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Laboratorio No.

8
Respiración celular

Fabian Angarita Verdugo 20191181021


Brayan Leonardo Rincón Sánchez 20191181025
Laura Alejandra Medina Valencia 20191181036
Junio 2019
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Biología General
Objetivos
 Aprender a realizar pruebas cualitativas para determinar los tipos de respiración celular en
distintas sustancias.
 Identificar los cambios físicos y biológicos de cada un de los distintos procedimientos.
 Determinar las distintas cualidades biológicas, químicas y físicas necesarias para la
respiración celular.
Marco Teórico:
La oxidación de la glucosa es una fuente principal de energía en la mayoría de las
células. Cuando la glucosa se degrada en una serie de pequeños pasos por medio
de enzimas, una proporción significativa de la energía contenida en la molécula
vuelve a empaquetarse en los enlaces fosfato de las moléculas de ATP.
La primera fase en la degradación de la glucosa es la glucólisis que se efectúa en el
citoplasma de la célula. La segunda fase es la respiración aeróbica, que requiere
oxígeno y, en las células eucarióticas, tiene lugar en las mitocondrias. La
respiración comprende el ciclo de Krebs y el transporte terminal de electrones
acoplado al proceso de fosforilación oxidativa. En condiciones anaeróbicas, el proceso de
fermentación transforma al acido pirúvico producido por la glucólisis o en etanol o en ácido láctico.
Es posible saber cómo y en qué cantidad la energía química, originalmente presente
en la molécula de glucosa, se recupera en forma de ATP en el curso de la
degradación de la molécula de glucosa. Así, es posible calcular el rendimiento
energético global de la oxidación de la glucosa, es posible saber cómo y en qué cantidad la energía
química, originalmente presente en la molécula de glucosa, se recupera en forma de ATP en el
curso de la degradación de la molécula de glucosa. Así, es posible calcular el rendimiento
energético global de la oxidación de la glucosa, que puede dar como resultado un
máximo de 38 moléculas de ATP. La actividad de la glucólisis y la respiración están
reguladas de acuerdo con las necesidades energéticas de la célula (Curtis, Barnes. Biología séptima
edición editorial Panamericana).
En el caso de un corredor, la descomposición de un azúcar (glucosa) libera energía; esta
liberación de energía se acopla a reacciones que consumen energía y hace que los músculos se
contraigan. Sin embargo, la glucosa no se puede utilizar directamente para contraer los músculos.
En vez de ello, la energía de la glucosa se debe transferir a una molécula portadora de energía, que
proporciona al músculo la energía para contraerse. Los portadores de energía funcionan un poco
como las baterías recargables: obtienen una carga de energía en una reacción exergónica, se
desplazan a otro lugar de la célula y liberan la energía para impulsar una reacción endergónica.
Puesto que las moléculas portadoras de energía son inestables, se usan solo para transferir energía
temporalmente dentro de las células; no se utilizan para transportar energía de una célula a otra, ni
para almacenar energía a largo plazo. Los músculos almacenan energía en forma de glucógeno,
que es una molécula de carbohidrato estable que consiste en cadenas de moléculas de
glucosa. Cuando se necesita energía, ciertas enzimas descomponen el glucógeno del cuerpo,
primero a glucosa y luego a CO2 y agua. La energía se capta y se transfiere a las moléculas proteicas
del musculo mediante el ATP. Varias reacciones exergónicas de las células producen ATP, Al
proporcionar energía a una amplia gama de reacciones endergónicas, produciendo transferencia de
energía; la energía liberada en las células por la descomposición de glucosa se utiliza para sintetizar
ATP a partir de ADP y fosfato (ILUSTRACIÓN 1).

Ilustración 1 a) ADP (difosfato de adenosina) para formar b) ATP (trifosfato de adenosina) Audesirk T, Audesirk G, Byers Bruce.
Biología la vida en la tierra Editorial Pearson. 2008 pp.106)

El ATP almacena esta energía dentro de sus enlaces químicos y la transporta a lugares donde se
efectúan reacciones que requieren energía, como la síntesis de proteínas o la contracción muscular.
Ahí, el ATP se descompone en ADP y fosfato. (Audesirk T, Audesirk G, Byers Bruce. Biología la vida
en la tierra Editorial Pearson. 2008.)

La glucosa y otros combustibles orgánicos se degradan en una serie de pasos, cada uno de los
cuales es catalizado por una enzima. Los electrones se separan de la glucosa, y cada electrón viaja
con un protón como lo es el átomo de hidrogeno. Los átomos de hidrogeno no se transfieren de
forma directa al oxígeno, sino que pasan a una coenzima denominada NAD+ como aceptor de
electrones, al recibir dos electrones cargados negativamente pero solo un protón con carga positiva,
el NAD+ tiene su carga neutralizada cuando se reduce a NADH, indicando que el hidrogeno se ha
recibido por una reacción. Cada molécula de NADH formada durante la respiración representa
energía almacenada que puede emplearse para sintetizar ATP. Si se mezcla H2 y O2 se proporciona
una chispa como energía de activación, esta explosión representa una liberación de energía a
medida que los electrones del hidrogeno se acercan a los átomos de oxigeno electronegativos
además de formar agua, en el proceso de respiración celular, se emplea una cadena de transporte
de electrones para dividir la caída de electrones al oxígeno en varios pasos que liberan energía en
lugar de una sola reacción explosiva. Los electrones que se extraen de los alimentos son
transportados por el NADH de la parte de mayor energía a la de menor, de manera que el oxígeno
capta estos electrones junto con los iones de Hidrogeno (H+) y forma agua. (ILUSTRACIÓN 2).
En lugar de que esta energía se libere y se desperdicie en un solo paso explosivo, la cadena de
electrones a lo largo de esta desde un transportador a otro se produce con una pequeña perdida de
energía en cada paso hasta que los electrones llegan al oxígeno, así los electrones extraídos de los
alimentos por el NAD+ caen en un gradiente energético en la cadena de transporte electrónico a
una localización mas estable en el átomo de oxigeno electronegativo. (Campbell Neil & Reece Jane.
Biología. Editorial Panamericana 2007).

Ilustración 2 a) la reacción exergónica no controlada de hidrogeno con el oxigeno para formar agua b) En la respiración celular,
una cadena de transporte de electrones fracciona la explosión de electrones almacenando parte de la energía liberada
sintetizando ATP (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial Panamericana 2007 pp.164)

El glucolisis que ocurre en el citosol y no requiere de oxígeno “descompone” la glucosa en


piruvato, captando la energía en dos moléculas de ATP. Si no hay oxígeno presente (condiciones
anaeróbicas), el glucolisis va seguida de la fermentación que no produce energía química adicional.
Durante la fermentación, el piruvato se convierte ya en lactato o en etanol además de CO2. Si hay
oxígeno presente (condiciones aeróbicas), la mayoría de los seres vivos utilizan un proceso llamado
respiración celular para “descomponer” el piruvato en CO2 y en agua. En las células eucariotas, la
respiración celular se produce en la mitocondria, se encarga de producir ATP y electrones de alta
energía, en este proceso, la glucosa que es un azúcar de seis carbonos se divide en dos azúcares de
tres carbonos, estos azúcares más pequeños luego se oxidan y los átomos remanentes se reordenan
para formar dos moléculas de piruvato la cuál se compone de dos fases: la fase de inversión de
energía, es donde la célula gasta ATP, esta inversión se reintegra durante la fase de pago o
compensación de energía, cuando se produce ATP mediante la fosforilación a nivel sustrato y el
NAD+ se reduce a NADH mediante sus electrones liberados, por lo que el rendimiento neto de
energía de la glucolisis, por cada molécula de glucosa, es 2ATP más 2 NADH (ILUSTRACIÓN
3) todo el carbono inicialmente presente en la glucosa está en las dos moléculas de piruvato; no se
libera CO2 durante la glucólisis. La glucólisis ocurre en presencia o ausencia de O2, sin embargo,
si hay O2, la energía química almacenada en el piruvato y en el NADH puede ser extraída mediante
el ciclo de acido cítrico y la fosforilación oxidativa. (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial
Panamericana 2007).

Ilustración 3 Entrada y salida de energía en la glucólisis (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial Panamericana 2007)
pp.165)

En el curso de la respiración, las moléculas de tres carbonos de ácido pirúvico producido por la
glucólisis son degradadas a grupos acetilo de dos carbonos, que luego entran al ciclo de Krebs. En
una serie de reacciones en el ciclo de Krebs, el grupo acetilo de dos carbonos es oxidado
completamente a dióxido de carbono. En el curso de la oxidación de cada grupo acetilo se reducen
cuatro aceptores de electrones (tres NAD+ y un FAD) y se forma otra molécula de ATP.
(ILUSTRACIÓN 4) En el ciclo de Krebs. los carbonos donados por el grupo acetilo se oxidan a
dióxido de carbono y los electrones pasan a los transportadores de electrones. Lo mismo
que, en la glucólisis, en cada paso interviene una enzima específica. La coenzima A es el nexo
entre la oxidación del ácido pirúvico y el ciclo de Krebs. A modo de resumen: en el ciclo de Krebs
se producen una molécula de ATP, tres moléculas de NADH y una molécula de FADH2 que
representan la producción de energía de este ciclo. Se necesitan dos vueltas del ciclo para completar
la oxidación de una molécula de glucosa. Así, el rendimiento energético total del ciclo de Krebs
para una molécula de glucosa es dos moléculas de ATP, seis moléculas de NADH y dos
moléculas de FADH. (Curtis, Barnes. Biología séptima edición editorial Panamericana)

Ilustración 4 Ciclo de Krebs o ciclo de ácido cítrico (Curtis, Barnes. Biología séptima edición editorial Panamericana pp.115)

La glucolisis y el ciclo de Krebs producen solo 4 moléculas de ATP por molécula de glucosa: 2
ATP a partir de la glucolisis y 2 ATP a partir del ciclo de Krebs. En este momento, las moléculas
de NADH y FADH2 dan cuenta de la mayor parte de energía extraída de los alimentos, estos
transportadores de electrones vinculan la glucolisis y el acido cítrico con la fosforilación oxidativa,
la cual emplea esta energía para impulsar la síntesis de ATP. La cadena de transporte de electrones
es una colección de moléculas insertas en la membrana interna de la mitocondria, la mayor parte
de componentes de la cadena son proteínas que existen en complejos multiproteicos numerados del
I al IV, unidos a estas proteínas se encuentran los grupos prostéticos compuestos no proteicos
esenciales para las funciones catalíticas de las enzimas (ILUSTRACIÓN 5), durante el transporte
de electrones a lo largo de la cadena, los transportadores de electrones alternan entre estados
reducidos y oxidados a medida que aceptan y donan electrones, cada componente de la cadena se
reduce cuando acepta electrones, luego regresa a su forma oxidada cuando cede electrones. Los
electrones extraídos de los alimentos por el NAD+ durante la glucolisis y el ciclo de Krebs se
transfieren del NADH a la primera molécula de transporte de electrones conocida como
flavoproteína, después la flavoproteína vuelve a su forma oxidada después de ceder electrones a
una proteína con hierro-azufre, esta proteína luego cede electrones a un compuesto conocido como
ubiquinona. Otra fuente de electrones es el FADH2 la cual añade sus electrones a la cadena de
transporte de electrones en el complejo II, en consecuencia, la cadena de transporte de electrones
proporciona alrededor de 1/3 de energía menos para la síntesis de ATP cuando su donante es
FADH2. (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial Panamericana 2007).

Ilustración 5 cambio de energía libre durante el transporte de electrones (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial
Panamericana 2007 pp.171)
Dentro de la membrana interna de la mitocondria se encuentran muchas copias de un complejo
proteico llamado ATP sintasa, la enzima que sintetiza ATP a partir de ADP y fosfato inorgánico,
funcionando como una bomba iónica utilizando la energía de un gradiente iónico existente para
impulsar la síntesis de ATP. El gradiente iónico que impulsa la fosforilación es un gradiente de
iones hidrogeno siendo una diferencia de la concentración de H de lados opuestos de la membrana
de la mitocondria proceso empleado para impulsar el trabajo celular, como la síntesis de ATP se
denomina quimiósmosis siendo el flujo de protones H a través de la membrana. (ILUSTRACIÓN
6) (Campbell Neil & Reece Jane. Biología. Editorial Panamericana 2007).

Ilustración 6 La quimiósmosis acopla la cadena de transporte de electrones a la síntesis de ATP

Se puede hacer la contabilidad para calcular las ganancias de ATP que se producen cuando la
respiración celular oxida una molécula de glucosa a 6 moléculas de CO2 (ILUSTRACIÓN 7) una
variable que reduce el rendimiento del ATP es el uso de la fuerza motriz protónica generada por
las reacciones redox de la respiración para conducir otros tipos de trabajo, por lo tanto si toda la
fuerza motriz protónica generada por la cadena de transporte de electrones se empleara para
conducir la síntesis de ATP, una molécula de glucosa podría generar un máximo de 34 ATP
producidos mediante la fosforilación oxidativa más 4 ATP netos desde la fosforilación a nivel
sustrato, dando un rendimiento total de 38 ATP o 36 ATP si no estuvieran funcionando las cadenas
transportadoras mas eficientes.
Ilustración 7 ATP producido por una molécula de glucosa en cada etapa de la respiración celular

Materiales
 2 corchos para Erlenmeyer
 Manguera plástica
 Bomba inflable pequeña
 Levadura
 Azúcar
 Algodón
 Rama Elodea
 10 pitillos
 Cronometro
 Encendedor
 Corcho para tubo de ensayo
 Dos frascos compoteros
 Lámpara
 6 Tubos de ensayo
 Indicador de pH
Procedimiento General
1. Colocar mezcla heterogénea en Erlenmeyer para determinar su pH.
2. Colocar en un frasco compotero una rama de Elodea y determinar su pH.
3. Registrar frecuencia cardiaca y respiratoria de un integrante del grupo y registrar su pH
antes y después de hacer actividad física.
Procedimiento Específico
1. En un Erlenmeyer colocar 100 ml de solución de glucosa y dos cucharadas de Levadura
taparlo con un corcho y una bomba inflable observar que pasa después de 20 minutos y
determinar su pH.
2. En un frasco compotero colocar agua destilada hasta la mitad de este, introducir la rama de
Elodea y tapar, después de 25 minutos determinar el pH.
3. En un tubo de ensayo colocar 5 ml de agua de cal y en otro fenolftaleína, colocar un corcho
perforado e introducir un pitillo, soplar a través de este hasta notar un cambio en el agua,
repetir el procedimiento después de caminar dos vueltas a la cancha de futbol además de
registrar frecuencia cardiaca y respiratoria, luego hacer lo mismo después de trotar dando
dos vueltas a la cancha de fútbol.
Resultados
Cumpliendo con el procedimiento general numero 1 y sus procedimientos específicos se logra
observar que después de diluir la mezcla entre agua, azúcar y levadura una sustancia de carácter
homogéneo que al dejarlo reposar por 20 minutos de determina un pH de carácter acido de 4
(ILUSTRACIÓN 8) .

Ilustración 8 Mezcla homogénea entre agua, azúcar y levadura, de observa que el globo se infla y resulta un pH de 4

Siguiendo el procedimiento general número 2 se introduce una rama de Elodea en lo que es un


frasco de vidrio, llenándolo hasta la mitad de su capacidad máxima, se tapa y se deja reposar
también por 20 minutos, recorrido el tiempo se logra determinar que la sustancia tiene un pH de 7
(ILUSTRACIÓN 9).

Ilustración 9 Determinación del pH de una rama de Elodea


Después de preparar en 6 distintos tubos de ensayo 5 ml de fenolftaleína en 3 tubos y 5 ml de
agua de cal en los 3 tubos restantes (ILUSTRACIÓN 10).

Ilustración 10 Agua de cal (Izquierda) y Fenolftaleína (derecha) sin alteraciones

Se procede a tomar la frecuencia cardiaca de un integrante del grupo en 6 segundos, dichos datos son
mostrados junto con los datos después de caminar y trotar en la Tabla 1. Después se introduce algodón
en cada tubo de ensayo de manera que cierre el pitillo con el contacto externo del tubo de ensayo y se
empieza a repetir el procedimiento caminando de manera que después de soplar se alcance a dar el
cambio de color en los tubos de ensayo para después determinar su pH (ILUSTRACIÓN 11) además de
registrar el tiempo que tardó en cambiar su color (tabla 2).
Ilustración 11 Alteraciones de color en la fenolftaleína (derecha) después de caminar

Después se realiza el mismo procedimiento anterior, solo que esta vez se procede a realizar
corriendo, dadas las dos vueltas enteras a la cancha de futbol, se dan los resultados presentes en la
tabla 1 y el tiempo que tarda en cambiar de color en la tabla 2; demostrando solo cambios en la
fenolftaleína (ILUSTRACIÓN 12).

Ilustración 12 Alteraciones en el color de la fenolftaleína después de correr


Tabla 1 Frecuencia cardiaca según estado del integrante del grupo

Tabla 2 Tiempo que tarda en cambiar el color de la sustancia según el estado del integrante

Análisis de resultados
Se denomina levadura a cualquiera de los diversos hongos microscópicos unicelulares que son
importantes por su capacidad para realizar la descomposición mediante fermentación de diversos
cuerpos orgánicos, principalmente los azúcares o hidratos de carbono, produciendo distintas
sustancias.
A veces suelen estar unidos entre sí formando cadenas. Producen enzimas capaces de descomponer
diversos sustratos, principalmente los azúcares. Una de las levaduras más conocidas es la especie
Saccharomyces cerevisiae. Esta levadura tiene la facultad de crecer en formaanaerobia1 realizando
fermentación alcohólica.2 Por esta razón se emplea en muchos procesos de fermentación industrial,
de forma similar a la levadura química, por ejemplo, en la producción de cerveza, vino, hidromiel,
pan, antibióticos, etc. Una molécula capaz de liberar (donar) un ion hidrogeno se denomina acido.
Cualquier molécula que sea capaz de aceptar un protón se define como una base.
La acidez de una solución se mide por la concentración de iones hidrogeno y se expresa en términos
de pH. A un pH (alcalino) disminuye la producción de lactato y CO2. A un pH por encima de 7,0
no existe producción de lactato. Debido a esto, al momento de determinar el pH de la solución entre
agua, azúcar y levadura se muestra que esta tiene un pH de 4 lo que representa la condición
anaeróbica de la levadura y su proceso de fermentación. (Méndez R María, Fragoso T Dalila,
Utrilla Q Alejandra, Pérez A Carolina. Biología Básica I, editorial BookMart. México.2016.)
Al cumplir con el segundo procedimiento, dejar la rama de Elodea en medio acuoso se logra
observar según el indicador de pH que la sustancia posee un pH neutro de 7 (ILUSTRACIÓN 9)
lo que determina que el agua de Elodea cumple con el procedimiento de respiración celular.
La frecuencia respiratoria incrementa al realizar una actividad porque cuando el cuerpo es
sometido a una actividad física se requiere mayor cantidad de oxígeno y de un potencial energético
mayor que el normal para obtener más energía a partir de la respiración aerobia. A medida que la
actividad aumenta, mayor será la necesidad de consumo de energía. Cuando el ejercicio se realiza
en exceso, el oxígeno no es suficiente para poder llevar a cabo la ruptura de la glucosa, por lo cual
nos músculos llevan a cabo el proceso de fermentación láctica.

Conclusiones
La respiración es un proceso muy importante en el trabajo celular de todo tipo de ser vivo, ya
se aerobio o anaerobio, cumpliendo un papel muy importante como lo es el de brindar energía a la
célula en la que es procesada, esto puede ser aplicado a distintos usos industriales como lo es el
proceso de lácteos la producción de sustancias alcohólicas y demás, esto lo podemos probar en el
procedimiento 1 donde la levadura degrada la glucosa para obtener energía, produciendo alcohol y
CO2 lo que determinaba su fuerte olor y la forma en que se infló el globo además de su pH ácido.
En la hoja de Elodea se puede determinar que por su carácter de células de planta se observa la
presencia de la fotosíntesis, así como su resultado de pH neutro representa que no es un estado de
fermentación, pero tampoco es de carácter básico ya que libera O2 y no existe producción de CO2.
Al exhalar una respiración estando en reposo en el primer recipiente el color fue el mismo,
podemos decir que por lo tanto tendrá un pH de carácter básico, después de caminar durante unos
minutos, se exhaló nuevamente en el segundo recipiente y se cambia de color a un medio de pH 5
en la fenolftaleína y de pH 13 en el agua de cal, demostrando que hay mayor presencia de CO2, la
frecuencia respiratoria incremento porque al realizar una actividad el cuerpo requiere mayor
cantidad de oxígeno y de un potencial energético mayor que el normal para obtener más energía a
partir de la respiración aerobia. A medida que la actividad aumenta, mayor será la necesidad de
consumo de energía. Por último, la misma persona corrió durante unos minutos, y nuevamente
volvió a exhalar en un tercer recipiente, ahora la solución cambio completamente su color este
cambio de coloración se debe a que hay mayor producción de co2. Las acumulaciones de CO2 se
pueden alterar simplemente al respirar profundamente o al ejecutar ejercicios de intensidad
elevada. Al llegar al agotamiento, el lactato se acumula en la sangre. El cuerpo intente invertir esta
acidificación liberando más co2. La acumulación de lactato incrementa la producción de CO2, ya
que el escaseo de ácido provoca que el ácido carbónico de la sangre se convierta en CO2. En
consecuencia, el co2 sale de la sangre penetrando en los pulmones para ser espirado, y aumenta la
cantidad de co2 liberado. Aquí el PH cambio a acido por haber mayor producción de CO2.ya que
se consigue un pH de 11.
Bibliografía
Audesirk T, Audesirk G, Byers Bruce. Biología la vida en la tierra Editorial Pearson. 2008.

Campbell Neil & Reece Jane Biología. Editorial Panamericana.2007.


Curtis, Barnes. Biología séptima edición editorial Panamericana.
Méndez R María, Fragoso T Dalila, Utrilla Q Alejandra, Pérez A Carolina. Biología Básica I,
editorial BookMart. México.2016.
Jiménez Luis, Merchant Horacio. Biología celular y molecular, editorial Pearson. México. 2003.

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