UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA-CICLO DE KREBS

JUAN CAMILO BEDOYA-415505

INRODUCCION
El ciclo de Krebs (conocido también como ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo
del ácido cítrico) es un ciclo metabólico de importancia fundamental en todas las
células que utilizan oxígeno durante el proceso de respiración celular. En estos
organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas
metabólicas responsables de la degradación y desasimilación de los
carbohidratos, las grasas y las proteínas en anhídrido carbónico y agua, con la
formación de energía química.
El ciclo de Krebs es una ruta metabólica anfibólica, ya que participa tanto en
procesos catabólicos como anabólicos. Este ciclo proporciona muchos
precursores para la producción de algunos aminoácidos, como por ejemplo el
cetoglutarato y el oxalacetato, así como otras moléculas fundamentales para la
célula.
La actividad de las enzimas puede detectarse en el laboratorio mediante el uso de
moléculas indicadoras en forma oxidada, cuya reacción por FADH2 puede inferirse
por el cambio de color del indicador. En presencia del inhibidor competitivo
Malonato, la reacción no se llevara a cabo.

MATERIALES
 Corazón de bovino
 Mortero
 Arena lavada
 Tampón de fosfatos
 Hielo
 2,6 Diclorofenol Indofenol
 Succinato de sodio
 Sustrato enzimático
 Malonato de sodio

Tubo Buffer Indicador Succinato Malonato

1 3ml 0.5ml 0 0
2 2ml 0.5ml 1ml 0
3 1ml 0.5ml 1ml 0
 4 1ml 0.5ml 1ml 1ml

RESULTADOS
1-PREPARCION DE EXTRCTO ENZIMATICO
Obtención de la enzima por medio de la maceración del corazón, obtención un
líquido rojo con pequeñas partículas.

2-DETECCION DE SUCCINATO
Se trata de un complejo formado en mamíferos por 4 subunidades proteicas.
Cataliza la reacción de oxidación del succinato a fumarato acoplándola con la
reducción de la ubiquinona a ubiquinol. El acoplamiento se realiza gracias a una
cadena de oxidaciones en varios coenzimas redox incluidos en este complejo.
La coenzima Q (ubiquinona) difunde entre la región hidrófoba de la bicapa lipídica
y el sitio de unión en las subunidades C y D del complejo II, integradas en la
membrana. Una vez reducido, el ubiquinol (QH2) puede desplazarse por la
membrana y así transportar los electrones hasta el complejo III.

Balance global en el complejo II: succinato + Q fumarato + QH2

En el tubo 2 se puede ver un cambio de coloración rápidamente, de color azul a

marrón, esto debido a que la enzima deshidrogena al succinato y cede H2 al FAD
para dar FADH2. Y el FADH2 que se encuentra reducido interacciona con el
indicador para pasar de azul pálido a café rojizo.

3-EFECTO DEL CAMBIO EN LA CONCENTRACION DE LA EZIMA

La velocidad de la reacción es directamente proporcional a la concentración de la
enzima a cualquier concentración de substrato. Por ejemplo, si la concentración de
enzima es disminuida a la mitad, la velocidad inicial de la reacción (v0) es reducida
también a la mitad de la original
La velocidad de transformación de los sustratos de una reacción en los
correspondientes productos, mediante una enzima y bajo condiciones de estado
estacionario, es dependiente tanto de las concentraciones de la enzima como de
los sustratos.
En el tubo de ensayo se pudo observar que al aumentar la concentración de
enzima, la velocidad de la reacción aumento.
4-EFECTO INHIBIDOR DE MALONATO
El malonato es un inhibidor competitivo de la reacción de la succinato
deshidrogenasa y bloquea la transformación del succinato a fumarato. El malonato
bloquea el flujo de metabolitos a través del ciclo, deteniendo completamente la
oxidación del piruvato.
Se pudo observar que no hubo reacción en el tubo de ensayo que contenía
malonato. Comprobando así la acción de inhibición que tiene sobre la oxidación
del piruvato

CONCLUSIONES
1. La velocidad de reaccion es directamente propocional a la cantidad de
enzima que se tenga y sustrato.
2. El ciclo de Krebs es una via anabolica y catabolica al mismo tiempo.
3. La labor de las enzimas es vital para la vida en el mundo, ya que gracias a
ellas se catalizan reacciones que no dan espera, como la produccion de
energia.

BIBLIOGRAFIA
http://www3.uah.es/jcdiez/bioquimica/TEMA26/RESPUESTAS-TEMA%2026.pdf
http://html.rincondelvago.com/cinetica-de-las-reacciones-quimicas.html
https://es.wikipedia.org/wiki/Ciclo_de_Krebs