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LABORATORIO DE BIOQUIMICA
HORA: 13:30 - 15:30
TEMA: TRANSPORTE ELECTRONICO: ESTUDIO DE LA ACCION
ENZIMATICA DE LA SUCCINATO DESHIDROGENASA Y DE LACTATO
DESHIDROGENASA
SEMESTRE:
AREQUIPA – PERÚ
TRANSPORTE ELECTRONICO: ESTUDIO DE LA ACCION ENZIMATICA
DE LA SUCCINATO DESHIDROGENASA Y DE LACTATO
DESHIDROGENASA
OBJETIVO
1. Poner de manifiesto experimentalmente una de las etapas del metabolismo
intermediario y la acción de las enzimas de oxido-reducción, haciendo uso de un
aceptor de electrones como el azul de metileno.
INTRODUCCIÓN
Sucrosa 0.25 M
Succinato de sodio 0.1 M
Malonato de sodio 0.5 M
Buffer fosfato pH 7.4 0.1 M
Azul de metileno 0.05%
Aceite mineral
Tubos de ensayo
Pipetas
Morteros
Centrífuga
Gradilla
PARTE EXPERIMENTAL
METODO DE TRABAJO
-Preparación del homogenizado. Colocar un mortero sobre hielo picado, luego pesar
10.0 g. de hígado, corazón o músculo de rata o de conejo; picarlo y colocarlo sobre
el mortero. Añadir 90.0 ml de sucrosa 0.25 M la cual debe estar fría, homogenizar y
luego centrifugar a 8000 rpm durante 10 min. Decantar el sobrenadante en un beaker
y guardarlo e frío hasta su uso.
Tubo N° 1 2 3 4
Succinato de sodio 0.1 - 0.5 0.5 0.5
Buffer fosfato pH 7.4 2.0 2.0 2.0 2.0
Malonato de sodio - - 0.5 -
Cianuro de potasio 0.1 M - - - 0.5
Agua destilada 1.5 1.0 0.5 0.5
Azul de metileno 0.05% 0.5 0.5 0.5 0.5
Extracto enzimático 0.5 0.5 0.5 0.5
Aceite mineral 1.0 1.0 1.0 1.0
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
BIBLIOGRAFIA