BIOQUIMICA DE LOS ALIMENTOS

PRACTICA N° 6
RESPIRACIÓN AEROBIA Y ANAEROBIA

I. OBJETIVOS

 Diferenciar entre la respiración anaerobia y aerobia.

 Comparar la producción de CO2 en el proceso de respiración celular bajo

diferentes estados de actividad física del cuerpo.

II. MARCO TEÓRICO

Las rutas metabólicas comparten varias características comunes, por ejemplo, la

mayoría requiere de ATP como fuente fundamental de energía. La glucosa que
entra a las células se puede degradar para producir energía. La ruta por la cual la
glucosa se degrada se denomina glucolisis; si la célula no tiene una demanda de
energía, la glucosa se almacena en las moléculas del glicógeno. La ruta
por la cual se produce el glicógeno se denomina glicogénesis. Lo opuesto de la
glicogénesis es la glicogenólisis.
La oxidación de la glucosa es una fuente principal de energía en la mayoría de las
células. La primera fase de este proceso es la glucólisis, en la cual la molécula de
glucosa (6C), se escinde en dos moléculas de ácido pirúvico (3C). Este paso produce
un rendimiento neto de2 moléculas de ATP y dos moléculas de NADH. La segunda
fase de la degradación de la glucosa es la respiración aeróbica que ocurre entre
etapas: ciclo de Krebs, transporte de electrones y fosforilación oxidativa. En
ausencia de O2 el ácido pirúvico de la glucólisis se convierte en etanol o ácido
láctico mediante fermentación. En el curso de la respiración las moléculas de ácido
pirúvico se fraccionan en grupos acetilos; los cuales ingresan al ciclo de Krebs. En
este ciclo los grupos acetilos se oxidan por completo a CO2, se reducen cuatro
aceptores de electrones (tres NAD+ y un FAD) y se forma GTP. La respiración celular
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es el conjunto de reacciones bioquímicas por las cuales determina dos compuestos

orgánicos son degradados completamente, por oxidación, hasta su conversión en
sustancias inorgánicas, proceso que rinde energía (en forma de ATP) aprovechable
por la célula. Los substratos habitualmente usados en el proceso son
la glucosa, otros hidratos de carbono ácidos
grasos, incluso aminoácidos, cuerpos cetónicos u otros compuestos orgánicos.

En el citosol la glucosa inicialmente es activada utilizando la célula 2 ATP,

posteriormente en el proceso se generan 4 ATP por un proceso denominado:
fosforilación a nivel de sustrato, que es una forma primaria de sintetizar ATP a nivel
citoplasmático. Simultáneamente durante la degradación de la glucosa se liberan
hidrógenos citoplasmáticos en un proceso conocido como deshidrogenación los
cuales son retenidos por la coenzima NAD+ que tras recibir 2H, reduce a NADH+H. El
ácido pirúvico producido, es una molécula clave que puede continuar a través de dos
vías citoplasmáticas:

 Vía anaeróbica: Se da cuando hay escasez o ausencia de oxigeno citoplasmático,

también se llama vía fermentativa de la cual se conocen dos formas.

 Fermentación láctica: Ocurre por ejemplo en el tejido muscular tras ejercicios

intensos donde los ácidos piruvicos son reducidos a ácidos lácticos los cuales
atraviesan fácilmente la membrana y pasan a la sangre, de aquí una parte se
pierde por la orina y otra parte es llevada al hígado donde un grupo de
enzimas que trabajan con piruvato trasforman la glucosa.

PRODUCCIÓN DE CO2 CUANDO HACEMOS EJERCICIO

La sangre arterial permanece casi completamente saturada de oxigeno (alrededor
del 98%)incluso durante la realización de esfuerzos intensos. Las acumulaciones de
CO2 en el cuerpo son muy grandes y se pueden alterar simplemente al respirar
profundamente o al ejecutar ejercicios de intensidad elevada. Cuando la intensidad
del ejercicio aumenta, la demanda de hidratos de carbono por parte de los
músculos también aumenta. A medida que se van usando más hidratos de carbono
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el valor de R (índice de intercambio respiratorio) se va elevando. Esta elevación del

valor de R refleja las demandas de glucosa de la sangre y del glucógeno muscular,
pero puede indicar también que se está descargando más CO2 desde la sangre del
que están produciendo los músculos. Al llegar al agotamiento cerca del mismo, el
lactato se acumula en la sangre. El cuerpo intente invertir esta acidificación
liberando más CO2. La acumulación de lactato incrementa la producción de CO2, ya
que el escaseo de ácido provoca que el ácido carbónico de la sangre se convierta
en CO2. En consecuencia, el CO2 sale de la sangre penetrando en los pulmones para
ser espirado, y aumenta la cantidad de CO2 liberado. Al expulsar CO2 purificamos
la sangre. En el ejercicio la concentración de iones hidrogeno se eleva, los iones
bicarbonato se combinan con el exceso de protones, y así los elimina de la solución.
El CO2 que expulsamos durante la Espiración surge de la respiración celular aerobia
que se realiza tanto en el hialoplasma (glucólisis), y en el interior de las
Mitocondrias (ciclo de Krebs en la matriz mitocondrial y cadena oxidativa en los
Oxisomas ubicados en el lado interno delas Crestas Mitocondriales).

FRECUENCIA RESPIRATORIA AL HACER EJERCICIO

La frecuencia respiratoria incrementa al realizar una actividad porque cuando el
cuerpo es sometido a una actividad física se requiere mayor cantidad de oxígeno y
de un potencial energético mayor que el normal para obtener más energía a partir
de la respiración aerobia. A medida que la actividad aumenta, mayor será la
necesidad de consumo de energía.
Cuando el ejercicio se realiza en exceso, el oxígeno no es suficiente para poder
llevar a cabo la ruptura de la glucosa, por lo cual nos músculos llevan a cabo el
proceso de fermentación láctica.
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III. MATERIALES Y REACTIVOS

o Tubos De Ensayos
o Tubo De Fermentación
o Pipeta Pasteur.
o Gradillas
o Mechero
o Pinzas Para Tubo de Ensayo
o Vaso De Precipitado
o Sorbetes
o Papel aluminio
o Tubo de vidrio en forma de S (figura)
o Cronometro
o Exprimidor de zumos
o Levadura de pan
o Sacarosa
o Reactivo de Benedict.
o Solución de Azul de Bromotimol
o Solución de azul de metileno.
o Zumo de naranja (1Kg)
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IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO 1: RESPIRACIÓN ANAEROBIA

1. Llenar a la mitad de su capacidad un tubo de ensayo con la suspensión de

levadura (100mL de agua destilada + 15g de levadura + 2g de sacarosa.
Dejar en reposo de 10 a 15 minutos).
2. Agregar 5 gotas de solución de azul de metileno agitar hasta obtener un
color azul claro.
3. Dejar en reposo por 5 minutos, observar y anotar los cambios.
4. Agregar 3 mL de formo al 10% sin dejar de agitar y dejar en reposo hasta
que se observe un cambio.

Figura 1. Muestra de jugo de piña, levadura Figura 2. Pesaje de las muestras

Y sacarosa

Fuente: Elaboración propia

fuente: Elaboración propia

5. En otro tubo de ensayo adicionar 3mL de jugo de naranja y 4 gotas de

reactivo de Benedict.
6. Calentar el tubo ligeramente en el mechero sin que hierva el líquido.
7. En el sistema de fermentación colocar 100mL de jugo de naranja y agregar
2g de levadura. Dejar en reposo por 5 minutos y agregar el reactivo de
Benedict.
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Figura 4. Reactivo DNS Figura 5. Concentración

Fuente: Elaboración propia fuente: Elaboración propia

8. Calentar el envase que contenga la solución en el mechero sin que hierva el

jugo y comparar lo que sucede con el tubo anterior (paso 6).
9. Observar y explicar lo que sucede.

EXPERIMENTO 2: RESPIRACIÓN AEROBIA

1. Rotular 3 vasos de precipitado de 100mL y agregar agua destilada a la mitad

de su capacidad.
2. Adicionar 5 gotas de solución de azul de metileno, agitar hasta obtener un
color homogéneo en las soluciones.
3. Tomar la frecuencia respiratoria de algún compañero en reposo y anotar
los resultados en la tabla.
4. El compañero debe exhalar el aliento de una respiración en el vaso 1
ayudándose de un sorbete.
5. Pedir al compañero que camine durante 2 minutos y volver a medir su
frecuencia respiratoria.
6. Anotar los resultados en la tabla 1 y debe exhalar el aliento de una
respiración en el vaso 2.
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7. Pedir que realice un ejercicio fuerte como correr, subir y bajar gradas
durante 3 minutos, volver a medir su frecuencia respiratoria y que exhale
el aliento de una respiración en el vaso 3.
8. Comparar las observaciones.
9. Repetir los pasos del 1 al 8 utilizando solución de azul de bromotimol.
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V. RESULTADOS

EXPERIMENTO N° 1

Figura 6. Respiración anaerobia

fuente: Elaboración propia

OBSERVACIÓN

 Al añadir el azul de metileno, obtenemos una solución de color celeste, debido a que
este detecta el CO2 producido por la activación de la levadura que consiste en que
la célula obtiene energía de una sustancia en este caso de la sacarosa añadida, sin
utilizar oxígeno, produciendo enzimas capaces de descomponerla y al hacerlo, divide
esta sustancia en otras. A todo ello denominamos proceso de la respiración anaerobia.
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EXPERIMENTO N° 2

Figura 6. Respiración anaerobia y aerobia

2 1

fuente: Elaboración propia

OBSERVACIÓN

 LA MUESTRA N° 1 :No presento cambios (ningún tipo de coloración).esto puede

deberse a que la levadura no encontró ningún tipo de sustancia para activarse,
especialmente azucares ,de este modo no produce energía, es por ello que no
reacciono el reactivo benedic, detector de CO2.

 LA MUESTRA N° 2: Se observo un cambio ligero en el color debido a que dejamos que

las levaduras empiezen a fermentar, por que utilizan en este caso la sacarosa, para
producir energía y con otros productos se forma el dióxido carbono, apareciendo
burbujar y empiezan a salir del tubo.

 OJO: Este proceso es utilizado en la industria de panificación , para poder hacer que
los panes aumenten de volumen, debido a la aculacion de este gas en la masa de la
harina.
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EXPERIMENTO N° 3
Figura 7. Pesaje de azucares

fuente: Elaboración propia

Figura 8. Pesaje de azucares

fuente: Elaboración propia

OBSERVACIÓN

 GLUCOSA + 3 GOTASDE BENEDIC → AMARILLO CLARO

 MALTOSA + 3 GOTASDE BENEDIC → AMARILLO
 FRUCTUOSA + 3 GOTASDE BENEDIC → AMARILLO INTENSO
 GALACTOSA + 3 GOTASDE BENEDIC → CELESTE CLARO
 MUESTRA + 3 GOTASDE BENEDIC → NO HAY CAMBIO DE COLOR

 Al agregar calor acelera el proceso de producción de CO2, según el cambio de color

deducimos que es en la galactosa donde se va a realizar un mayor proceso metabólico.
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EXPERIMENTO N° 4

CUADRO N°1: Frecuencia respiratoria en reposo.

Actividad Valor Vaso 1 (anotar las observaciones)

Frecuencia 14 Se observo un color mucho mas claro, la respiración se

respiratoria en pulsaciones dio en estado de reposo y se combinó el CO2 con azul
reposo. por minuto de bromotimol.
fuente: Elaboración propia

FUNDAMENTE SU OBSERVACIÓN

 Al encontrarse en estado de reposo, el proceso de respiración no es solamente una

actividad de los pulmones. Todo el organismo respira a través del pulmón. Quien
captura el oxígeno y quien expulsa el dióxido de carbono es todo el organismo. Sus
miles de millones de células consumen oxígeno incansablemente para liberar de los
glúcidos (azúcares) la energía necesaria e indispensable para realizar sus actividades.

 Cuando la frecuencia respiratoria es baja, es decir cuando esta en reposo la persona

produce menor cantidad de CO2 y cuando el azul de bromotimol entra en contacto no
reduce la intensidad del reactivo .

 La reacción química global de la respiración es la siguiente:

C6 H12 O6 + 6O2 → 6CO2 + 6H2O + energía (ATP)
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CUADRO N°2: Frecuencia respiratoria (caminata de 2 minutos)

Actividad Valor Vaso 2 (anotar las observaciones)
Frecuencia 70 Se realizo el mismo procedimiento, pero el compañero
respiratoria pulsaciones realizo una caminata, al exhalar sobre el vaso este se
(caminata de 2 por tornó de color verdoso.
minutos) minuto
fuente: Elaboración propia

FUNDAMENTE SU OBSERVACIÓN

 En esta experiencia al realizar ejercicio se produce mas cantidad de CO2, pero no es

aún la máxima cantidad, es por eso que la solución se torno de colo verdoso que según
el parámetro colorimétrico del azul de bromotimol indica que la solución es neutra.

CUADRO N°2: Frecuencia respiratoria (caminata de 2 minutos)

Actividad VALOR Vaso 3 (anotar las observaciones)
Frecuencia 120 En este caso también fue el mismo procedimiento, el
respiratoria pulsaciones por compañero realizo un ejercicio fuerte y exhalo en el
(ejercicio fuerte minuto vaso ,en este caso la solución cambia a color
de 3 minutos) amarillo.
fuente: Elaboración propia

FUNDAMENTE SU OBSERVACIÓN
 Es este caso como se realiza mas esfuerzo físico durante más tiempo ,se produce mas
cantidad de CO2 siendo un ejercicio anaeróbico, y por ello el vaso cobro un color
amarillo, de acuerdo con el parámetro colorimétrico del azul de bromotimol indica que
la solución acida, debido al ácido láctico producido que proviene de la
descomposición de glucosa cuando no hay presente oxígeno (metabolismo
glucolítico).
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VI. CONCLUSIONES
 La oxidación de la glucosa es una fuente principal de energía en la mayoría de
las células.

 En la determinación de azucares reductores se comprobó que la sacarosa no es

un azúcar reducto.

 La respiración aeróbica es el proceso con la que el organismo obtiene energía,

mediante la degradación de los nutrientes.

VII. RECOMENDACIONES

 Al ingresar al centro de laboratorio, llevar el equipo de protección adecuada

para evitar accidentes y pruebas erróneas.

 Inspeccionar que los materiales a utilizar siempre esta en calibrados y en buen

estado.

 Estar siempre atentos al añadir la cantidad necesaria que requiere la

experiencia ha realizar

VIII. CUESTIONARIO

1. ¿Las levaduras son procariotas o eucariotas?

Las levaduras son microorganismos procariontes por presentar la envoltura
nuclear que aisla el material genético o ADN del centro de la célula, observados
en microscopio y dentro de la misma el ADN
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2. ¿En qué partes de la célula de levadura ocurre la glucólisis?

La glucolisis tiene lugar en el citoplasma celular, consiste en una serie de diez
reacciones, cada una catalizada por una enzimadeterminada que permite
transformar una molecula de glucosa en doa moléculas de glucosa, un
compuesto de dos carbonos, el acido pirúvico.

3. ¿Por qué es ventajoso para un organismo realizar fermentación?

Porque no necesita oxígeno para ella como aceptor final de electrones, sino que
un compuesto organico y NADH+, por lo tanto, puede vivir en ambientes
anaerobios.
La desventaja será que la fermentacion produce mucho menos energía que la
respiración aerobia, la primera produce solo 2 moleculas de ATP por molecula
de glucosa, mientras que la respiracion produce 36.
 La fermentación siempre supone la descomposición de nutrientes en partes
más sencillas que nuestro organismo asimila mejor.
 Produce vitaminas, sobretodo del grupo B y C, incluso B12.
 La fermentación destruye parte del ácido fítico de la corteza de los cereales,
el cual impide la absorción de calcio, hierro y cinc (sobre todo la
fermentación con levadura madre).
 Se trata de una predigestión, al igual que ocurre con la germinación. Los
cereales y las leguminosas son alimentos concentrados de proteínas e
hidratos de carbono complejos que deben ser sometidos a largos tiempos
de cocción para poder ser asimilados. La fermentación y la germinación
facilitan su digestión y aportan beneficios que no podemos obtener por
métodos de cocción.
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4. Fórmula de oxidación del azul de metileno.

5. ¿Qué sucede durante la fermentación?

 Se denomina fermentación al proceso que se realiza en condiciones
anaeróbicas, el piruvato se convierte en etanol.
 La fermentación no produce mas ATP , pero es necesario para regenerar las
moléculas portadoras de electrones de alta energía NAD+ que se reutilizan
durante la glucolisis y deben estar disponibles para que estas continúen.

6. ¿Qué sustancias detecta el azul de Bromotimol? ¿En el caso del experimento

donde se usó este reactivo, cual fue la sustancia detectada?
 Este reactivo detecta el CO2 y es un indicador de pH, fue usada en el
experimento donde se usó en la cantidad de CO2 de acuerdo a la actividad
física realizada por uno de nuestros compañeros.
 De la muestra se detectó ácidos o bases orgánicos débiles.
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IX. BIBLIOGRAFÍA

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