorganismos y la microorganismos y la presencia de contaminados por R. M. (2017). biorrem
presencia de abundante abundante materia orgánica. Los hidrocarburos. Recuperado de: Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía de ediació
materia orgánica. microorganismos añadidos deben https://repository.unilibre.edu. Guía de métodos de métodos de n para
sobrevivir a los depredadores y co/handle/10901/10607 biorremediación para la biorremediación la
Suarez Beltrán, R. M. (2017). competir con éxito con la población recuperación de suelos para la recuper
Guía de métodos de autóctona antes de ocupar los contaminados por recuperación de ación
biorremediación para la nichos potenciales. En general, los hidrocarburos. Recuperado de: suelos de
recuperación de suelos ambientes más selectivos y la https://repository.unilibre.edu. contaminados suelos
contaminados por utilización de consorcios co/handle/10901/10607 por contam
hidrocarburos. Recuperado de: microbianos favorecen la hidrocarburos. inados
https://repository.unilibre.edu. bioaumentación. Recuperado de: por
co/handle/10901/10607 https://repositor hidroca
Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía y.unilibre.edu.c rburos.
de métodos de biorremediación o/handle/10901/ Recupe
para la recuperación de suelos 10607 rado
contaminados por hidrocarburos. de:
Recuperado de: https://r
https://repository.unilibre.edu.co/ha eposito
ndle/10901/10607 ry.unili
bre.edu

Landfarmi Esta es la técnica más usada
ng para la Biorremediación de los
lodos contaminados con
hidrocarburos y de otros
desechos de la industria
petrolera.
Suarez Beltrán, R. M. (2017).
Guía de métodos de
biorremediación para la
recuperación de suelos
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607
.co/han
dle/109
01/106
07
Esta técnica consiste en excavar los Es económico con respecto a Requiere grandes extensiones Contaminados Suelo
suelos contaminados, extenderlos otras técnicas de de terreno para disposición de con
sobre un área suficientemente Biorremediación. Es un suelos y no es viable si no se hidrocarburos y Suarez
amplia y estimular las variables de proceso considerado de bajo cuenta con suficiente área. de otros Beltrán
incidencia en el proceso para nivel tecnológico que no Cuando los contaminantes son desechos de la , R. M.
promover la actividad de los requiere exigentes hidrocarburos livianos la industria (2017).
microorganismos encargados de consideraciones de ingeniería, remediación puede ser petrolera. Guía de
degradar los hidrocarburos. Antes y a la vez permite una fácil acelerada por su método
de extender el suelo contaminado se manipulación y control de las volatilización, lo cual Suarez Beltrán, s de
deben adecuar las condiciones de la variables de diseño y generaría problemas con las R. M. (2017). biorrem
superficie para controlar los operación. autoridades ambientales donde Guía de ediació
lixiviados y las aguas lluvias. En las regulaciones de emisiones métodos de n para
áreas de riesgo de contaminación de Suarez Beltrán, R. M. (2017). atmosféricas son exigentes. biorremediación la
acuíferos, se debe impermeabilizar Guía de métodos de Cuando la contaminación es para la recuper
la zona de tratamiento con sellos de biorremediación para la profunda los costos de recuperación de ación
arcilla o geomembranas para evitar recuperación de suelos excavación y movimiento de suelos de
el arrastre de hidrocarburos solubles contaminados por tierras pueden ser altos. contaminados suelos
de las lluvias hacia las aguas hidrocarburos. Recuperado de: por contam
subterráneas. Una vez extendido el https://repository.unilibre.edu. Suarez Beltrán, R. M. (2017). hidrocarburos. inados
suelo contaminado se irriga con las co/handle/10901/10607 Guía de métodos de Recuperado de: por
soluciones de nutrientes, los biorremediación para la https://repositor hidroca
microorganismos y los aditivos recuperación de suelos y.unilibre.edu.c rburos.
químicos en el caso que sean contaminados por o/handle/10901/ Recupe
necesarios. Periódicamente se debe hidrocarburos. Recuperado de: 10607 rado
airear el suelo para suministrarle https://repository.unilibre.edu. de:
oxígeno, con la ayuda de tractores y co/handle/10901/10607 https://r
retroexcavadoras (aireación eposito
mecánica) o sistemas de inyección ry.unili
de aire comprimido. Para empezar bre.edu
el procedimiento, se hace una .co/han
búsqueda y selección de bacterias dle/109

Exsitu
Biopilas La técnica conocida como
bioceldas o biopilas es un
tratamiento de
biorrecuperación en
condiciones no saturadas.
Suarez Beltrán, R. M. (2017).
Guía de métodos de
biorremediación para la
recuperación de suelos
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607
nativas aisladas de las muestras de 01/106
suelos que se 29 encuentran 07
contaminados, ya que estas tienen
la capacidad catabólica para crecer
bajo las condiciones físico-
químicas y de estrés a las que están
sometidas, y tendrán un mejor
desempeño a la hora de la
Biorremediación.
Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía
de métodos de biorremediación
para la recuperación de suelos
contaminados por hidrocarburos.
Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.co/ha
ndle/10901/10607
Consiste en la reducción de la Esta técnica es muy eficiente Si en el proceso se generan Contaminantes Suelo
concentración de contaminantes en el tratamiento de residuos gases o vapores de derivados del
derivados del petróleo en suelos con bajas concentraciones de hidrocarburos volátiles petróleo. Suarez
excavados mediante el uso de la hidrocarburos. Por ser un regulados por la autoridad Beltrán
biodegradación a partir de la sistema cerrado permite un ambiental, o las condiciones Suarez Beltrán, , R. M.
construcción de un sistema cerrado mayor control de las variables climatológicas de la zona R. M. (2017). (2017).
que permita controlar lixiviados, del proceso, como el control pueden afectar negativamente Guía de Guía de
hidrocarburos volátiles y algunas de condiciones climatológicas la eficiencia del proceso, la métodos de método
variables de diseño mediante el adversas (baja temperatura o pila del suelo se debe cubrir biorremediación s de
suministro de nutrientes y oxígeno alto régimen pluviométrico). con membranas o poner techo para la biorrem
a través de la pila del suelo. La Cuando no se dispone de de forma similar a los recuperación de ediació
técnica consiste en la formación de espacio suficiente para invernaderos. suelos n para
pilas de material biodegradable de extender el suelo, este sistema Los vapores generados en el contaminados la
dimensiones variables, formadas permite construir pilas de proceso se deben colectar y por recuper
por suelo contaminado y materia suelo cuatro o cinco veces más tratar antes de ser emitidos a la hidrocarburos. ación
orgánica (compost) en condiciones altas que en una disposición atmósfera. Lo que incurre a Recuperado de: de
favorables para el desarrollo de los sobre el suelo (ocupa diez costos adicionales. 31 Como https://repositor suelos
procesos de biodegradación de los veces menos área). todos los tratamientos “Ex y.unilibre.edu.c contam
contaminantes. En el fondo de la Situ”, cuando la o/handle/10901/ inados
pila el 30 sistema cuenta con un
aislante que generalmente son
geomembranas o canales plásticos
para el control de lixiviados. Estas
pilas de compost pueden ser
aireadas de forma activa, volteando
la pila, o bien de forma pasiva,
mediante tubos perforados de
aireación, con distribución
permanente de nutrientes,
microorganismos y aire. En
principio, las biopilas se pueden
aplicar a la mayoría de los
compuestos orgánicos, siendo más
eficaz en los compuestos de
carácter más ligero. Necesidad de
una densidad de poblaciones
microbianas (>1.000CFU/gramo de
suelo), condiciones de humedad (40
a 85% de capacidad decampo),
temperatura (10 a 45ºC), textura
(baja proporción de arcillas), pH del
suelo adecuadas (6 a 8) y baja
presencia de metales pesados (<
2.500ppm). La concentración de
nutrientes en el suelo cuyo rango
normal de C:N:P sea de 100:10:1.
Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía
de métodos de biorremediación
para la recuperación de suelos
contaminados por hidrocarburos.
Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.co/ha
ndle/10901/10607
Suarez Beltrán, R. M. (2017).
Guía de métodos de
biorremediación para la
recuperación de suelos
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607
contaminación es muy 10607 por
profunda, el movimiento de hidroca
tierra puede requerir costos rburos.
más altos. Los hidrocarburos Recupe
deben ser no halogenados y rado
deben encontrarse en el suelo de:
en concentraciones menores a https://r
50.000 ppm. Dada la eposito
necesidad de excavación y ry.unili
posterior depósito del suelo bre.edu
contaminado, se requiere una .co/han
superficie de trabajo dle/109
relativamente grande cuyas 01/106
dimensiones dependen del 07
volumen de suelo a tratar.
Suarez Beltrán, R. M. (2017).
Guía de métodos de
biorremediación para la
recuperación de suelos
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607
Biorreactor El procedimiento consiste en
excavar el suelo contaminado
y luego introducirlo en un
reactor añadiendo nutrientes,
agua, y los cultivos
microbianos adecuados para
que se lleve a cabo la
degradación.
Suarez Beltrán, R. M. (2017).
Guía de métodos de
biorremediación para la
recuperación de suelos
contaminados por
hidrocarburos. Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.
co/handle/10901/10607
Se mezcla bien y se airea la En comparación con otros Debido al energético Contamiantes de Suelo,
suspensión hasta que las procesos de tratamiento, los mezclado y a la aireación emisiones. aire
transformaciones de los compuestos reactores vía suspensión forzada se favorece el escape dióxido de
seleccionados para su eliminación proporcionan el mayor de emisiones de aire, por ello carbon Suarez
alcanzan el nivel deseado. A contacto entre los la suspensión no es una buena Beltrán
continuación se detienen el contaminantes, los elección para suelos donde los Suarez Beltrán, , R. M.
mezclado y la aireación, y se deja a microorganismos, el oxígeno, compuestos volátiles sean R. M. (2017). (2017).
los sólidos separarse de los fluidos el agua y los nutrientes. La mayoría. Esta técnica Guía de Guía de
por sedimentación. El sedimento es capacidad de controlar los demanda mayor cantidad de métodos de método
retirado y, si la transformación ha sistemas del tratamiento vía dinero a comparación de otras biorremediación s de
tenido éxito, el suelo se devuelve a suspensión es mucho mayor y técnicas de biodegradación. para la biorrem
su lugar de origen, mientras que los por tanto puede ser la Suarez Beltrán, R. M. (2017). recuperación de ediació
líquidos se tratan como aguas tecnología más efectiva. Es Guía de métodos de suelos n para
residuales. El suministro de más rápido y requiere menos biorremediación para la contaminados la
oxígeno puede realizarse mediante superficie que otros sistemas. recuperación de suelos por recuper
aireación difusa, turbina difusora y El tratamiento vía suspensión contaminados por hidrocarburos. ación
aireación superficial. La tasa de puede aplicarse en particular a hidrocarburos. Recuperado de: Recuperado de: de
transferencia de oxígeno necesaria los suelos contaminados con https://repository.unilibre.edu. https://repositor suelos
es función de la tasa de degradación residuos oleosos de co/handle/10901/10607 y.unilibre.edu.c contam
de los compuestos orgánicos y de la consistencia alquitranada. o/handle/10901/ inados
tasa de crecimiento microbiano. Su Suarez Beltrán, R. M. (2017). 10607 por
determinación no es fácil de hacer, Guía de métodos de hidroca
sin embargo, las tasas de biorremediación para la rburos.
transferencia disminuyen al recuperación de suelos Recupe
aumentar la concentración de contaminados por rado
sólidos suspendidos. El mezclado y hidrocarburos. Recuperado de: de:
el suministro de nutrientes también https://repository.unilibre.edu. https://r
son fundamentales, ya que por el co/handle/10901/10607 eposito
primero se incrementa el contacto ry.unili
entre los microorganismos y los bre.edu
componentes contaminantes, dando .co/han
como resultado un incremento de dle/109
las velocidades de transferencia de 01/106
masa y de reacción. Los nutrientes 07
normalmente optimizan la
biorrecuperación por favorecer el
crecimiento de los
microorganismos. Por otro lado, el
mezclado y la aireación ayudan a
romper los flóculos de tierra y a
disolver los contaminantes.
(Mishra, 2001)
Suarez Beltrán, R. M. (2017). Guía
de métodos de biorremediación
para la recuperación de suelos
contaminados por hidrocarburos.
Recuperado de:
https://repository.unilibre.edu.co/ha
ndle/10901/10607
 PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS DEL ARTÍCULO

Título EVALUACIÓN DE LA BIOESTIMULACIÓN FRENTE A LA

ATENUACIÓN NATURAL Y LA BIOAUMENTACIÓN EN UN SUELO
CONTAMINADO CON UNA MEZCLA DE GASOLINA - DIESEL
Propósito El objetivo principal de este trabajo fue la biorremediación de un suelo
contaminado con la mezcla de combustibles gasolina-diésel a escala de
laboratorio, para evaluar la bioestimulación frente a la atenuación natural y la
bioaumentación.
Escala El objetivo de este trabajo fue evaluar la bioestimulación frente a la
atenuación natural y la bioaumentación a escala de laboratorio. Para realizar el
procedimiento de bioaumentación fue aislada e identificada una bacteria con
capacidad para degradar hidrocarburos bajo las condiciones de operación y de
fácil adaptación al suelo actuando como un agente exógeno.
Matriz de estudio Los análisis finales del suelo muestran el cambio de textura para tratamiento
control. Se atribuye este cambio a la adición del ácido clorhídrico, el cual
diluyo la arcilla liberándose el aluminio contenido en ella; incrementándose su
valor de 0,4 cmolc/kg a 26,8 cmolc/kg (ver tabla 2). Así, la arcilla liberó sus
silicatos aumentando la cantidad de arena y el aluminio presente actúo como
un floculante, permitiendo que partículas pequeñas se aglomeraran debido a la
diferencia de carga, registrando el aumento de los limos. La alta cantidad de
aluminio presente en el control disparó la conductividad eléctrica del suelo
alcanzando un valor de 42dS/m, el cual en los otros tratamientos no sobrepaso
de 1 dS/m. La variación en el pH al final del experimento lo explican los
diferentes tratamientos aplicados, con su disminución en el tratamiento A
hasta 2,6 y su aumento en los tratamientos C hasta 7,6 y D hasta 7,4. Para el
tratamiento B no se aprecia ningún cambio debido a que esté no recibió
ninguna sustancia adicional (ver tabla 2).

La materia orgánica en el suelo se incrementó en todos los tratamientos

debido a la adición de los combustibles, pasando del 3,6 al 4,9% en el
tratamiento A, al 5,9% en el tratamiento B, al 5,5% en el tratamiento C y al
5,0% en el tratamiento D (ver tabla 2).
Técnicas de La Bioestimulación es una técnica en la
biorremediación cual se adicionan macro y micro nutrientes al suelo para estimular el
empleadas crecimiento microbiano y así aumentar la población de
Microorganismos.
Contaminantes tratados GASOLINA - DIESEL
Organismos vivos Los nutrientes empleados en los tratamientos fueron: urea al 99.8% de pureza
utilizados (Gentech) al 0.03M y fosfato de potasio dibásico (Mallinckrodt AR®) al
0.003M; calculados empleando la ecuación de McCarty en una relación de
C:N:P de 100:17,5:1,75 [8].
Resultados
Degradación de los HTP:

En los tratamientos con la aplicación de nutrientes el amonio se incrementó

por la adición de urea, el cual representa la fuente más directa de nitrógeno
para el crecimiento de los microorganismos [12]. Además, el tratamiento por
atenuación natural presenta la reducción de una parte de la cantidad inicial del
amonio y el agotamiento, así como en el control, de la concentración de
nitrato.

Para el análisis de los hidrocarburos alifáticos se tuvieron como blanco 19

compuestos desde el undecano hasta el nonacosano. En la tabla 3 se aprecia
como para los primeros 10 compuestos su concentración se reduce alrededor
de una tercera parte y al ir creciendo la cadena de hidrocarburos, dicha
reducción en la concentración va disminuyendo. Además, existe una
incongruencia con los resultados obtenidos para los tres últimos compuestos,
los cuales reportan una concentración final por encima de la inicial. Este
resultado se puede explicar por las limitaciones del método, el cual es
apropiado para analizar mezclas de hidrocarburos desde C10 hasta C24 en
concentraciones de 10 hasta 200 mg/l [12].

Recuento de Bacterias

Los recuentos se realizaron durante las primeras 10 semanas del experimento

tomando una muestra representativa de cada tratamiento. Para todos los
tratamientos, el crecimiento de las bacterias heterótrofas es superior al
 observado para las bacterias hidrocarburoclastas con excepción de las
primeras 5 semanas del tratamiento por atenuación natural. Igualmente, se
evidenció la presencia de bacterias hidrocarburoclastas en todos los
tratamientos, lo que sugiere la adaptación de los microorganismos a la nueva
fuente de carbono y energía. El crecimiento de ambas poblaciones demuestra
que no hubo inhibición de las bacterias por el suministro de nutrientes.
Referencia bibliográfica Gómez, W., Gaviria, J., & Cardona, S. (2009). Evaluación de la
bioestimulación frente a la atenuación natural y la bioaumentación en un suelo
contaminado con una mezcla de gasolina-diesel. Dyna, 76(160), 83-93.
Recuperado de: https://www.redalyc.org/pdf/496/49612068032.pdf

DIAGRAMA DE FLUJO

CARACTERÍSTICAS DEL LUGAR DE EVALUACIÓN

EVALUACIÓN DE LA BIOESTIMULACIÓN FRENTE A LA

ATENUACIÓN NATURAL Y LA BIOAUMENTACIÓN EN UN SUELO
CONTAMINADO CON UNA MEZCLA DE GASOLINA - DIESEL

Suelo (predio
universitario)

Nutrientes utilizados

Urea al 99.8% de Fosfato de potasio

pureza (Gentech) al dibásico
0.03M (Mallinckrodt AR®) al
0.003M
Calculados con la Ecuación
de McCarty en una relación
de C:N:P de 100:17,5:1,75

Características del suelo

 PROCEDIMIENTO:

Tratamiento previo de secado,

desagregado y tamizado

Montaje de los tratamientos se Se garantizó que el proceso fuera

empleó el suelo con tamaños de aeróbico y se logrará una distribución
partículas entre 2 y 2.36 mm más homogénea del combustible

Esterilización: autoclave operando a una

temperatura de 121ºC y una presión de 1.5
Kg/cm2 durante 4 horas.

Vertido de la mezcla de combustibles gasolina-diesel en igual

cantidad:
Bandejas de un volumen nominal de 9000 cm3 con 2 kg de
suelo cada una para los siguientes tratamientos:

Secuenciación del gen ribosomal 16S, el cual se obtuvo

mediante la reacción en cadena de la polimerasa.

Este microorganismo se inóculo en 5 ml del medio Luria

Bertani líquido durante 12 horas.

Luego, se pasó a un volumen de 50 ml del mismo medio a unas

condiciones de operación de 180 rpm y una temperatura de
30 ºC durante 24 horas.

Fue centrifugado a 4000 rpm durante 5 minutos, obteniendo

el pellet que fue resuspendido en 300 ml de agua ultrapura

Método de la agitación – centrifugación

Extracción de hidrocarburos

Pasos:
- En viales de polipropileno para centrifuga de 50 ml se depositó 1 g de suelo seco,
al cual se le adicionaron 2.5 g de Na2SO4 anhidro (Panreac).
- Luego se le agregó a cada vial 5 ml de diclorometano (Chemi, grado analítico) y se
llevó al vortex por 90 segundos. Las muestras fueron centrifugadas en un equipo
Jouan serie MR22 a 7000 rpm durante 20 minutos.
- El proceso de lavado del suelo se repitió dos veces más sobre el residuo sólido
remanente hasta lograr un volumen de 15 ml de sobrenadante.

Se empleó:
- Un rotoevaporador Heidolph (Laborota 4003-control) operando a una
temperatura de 40 ºC y una presión de 740 mmHg para separar el extracto
orgánico del solvente y el extracto se resuspendió en 1ml de diclorometano.
- Las muestras fueron almacenadas a una temperatura de -5 ºC.
Referencias bibliográficas:

Gómez, W., Gaviria, J., & Cardona, S. (2009). Evaluación de la bioestimulación frente
a la atenuación natural y la bioaumentación en un suelo contaminado con una mezcla de
gasolina-diesel. Dyna, 76(160), 83-93. Recuperado de:
https://www.redalyc.org/pdf/496/49612068032.pdf