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Caracterização Fitoquímica e Análise do Efeito Antimicrobiano do


Extrato Foliar de Anacardium occidentale Sobre Bactérias de Interesse
Clínico
Anne Caroline Santos Ramos1,2 (PROVIC/CNPq-Unit), e-mail:
annecaroline.9@hotmail.com; José Reinaldo Oliveira Silva1,2 (PROBIC/Unit), e-mail:
reinaldoagape@gmail.com; Jorge Alberto Lopez2,3(Co-orientador), e-mail:
jorgejal@gmail.com; Maria Lucila Hernandez-Macedo2,3 (Orientadora), e-mail:
lucyherma@hotmail.com
1
Universidade Tiradentes/Biomedicina/Aracaju, SE.
2
Instituto de Tecnologia e Pesquisa/Laboratório de Biologia Molecular/Aracaju-SE.
3
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Industrial/Universidade
Tiradentes/Aracaju, SE

2.12.00.00-9 Microbiologia 2.12.02.00-1 Microbiologia Aplicada


Pesquisa executada com recursos do CAPES/FAPITEC/SE.

RESUMO: Com o incremento de infecções Assim, o objetivo deste trabalho foi preparar
causadas por microrganismos resistentes aos extrato foliar de A. occidentale, analisar a sua
antimicrobianos convencionais, torna-se relevante a fitocomposição e avaliar sua atividade
investigação de compostos químicos presentes em antimicrobiana em linhagens de Staphyloccocus
extratos vegetais com potencial antimicrobiano. O aureus e Pseudomonas aeruginosa.
Anacardium occidentale é um exemplo de planta
cujos extratos apresentam atividade antitumoral, MATERIAL E MÉTODOS
antimicrobiana e antifúngica. O presente trabalho
tem como objetivo avaliar a composição fitoquímica Análise da composição de polifenóis no
do extrato foliar de A. occidentale, bem como o seu extrato foliar
potencial antimicrobiano. Os resultados mostraram
que o extrato apresenta capacidade antioxidante e Os polifenóis serão avaliado seguindo a
antimicrobiana que pode ser uma alternativa para metodoogia de Cuendet et al. (1997), utilizando
utilização em tratamento de infecções bacterianas. 500µL de solução de extrato foliar e ácido gálico
(padrão) em 1 mL de Folin Ciocalteau (1:10), e
Palavras-chaves: Anacardium occidentale, posterior adição de 3 mL de carbonato de sódio
antioxidante e atividade antibacteriana. para leitura em espectrofotômetro a 760 nm.

INTRODUÇÃO Quantificação de flavonóides no extrato foliar


A necessidade de tratamento para diversas
doenças causadas por micro-organismos 1 mL de AlCl3 2% foram adicionados em uma
resistentes aos antimicrobianos convencionais, solução etanólica do extrato (10 mg/mL) e
torna relevante a investigação de compostos quercetina (padrão). As amostras foram avaliadas
presentes em extratos vegetais com potencial em espectrofotômetro a 510 nm (MILIAUSKAS et
antimicrobiano como de Anacardium occidentale. al., 2004), utilizando a quercetina como padrão. O
Esta de planta apresenta capacidade antimicrobiana resultado foi dado em miligramas de equivalentes
o que a torna uma alternativa eficaz contra de quercetina/grama de extrato (mgEQ/g extrato).
patógenos multirresistente (AJILEYE et al., 2015).
Entre os compostos encontrados no extrato de A. Espectrofotometria do extrato foliar
occidentale estão antioxidantes, como ácido gálico,
quercitina e rutina, todos de características
Uma solução aquosa de extrato foliar foi
fenólicas. Esses compostos atuam na membrana
adicionada em cubeta de quartzo para leitura em
celular dos microrganismos, promovendo a sua lise
UV-VISIBLE (HACH/DR500) para qualificar os
(MIRANDA et al., 2013).
compostos presentes na composição fitoquímica da

Anais 2016: 18ª Semana de Pesquisa da Universidade Tiradentes. “A prática interdisciplinar


alimentado a Ciência”. 24 a 28 de outubro de 2016.
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folha de A. occidentale. quantidade de polifenois que a polpa da fruta.

Capacidade de seqüestro de radicais livres Quantificação de flavonóides no extrato


por DPPH foliar

O reagente DPPH foi diluído em etanol e O extrato foliar de A. occidentale possuiu 77,3
adicionado ao extrato foliar e silimarina (padrão) nas mg de flavonóides/100g de extrato, quantidade
concentrações de 50, 150 e 250 μg/mL, com maior que a obtida por Michodjehoun-Mestres et. al.
incubação de 30 minutos protegidos da luz e leitura (2009) ao analisar a pele do fruto de A. occidentale,
da absorbância a 515 nm (UB-VISIBLE, contendo 2 mg/100 mg de extrato de pele de fruto.
HACH/DR500), sendo os resultados expressos em
%SRL. Espectrofotometria do extrato foliar

Espectrofotometria por infravermelho (FTIR) Os picos demonstrados na espectrofotometria do


do extrato foliar de A. occidentale extrato (285 e 356 nm) demonstram a presença de
polifenois e flavonóides, corroborado Escarpa
(2001), que obteve picos semelhantes que
O extrato liofilizado foi analisado em
indicavam a presença de rutina, quercetina e ácido
espectrofotometria de FTIR para obtenção do
gálico no extrato foliar de A. occidentale
comprimento de onda, transmitância e determinação
dos compostos presentes na sua composição
(BALER et al., 2014). Capacidade de seqüestro de radicais livres
por DPPH
Avaliação da atividade antimicrobiana por
Ao se comparar os resultados do extrato e do
Concentração inibitória mínima (CIM)
padrão (silimarina), foi possível notar o incremento
da capacidade antioxidante proporcional ao
Para determinação da CIM (concentração
aumento da concentração de extrato. O extrato
inibitória mínima), 100 μL de uma solução base
foliar apresentou capacidade antioxidante maior que
(extrato) com 50 mg/10mL foram pipetados na
a silimarina, numa diferença de 14,5%. Ao se
primeira fileira de microplacas de 96 poços,
comparar os 73,7% de capacidade antioxidante do
realizando diluição sucessiva até o último poço
extrato com o obtido por Broinizi et al. (2008) apos
(PITTA, et. al., 2016). Após cultivo a 37°C por 24 h
utilizar o pedúnculo da fruta de caju (63,6%), pode-
foram adicionados 25 μL de cloridrato de
se constatar que a folha tem capacidade
trifeniltetrazólico, com incubação de 2 horas para
antioxidante maior que o fruto.
leitura em espectrofotômetro de microplacas a 490
nm (Thermo Plate TP-READER). Os resultados
Espectrofotometria por infravermelho (FTIR)
foram obtidos aplicando as absorbâncias na fórmula
do extrato foliar de A. occidentale
abaixo:
O resultado da espectrofotometria por
infravermelho (Tabela 1) demonstra a presença de
fenóis e flavonóides, sendo complementar às
RESULTADOS E DISCUSSÃO metodologias anteriores, com resultado semelhante
ao obtido por Sheny (et al., 2013).
Quantificação de compostos polifenólicos no
extrato foliar Avaliação da atividade antimicrobiana por
Concentração inibitória mínima (CIM)
O extrato foliar apresentou valor igual a
113,3±1,13 mg em equivalente de mg de ácido O extrato hidroetanólico apresentou atividade
gálico/g de extrato. Ao se comparar com os bactericida contra P. aeruginosa e S. aureus (CIM
resultados de Vieira (2011) ao estudar a polpa da 0,26 mg/mL). Em comparação aos antibióticos
fruta de cajueiro (449,63 ± 10,24 mg EAG/g de controles, o extrato foliar mostrou melhor atividade
extrato), pode-se notar que a folha apresenta menor
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contra P. aeruginosa que o meropenem. Entretanto, AREKEMASE, M. O.; OYEYIOLA, G. P.; ALIYU, M. B.
o antibiótico controle vancomicina utilizado para S. Antibacterial Activity of Anacaridum Occidentale on Some
aureus teve inibição em uma concentração menor Enterotoxin Producing Bacteria. International Journal of
que as concentrações do extrato foliar, mostrando Biology, 3:4, 92-99, 2011.
que o antibiótico foi mais eficiente que o extrato.
BALER, M. J.; TREVISAN, J.; BASSAN, P. et. al. Using
Fourier transform IR spectroscopy to analyze biological
Figuras e Tabelas materials. Nature Protocols, 9:8, 1771–1791, 2014.

Tabela 1 – Radicais referentes aos picos BROINIZI, P. R. B.; ANDRADE-WARTHA, E. R. S.;


apresentados no FTIR do extrato foliar segundo OLIVEIRA E SILVA, A. M. et al. Antioxidant properties in
Sheny et al. (2013) cashew Apple byproduct (Anacardium occidentale L.):
effect on lipoperoxidation and on the polyunsaturated
Pico Radical Referente fatty acids profile in rats. Revista Brasileira de Ciências
-1
Farmacêuticas, 44:4, 2008.
770 cm C-H
1107 cm-1 C-O (carbonila) CHAVES, M. H.; CITÓ, A. M. G. L; LOPES, J. A. D.;
1222 cm-1 Poliois COSTA, D. A.; OLIVEIRA, C. A. A.; COSTA, A. F.;
JÚNIOR, F. E. M. B. Fenóis totais, atividader antioxidante
1448 cm-1 C-OH (álcool) e constituintes químicos de extratos de Anacardium
1519 cm-1 e 1641 cm-1 Radicais amida occidentale L., Anacardiaceae. Revista Brasielira de
Farmacognosia, 20:1, 106-112, 2010.
1720 cm-1 C=O (ác carboxílico)
-1
3400 cm -OH (polifenóis) CUENDET, M.; POTTERAT, O.; HOSTETTMANN, K.
Iridoid glycosides with free radical scavenging properties
from Fagraea blumei. Helvetica Chimica Acta, 80:11, 44-
CONCLUSÕES 1152, 1997.

O extrato hidroetanólico de Anacardium ESCARPA, A.; GONZÁLEZ, M. C. Approach to the


occidentale apresenta atividade antioxidante devido contento f total extractable phenolic coumpounds from
à presença de compostos fenólicos e flavonóides. different food samples by comparison of chromatographic
Os resultados dos testes antimicrobianos and spectrophotometric methods. Analytica Chimica Acta,
revelam a ação antimicrobiana, seja bactericida ou 427, 119-127. 2001.
bacteriostática do extrato.
GEORGÉ, S.; BRAT, P.; ALTER, P.; AMIOT, M. J. Rapid
O resultado da avaliação da atividade
antimicrobiana do extrato foliar foi melhor do que determination of polyphenols and vitamin C in plant-
antibiótico controle para a linhagem de P. derived products. Journal of Agricultural and Food
aeruginosa, mas possuindo ação semelhante para Chemistry, 53, 1370-1373, 2005.
S. aureus.
MÉLO, E. A., DE LIMA, V. L. A. G., MACIEL, M. I. S.,
AGRADECIMENTOS CAETANO, A. C. S., & LEAL, F. L. L. Polyphenol, ascorbic
acid and total carotenoid contents in common fruits and
Agradecemos ao CNPq, FAPITEC/SE e CAPES vegetables. Brazilian Journal of Food Technology, 9, 89–
pelo apoio durante a execução deste projeto 94, 2006.
científico.
MICHODJEHOUN-MESTRES, L.; SOUQUETE, J.;
REFERÊNCIAS FULCRAND, H.; BOUCHUT, C.; REYNES, M.;
BRILLOUET, J. Monomeric phenols of cashe apple
AJILEYE, O. O.; OBOUTOR, E. M.; AKINKUNMI, E. O.; (Anacardium occidentale L.). Food Chemistry, 112, 851-
ADEROGBA, M. A. Isolation and characterization of 57, 2006.
antioxidant and antimicrobial compounds from
Anacardium occidentale L. (Anacardiaceae) leaf extract.
MILIAUSKAS, G.; VENSKUTONISA, P.R.; BEEK, T.A.
Journal of King Saud University, 27:3, 244-252, 2015.
Screening of radical scavenging activity of some

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medicinal and aromatic plant extracts. Food Chemistry,


85, 231-237, 2004.

MIRANDA, G.S.; SANTANA, G. S.; MACHADO, B. B. et


al. In vitro antibacterial activity of four plant species at
different alcoholic contents. Revista Brasileira de Plantas
Medicinais, 15:1,104-11, 2013.

PITTA, E.; ROGACKI, M K.; BALABON, O. et al.


Searching for new leads for Tuberculosis: Design,
synthesis and biological evaluation of novel 2-quinolin-4-
yloxyacetamides. Journal of Medicinal Chemistry. 59:8,
6709-28, 2016.

RAZALI, N.; RAZAB, R.; JUNIT, S. M.; AZIZ, A. A.


Radical scavenging and reducing properties of extracts of
cashew shoots (Anacardium occidentale). Elsevier, Food
Chemistry, 111, 38-44. 2008.

SHENY, D. S.; PHILIP, D.; MATHEW, J. Synthesis of


platinum nanoparticles using dried Anacardium
occidentale leaf and its catalytic and thermal applications.
Spectrochimica Acta Pat A: Molecular and Biomolecular
Spectroscopy; 114, 267-271. 2013.

VIEIRA, L. M.; SOUSA, M. S. B.; FILHO, J. M., LIMA, A.


Total phenolics and antioxidant capacity “in vitro” of
tropical fruit pulps. Revista Brasileira de Fruticultura, 33:3,
2011.

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