RECUENTO DE MICROORGANISMOS STAPHYLOCOCCUS

COAGULASA POSITIVA

BARBOSA JAIME ANNY

IGLESIA HERRERA JOHANNYS
RIVERA ANAYA ANGEL
MUÑOZ DUARTE LUIS
VEGA USTARIZ JUAN L

YUMAR RUIDIAZ MENDEZ

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
VALLEDUPAR-CESAR
2017
1. CONTENIDO:

1.1. FUNDAMENTO: Es el método comúnmente utilizado para determinar el número de

células viables o de unidades formadoras de colonias (ufc) en un alimento, e incluye todos los
géneros aerobios y facultativos que crecen en medios simples a una temperatura entre 20 y 45
ºC.

1.2. DEFINICIONES:
1.2.1. Baird Parker (Triptona, fuente de proteína, extracto de carne, extracto de levadura, teluito
potasio, yema de huevo, glicina, cloruro de litio, Agar-gel)
1.2.2. microorganismo viables: son aquellos microorganismos que tienen la propiedad de poder
reproducirse, en el caso de las bacteria de formar colonias.
1.2.3. UFC: Unidades formadoras de colonias.

1.3. CONDICIONES GENERALES: lo microorganismos aerobios grampositivos. se

consideran como indicador del grado de contaminación de los alimentos en cualquier etapa
del proceso de producción, permite también obtener información sobre la alteración incipiente
de los alimentos y su probable vida útil.

1.4. MATERIALES Y REACTIVOS:

1.4.1. Gradillas
1.4.2. Tubos de ensayo tapa rosca
1.4.3. Bolsas plásticas estériles
1.4.4. Agua peptonada al 0.1% estéril.
1.4.5. Baird Parker
1.4.6. Cajas de petri estériles
1.4.7. Instrumentos para preparar las muestras: Cuchillos, Tenedores, Pinzas, Tijeras,
Cucharas, espátulas, Sacabocados, Morteros con sus respectivos pistilos etc.
Previamente esterilizados.
1.4.8. Muestra (leche en polvo klin)

1.5. EQUIPOS:
1.5.1. Refrigerador
1.5.2. Contador de colonias
1.5.3. Incubadora a 37ºC +/- 2ºC.
1.5.4. Lo necesario para la preparación y dilución de los homogenizados de los alimentos.
2. RESUMEN
2.1 OBJETIVO
Determinar la presencia de microorganismos staphylococcus coagulasa positiva.

2.2 METODOLOGIA.
Se analizó una muestra de leche en polvo adquirida en una tienda ubicada en el barrio sabana
de la ciudad de Valledupar departamento del Cesar, esta fue analizada en la Universidad
Popular del Cesar; de este alimento se emplearon cuatro muestras representativas; El
microorganismo estudiado fue: Staphylococcus coagulasa positiva. Para la determinación de
este se utilizó el método de recuento en placa en Baird Parker (Triptona, fuente de proteína,
extracto de carne, extracto de levadura, teluito de potasio, yema de huevo, glicina, cloruro de
litio, Agar-gel). Todas las cajas se incubaron durante 5 días a 37°C, los resultados se expresan
como UFC/g.

2.3 RESULTADOS
No hubo crecimiento de colonias en ninguna de las dos diluciones 101 y 102, es decir, que
estamos dentro de la NORMA TÉCNICA COLOMBIANA 1036, 30-10-2002, por lo tanto es
apto para el consumo humano

2.4 CONCLUSION
La evaluación mediante el recuento de Staphylococcus coagulasa positiva en las muestras
analizadas, refleja la eficiencia en el proceso de elaboración y conservación de la leche en polvo
comercializada en la ciudad de Valledupar, lo cual no representa un riesgo potencial para la
salud del consumidor.

3. PROCEDIMIENTO:

3.1. Método de Recuento en Placa:

3.1.1. Se mezcló muy bien la muestra (liquida) para asegurar su homogenización.
3.1.2. Se desinfectó con alcohol al 75% el sitio por donde fue extraída la muestra.
3.1.3. Se abrió asépticamente (con el mechero en medio) y se adecuo la muestra.
3.1.4. La muestra era sólida, se tomaron porciones de diferentes sitios de ella.
3.1.5. Se pesaron 11 gramos de la muestra en balanza analítica, sobre un papel
graff estéril.
3.1.6 Se añadió al recipiente de dilución que contenía 99 ml de agua peptonada para
obtener la dilución de 101.
3.1.7. Se mezcló al agitar vigorosamente el recipiente para homogenizar.
3.1.8. Se preparó la dilución 102 transfiriéndose 1 ml de la dilución 101 a un tubo de
ensayo que contenía 9 ml de agua peptonada, se agitó cuidadosamente.
3.1.9. Se transfirió por duplicado alícuotas de 1 ml de cada una de las diluciones
consecutivas en cajas de petri estériles.
3.1.10. Se vertió en las cajas de petri, 15 ml de Baird Parker
3.1.11. el medo de siembra realizado fue por superficie, Se mezcló el inoculo con el medio de
cultivo.
3.1.12. Se hizo control de esterilidad del medio de cultivo incubando una caja que
contenía Baird Parker.
3.1.13. Se hizo control de esterilidad del agua peptonada 0.1 % incubando una caja
que contenía 1 ml de agua peptonada y Baird Parker.
3.1.14. Se incubaron a 37ºC +/- 2ºC durante 5 dias.
3.1.15. Se calculó y se interpretó los resultados.

4. RESULTADOS
DILUCIONES

Disoluciones 10-1 Disoluciones 10-2

Caja de Petri 1 Caja de Petri 2 Caja de Petri 1 Caja de Petri 2

Cantidad: 0 Cantidad: 0 Cantidad: 0 Cantidad : 0

Reportamos < 1 X 10 (U.F.C) / gr de staphylococcus coagulasa positiva en leche en polvo

Observamos que no hubo unidades formadoras de colonias (u.f.c) en la muestra obtenida de
leche en polvo, es decir que es apto para el consumo humano.

4.1 NORMATIVA NACIONAL.

NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 1036 (Cuarta actualización) ministerios de salud-
Colombia.
Se efectuará de acuerdo con lo establecido en la NTC 4779 o en la norma IDF 145:1990.
NTC 4779:2000, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Método horizontal
para el recuento de estafilococos coagulasa positvo –Staphylococcus aureus - y otras especies.
Desde la producción de las materias primas hasta el punto de consumo, los productos regulados
por esta norma deberán estar sujetos a una serie de medidas de control, las cuales podrán incluir,
por ejemplo, la aplicación del sistema HACCP, y deberá demostrarse que estas medidas pueden
lograr el grado apropiado de protección de la salud pública.
Los productos regulados por esta norma deberán ajustarse a los criterios microbiológicos
establecidos de acuerdo con los Principios para el establecimiento y la aplicación de criterios
microbiológicos para los alimentos (CAC/GL 21-1997). Además deben cumplir los requisitos
establecidos en la Tabla 2.

Fuente: https://es.slideshare.net/joseluis699/ntc1036-lecheenpolvo

5. ANÁLISIS DE RESULTADO
Como se ha resaltado anteriormente el resultado en la práctica ha dado que la muestra
representativa de leche en polvo es apta para el consumo humano, debido a que esta no presenta
unidades formadoras de colonias de staphylococcus coagulasa positiva, y porque reúne los
requisitos mínimos de calidad exigidos por la norma técnica colombiana NTC 1036.

5.1 PRIMER AUTOR:

Germán Darío Byczko - Nicolás Andrés Byczko (2011), realizaron un estudio de los
componentes nutriciones y microbiológico en la leche de búfala en polvo.
La leche de búfala se destaca entre otras ya que posee varios compuestos nutricionales. Presenta
mayor contenido de proteínas, carbohidratos, grasa, minerales y calorías que la leche de vaca.
Posee un 25 % más de aminoácidos esenciales, a excepción de cistina y triptófano. Tiene mayor
contenido de vitamina A y antioxidantes como el tocoferol y el ácido ascórbico. A demás
contiene mayores concentraciones de calcio, hierro, manganeso y boro.
Se utiliza la leche en polvo ya que nos permite, con los procesos adecuados, una mayor vida
útil del producto, facilita las tareas de almacenamiento y distribución sin refrigeración. La leche
de búfala al contener mayor cantidad de sólidos totales que otras leches, necesarios en las
industrias de sus derivados, permite un ahorro energético en los procesos de evaporación y
concentración, ya que se alcanzará más rápido la concentración final deseada. Los análisis
microbiológicos reportados por la cada muestra es 10 UFC/g de Estafilococus coagulasa
positiva en le leche en polvo de búfala. Lo cual indica que acta para el consumo humano y
además favorece muchos factores nutricionales en la alimentación del ser humando por su alto
contenido de grasas y nutriente y minerales.
5.2 SEGUNDO AUTOR:

Nestlé (2009), beneficios nutricionales de la leche en polvo.

la leche en polvo tiene atributos tan importantes como el rendimiento, la frescura y una verdad
condición, larga vida útil, debido a la posibilidad de dosificar el consumo del producto y sus
características que la convierten en un alimento indispensable para a porta, nutrición, salud y
bienestar.

6. CONCLUSIONES.
La determinación staphylococcus coagulasa positiva en los alimentos tiene gran importancia
desde el punto de vista en la reproducción de microorganismos ya que algunos de ellos afectan
la vida útil del alimento y por ende la vida del consumidor. Ha sido importante la determinación
de staphylococcus coagulasa positiva en la muestra de leche en polvo, y el método de su
identificación a través del cual se puede evaluar y cuantificar el contenido de microorganismos
presentes en la muestra y de allí determinar si es apto o no para el consumo humano.
La leche constituye un alimento básico en la nutrición humana, por el aporte de macro y
micronutrientes como son las proteínas de alto valor biológico y el calcio. Durante el primer
año de vida la leche materna es fundamental, ya que cuenta con todos los nutrientes necesarios
para un óptimo crecimiento y desarrollo del niño. Posteriormente es reemplazada por leche de
vaca y alimentos sólidos, para lograr una alimentación balanceada. Debido a la práctica
realizada en la muestra la leche en polvo durante la cual se incubó a 5 días a 37ªc; el recuento
de las placas y el reportado en el informe. < 1 X 10 (U.F.C) / gr de staphylococcus coagulasa
positiva en leche en polvo. El staphylococcus coagulasa positiva es uno de los patógenos
humanos no esporo formador más resistente, pues puede sobrevivir por extensos periodos de
tiempo. Es por esto que para algunos alimentos procesados o tratados, es un indicador del grado
de contacto humano o con alimentos naturales no tratados de origen natural dentro de la fábrica
de alimentos.
7. RECOMENDACIONES.
7.1. Empresa productora- comercializadora. Leche polvo leche KLIM.
Debido a lo observado en la práctica realizada en la muestra de leche en polvo, se comprobó
que este producto esta en óptimas condiciones, debido a que no se presentó ningún tipo de
crecimiento de microrganismo en las muestras de cada dilución correspondiente.
Lo propuesto por la empresa productora de la leche en polvo; da buenos resultado en la
conservación del alimento ya que tiene buenos parámetros de conservación y transformación la
invitamos a que siga fortaleciendo la calidad de los productos y brindar de este modo una
seguridad al consumidor.
7.2 AL CONSUMIDOR.
Al momento de buscar alternativas en su alimentación, que selecciones alimentos que brinde
una seguridad alimentaria y optar por conseguir un alimento que cumpla con todos los
parámetros de calidad en su manipulación y transformación y sin embargo que el alimento no
piedad su valor nutricional.
Debido que a Las empresas procesadoras de la materia prima llevan a cabo Los análisis
microbiológicos, presentes en las muestras antes de ser sometidas al mercado; Con el fin de
determinar la calidad del producto y es necesario tener en cuenta la higiene personal y usar
técnicas de trabajo que garantice, en la calidad del estudio; la exclusión de contaminación
externa. Dado que, en estas condiciones, es posible brindar únicamente unos pocos ejemplos de
las precauciones que se deben tomar durante los análisis microbiológicos, el conocimiento
completo de las técnicas microbiológicas y de los microorganismos involucrados es esencial.

7.3. EN EL LABORATORIO.
Establecer las condiciones sanitarias del aula del laboratorio esterilizando las muestras,
materiales y equipos, el personal manipulador con la instrumentaría necesaria.
Al momento de trabajar con diferentes muestras de alimentos, hay que verificar que sus
propiedades organolépticas estén en óptimas condiciones y sin duda tener en cuenta la
temperatura si es algún alimento bastante susceptible al deterioro con el ambiente, llevando
acabo todas esas precauciones se desarrollaría una práctica satisfactoria dependiendo del
objetivo de ella.
Cuando llegue el momento de preparar una muestra para su posterior análisis tener la
precaución de los diferentes microrganismos presentes en el ambiente que pueden contaminar
muy rápidamente la muestra y los utensilios alterando el resultado a obtener, por lo cual se debe
trabajar a 10 cm del mechero.
Una para el lugar donde dejamos la muestra debe de ser apto esterilizado, para no contaminar
la muestra en análisis y evitar la circulación de personal en el recinto.
8. BIBLIOGRAFÍAS.

Germán Darío Byczko - Nicolás Andrés Byczko (2011). leche de búfala en polvo componentes
nutricionales y análisis microbiológico. Recuperado.
file:///C:/Users/ANGEL/Downloads/Dialnet-LecheDeBufalaEnPolvo-4216919.pdf

Resolución número 02310 DE 1986 (24 de Febrero de 1986). Límites permisibles

microbiológicos de los derivados lácteos. Recuperado.
https://www.invima.gov.co/images/stories/resoluciones/resolucion_02310_1986.pdf

zela, jesús maría (2005). Aspectos nutricionales y tecnológicos de la leche. recuperado.

http://www2.congreso.gob.pe/sicr/cendocbib/con3_uibd.nsf/7AE7E7AB111562710525797D0
0789424/$FILE/Aspectosnutricionalesytecnol%C3%B3gicosdelaleche.pdf

Norma técnica colombiana 1036 (2002). Derivados lácteos leche en polvo. Recuperado.
https://es.scribd.com/document/205406140/50092033-NTC1036-pdf