UNIVERSIDAD TECNICA DEL NORTE

FACULTAD DE INGENIERÍAS EN CIENCIAS AMBIENTALES Y

AGROPECUARIAS
“INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA”

TEMA:

“CICLO DE REPLICACIÓN IN VITRO Y ADAPTACIÓN A SUSTRATOEN

EL ANTURIO CON LA VARIEDAD ANTURIUM ANDREARUM ROJO.”
Proyecto de aula de metodología de la investigación científica

AUTORES: Jhony Adrian Atiaja

Ernesto Sebastián Benavides
Rubén Alexander Quishpe
Santiago Toapanta
Jostin Padilla

DOCENTE:
RENATO ECHEVERRÍA

IBARRA-2017
 INTRODUCCIÓN
La belleza de la flor del anturio incentiva a las personas a adquirirlo como planta o
simplemente como un arreglo floral, por lo general se adquieren en color rojo, blanco o
naranja. Muchas hibridaciones han mejorado el color y las características de la flor. Pero
también tienen sus inconvenientes, en ocasiones no se reproducen en forma sexual o el
crecimiento de sus esquejes es muy lento. Para solucionar estos problemas se ha
aprovechado los beneficios de la biotecnología vegetal y así reproducirlos in vitro (En
vidrio ), utilizando técnicas que permiten regular las hormonas de crecimiento rápido en
sus ápices y así seccionar los brotes para producir plántulas que posteriormente son
aclimatadas en sustratos formados a partir de residuos de plantas secas, cascaras de coco,
humus para incentivar a las plantas a realizar la fotosíntesis y crecer ex vitro (Fuera de
vidrio) (Arriaga, 1995).
Según varios estudios realizados en Cuba la propagación in vitro también presenta varios
problemas como: la contaminación y los costos de los reguladores de crecimiento que se
emplea en la preparación de medios de cultivo por lo cual se ha sustituido estos
biorreguladores de crecimiento por oligopectatos y oligosacarinas que son de mayor
eficiencia y menor costo. Los que además de proporcionar un rápido crecimiento a la
planta, aporta también con defensas necesarias y controlan la morfogénesis de la misma.
Para evitar la contaminación se ha implementado el uso de alcohol, Hipoclorito de sodio
y Bicloruro de mercurio en pequeñas cantidades y muy controlado para evitar la
contaminación ambiental (Silvia Montes, 2000).
El uso de estos oligopectatos y oligosacarinas al ser obtenidos de la descomposición de
frutos cítricos y tropicales disminuye significativamente el costo de la replicación in vitro
y sobretodo ayuda a la formación de callos y brotes embrionarios en los explantes
inducidos a organogénesis, el uso de los macro elementos (nitratos, fosfatos, sulfatos) y
los micro elementos (haloides, EDTA, hierro, Boro) son aplicados según los protocolos
de cada laboratorio en cantidades exactas para comparar la eficiencia de las citoquininas
naturales (Silvia Montes, 2000).
La manipulación de los factores climáticos y recursos genéticos permiten mejorar las
especies o modificarlas de tal manera que se pueden acoplar a nuestras expectativas de
producción. Según (Reinert & Bajaj, 1977) la contaminación bacteriana se convierte la
principal falla del sistema ya que cualquier microorganismo se desplazará por el medio
de cultivo apoderándose de los explantes. Otra de los beneficios de los cultivos in vitro
es la totipotencia de las plantas que les permite regenerarse en un nuevo individuo
genéticamente igual al donante a partir de cualquiera de sus partes siempre y cuando estas
contengan células meristemáticas o no diferenciadas por lo general están presentes en el
cambium, las hojas, flores zonas apicales, axiales, meristemos, incluso en frutos y
semillas (Pérez, 1998).
ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN
De acuerdo con Álvarez (2006), esta industria se desarrolló principalmente como un
pasatiempo en una parte de los jardines de los cultivadores quienes cambiaron las flores
de tienda durante la década de 1940. Según él, los incrementos en la demanda mundial en
cuanto a flores de Anthurium cortadas en la década de 1970 promovieron las ventas he
incrementaron el área de producción de 40 acres hasta 400 acres en 1979.

La industria llegó hasta su máximo en 1980, suministró en el mercado local, nacional e

internacional con un aumento de 232.000 docenas de flores por mes. En el caso del genero
Anthurium los terrenos de cultivo medidos en acres han incrementado dramáticamente;
las plantas son derivadas de semillas con variaciones substanciales en los aspectos mas
importantes del color, calidad, producción anual y tiempo para el primer florecimiento
(Reinert, 1977).

Hay una demanda fuerte para la producción vegetativa de plantas élites que la importación
convencional no puede satisfacer (Reinert, 1977). Recientemente la micropropagación de
Anthurium es una práctica común comercialmente (Te-Chato et al., 2006).

PROBLEMA
La reproducción de forma sexual o por esquejes es muy lenta pero gracias a los beneficios
de la biotecnología vegetal el tiempo de reproducción se disminuye obteniendo una mayor
cantidad de plantas en menos tiempo en ciertas plantas. Para ello se ha planteado la
siguiente pregunta. ¿Se puede aplicar los métodos de producción acelerada en todas sus
etapas al anturio?
Para inducir una planta al producción en vitro es necesario desinfectar los explantes que
se los van a inducir ya sean semillas, raíces, tallos, hojas, flores, frutos, brotes entre otros
no todas las plantas tienen la misma reacción a los métodos que se han empleado en la
desinfección, por esta razón se comprobará con el método de desinfección desarrollado
en el laboratorio de biotecnología vegetal de la UTN en un proyecto de desinfección de
semillas de café.
Una vez inducidos los explantes pueden tener varios tratamientos; sea para la formación
de callos (callogénesis), para la formación de embriones somáticos o cigóticos
(embriogénesis), y para la formación de nuevas plantas a través de segmentos
(organogénesis). Este proyecto está enfocado a la embriogénesis somática por
suspensiones celulares.
La vialidad de los embriones que se obtiene de las suspensiones celulares dependen de
los reguladores pero en varias especies al extraer los embriones y subcultivarlos en
medios sólidos se deforman dando origen a tejidos de células indiferenciadas (callos) por
esta razón se aplicará un método de callificación para comparar y conocer sus efectos.
Una vez obtenidos los embriones y una vez que estos se hayan desarrollado necesitan un
subcultivo o aclimatación a sustratos para que inicien su desarrollo fotosintético y puedan
sobrevivir en el medio natural pero como se ha mencionado con anterioridad no todas las
plantas tiene la misma reacción un solo protocolo. ¿Qué reacción tendrá el anturio ante el
protocolo ya establecido y que cambios necesita?
DELIMITACIÓN DEL PROBLEMA
Basados en varias investigaciones realizadas en el anturio o varias plantas relacionadas
por el Instituto Nacional de Ciencias Agrarias en la Habana (Cuba), se comparará con sus
resultados y se modificarán de ser necesario con el fin de obtener el protocolo adecuado
para la producción industrial del anturio. La investigación no será secuencial puesto que
ya se han realizado tratamientos eficientes en el laboratorio de biotecnología vegetal de
la Universidad Técnica del Norte pero no han sido publicados.
A partir de los explantes ya obtenidos se tomaran muestras para la investigación y se
inducirán a la formación de callos y división celular por suspensión de tejido basándose
en el protocolo establecido en el proyecto del café que mantiene el laboratorio de
biotecnología vegetal.

OBJETIVOS:

 OBJETIVO GENERAL:

Plantear un protocolo de producción a nivel industrial in vitro del Anturio

(Anthurium Andreanum) rojo para abastecer de plantas a los productores de flores y
público en general.

 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Determinar un método de desinfección de explantes para la inclusión in

vitro.
 Establecer un método para la producción a gran escala y más efectiva del
Anturio in vitro.
 Plantear un método para la adaptación efectiva y adecuada de las plántulas
en un sustrato preparado (ex vitro)
2. MARCO TEÓRICO

2.1 ANTURIO
El Anturio es una planta ornamental que se distingue por los llamativos colores de su
espata, apreciada por su larga vida en florero (15 a 20 días), muy razonable con respecto
a otras especies. Inicialmente, su cultivo y selección se realizaron en Francia y Bélgica,
descubierta durante una expedición al oeste de los Andes en Colombia y Ecuador en el
año 1876, dando origen mediante hibridaciones a las variedades de flores para corte y
maceta Anthura (2011).

2.2 ORIGEN
Murguía (2007) menciona que el nombre de la variedad Anthurium proviene de las
palabras griegas anthos y oura, que significan respectivamente “florecimiento” e “inicio”,
a la que pertenecen cerca de 1000 especies (Rivero et al., 2008), siendo la más conocida
en el mercado por su demanda A. andreanum Linden, que cuenta con la mayoría de las
variedades comerciales.
El anturio (Anthurium andreanum L.), es una planta herbácea perenne originaria de los
bosques lluviosos de Colombia, Ecuador y América Central .En su medioambiente, los
anturios nacen y crecen sobre la hojarasca del bosque y bajo la sombra de los árboles,
donde hay buena humedad y noches frescas, además la planta tiende a pegarse al tallo de
los árboles a través de raíces adventicias, y muchas veces asociada a otras epífitas como
las orquídeas y bromelias.

2.3 TAXONOMÍA
Según Salgado (2007) la clasificación taxonómica del anturio es la siguiente:
Dominio: Eukaryota
Reino: Plantae
Subreino: Viridaeplantae
Phylum: Tracheophyta 15
Subphylum: Spermatophytina
Infraphylum: Angiospermae
Clase: Liliopsida
Subclase: Aridae
Suborden Aranae
Orden: Arales
Familia: Araceae
Subfamilia: Photoideae
Género: Anthurium
Especie: andreanum
Nombres comunes: Anturio
Corazón chino
Planta del flamenco (Países Bajos)
Cresta de gallo (América del Sur)
Cabeza de buey (China)
Flor de cola (Estados Unidos)
Variedades: Linden ex André, Schott, Tropical, Avoclaudia, Avonette, Avanti Casino,
Lunette, Avoanneke, Limbo, Scorpion, Acrópolis, Fantasía, Cuba, Merengue, Uranus,
Paradise, Champion, Alii, New Pahoa Red, Marian Seefurth, Tatsata Pink, Kalapana,
Oshiro Red, Lavender Lady, Mickey Mouse, Oshiro White, Tropic Mist, Rainbow, Blush
Oishi, Kozohara, Blush Bride, Nitta, Ozaki, Red Obake, Bettina, Sarah, PlewThien
Phuket, Valantino, Sonat.

2.4 DESCRIPCIÓN MORFOLÓGICA

Murguía (2007) indica que Anthurium andraeanum Linden es un planta perenne y por
esta razón permanece viva durante el invierno, con una vida productiva de varios años;
es herbácea y epífita. La raíz es fibrosa, cilíndrica, de consistencia carnosa, gruesa, no
profundiza mucho en la tierra, blanca, con producción de raíces adventicias. El tallo es
erecto, simple, herbáceo cuando joven y semileñoso cuando adulto, llega a crecer hasta
1,5 m. Las hojas son grandes de ápice agudo y borde liso, miden 30 cm de longitud por
20 cm de ancho, con una disposición alternada en el tallo. El pecíolo de la hoja está
envuelto por una vaina inserta en el tallo, es largo y de color verde brillante. La flor
comercial es una hoja modificada llamada espata en forma de corazón de alrededor de 5-
8 cm de longitud, la cual envuelve a una estructura cilíndrica denominada espádice de
aproximadamente 9,5 cm de longitud.

2.5 CONDICIONES AMBIENTALES

Según de FLORES ORGASMIC (2010) el Anturio es una planta tropical y, por lo tanto,
no tolera bien las temperaturas inferiores a 15 ºC y las superiores a 30 °C, asimismo puede
soportar temperaturas extremas de 40 °C, sin embargo los pedúnculos largos y las espatas
anchas, representativas de la más alta calidad, se han obtenido a temperaturas de 19 a 22
°C en el aire Se cultiva para producción comercial a altitudes entre 200 y 2000 msnm.
La intensidad luminosa más apropiada se ubica entre 18000-25000 lux (250-300 Watt),
además prefiere un 75% de media sombra, con malla negra o plateada, una fija que
proporcione el 60% y una segunda que proporcione el 50% de protección, con una
humedad relativa entre el 60 y el 80%.

2.6 PROPAGACIÓN
Trujillo y Otros (2000) manifiesta que todos los métodos de propagación existentes
pueden ser utilizados para multiplicar el anturio, como son la división de plantas, esquejes
o “chupones” del rizoma propagación por acodo e incluso la propagación sexual por
semilla, los cuales resultan lentos y poco costeables. A continuación se describen las
formas de propagación comúnmente usadas.

2.6.1 PROPAGACIÓN POR SEMILLA

Ruiz (2000) menciona que Anthurium andreanum es una especie de flores protóginas.
Aunque las plantas son autocompatibles, la polinización cruzada en algunas plantas es
preferida para producción comercial de semilla, donde se realiza una selección de plantas
“élite” por aspectos como tamaño, forma de la espata y color. Sin embargo este es un
proceso lento, que lleva hasta tres años desde que se establece la semilla hasta la floración,
posteriormente pasan seis o siete meses para que se formen los frutos maduros y se
obtenga la semilla, además su viabilidad es muy corta, presenta una gran variación en la
progenie y la fase juvenil es de larga duración.

2.6.2 PROPAGACIÓN POR HIJUELOS DE TALLO

Murguía (2007) menciona que esta forma de propagación es la más rápida, utilizando los
hijuelos que brotan del tallo (1 a 8 por año) para una vez que den su primera flor separarlos
de la planta, aproximadamente en ocho a diez meses, dependiendo de la variedad y
manejo del cultivo.

2.6.3 PROPAGACIÓN POR HIJUELOS DE RAÍZ

Murguía (2007) demostró que para obtener plántulas de la raíz, es necesario dar
condiciones óptimas de nutrición, aireación y riego a la planta, para seguidamente
cortarlos y sembrarlos cuidadosamente, debido a que son muy tiernos y se deshidratan
fácilmente.
2.6.4 PROPAGACIÓN POR DIVISIÓN DEL TALLO
Murguía (2007) señala que este método consiste en seccionar las plantas adultas cuyo
tallo sea de más de 40 cm de altura y posea por lo menos cinco nudos. Los mismos que
se siembran preferiblemente en forma horizontal sobre un substrato poroso esterilizado.
Posteriormente emergerán las raíces de las estacas y cuando broten las primeras hojas se
trasplantarán al lugar definitivo.

2.7 CULTIVO DE TEJIDOS

Ruiz (2000) indica que la propagación en el laboratorio, también llamada por cultivo de
tejidos, permite obtener un gran número de plantas en muy poco tiempo, libres de virus y
enfermedades bacterianas o fungosas.
De acuerdo a Lee et al (2003) que el cultivo in vitro de anturio fue desarrollado
inicialmente por Pierik (1974) y posteriormente abordado por otros investigadores.
(Musa G, 1997)empleó hojas jóvenes abiertas, para la propagación clonal in vitro de
anturio a través de callo ú organogénesis indirecta, cortando secciones de 3 cm x 8 cm y
de 1,5 cm x 2 cm, sembrados en tubos de ensayo en un medio semisólido de iniciación,
constituído de 50% macronutrientes y 100% micronutrientes, suplementado con 1,5 mg
L-1BAP, 0.2 mg L-12,4-D y 30 g L-1 Glucosa, permitiendo su propagación masiva
comercial.
Lee et al(2003) obtuvieron el mayor número de brotes a partir de yemas axilares de
Anthuriun andreanum L., en medio líquido MS (37,5%) suplementado con 0.8 ppm de
N6- bencilaminopurina (BAP), en agitación. Además, probaron medio MS sólido
adicionado 0.2 ppm de N6-bencilaminopurina (BAP), que rindieron la mayor
proliferación de brotes múltiples por organogénesis directa.
Rivero et al(2008) reportan la inducción de embriogénesis somática indirecta en
Anthurium andreanum. (Monocotiledónea), usando explantes de segmentos foliares de
plantas micropropagadas sobre un medio de cultivo MS modificado suplementado con
6,79 μM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 2,32 μM kin (kinetina). Además,
indican la diferenciación de los embriones somáticos en el medio de cultivo MS
modificado adicionado 4,44 μM de N6-bencilaminopurina (BAP), en condiciones de
oscuridad.
2.8 PROPAGACIÓN IN VITRIO
Castillo (2004) manifiesta que este es un método de propagación rápido, que permite
obtener un gran número de plantas libres de enfermedades, virus, bacterias u hongos, en
muy poco tiempo.
2.8.1 Etapa 0
Se refiere al mantenimiento de la planta madre, es decir en condiciones sanitarias óptimas,
con una nutrición y riego adecuados, para permitir un crecimiento vigoroso y libre de
enfermedades.
2.8.2 Etapa I
Esta es la etapa de iniciación, donde se realiza el aislamiento estéril de los explantes,
eliminando los contaminantes externos como hongos y bacterias que habitan en forma
natural en el ambiente. De ésta manera se puede llevar a cabo un crecimiento y desarrollo
sin contaminación para poder establecer el cultivo in vitro.
Explante
Para el establecimiento y desarrollo de cada cultivo se debe seleccionar el explante
adecuado. La elección del explante se basa principalmente, en el objetivo que se persigue
y la especie utilizada. Por lo que se debe de tomar en cuenta los siguientes factores:
Edad de la planta: la capacidad regenerativa disminuye conforme la planta envejece,
por lo que se utiliza material procedente de plantas juveniles. Para la regeneración in vitro
de Anthurium andreanum, es necesario el uso de tejido joven y aun blando.
Edad del órgano o tejido: los tejidos jóvenes son más apropiados para el cultivo que los
tejidos viejos y leñosos. En Anthurium andreanum se pueden utilizar explantes de
órganos jóvenes que están en la parte aérea de la planta, como la vena central de la hoja
y el espádice de la inflorescencia.
Tamaño del explante: mientras mayor sea el fragmento vegetal, más fácil es inducir el
crecimiento y la regeneración, debido a que cada fracción aislada tiene su propia porción
de reservas y hormonas.
Tipo de explante: la propagación de anturio a través de segmentos de hoja es la más
utilizada, ya que da la mayor cantidad de explantes y su desinfección es más eficiente que
la espata o el espádice, evitando pérdida general de material por ataque de
microorganismos.
2.9 DESINFECCIÓN DE HOJAS
Según Ruiz, 2000 existen cuatro fuentes de infección: la planta, el medio, el aire y
operador. De estas la más importante es la planta, y por ende el material vegetal debe bien
esterilizado superficialmente antes de su aislamiento in vitro.
En el caso del anturio (Anthurium andreanum), la fase crítica para su propagación in vitro
es la etapa de iniciación. existen distintas formas de llevar a cabo la desinfección en los
diferentes tipos de explantes utilizados, sin embargo la mayoría incluyen soluciones con
hipoclorito de sodio (NaOCl) como ingrediente activo, por ejemplo: se recomienda
sumergir el material en alcohol al 70% por unos segundos, seguido por una inmersión en
una solución de hipoclorito de sodio que contenga 15 g L-1 de cloro activo y 0.5 ml de
Tween por cada 100 ml de solución desinfectante por 10 a 15 min, para finalmente
enjuagar tres veces con ADE
Para las hojas se recomienda lavar su superficie con agua y jabón líquido, y
posteriormente en cámara de flujo laminar sumergirlas en una solución de hipoclorito de
sodio al 3% por
15 min, con tres gotas de Tween 20 por cada 100 ml de solución, seguida de tres enjuagues
de 2 min cada uno con ADE.
Según Castillo, (2004) aplicó un protocolo de desinfección que consistió en sumergirlos
sucesivamente por 10 minutos en soluciones de Betadine (10 %), Benomyl (3 g·L-1),
Kasumín (4 mL·L-1), Bidroxyl (500 mg·L-1) e hidróxido de sodio (i.a. 5,25 %). Entre
cada paso se realizaron tres enjuagues con agua destilada y esterilizada. El medio de
cultivo estuvo conformado por las sales de Murashige y Skoog al 100 % y sacarosa a 30
mg·L-1 en las dos fases de cultivo.
2.10 FACTORES LIMITANTES DEL CULTIVO IN VITRO
Fenolización.- La fenolización es el pardeamiento que se presenta con mayor frecuencia
en explantes de especies leñosas, se relaciona con la liberación al medio y oxidación de
polifenoles, es producido por acción de enzimas oxidasas que contienen cobre, como las
polifenoloxidasas y las tirosinasas que se liberan al herirse los tejidos, dando como
resultado compuestos quinónicos altamente activos y tóxicos para el explantes Toro
(2004).
Contaminación.- La contaminación de los explantes se puede presentar en forma
exógena por una inadecuada esterilización del material vegetal o en forma endógena
cuando existen contaminantes sistémicos difíciles de eliminar, las fuentes de donde
proceden los contaminadores son: el explante (tejido), el medio, el aire y el investigador;
siendo la más importante el material vegetal.
Contaminación exógena.-La contaminación que el explante lleva en su superficie se
puede eliminar mediante un eficiente protocolo de desinfección, generalmente se hace
uso de soluciones de hipoclorito de sodio (NaOCl) en concentraciones de 1 a 3%, es una
de las preparaciones más útiles como germicida, se lo ha utilizado durante muchos años
como esterilizante superficial en los tejidos, siempre y cuando no se produzcan lesiones
debido a su acción blanqueadora. Como esterilizante superficial también se utiliza la
solución de bicloruro de mercurio (HgCl2), sin embargo es altamente tóxico y se debe
utilizar con cautela en una solución acuosa entre 0.1 a 1.5% (p/v) por 3 a 10 minutos.
También se puede hacer uso de desinfectantes como el yodo, fungicidas, y otros
bactericidas de naturaleza química.
Contaminación endógena.-Esta se produce cuando los contaminantes se encuentran
dentro del tejido y por ende son difíciles de eliminar. En este caso puede ser útil la
inclusión de fungistáticos o bacteriostáticos en el medio de cultivo; el sulfato de
gentamicina, la penicilina y el sulfato de estreptomicina (10 a 50 mg L-1), son algunos
de los productos de amplio espectro que se pueden utilizar .El cultivo de tejidos
incrementa el promedio de multiplicación normal de las plantas y puede considerarse
como una fuente de material limpio, ya que está libre de bacterias y otras enfermedades
como la antracnosis, decadencia, mancha de la hoja y nudo de raíz Salgado, 2007

2.11 ORGANOGÉNESIS INDIRECTA

Gupta (2005) menciona que la formación de un primordio unipolar a partir de una yema
con el subsecuente desarrollo de este en un brote vegetativo, existiendo siempre una
conexión entre los nuevos brotes y el tejido paterno. Estos brotes vegetativos son
posteriormente puestos a enraizar en otra etapa, vía formación de primordios de raíces y
el subsecuente enraizamiento final.
Los brotes pueden formarse directamente del explante (organogénesis directa) o
indirectamente a partir de callos.
En contraste con la embriogénesis somática, en la vía organogénica para la formación de
una planta completa, ya sea por la vía directa o indirecta, se requiere de una secuencia de
medios de cultivo, ya que aquellos medios que favorecen el desarrollo de los brotes
inhiben la formación de raíces y viceversa.
La embriogénesis somática como sistema de propagación de plantas presenta una serie
de ventajas frente a otros sistemas: Una enorme capacidad de multiplicación aplicable
industrialmente, permite obtener en un solo proceso estructuras completas con ápice y
raíz, que pueden ser almacenadas y encapsuladas perfectamente.
 Anexos

Marco Administrativo

4.1.- Cronograma de Actividades (Gantt)

Mes de Abril
Semana 1 o Método de desinfección.
o Cultivo de Callos.
o Suspensiones.
o Obtención de Embriones.
o Aclimatación.
Semana 2 o Incubación.
o Análisis de datos.
o Vitro plantas.
o Preparación de suspensiones.
Semana 3 o Inclusión de callos a suspensiones o inducción de suspensiones.
o Preparación de sustrato para preparar plantas organogénicas.
o Replicación de callos.
Semana 4 o Obtención de datos.
o Aclimatación de plantas organogénicas.

Mes de Mayo
Semana 1 o Cambiar medios de suspensión.
Semana 2 o Análisis de datos.
Semana 3 o Análisis de datos.
Semana 4 o Filtración celular con una malla de 2mm.
o Observación de células vivas y muertas y diferenciación.

Mes de Junio
Semana 1 o Observación de células vivas y muertas y diferenciación.
o Cambio de medios y división de plantas organogénicas.
Semana 2 o Observación de células vivas y muertas y diferenciación.
o Análisis de datos.
Semana 3 o Cambio por filtración de tejidos con papel filtro de 750 um.
Semana 4 o Conteo celular.
o Análisis de datos.

Mes de Julio
Semana 1 o Conteo celular.
o Aclimatación.
Semana 2 o Extracción de los primeros embriones.
Semana 3
Semana 4
Tabla número 1: actividades realizadas
4.2.- Recursos:
4.2.1.- Humanos
- Jhony Atiaja
- Sebastián Benavides
- Jostin Padilla
- Ruben Quishpe
- Santiago Toapanta
4.2.2.- Administrativo

- Cuadernos - $ 0,70
- Lápices - $ 0,50
- Esferos - $ 1,00
- Borradores - $ 0,20
- Reglas - $ 0,30
- Hojas - $ 4,00
- Laptop - $ 0,00
- Impresiones - $ 10,00
- Internet - $ 2,00
- Carpetas - $ 1,00

Total: $ 19,70

4.2.3.- Herramientas

- Estereoscopio - $ 0,00 - Mechero - $

- Microscopio - $ 0,00 - Aluminio 10,00
- Estufas - $ 0,00 - Ligas - $ 3,00
- Autoclaves - $ 0,00 - Guantes - $ 0,00
(manual y - Mandil de tela - $ 7,00
automática) - $0,00 - Mandil - $ 5,00
- Balanza - $ 0,00 desechable - $ 3,00
electrónica - $ 0,00 - Cubre zapatos - $ 0,00
- Tubos de - $ 0,00 - Termómetro - $ 0,00
ensayo - $ 0,00 - Pinzas - $ 0,00
- Pipetas - $ 0,00 - Mangos de - $ 0,00
graduadas - $ 0,00 bisturí - $ 8,00
- Probeta - $ 0,00 - Bisturís
- Goteros - Gradillas
- Cajas Petri - $ 0,00 - Frascos de
- Vasos de - $ 0,00 cristal
precipitcion - $ 0,00 - Cámara de flujo
- Horno de - $ 9,00 - Computador
esterilización - $ 5,00 - Flash
- Medidor de - $ 3,00 Total: - $
acides - $ 49,00
- Agitador 15,00
magnético
4.2.4.- Insumos

- Bencil Amino Purina (BAP)

- Ácido Naftalenacetico (ANA)

- Di cloro fenoxiacético (2,4D)

Macronutrientes
- Nitrato de Amonio - $ 0,00
- Sulfato de magnesio Heptahidrato
- Nitrato de potasio
- Fosfato de potasio
- Cloruro de calcio
Micronutrientes
-