MANEJO DE MICROPIPETAS Y RECONOCIMIENTO DEL LABORATORIO

Sebastián L. Bedoya –Suárez, JanCarlos Sandoval- Barrera, Yilberth A. Calixto- Delgado

Estudiantes de Ingeniería Agronómica, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos
Naturales, Universidad de los Llanos
E-mail: sebastian.bedoya@unillanos.edu.co
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Introducción
En la biología molecular se realizan procesos Objetivo
de manipulación de ADN por cual se requiere
Conocer los equipos, materiales y reactivos
el uso de micro pipetas que ayuden a medir
con los diferentes tipos de micro pipetas y sus
cantidades muy pequeñas de forma precisa,
componentes, para adquirir destreza en el
“La micro pipeta es un instrumento de
manejo de ellas.
laboratorio empleado para absorber y
transferir pequeños volúmenes de líquidos y
permitir su manejo en las distintas técnicas
científicas. Los volúmenes captables por Metodología
estos instrumentos varían según el modelo: I. Observar y conocer las micro
los más habituales, denominados p20, p200 pipetas
y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y
1000 μl, respectivamente. Es de destacar
que el uso de micro pipetas permite Recorrer el laboratorio e ir observando los
tipos de materiales y su función dentro del
emplear distintos líquidos sin tener que mismo
lavar el aparato: para ello, se emplean puntas
desechables, de plástico, que habitualmente
son estériles. Existen varios tipos de
puntas: por ejemplo, las amarillas para
pipetear volúmenes pequeños (por Tomar la micro pipeta, analizarla y aprender
ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear del uso del piston y como tener una buena
volúmenes grandes (por ejemplo,800 μl).” lectura de ella
(Rey, 2017)
En el laboratorio también se encuentran otros
equipos y materiales necesarios para las
prácticas de extracción y manipulación de Observar el volumen de la micro pipeta y
aprender a cambiarlo para asi poder tomar
ADN, tales como: la cámara de electroforesis
distintos volumenes
horizontal, balanza analítica, balanza
agitadora, microondas, autoclave, equipo
para baño maría y nevera.
 II. Manejo de micro pipetas Resultados

Elegir una micro pipeta para el volumen

necesario a utilizar . Tabla No. 1 Equipos y Materiales

Equipos y Uso
Colocar la punta desechable materiales
Micro pipeta Es un instrumento
Tomar el liquido presionando el piston de laboratorio
hasta el primer tope, para no exceder la empleado para
micro pipeta. absorber y transferir
pequeños volúmenes
de líquidos y
Sumergir la punta en el liquido y soltar
despacio el piston, con un angulo de 90° permitir su manejo
en las distintas
técnicas científicas.
Transferir el liquido al tubo eppendorf,
para su almacenamiento Autoclave Esterilizar
materiales
compresión a vapor.
Liberar la punta con el embolo y ubicarla
en su lugar .
Equipo baño María Incubar muestras en
agua a una
III. Calibración de micro pipetas temperatura
constante durante un
Pesar el tubo eppendorf en una balanza largo periodo de
analitica para su pesaje tiempo
Microondas Calentamiento,
ensayos
Tomar el volumen indicado enzimáticos,
preparación de
tejidos.
Transferir el agua a un tubo eppendorf
Centrifugadora Secar ciertas
sustancias o separar
Pesar el tubo con el agua, y anotar los datos los componentes de
una masa o mezcla

Repetir 3 veces para un promedio colectivo Balanza agitadora y Utiliza un campo

calentadora magnético para
mezclar de manera
Calcular el peso, gracias a los datos
obtenidos automática una
sustancia

Calcular la diferencia entre el promedio y el

volumen marcado en la micropipeta
Balanza analítica Sirve para medir la Tabla No. 2 Calibración de las micro pipetas
masa
Volúmenes en μl

Ensayo 5 20 50 150 750 1000

1 4.6 19,4 50.2 150.5 748.7 990.2

Cámara de flujo Evita la
laminar contaminación y 2 5.5 12.3 50.3 150.6 742.5 994.7
facilita la
propagación de 3 5.5 10.5 50.6 149.6 739.7 987.3
plantas mediante
implantes de Media 5.2 14.1 50.3 150.2 743.6 990.7
embriones Error
0.2 12.1 0.3 0.2 6.4 9.3
Agitador horizontal Agita horizontal o absoluto
y circular circularmente una Error
4% 29.5% 0.6% 0.1% 0.8% 0.9%
sustancia. relativo

Análisis de resultado
Para la atabla N°1 se puede observar los
Cámara Permite la distintos materiales y sus funciones
electroforesis generación de un respectivas, se debe tener en cuenta que cada
horizontal campo eléctrico material es de alto costo, y debe ser utilizado
alrededor de un gel con el mayor cuidado y profesionalismo
donde se depositen
posible para no tener que recurrir a sanciones
las muestras
y pagos por dichos materiales.
En el caso de la tabla N°2 se puede observar
Vórtex Agitar pequeños la toma de medidas en micro litros de
tubos o frascos de diferentes volúmenes, donde la medición se
liquido repitió 3 veces para poder llegar a un
promedio real.
Tubos pequeños de Sirve para guardar Se logra ver que la micro pipeta de 20 micro
reactivos pequeñas cantidades litros, tiene una oscilación de error muy alta,
de reactivos con eso, se puede deducir dos cosas, la
primera que la micro pipeta este des calibrada
y por ende razón arroje mal los volúmenes, o
la segunda y más razonable un error humano
que conlleva al muestreo negativo de la
muestra.
Este suceso suele suceder cuando la micro
pipeta no es bien tomada, o en otro caso no es
utilizada de la forma correcta dando datos Referencias
erróneos y no confiables. Accumax. (12 de Mayo de 2019). Accumax.
Según el parte fabricante Accumax Pro la Obtenido de
micro pipeta de 5-50 micro litros tiene una http://www.accumaximum.com/accum
desviación estándar de 0.5 a 2% de ax_prodata.html
inexactitud en las pruebas, demasiado poco Rey, H. R. (12 de SEPTIEMBRE de 2017).
comparando los resultados. MANEJO DE MICROPIPETAS. Obtenido
(Accumax, 2019) de
https://www.coursehero.com/file/2548
Consultar tabla de errores en Anexos 5538/BIOLOGIA-MOLECULAR-LAB-1-
MANEJO-Y-USO-DE-
MICROPIPETASdocx/
Por ende, se justifica un mal muestreo de los
volúmenes y el factor de error humano en la
práctica.
Para el caso de los otros valores están por Anexos
debajo de la desviación estándar que sugiere
1. Tabla de errores (Accumax)
cada empresa, de tal motivo que se puede
decir que los volúmenes fueron hallados con
mayor exactitud.

Conclusiones
Se debe usar las micro pipetas de la forma
más adecuada.
Tener en cuenta el rango de la pipeta, para no
exceder su volumen, y llegar a dañarla
Es necesario hacer más pruebas de volumen
para hallar un mejor resultado y tener una
variación mínima de ellos