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INTEGRANTES
ARANDA CASTILLO, Daniela Fresia
PINEDA NUÑEZ, Jhonn
DIAZ DIAZ, Ervin
DOCENTE
Dr. José Antonio Llahuilla Quea
HORARIO DE PRÁCTICAS
2019-I
I.-OBJETIVOS
Conocer y aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio de
Toxicología y Química Legal.
Dar a conocer procedimiento para envío, recepción y tratamiento de una
muestra problema para un Análisis Toxicológico.
Realizar ensayos preliminares de Análisis Toxicológico.
II.-MARCO TEÓRICO
La bioseguridad es un conjunto de medidas que tienen la finalidad de evitar la
adquisición accidental de infecciones con patógenos contenidos en las muestras,
así como los riesgos relacionados con la exposición a agentes químicos, físicos o
mecánicos a los que está expuesto el personal en los laboratorios. 1
Frente a la sospecha clínica de una intoxicación, siempre se deben tomar
muestras de sangre y orina al momento del ingreso del paciente y éstas deben ser
enviadas al laboratorio de toxicología, con la solicitud respectiva, consignando en la
orden médica la sospecha diagnóstica. En aquellos pacientes en que no se
sospecha claramente una intoxicación, pero que se presentan con cuadros clínicos
inusuales, se deben tomar también muestras de sangre y orina al momento del
ingreso y solicitar al laboratorio que las almacene refrigeradas temporalmente. Los
análisis toxicológicos pueden clasificarse como de primer o segundo nivel.2
1. El primer nivel incluye el análisis de urgencia de determinados exámenes
cuantitativos en sangre o exámenes cualitativos en orina.
2. El segundo nivel (estudios toxicológicos avanzados o ampliados), permite el
análisis de muestras de sangre, orina, contenido gástrico, vómito e incluso el
medicamento sospechado. Se requiere de tecnologías como cromatografía
en capa fina, cromatografía líquida o de gas con detección de espectrometría
de masa; además de operadores con experiencia para su correcto análisis.
IX.-ANEXOS
CUESTIONARIO 1
9.1 NORMAS LEGALES QUE RIGEN EL ANÁLISIS TOXICOLÓGICO.
Un análisis toxicológico es la búsqueda, por parte del laboratorio, de los posibles
agentes etiológicos causantes de un cuadro clínico/ambiental de intoxicación. En
nuestro país existe base legal para realizar análisis toxicológico tanto en paciente
con vida o cadáver.
Ley Nº 26842, Ley General de Salud.
Decreto Legislativo 635: Código Penal
NTS Nº 111 – 2014-MINSA/DGE - V.01 NORMA TÉCNICA DE SALUD QUE
ESTABLECE LA VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA EN SALUD PÚBLICA DE
FACTORES DE RIESGO POR EXPOSICIÓN E INTOXICACIÓN POR
METALES PESADOS Y METALOIDES.
Resolución Ministerial Nº 757-2013-MINSA, que aprueba la Guía Técnica:
Guía de Práctica Clínica para el Diagnóstico y Tratamiento de la Intoxicación
por Mercurio, y Guía Técnica: Guía de Práctica Clínica para el Diagnóstico y
Tratamiento de la Intoxicación por Cadmio.
PACIENTE CADÁVER
En el medio hospitalario se realiza habitualmente la autopsia clínica en aquellos
casos de pacientes que falleciendo en el centro se considera que tiene interés para
aclarar la causa o circunstancias de una enfermedad o muerte. La autopsia clínica
se rige por normas legales, para su práctica se solicita el permiso familiar.
La autopsia médico-legal es preceptiva en los casos de muerte sujeta a
investigación judicial, esto es en muertes violentas, muertes sospechosas de
criminalidad y muertes no certificadas.
PACIENTE CON VIDA
La atención en un servicio de urgencias de un paciente con una intoxicación de
cualquier etiología genera la obligación de comunicarlo a las autoridades
correspondientes. Existe obligación legal en reportar el hecho dado que nuestro
ordenamiento jurídico considera la intoxicación/envenenamiento como lesión y está
recogida por tanto en nuestro Código Penal (Capítulo III, Sección I:Artículo 287)
El parte de lesiones debe incluir como mínimo los siguientes datos:
–Datos de filiación del facultativo.
–Datos de identificación del paciente.
–Descripción de las lesiones (en este caso del tipo de intoxicación).
–Manifestación de cómo se ha producido el hecho lesivo.
–Pronóstico de las lesiones.
–Destino del paciente una vez atendido.
–Fecha, señalando la hora de la asistencia.
–Firma del facultativo responsable de la atención médica.
9.2 PROCEDIMIENTO EN CASO DE LA EXHUMACIÓN DE UN CADÁVER.
La exhumación de un cadáver tiene su base legal en la ley de cementerios y
servicios funerarios que se detallan a continuación:
DECRETO SUPREMO Nº 03-94-SA REGLAMENTO DE LA LEY DE
CEMENTERIOS Y SERVICIOS FUNERARIOS
Capítulo V De las exhumaciones y transporte de cadaveres y restos
humanos
Artículo 61.- Se requiere autorización sanitaria de la Autoridad de Salud para
proceder a la exhumación o traslado de un cadáver, la que no puede realizarse
antes de un año de realizado el entierro, salvo que éste haya sido embalsamado o
lo solicite la autoridad judicial. La autorización sanitaria sólo podrá ser gestionada
por los ascendientes, descendientes o cónyuge del occiso y deberá ser concedida
o denegada dentro del plazo de tres (3) días de solicitada, en caso de ausencia de
pronunciamiento operará el silencio administrativo positivo, entendiéndose como
automáticamente concedida. Las solicitudes de exhumaciones o traslados de
cadáveres históricos serán gestionadas por la Corte Superior de la localidad.
Ley N°30868 que modifica la Ley N°26298
Capitulo V de las exhumaciones y del transporte de cadáveres o restos
humanos
Artículo 26o.- La exhumación de un cadáver o resto humano para su cremación,
traslado a otro recinto o establecimiento funerario, dentro del territorio nacional,
internamiento al país y transporte internacional se efectuará previa autorización de
la Autoridad de Salud, a petición de sus deudos o por orden judicial. Cuando el
cadáver o los restos humanos constituyan prueba en un proceso judicial, estén
sujetos a diligencias judiciales o cuando un pronunciamiento judicial emitido en un
proceso en trámite pueda afectar su destino, será competente el magistrado o los
magistrados que conozcan de este proceso, en la instancia en que se encuentre.
ASIGNATURA:
TEMA:
ENSAYOS PRELIMINARES
PROFESOR:
INTEGRANTES:
GRUPO:
Lunes 10am-2pm
MESA: 3
2019 - I
MARCO TEORICO
La parte de la muestra destinada para los ensayos preliminares, van a permitirnos
orientar el análisis toxicológico, que por medio de ellos vamos a ir desechando a
cierto grupo de posibles tóxicos así como, inducirnos a sospechar de la causalidad
de otros. 1
Los papeles sensibles, o también llamados papeles reactivos, van a dar una
información de la presencia de tóxicos volátiles y gaseosos. Las láminas metálicas
permitirán detectar la presencia de tóxicos metálicos y no metálicos. Por otro lado,
los ensayos biológicos son herramientas de diagnóstico adecuadas para determinar
el efecto de agentes físicos y químicos sobre organismos de prueba bajo
condiciones experimentales específicas y controladas.
Estos efectos pueden ser tanto de inhibición como de magnificación, evaluados por
la reacción de los organismos, tales como muerte, crecimiento, proliferación,
multiplicación, cambios morfológicos, fisiológicos o histológicos.
Reactivos
Ácido tartárico
Solución acuosa de sulfato de cobre al 0.2%
Solución alcohólica de resina de guayaco al 10% recién preparada.
Solución acuosa de ácido pícrico 1% caliente antes del enfriamiento se
agregan 10gr de CO3 Na2
Solución de Iodo yodurada
Solución de almidón al 1%
Solución de nitrato de plata al 10%
Solución de di cloruro de paladio al 10%
Solución de tártaro emético al 10%
Solución de acetato de plomo al 10%
Solución de hidróxido de sodio al 10%
Solución de sulfato ferroso al 10%
Solución de ácido clorhídrico concentrado
Materiales
Papel filtro
Frascos de vidrio.
Alambre de cobre.
Pipetas
Equipo
Baño María.
Estufa.
Parte experimental:
Frasco con ml de
muestra problema
preparación de las 8 tiras de
(agua de rio).
papel sensible.
Baño María
por 5 minutos.
Nombre de la reacción:
Papel yodo-almidonado. Tiene una sensibilidad de 1µg. Es un ensayo muy sensible
pero inespecífico.
2.1 Fundamento:
El ioduro de potasio forma el anión triyoduro (I3−) al combinarse con iodo elemental.
A diferencia del iodo, los triyoduros son altamente solubles en agua, por lo que el
ioduro de potasio aumenta considerablemente la solubilidad del iodo elemental en
agua.
El ión yodo (II) (I2+) puede reducirse a ión yoduro (I-) por la acción, de un agente
reductor que puede ser el ácido sulfhídrico o el ácido cianhídrico, y cuando todo el
yodo se consume, el color azul desaparece. Esto se llama una valoración
yodométrica.
2.2 Técnica operatoria:
En el momento de su uso, se embebe una franja de papel sensible con una gota de
solución de almidón dejando escurrir el exceso. Luego se embebe con una gota de
solución acuosa de yodo-yodurado.
HCN + I2 ICN + HI
Otra reacción:
2.5 Resultados:
En la parte experimental se observó que se formó una decoloración ligera.
Nombre de la reacción
Ensayo de Grignard, reacción poco sensible que tarda minutos para evidenciarla.
3.1 Fundamento:
El ensayo se fundamenta en que el ácido pícrico en presencia del HCN, liberado
de la muestra ácida, forma isopurpurato alcalino, de color rojo al rojo naranja en el
transcurso de cinco minutos.
3.4 Resultados:
En la parte experimental no se observó la formación de isopurpurina
por lo que se dio un resultado negativo de esta prueba.
Nombre de la reacción
Poco sensible debido a la poca cantidad de reactivo para reaccionar.
4.1 Fundamento:
Reacciona con la muestra problema formando ácido sulfhídrico (en forma de sulfuro
argéntico) además de arsina y fósforo blanco.
4.2 Técnica operatoria:
En el extremo de una tira de papel de filtro, agregar I o II gotas de solución de
nitrato de plata 10%. En el otro extremo colocar el número 4. Obtenida la tira reactiva
(papel sensible) colocarlo al borde de un frasco boca ancha, que contenga la
muestra problema, luego colocarlo en baño María por cinco minutos adicionando
100 mg de ácido tartárico.
d. Fósforo blanco:
H2O-
HCl
Nombre de la reacción:
Papel Sensible de Tártaro Emético (10%) o tartrato de antimonio y potasio.
6.1 Fundamento:
6.6 Resultados:
Se impregna una tira de papel con una solución al 10% de acetato de plomo y se
expone al interior del recipiente por unos minutos. Se formará unos puntos negros
evidenciando la presencia de sulfuro de plomo.
7.6 Resultados:
Luego:
Azul de prusia
DISCUSIONES
CONCLUSIONES
Dicromato de potasio
Procedimiento: agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra y calentar en baño
maría durante 3 minutos.
Resultado: un cambio en el color de naranja al verde indica la presencia de
sustancias volátiles reductoras. Si un resultado positivo se obtiene en esta
prueba se debe llevar a cabo un ensayo cuantitativo para etanol o metanol
en sangre.
Forrest
Muestras: orina o desproteinizado de sangre.
Procedimiento: a 0,5 ml de muestra agregar 1 ml del reactivo de Forrest y
mezclar durante 5 segundos.
Resultado: amarillo-verde- verde oscuro –azulado: indica la presencia de
imipramina o de los compuestos relacionados.
Ninhidrina
Procedimiento: colocar una pequeña cantidad de la muestra (1 a 2 mg de
polvo o una o dos gotas si se trata de un líquido) en un papel de filtro y
agregar una gota del reactivo. Calentar a110°C sobre una plancha
calefactora.
Resultado: la aparición de un color rosado-anaranjado indica la presencia
de anfetaminas. Noes un ensayo muy sensible.
Tricloruro férrico
Procedimiento: Agregar la solución de tricloruro férrico a la muestra o a una
soluciónetanólica de la muestra.
Resultado: colores rojos, naranjas, verdes azules, violetas o marrones
indican la presencia de compuestos fenólicos, ácidos grasos o fenilpirazolina.
Algunas fenotiazinas dan positivo este ensayo. Los salicilatos dan color
violeta. Algunos compuestos fenólicos no dan la reacción si están en solución
acuosa.
Trinder
Procedimiento para orina: a 2 ml de orina agregar 100 ul del reactivo de
Trinder y mezclar durante 5 segundos.
Procedimiento para otras muestras: hidrolizar el contenido estomacal o los
residuos de la escena por calentamiento con ácido clorhídrico 0,5 M en un
baño de agua hirviendo por 2minutos, neutralizar con hidróxido de sodio 0,5
M antes de realizar el ensayo.
Resultado: color violeta indica presencia de salicilato.
10. BPA. un químico que actúa como estrógeno e interrumpe la actividad hormonal
en el cuerpo. Se le vincula a enfermedad cardiaca, daño intestinal, infertilidad y otros
problemas del sistema reproductor. De acuerdo con los Centros de Control de
Enfermedades y Prevención (CDC), hay una exposición extendida de BPA en los
Estados Unidos. Los tomates enlatados son más peligrosos porque su alta acidez
causa que el BPA les penetre.
+ CN
CN- H
O 2N NO 2 NO 2
HO -O HO O- OH O-
+ + +
O 2N + N O 2N N O 2N N
O- O- O-
H
NC CN NC CN CN
CN-
NO 2 O 2N NO 2
OH O HO
+
O 2N N O 2N NH2
O- CN-
+ OCN- + HO-
Reducción
NC CN NC CN
NO 2 NO 2