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I. ALCANCE
La siguiente metodología establece la determinación del Ácido Domoico (Biotoxina ASP)
mediante la Cromatografía Liquida- HPLC en moluscos bivlavos.
II. PRINCIPIO
El principio del método corresponde a un proceso de extracción metanólica del ácido
Domoico contenido en la muestra homogenizada, la solución sobrenadante es analizada a
condiciones isocráticas a 242 nm.
IV. REACTIVOS
4.1 Agua grado cromatográfico o equivalente
4.2 Acetonitilo HPLC
4.3 Metanol HPLC
4.4 Ácido trifluoroacetico grado espectrofotométrico
4.5 Solución certificada de ácido Domoico
4.6 Material de referencia
V. SOLUCIONES
5.1 Metanol al 50 %
Medir 250 ml de agua grado cromatográfico o equivalente y se mezclan con 250 ml
de metanol HPLC.
DETERMINACIÓN DE ACIDO
7.1 DOMOICO (Biotoxina Amnésica ASP)
PE LO LAB 08-11 MSW ESP
(5.4) POR HPLC CON DETECTOR UV-VIS
ISP - 018
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VI. PROCEDIMIENTO
6.1 Generalidades
Se debe evitar el contacto de las muestras y los estándares con la piel, los ojos y
mucosas. Se recomienda utilizar mascarillas y guantes para manipular las muestras
6.4 Determinación
6.4.1 Las muestras se analizan tan pronto como sea posible. Los extractos y los
homogenizados pueden ser almacenados a temperaturas -10ºC.
6.4.2 Inyectar soluciones patrón de ácido domoico.
6.4.3 3 La identificación del ácido domoico se realiza por comparación con el tiempo
de retención del patrón y la confirmación se efectúa mediante la adición de
patrón a los extractos de las muestras analizadas que presenten
concentraciones de ácido domoico mayores a 10 ugAD/ g, el tiempo de
contacto mínimo debe ser de 4 horas a 4°C, observándose un aumento del
área del pico y la no aparición de desdoblamientos del mismo.
Donde :
DETERMINACIÓN DE ACIDO
7.1 DOMOICO (Biotoxina Amnésica ASP)
PE LO LAB 08-11 MSW ESP
(5.4) POR HPLC CON DETECTOR UV-VIS
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AE : Ácido epidomoico
M.A Quilliam “Chemical methods for domoic acid, the amnesia shellfish poisoning(ASP)
toxin” 2003.
Validación de la metodología para la determinación de ácido domoico (Biotoxina ASP en
moluscos bivalvos por cromatografía líquida de alto rendimiento – Revista Peruana de
Medicina Experimental y Salud Pública, 2002.
Manual de información general que acompaña a la solución certificada de ácido domoico
(DACS-1) y Material de Referencia MUS 1B, enviada por el National Research Council de
Canadá (NRC-CNRC, Canadá).
Quilliam, M.A. and Wright, J.L.C., “The amnesic shellfish poisoning mystery”, Analyt. Chem.
61: 1053A-60A (1989).
CENTRO RICERCHE MARINE Laboratorio Nazionale di Riferimento per le Biotossine
Marine “METODO PER L’IDETIFICAZIONE E LA DETERMINAZIONE DELL’ ACIDO
DOMOICO NEI MOLLUSCHI EDULLI LAMELLIBRANCHI”.