CARACTERIZACION QUIMICA DE LIPIDOS

CHEMICAL CHARACTERIZATION OF LIPIDS

Martínez Jennifer, Ríos Alejandro, Rodríguez Karen
Corporación Tecnológica de Bogotá, Tecnología en Química Industrial
Bioquímica
07/11/2018
RESUMEN
Los lípidos son moléculas químicas caracterizadas por su insolubilidad en solventes
polares, especialmente el agua, sin embargo muchos tienen un carácter anfótero; además
poseen buena energía por el número de enlaces carbono-hidrogeno. Estos compuestos están
presentes en alimentos y son consumidos para aumentar las reservas de energía.
La yema de huevo consta de una composición lipídica importante, por tanto el objetivo de
la práctica es reconocer su composición química por medio de diferentes ensayos
cualitativos, los cuales evidencian la presencia de; colesterol, triglicéridos y fosfolípidos.
Posteriormente, la cromatografía de capa fina, separa los componentes enunciados
anteriormente, confirmando el resultado, además de brindar el índice de refracción
respectivo.
PALABRAS CLAVE: Colesterol, Triglicéridos, Fosfolípidos, Cromatografía, Capa Fina.

ABSTRACT
Lipids are chemical molecules characterized by their insolubility in polar solvents,
especially water, however many have an amphoteric character; they also possess good
energy by the number of carbon-hydrogen bonds. These compounds are present in food and
are consumed to increase energy reserves.
The yolk of egg consists of an important lipid composition, therefore the objective of the
practice is to recognize its chemical composition by means of different qualitative tests,
which show the presence of; cholesterol, triglycerides and phospholipids. Subsequently,
thin-layer chromatography separates the components listed above, confirming the result, in
addition to providing the respective refractive index.
KEY WORD
Cholesterol, Triglycerides, Phospholipids, Chromatography, Thin Layer
INTRODUCCION
La presencia de colesterol, triglicéridos y
fosfolípidos en la yema del huevo,
pretende evidenciarse, por medio de los
ensayos cualitativos, basados en el
líquido y sólido extraídos de la yema del
huevo, por medio de la filtración y
evaporación por duplicado,
respectivamente. Posteriormente, la
siembra en la placa para la cromatografía
de capa fina, consta de cinco sustancias;
aceite, colesterol, solución uno (líquido),
solución dos (sólido mezclado con éter),
colesterol y lecitina, de manera que los
resultados sean proporcionales a los
obtenidos por las pruebas cualitativas.
(Gil, A. 2010)
Según, Gil, A. (2010); ̈ los lípidos se
encuentran en un 68.5% en la yema de
huevo formando parte de las
lipoproteínas, las cuales tienen una gran Los lípidos tienen como característica
cantidad de colesterol de baja densidad principal el ser hidrófobos (insolubles en
(LDL), por lo tanto constituyen la agua) y solubles en disolventes orgánicos.
estructura en forma de gotitas, en la Se los llama incorrectamente grasas, ya
yema, al igual que el colesterol de alta que las grasas son solo un tipo de lípidos
densidad (HDL), ya que se asemeja a los procedentes de animales. Cumplen
glóbulos de grasa. Por otra parte, contiene diversas funciones en los organismos
triglicéridos, los cuales son vivientes. Los lípidos son un conjunto
principalmente; ácido oleico, palmítico, de moléculas orgánicas (la mayoría
esteárico y linoleico. Por otro lado, la biomoléculas) compuestas principalmente
vitamina A, ácido pantoténico y tocoferol, por carbono e hidrógeno y, en menor
están presentes en la yema, la cual tiene medida,oxígeno; aunque también pueden
alrededor del 1% de hidratos de carbono, contener fósforo, azufre y nitrógeno. Los
los cuales incluyen, glucosa, manosa lípidos cumplen funciones diversas en los
galactosa, arabinosa, xilosa y ribosa, no organismos vivientes, entre ellas la de
obstante el color anaranjado se debe a la reserva energética (como los
presencia de carotenos asociados a triglicéridos), la estructural (como los
lipoproteínas y xantofilas (luteína y fosfolípidos de las bicapas) y la
zeaxantina). (Gil, A. 2010) reguladora (como las hormonas
esteroides). (Anónimo; 2014)
Los lípidos son moléculas muy diversas;
unos están formados por cadenas
alifáticas saturadas o insaturadas, en
general lineales, pero algunos tienen
anillos (aromáticos). Algunos son
flexibles, mientras que otros son rígidos o
semiflexibles hasta alcanzar casi una total
flexibilidad mecánica molecular; algunos
comparten carbonos libres y otros forman
puentes de hidrógeno.
La mayoría de los lípidos tiene algún tipo
de carácter no polar, es decir, poseen una
gran parte apolar o hidrofóbico ("que le
teme al agua" o "rechaza el agua"), lo que
significa que no interactúa bien con
solventes polares como el agua, pero sí
con la gasolina, el éter o el cloroformo.
(Anónimo, 2014)
Los lípidos son hidrofóbicos, esto se debe
a que el agua esta compuesta por un
átomo de oxígeno y dos de hidrógeno a su
alrededor, unidos entre sí por un enlace de
hidrógeno. El núcleo de oxígeno es más
grande que el del hidrógeno, presentando
mayor electronegatividad. Como los
electrones tienen mayor carga negativa, la
transacción de un átomo de oxígeno tiene
una carga suficiente como para atraer a
los de hidrógeno con carga opuesta,
uniéndose así el hidrógeno y el agua en
una estructura molecular polar.
(Anónimo, 2014)
Los lípidos son largas cadenas de
hidrocarburos y pueden tomar ambas
formas: cadenas alifáticas saturadas (un
enlace simple entre diferentes enlaces de
carbono) o insaturadas (unidos por
enlaces dobles o triples). Esta estructura
molecular es no polar.
Los enlaces polares son más
enérgicamente estables y viables, por eso
es que las moléculas de agua muestran
una clara afinidad por los demás. Pero por
el contrario, las cadenas de hidrocarburos
no son capaces de establecer un grado
sustancial de afinidad con las moléculas
de agua y entonces no se mezclan. Los
lípidos son insolubles en agua porque no
hay adhesión entre las moléculas de agua
y la sustancia lipídica. (Anónimo; 2014)
Los lípidos son un grupo muy
heterogéneo que usualmente se subdivide
en dos, atendiendo a que posean en su
composición ácidos grasos (lípidos
saponificables) o no los posean (lípidos
insaponificables):
Lípidos saponificables Simples. Son los
que contienen carbono, hidrógeno y
oxígeno.
Los acilglicéridos; Son ésteres de ácidos
grasos con glicerol. Cuando son sólidos
se les llama grasas y cuando son líquidos
a temperatura ambiente se llaman aceites.
Los céridos son ceras. (Anónimo; 2014)
Lípidos saponificables Complejos. Son
los lípidos que, además de contener en su
molécula carbono, hidrógeno y oxígeno,
contienen otros elementos como
nitrógeno, fósforo, azufre u otra
biomolécula como un glúcido. A los
lípidos complejos también se les llama
lípidos de membrana pues son las
principales moléculas que forman las
membranas celulares.
Fosfolípidos, Fosfoglicéridos,
Fosfoesfingolípidos, Glucolípidos,
Cerebrósidos, Gangliósidos. (Anónimo;
2014)
Lípidos insaponificables. Terpenoides,
Esteroides, Prostaglandinas. (Anónimo;
2014)
Los lípidos desempeñan diferentes tipos
de funciones biológicas:
- Función de reserva energética. Los
triglicéridos son la principal reserva de
energía de los animales ya que un gramo
de grasa produce 9,4 kilocalorías en las
reacciones metabólicas de oxidación,
mientras que las proteínas y los glúcidos
solo producen 4,1 kilocalorías por gramo.
- Función estructural. Los fosfolípidos,
los glucolípidos y el colesterol forman las
bicapas lipídicas de las membranas
celulares. Los triglicéridos del tejido
adiposo recubren y proporcionan
consistencia a los órganos y protegen
mecánicamente estructuras o son aislantes
térmicos.
- Función reguladora, hormonal o de
comunicación celular. Las vitaminas
liposolubles son de naturaleza lipídica
(terpenos, esteroides); las hormonas
esteroides regulan el metabolismo y las
funciones de reproducción; los
glucolípidos actúan como receptores de
membrana; los eicosanoides poseen un
papel destacado en la comunicación
celular, inflamación, respuesta inmune,
etc.
- Función transportadora. El transporte de
lípidos desde el intestino hasta su lugar de
destino se realiza mediante su emulsión
gracias a los ácidos biliares y a las
lipoproteínas.
- Función biocatalizadora. En este papel
los lípidos favorecen o facilitan las
reacciones químicas que se producen en
los seres vivos. Cumplen esta función las
vitaminas lipídicas, las hormonas
esteroideas y las prostaglandinas.
- Función térmica. En este papel los
lípidos se desempeñan como reguladores
térmicos del organismo, evitando que este
pierda calor.
(Anónimo; 2014)
Las grasas son fuentes de ácidos grasos
esenciales, nutrientes que no se pueden
sintetizar en el cuerpo humano. Juegan un
papel vital en el mantenimiento de una
piel y cabellos saludables, en el
aislamiento de los órganos corporales
contra el shock, en el mantenimiento de la
temperatura corporal y promoviendo la
función celular saludable. Además, sirven
como reserva energética para el
organismo. Las grasas son degradadas en
el organismo para liberar glicerol y ácidos
grasos libres. (Anónimo; 2014).
El contenido de grasas de los alimentos
puede ser analizado por extracción. El
método exacto varía según el tipo de
grasa a analizar. Por ejemplo, las grasas
poliinsaturadas y monoinsaturadas son
analizadas de forma muy diferente.
Las grasas también pueden servir como
un tampón muy útil de una gran cantidad
de sustancias extrañas. Cuando una
sustancia particular, sea química o biótica,
alcanza niveles no seguros en el torrente
sanguíneo, el organismo puede
efectivamente diluir (o al menos mantener
un equilibrio) estas sustancias dañinas
almacenándolas en nuevo tejido adiposo.
(Anónimo; 2014).
El tejido adiposo o graso es el medio
utilizado por el organismo humano
para almacenar energía a lo largo de
extensos períodos de tiempo.
Dependiendo de las condiciones
fisiológicas actuales,
los adipocitos almacenan triglicéridos der
ivadas de la dieta y el metabolismo
hepático o degrada las grasas
almacenadas para proveer ácidos grasos y Para la prueba cualitativa No.1 se
glicerol a la circulación. (Anónimo; agregaron las cantidades correspondientes
2014). a la siguiente tabla:

MATERIALES Y METODOS

1 Frasco lavador
En una cámara cromatografía se coloca 1 churrusco
aproximadamente 5 ml de una solución 1 gradilla tubo de ensayo grande
de n-hexano: éter etílico: ácido acético 1 maya de cerámica
1 microespátula
glacial (70:25:1) y se deja saturar por 20
1 pipeteador
minutos.
1 tripode
- Preparación de la muestra 1 vidrio reloj
12 tubos de ensayo grande
En un mortero se agregaron 4 g de yema 2 celdas de vidrio redondas
de un huevo previamente cocido; a este se 2 vasos precipitado 100ml
agregan 20mL de la solución de etanol: 3 pipeta graduada de 5ml
éter: cloroformo (2:1:2) 3 pipetas graduadas de 1 ml
Se macero suavemente y filtro a través de 3 vasos precipitado 50 ml
papel filtro, recogiendo el filtrado en un 5 pipetas pasteur
vaso de precipitados. Agitador magnético
Cámara cromatografíca
Por medio de calentamiento leve se Mortero
evaporo el solvente agitando el vaso Plancha
constantemente, hasta obtener un extracto
viscoso pero seco. Una vez seco, se le
agrego a la muestra 10 mL de éter, y 30
mL de acetona para formar un
precipitado, este se dejó decantar
colocando el vaso de precipitados en
forma vertical. De allí se tomó la fase
Para la prueba cualitativa No.2 se
líquida y se colocó en un vaso de
agregaron las cantidades correspondientes
precipitado de 50mL, este se calentó
en la siguiente tabla:
cuidadosamente dejando reducir su
volumen a 10 mL esta se toma como
solución 2*
La fase sólida se dejó secar y se disolvió
el sólido en 10 mL de éter etílico esta se
tomó como solución 1*
A los tubos anteriores se calentaron
levemente a la llama y se detectó el olor
desprendido en cada tubo.
Para la prueba cualitativa No.3 se
agregaron las cantidades correspondientes
a la siguiente tabla:
Tubo 1.1 = 1ml Sln1 + 1ml Molibdato de
amonio + 1ml H2SO4 + 1ml Acido
Ascorbico
Tubo 1.2 = 1ml Sln2 + 1ml Molibdato de
amonio + 1ml H2SO4 + 1ml Acido
Ascorbico
Tubo 1.3 = 1ml Lecitina + 1ml
Molibdato de amonio + 1ml H2SO4 +
1ml Acido Ascorbico

Agrego 1 mL de las soluciones y 2 mL de Tubo 1.4 = 1ml Molibdato de amonio +

ácido sulfúrico concentrado a los tres 1ml H2SO4 + 1ml Acido Ascorbico
tubos anteriores y a un cuarto tubo vacío
(control negativo).
SEPARACIÓN DE LÍPIDOS POR
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
Sobre las placas cromatografías se marca
con un lápiz suavemente una línea
dejando una distancia de 1 cm desde la
base de la placa.
se siembro cada muestra asegurandonos
de de marcar cada punto sembrado; luego
se coloco la placa en la cámara
previamente saturada y se tapo hasta que
la fase movil quedo a un 1 cm de la parte
superior de la placa.
Luego de subir la fase movil se saco la
placa y se marco con lápiz la zona hasta La formación de precipitado indica una
donde llego la fase movil se dejo secar la prueba positiva para la presencia de fósforo
placa, y se agrego la solucion reveladora inorgánico, lo que precipita es el
de sulfato de amonio 10%; se dejo secar y fosfomolibdato de amonio. Toda sustancia
se coloco la placa sobre una plancha de orgánica arrojará resultado positivo a la
calentamiento a 70°C y de alli se retiro prueba.
una vez se empezaron a revelar colores
sobre esta.
- PRUEBA CUALITATIVA No.2
Tubo 2.1 = 1ml Sln1 + KHSO4 (Bisulfato de
ANALISIS DE RESULTADOS Potasio solido en pequeña cantidades).
- PRUEBA CUALITATIVA No. 1 Tubo 2.2 = 1ml Sln2 + KHSO4 (Bisulfato de
Potasio solido en pequeña cantidades).

1.4 1,3 1,2 1,1

Tubo 2.3 = 1ml Glicerina + KHSO4
(Bisulfato de Potasio solido en pequeña
cantidades).
Tubo 2.4 = KHSO4 (Bisulfato de Potasio 3.2
solido en pequeña cantidades). 3.4
3.1 3.3

La coloración final de la reacción fue

amarillo con segmentos marrones ya que las
sustancias que dan este color, tienen como
núcleo un ciclo pentanoperhidrofenantreno.

- CROMATOGRAFIA DE CAPA
FINA

El control positivo para el olor se hace con

glicerina como se muestra en la reacción para
notar el olor que se desprende, el cual
corresponde a la acroleína y es un olor
desagradable. En la solución 1 y 2 el olor más
destacado era el del solvente, en el control
positivo con glicerina, al desprenderse los
vapores durante el calentamiento se percibió
el olor desagradable de la acroleína.

PLACA 1
- PRUEBA CUALITATIVA No.3 Solución 1 =3,5 / 5,0 = 0,15
Tubo 3.1 = 1ml Sln1 + 3ml de FeCl3 + 1ml Solución 2 = 3,5 / 5,0 = 0,15
de Acido Sulfúrico. Patrón de Lecitina = 2,8 / 5,0 = 0,2

Tubo 3.2 = 1ml Sln2 + + 3ml de FeCl3 +

1ml de Acido Sulfúrico. PLACA 2

Tubo 3.3 = 1ml Colesterol + 3ml de FeCl3 + Patrón de = 3,2 / 5,0 = 0,625
1ml de Acido Sulfúrico. Muestra con mayonesa= 3,8 / 5,0 = 0,76
Tubo 3.4 = 3ml de FeCl3 + 1ml de Acido
Sulfúrico. CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFIA

- Arranz, M. Esteban, M. Palacios, M.

(1994). Métodos recomendados para
la determinación de la concentración
de colesterol en suero o plasma y en
otros especímenes biológicos.
Sociedad española de bioquímica
clínica y patología molecular. 13(7).
Pág. 496-503.
- Gil, A. (2010). Tratado de nutrición:
Composición y calidad nutritiva de
los alimentos. Tomo II. Segunda
Edición. Madrid: Médica
panamericana. Pág. 79-84
- Prácticas de Bioquímica I. (2018).
Practica de identificación y
propiedades de los lípidos.
Reacciones de identificación y
propiedades de los lípidos.
Cromatografía en capa fina.
Consultado (02/11/2018).
http://www.fcv.luz.edu.ve/images/stor
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- Química biológica. (2018). Lípidos.
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- Cosmetica científica. (2014). Lipidos:
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