INTRODUCCIÓN

La mayoría de los métodos de análisis son en los casos favorables selectivos,

pero no específicos. Por ello, cuando se trata de muestras complejas la
separación del analito de las posibles interferencias es una etapa esencial. Aún
mejor sería la posibilidad de determinar varios analitos después de una
separación previa.

Uno de los mejores métodos para conseguir la separación, y posiblemente, el

más utilizado es la cromatografía. Este conjunto de técnicas permite la
separación de componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas.
La cromatografía en sus orígenes era exclusivamente una técnica de separación
que se transformó en técnica de análisis cuando se acopló con un dispositivo
para monitorizar las especies químicas que se iban separando. Así, la
cromatografía se ha convertido en un método analítico de primer orden para
separar, identificar y cuantificar los compuestos presentes en muestras líquidas
o gaseosas (para muestras sólidas se requiere una etapa de disolución o
extracción).

En cromatografía, los solutos se separan en base a la distinta velocidad de

desplazamiento cuando son arrastrados por una fase móvil a través de un lecho
cromatográfico que contiene a una fase estacionaria (sólida o líquida).

La muestra se disuelve en la fase móvil y se hace pasar a través de la fase

estacionaria (inmiscible con la móvil) que se mantiene fija en una columna o
sobre una superficie plana. Las dos fases se eligen de tal modo que los
componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre las dos fases.
Aquellos que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven
lentamente con el flujo de fase móvil, mientras que los que se retiene débilmente
avanzan con más rapidez.
 CROMATOGRAFIA

La cromatografía es un tipo de técnica aplicada para la separación de varios

elementos que conjugan a una mezcla, esta división se fundamenta en las
características físicas y químicas que posea cada elementos, haciendo énfasis
en la capacidad de interacción de cada componente de la mezclado de la
solución con una sustancia.

A grandes rasgos la cromatografía se logra por medio de la utilización de

dos fases: una fase móvil, el cual es una solución que está compuesta
por distintos elementos; y una fase estacionaria, esta se caracteriza por
ser un material solido que permanecerá sin cambios antes o después de
la implementación de la técnica, la mezcla a estudiar permanecerá con el
compuesto que posea más afinidad bien sea el que se encuentra en fase
solida o en fase móvil, de esta forma se apreciara
las características generales de cada compuesto estudiado.

La cromatografía, puede ser clasificada según la metodología y los

materiales utilizados en: cromatografía plana, este tipo de técnica se
realiza por medio de la utilización de un material sólido como un papel,
gracias a esto puede subclasificarse en “capa gruesa” o “capa fina”, debido
a que la fase estacionaria reposa sobre soporte totalmente rígido, esta
capa se pone en contacto con la fase móvil que es líquida y el mismo
comienza a ascender, de acuerdo a la ubicación de cada elemento en el
papel puede lograr su identificación; por otra parte se encuentra la
cromatografía en columna, en la cual se utiliza varios cilindros largos
cuyo nombre es “bureta” como fase estacionaria, y una mezcla liquida
como fase móvil, de igual forma pueden usarse otro estado físico para la
fase móvil, como el gas, los distintos compuestos a separar van a ir
ascendiendo de forma progresiva por la columna; de acuerdo al estado
físico de las fases utilizadas para el proceso la cromatografía puede
clasificarse en: cromatografía de gases, ya que su fase móvil es
de carácter gaseoso, por otra parte está la cromatografía líquida, en la
cual la fase móvil está compuesta por un agente líquido, y por último la
cromatografía HPLC caracterizada por poseer un alto nivel de eficacia y
precisión en la separación de compuestos.

TIPOS DE CROMATOGRAFIA

Aunque hay muchas y variadas técnicas cromatográficas, el objetivo de todas es

separar las sustancias que forman una mezcla y enviarlas secuencialmente a un
detector para que las determine y cuantifique.

Todas se basan en el mismo fenómeno: permitir que las sustancias que

forman una mezcla entren en contacto con dos fases (un líquido y un gas, un
sólido y un líquido, etc.). Una de las fases es estática (no se mueve) y tenderá
a retener las sustancias en mayor o menor grado; la otra, fase móvil, tenderá a
arrastrarlas. Cada sustancia química tiene distinta tendencia a ser retenida y a
ser arrastrada.

Dependiendo de la naturaleza de la fase estática y de la fase móvil se pueden

distinguir distintos tipos de cromatografía.

a) Cromatografía sólido-líquido: La fase estática o estacionaria es un sólido y

la móvil un líquido.

b) Cromatografía líquido-líquido: La fase estática o estacionaria es un líquido

anclado a un soporte sólido.

c) Cromatografía líquido-gas: La fase estática o estacionaria es un líquido no

volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.

d) Cromatografía sólido-gas: La fase estacionaria es un sólido y la móvil un

gas.

Según el tipo de interacción que se establece entre los componentes de la

mezcla y la fase móvil y estacionaria podemos distinguir entre.
a) Cromatografía de adsorción: La fase estacionaria es un sólido polar capaz
de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo
polar.

b) Cromatografía de partición: La separación se basa en las diferencias de

solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y móvil,
que son ambas líquidas.

c) Cromatografía de intercambio iónico:La fase estacionaria es un sólido que

lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar
por aquellos iones presentes en la fase móvil.

COMPONENTES DE CROMATOGRAFIA

Concepto Definición

Analito Es la sustancia producto de un proceso cromatografico.

Se utiliza para determinar la presencia y concentración

Cromatografía Analítica
de analito en la muestra.

Cromatografía Se utiliza para la purificación de sustancias con fines

Preparativa específicos (para el análisis).

Es una representación visual de los resultados del

Cromatograma proceso cromatográfico. Cada sustancia corresponde a
un cierto pico en el cromatograma.
 Cromatógrafo Instrumento para la realización de la cromatografía.

Tiempo durante el cual el analito pasa a través del

Tiempo de retención
sistema cromatográfico en ciertas condiciones.

Sustancia que se fija a la columna o en el panel, sobre

Fase estacionaria
cuya superficie se separan las sustancias.

Fase que se está moviendo en una dirección

determinada. Puede ser un líquido o gas. La fase móvil
Fase móvil
se mueve a través de una columna que lleva la muestra a
separar.

CROMATOGRAFO

 El Cromatografo es un instrumento utilizado para realizar las diferentes

formas de cromatografía, este detecta el cambio de conductividad
eléctrica que produce la llegada de los distintos gases al final de la
columna convirtiéndolos en una señal grafica o cromática.

 Identificación Cualitativa.

Determina la presencia de un compuesto, de un componente cualquiera que se

basa en el tiempo de retención o tiempo que se tarda en aparecer al final de la
columna, el que es especifico para cada elemento.

 Identificación Cuantitativa.

Determinar las cantidades en el que se encuentra la sustancia, es mas

complicado pues requiere el calculo del área de la señal, o pico, dejada por el
gas, la cual será proporcional a la concentración del componente.
ADSORBENTES Y DISOLVENTES EN CROMATOGRAFIA

Separación de componentes

 Dejamos que se mueva la mezcla por un soporte y los componentes se

separan por que se mueven a diferentes velocidades, debido a las
diferentes fuerzas de adsorción que ejerce el soporte sobre cada
elemento, así de fácil. No confundir el termino adsorción y absorción.
Fases de la Cromatografía

 Las cromatografías se hacen en dos fases. Una estática y otra móvil.

En la fase estática o estacionaria, la mezcla se coloca sobre un soporte

fijo, por ejemplo papel.

En esta fase tenemos ya la mezcla sobre un soporte, en nuestro ejemplo

un papel.

En la fase móvil se hace mover otra sustancia sobre la mezcla que ya

está sobre el soporte de la fase estática, por ejemplo un líquido que se
mueve por el papel con la mezcla. En la fase móvil empezará el proceso
de separación de los componentes de la mezcla al moverse a distintas
velocidades por el líquido los distintos componentes de la mezcla sobre
el papel.

APLICACIONES EN LA INDUSTRIA

 Determinación de concentración y porcentaje de solvente en un producto

agroquímico terminado.

 Control de calidad de pureza de solventes, como alcohol etílico anhidro,

tolueno, xileno, benceno, que entran como materias primas a una planta.

 Determinación del contenido de principio activo de un antitóxico en una

planta de medicamentos.

 En fabricas de alimentos, para control de calidad de producto terminado

y materias primas, tales como: proteínas, sabores, sustancias que dan el
olor, o sea aromatizantes, pues algunos son sintéticos, como el olor a
pollo, y solo este tiene variantes, como pollo con barbacoa, pollo frito,
pollo asado, determinación de colorantes.