DEMOSTRACIÓN DE LA PRESENCIA DE

MICROORGANISMOS EN DIFERENTES AMBIENTES

Lopez Vivian Yulieth, Muñoz Maria Camila, Orozco Daniela

Escuela de ingeniería de alimentos

Cali, Valle 26/06/2019

Resumen
En esta práctica de laboratorio se demostró la presencia de microorganismos en ambientes
comunes para el ser humano además de familiarizarse con los métodos de obtención, cultivo y
tratamiento muestras de microorganismos. Mediante el cultivo de estas de muestras en
diversos medios: Agar nutritivo, agar inclinado y caldo nutritivo. Se logró observar la formación
y posterior caracterización de las morfologías de las colonias obtenidas. Se tomaron muestras
provenientes de: una billetera, el aire acondicionado, unas gafas y saliva, estas se depositaron
sobre agar nutritivo que conduce a la obtención de un cultivo para su posterior observación e
identificación, después de 48 horas se observan que las muestras provenientes de la billetera,
la saliva y las gafas presentaron formación de colonias de diversos microorganismos, en la
muestra tomada del aire acondicionado no se observó presencia de microorganismos.
Además, se suministró la bacteria ​Pseudomona para el cultivo en agar inclinado y caldo
nutritivo, se obtuvo un crecimiento de colonias en ambos medios, permitiendo discutir sobre la
fisiología de la misma.

Palabras clave:​ microorganismos, colonias, medio de cultivo,

Introducción
Hace trescientos años Antonie van Leeuwenhoek observó por primera vez en un microscopio
primitivo unos “pequeños animáculos” que ahora se conocen como microorganismos. Los
microorganismos son los seres más primitivos y numerosos que existen en la Tierra, colonizan
todo ambiente: suelo, agua y aire, participan de forma vital en todos los ecosistemas y están en
interacción continua con las plantas, los animales y el hombre.​1
La distribución de especies en todos los hábitats es debido a su poco peso, los microorganismos
pueden difundirse con facilidad por corrientes de aire. Por ello, en condiciones naturales no hay
ningún hábitat ni ningún sustrato que tenga que ser inoculado. Este hecho es el que se aprovecha
con la técnica del cultivo de enriquecimiento (​medio de cultivo que contiene los nutrientes
necesarios para apoyar el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos​). Hay
microorganismos en todas partes; técnicamente el medio decide cual es el tipo que se reproducirá.
Estableciendo las condiciones selectivas correspondientes en un tubo de ensayo se pueden
enriquecer y aislar en cultivo puro la mayoría de los microorganismos conocidos a partir de una
pequeña cantidad de muestra.

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Los métodos de cultivo en el laboratorio fueron desarrollados el siglo pasado por O. BREFELD y
R.KOCK y su escuela. La introducción de los medios de cultivo solidificados (gelatina o agar) han
hecho posible el aislamiento de microorganismos, seguir su crecimiento hasta colonias y conseguir
cultivos puros.​2
En esta práctica se apreciaron algunos de los diferentes tipos de microorganismos que conviven
en el día a día poniendo en observación objetos cotidianos como las gafas, la billetera. Teniendo
en cuenta que a nuestra disposición tenemos un agar nutritivo el cual es un medio de cultivo en el
que se distingue el crecimiento microbiano. Como se sabe los microorganismos están presentes
tanto exterior como interiormente, siendo el cuerpo humano uno de los medios donde proliferan
bacterias (la mayoría), virus, hongos y protozoos que habitan dentro del organismo y en la piel, a
todo este conjunto de microorganismos se le llama microbioma humano.
Dentro de esta práctica se pudo reconocer algunos de los muchos microorganismos que habitan
en el entorno identificando de ellos su morfología más relevante.

Materiales y métodos

La práctica se desarrolló en dos partes, los materiales utilizados durante esta fueron:

● 4 Cajas de Petri con agar nutritivo

● Aplicadores de algodón estéril
● Mechero
● Jabón antibacterial
● Alcohol
● Toallas de papel
● Cinta vinipel para sellar cajas
● Asas de inoculación
● Tubo de caldo nutritivo por 5 ml
● Tubo de agar inclinado aproximadamente 8 ml
● Caja con bacterias.

En la primera parte de la práctica se depositaron las cuatro muestras en las cajas de Petri.
Aire acondicionado: Se tomó una de las cajas y se expuso muy cerca del aire acondicionado del
laboratorio durante unos segundos.
Billetera: Con un hisopo se tomó una muestra de la billetera de una compañera y se sembró en el
agar haciendo varias líneas en zigzag.
Gafas​: Con un hisopo se tomó una muestra de las gafas de una compañera y se en el agar
haciendo varias líneas en zigzag.
Saliva: Con un aplicador se frota la cavidad bucal de una compañera y se aplica este al agar
nutritivo se expande la muestra, se pone la lengua sobre el agar.
Todas las muestras fueron debidamente rotuladas y selladas con papel film después de ser
sembradas.
Posteriormente se llevó a cabo la siembra Pseudomona en el agar inclinado ya preparado y en el
caldo nutritivo. Se dejó calentar inicialmente el asa circular a fuego directo de un mechero hasta
tornarse rojo, luego se introdujo en la muestra de ​Pseudomona​, se raspó ligeramente, luego se
realizó la siembra moviendo el asa en forma de zigzag, se tapó el agar y se flameó nuevamente
el asa en el mechero.

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 Para la siembra en el caldo nutritivo, se flameó inicialmente el asa en el mechero, se introdujo en
la muestra de ​Pseudomona y se raspo ligeramente, se introdujo el asa con el cultivo en el caldo
nutritivo y se dejó actuar por unos segundos, se tapó el caldo.
Las muestras de agar en caja de Petri se dejaron incubar 48 horas después, luego del tiempo de
incubación, se observaron las colonias a simple vista y con ayuda de un estereoscopio.

Resultados
Primera Parte

​ igura 2. muestra tomada de gafas ​

Figura 1. muestra extraída de billetera​ F ​Figura 3. muestra extraída de saliva

1. Billetera

Figura 4. Figura 5. Figura 6.

muestra de billetera observada desde diferentes lugares del agar vista en estereoscopio

Tabla 1. ​Características de las colonias observadas en el agar nutritivo

Muestra de billetera Figura 4 Figura 5 Figura 6

Figura circular circular circular

Borde filamentoso entero entero

Elevación acuminada convexa convexa

Superficie granular lisa lisa

3
 Cromogénesis blanco blanco amarilla

Luz reflejada mate brillante brillante

2. Gafas

Figura 7. Figura 8.
Muestra de gafas observada desde diferentes partes del agar vista en estereoscopio

Tabla 2. ​Características de los microorganismos analizados en el agar

Muestra de gafas Figura 7 Figura 8

Forma irregular irregular circular circular

Borde lovulado ondulado entero entero

Elevación plana crateriforme convexa acuminada

Superficie lisa rugosa lisa lisa

cromogénesis blanco Beige blanca crema

Luz reflejada mate mate brillante brillante

3. Saliva
Tabla 3. ​Características de las colonias observadas en el agar

Muestra de saliva Figura 9

Forma circular puntiforme

Borde entero entero

Elevación convexa convexa

Superficie lisa lisa

3
 Cromogénesis blanco transparente

Luz reflejada brillante brillante

Figura 9. muestra de saliva vista en

estereoscopio
Segunda Parte

Figura 10. Agar inclinado con pseudomona Figura 11. Caldo nutritivo con pseudomona

Tabla 4. ​Características del crecimiento de pseudomona ​Tabla 5.​ Características observadas del crecimiento
en agar inclinado de pseudomona en caldo nutritivo

Crecimiento Filiforme Película Sin película

Apariencia Efuso Sub-superficial Turbia

Sedimento Floculento

Discusión
La muestra de aire acondicionado después de 48h de incubación no mostró ningún crecimiento
de microorganismos, por ello no se consignaron los resultados en este informe; esto puede
significar que los filtros del mismo gozan de un mantenimiento periódico y buena limpieza, lo
cual es muy importante al interior de un laboratorio ya que la atmósfera no tiene una microbiota
autóctona pero es un medio de dispersión de microorganismos de otros ambientes, facilitando
la contaminación​ [3]
De las características observadas registradas en la tabla 1 de la figura 5 y 6, se puede inferir
por el crecimiento en diversas colonias que se trata de bacterias, además comparando el
crecimiento obtenido entre la figura 1 y 2, se puede observar que en el 2 fue mayor,
posiblemente por la muy reducida limpieza que tiene el objeto periódicamente, asimismo este
está expuesto al ambiente todo el tiempo, y con su uso continuo más propenso a la adherencia
de microorganismos. En la figura 3 se puede notar la expansión de microorganismos a lo largo

3
de la línea de incubación, los cuales pueden ser naturales de la cavidad oral, ya que en esta
existen aproximadamente 1010 bacterias y 60% de ellas es cultivable ​[3]
En la figura 11 se observó un cambio en la turbidez a lo largo de todo el caldo de cultivo
pasadas las 48h de incubación, como también un pequeño sedimento en el fondo del tubo, lo
que puede indicar que la bacteria sea anaerobia; en la figura 10 se observa mejor el
crecimiento de la bacteria, sobre toda la línea de inoculación y muy delgado como un velo.

Anexos
1. ¿Por qué se dice que existen microorganismos que cumplen funciones beneficiosas o
perjudiciales?, nombre dos en cada categoría y ejemplifique.
2. ¿Qué es una colonia bacteriana? ¿De qué factores depende el tipo de crecimiento de
una colonia?
Una colonia bacteriana es una aglomeración de bacterias que son descendientes una o unas
pocas bacterias progenitoras. (Pírez, 2016). En las cuales, todas son genéticamente idénticas y
dependiendo de las características de las mismas se generan diversas estructuras visuales, las
cuales dan una amplia gama de morfologías de colonias bacterianas.

El crecimiento bacteriano depende fundamentalmente del tipo de bacteria, también influyen el

pH, composición del medio, temperatura de incubación, edad del cultivo, entre otros,
(Pumarola, 1990) por lo que la alteración de estos factores limitaría considerablemente el
crecimiento bacteriano.
También es posible darse por factores como:
1. Agotamiento de los nutrientes en el medio de cultivo y por lo cual no hay alimento para
las bacterias.
2. Los desechos generados por las mismas bacterias pueden crear un ambiente que

 
impida la duplicación de ellas. (Madigan et Al, 2016).
3. En diferentes casos, dependiendo del tipo de bacterias (aerobias, anaerobias,
capnofílicas estrictas) el agotamiento de oxígeno y CO2 provocan la limitación de este
crecimiento.

3. ¿Podría usted observar colonias bacterianas en un medio líquido?, Justifique su

respuesta.
4. ¿Qué es un medio de cultivo? ¿En qué casos se utilizan medios sólidos y en qué otros
medios líquidos? Explique.
5. Escoja un tipo de ambiente o material (alimentos, baño, cocina, boca, celular, etc.) e
investigue de qué tipo y cuáles (mínimo 5) son los microorganismos más comunes en
dicho ambiente.

Conclusiones
Se demostró que existe una gran presencia de diversos microorganismos en nuestro medio y
en el interior de nuestro organismo.
Se pudo observar que las colonias bacterianas presentan una morfología diversa según el tipo
de bacteria que conforme la colonia.

3
Es fundamental el adecuado manejo de los instrumentos a utilizar para lograr los objetivos
propuestos.
El uso de implementos de seguridad y prevención, evitar el uso de accesorios y mantener
limpio el área de trabajo son factores indispensables para llevar a cabo una buena práctica.

Referencias bibliográficas
[1] Montaño N, Sandoval A. Camargo S, Sánchez J. (2010). Los microorganismos: pequeños
gigantes.Elementos 77 15-23

[2] Schlegel Hans G. (1997) Microbiología General. Barcelona, Ediciones Omega S.A

[3]De la Rosa M del C, Mosso MA, Ullán C. El aire: Hábitat y medio de transmisión de
microorganismos. Obs. Medioambient. 2002.

[4]Paster B J, Boches S K, Galvin J L, Ericson R E, Lau C N, Levanos V, et al. Bacterial

diversity in human subgingival plaque. J Bacteriol 2001.

Madigan, M., Martinko, J., Parker, J., & Brock.,. (2004). Biologia de los microorganismos (10
ed., pp. 144-145). Madrid: Pearson Education/Prentice Hall