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MARCO TEORICO
El colesterol pertenece al grupo de las grasas o lípidos que es útil para las
fibras nerviosas, para las paredes celulares, para los ácidos tales como los ácidos biliares y
también para el equilibrio de ciertas hormonas. El colesterol HDL son las lipoproteínas de alta
densidad (colesterol bueno) que realizan la función vital de la eliminación del exceso de colesterol,
que es el colesterol malo (llamado LDL). Por lo tanto, evita los bloqueos en las arterias y transporta
el exceso de colesterol al hígado para que pueda ser excretado. Los niveles de colesterol deben
ser de esta manera: Alta HDL y LDL bajo. Pero, cuando es a la inversa, lo que significa, bajo
HDL y LDL alto, esto significa que la persona necesita una modificación seria de la dieta, así
como algunos cambios productivos en el estilo de vida. Es importante aumentar los niveles de
HDL La eliminación de colesterol malo, la prevención de enfermedades del corazón,
y la protección contra el ataque al corazón y accidente cerebrovascular son algunas de las
ventajas principales de las lipoproteínas de alta densidad, conocidas comúnmente como el
colesterol HDL. HDL se considera "colesterol bueno" lo que se necesita en general para la función
saludable del cuerpo, mientras que las lipoproteínas de baja densidad, o LDL, se reconoce como
un tipo dañino de colesterol. Los tipos de alimentos que se consumen, es decir los que no
tienen grasas saturadas peligrosas, contribuyen a la fuente de colesterol HDL en el
cuerpo y proporcionan una serie de beneficios.
BIOQUÍMICA
Los componentes típicos del sistema nervioso (cerebro) son los lípidos, que están contenidos
principalmente en los cilindroejes de los nervios. La sustancia blanca contiene proporcionalmente
más lípidos que la gris. El contenido total alcanza del 12 al 15% del peso fresco,
aproximadamente la mitad del peso seco. Para los distintos grupos de lípidos se han obtenido los
siguientes valores (tanto por ciento del peso en fresco):
Fosfátidos 6%
Cerebrósidos 2%
La vaina de mielina de los nervios es birrefringente. Se supone que está formada por capas
coaxiales de proteínas y lípidos, y de tal manera, que siempre entre dos capas de proteínas esta
intercalada una laminilla bimolecular de lípidos.
La neuroglia, o tejido de sostén del tejido nervioso, contiene una proteína esencial, la
neuroqueratina. Probablemente esta es también un componente de las propias células nerviosas
(dendritas y cilindroejes). Es igual a la queratina, si bien la proporción de aminoácidos básicos es
algo diferente. (El parentesco químico con la queratina es interesante porque las células de
neuroglia son también de origen ectodérmico).
El colesterol
Los fosfolípidos son los principales constituyentes lipídicos de la membranas. El ácido fosfatidico
es muy importante como intermedio en la síntesis de triacilgliceroles y fosfolípidos. Los lípidos
son transportados en el plasma como lipoproteínas y un grupo identificado como tal es el grupo
de los fosfolípidos. Tanto los fosfolípidos como la apolipoproteina C-III se requieren como
cofactores para la actividad de la lipoproteína lipasa. La apolipoproteina C-II .
Los Glucolípidos
son lípidos complejos, líquidos que contienen un ácido graso, esfingosina y carbohidratos. Los
glucolípidos están distribuidos ampliamente cada tejido del cuerpo, en particular en el tejido
nervioso (como el cerebro). En especial se encuentran en la capa externa de la membrana
plasmática donde forman parte de los carbohidratos de la superficie celular.
Los glucolípidos principales en tejidos animales son los glucoesfingolípidos; contienen ceramida
y uno o más azucares. Los dos más sencillos son la galactosilceramida y glucosilceramida. La
galactosilceramida es un glucoesfingolípido mayoritario del cerebro y otros tejidos nerviosos y
bajo en el resto del cuerpo; contiene cierto número de ácidos grasos C24 característicos.
OBJETIVOS
5 pipetas graduadas de 10 ml
3 pipetas Pasteur
2 tubos de centrifuga
1 varilla de vidrio
parrilla
centrifuga
3 frascos de 20 ml
Biológico
Reactivos
Acetona
Éter
Etanol 95%
METODOLOGÍA
Se pesan los frascos, etiquetándolos como fracción 1 a la 3. Solo pesaremos en papel aluminio
2.5 gramos de cerebro, este se picara y se colocara en un tubo de centrífuga, adicionándole
acetona, 1ml por cada 0.5 g. de cerebro, se homogeniza el tejido por 1 minuto y sé centrífuga a
3000 rpm. Se decanta el SN en el frasco fracción I, y al residuo se le añadirá 2 ml de acetona y
se homogeniza nuevamente, se centrífuga y se vuelve a colocar el SN con la fracción I, (fracción
I es colesterol).
Por 5 minutos se dejará el residuo a temperatura ambiente para evaporar la acetona. Se adicionan
3 ml de éter al residuo, esto sé centrífuga por 2 minutos a 3000 rpm; el SN se colecta en otro tubo
de centrífuga con la leyenda fracción A, esto contiene fosfolípidos, nuevamente se hará otra
extracción con éter y se junta el SN en la fracción A. Ahora quitaremos los residuos de éter
dejando que le dé un poco de aire, entonces se adicionaran 3 ml de etanol al 95% caliente (70°),
agitando y después centrifugando (2 min. a 3000 rpm), el SN se colecta en el frasco de
la Fracción III, la cual son glucolípidos, y se hará otra vez la extracción con 3 ml de etanol.
En cada frasco se colocarán dos perlas de ebullición y se evaporara a sequedad todos los frascos
sobre la parrilla, no deben quemarse los residuos. Por último, se pesarán los frascos nuevamente
y calcularemos la cantidad obtenida de cada fracción
RESULTADOS.
En este momento se calculará el porcentaje de cada una de las fracciones. Tomando los datos
que obtuvimos al pesar los frascos como lo indica la tabla:
Tabla 1.
Ahora para hacer la comparación del porcentaje teórico con los resultados obtenidos,
convertiremos los porcentajes teóricos a gramos. Utilizando la media del porcentaje teórico total
de lípidos en el cerebro (12 al 15%).
Tabla 2.
Como se puede observar en la tabla 2, el contenido de los diversos lípidos varia en un cierto
rango, es por eso que se necesita sacar el promedio del contenido y sumar lo que se localiza
también en la materia gris como en la blanca, dado que en la obtención se utilizaron ambas. Los
valores teóricos de la tabla 2 son solo promedios de la variación en el contenido de los mismos,
por lo que el resultado del colesterol se encuentra dentro del rango, aunque el porcentaje parece
que excede el contenido propio.
DISCUSIÓN.
IMPORTENTE: Se tiene que tomar en cuenta que el valor teórico es un promedio de entre
12% a 15% del peso fresco del cerebro.
La propiedad de solubilidad de los lípidos en compuestos orgánicos puede ser aprovechado como
un método de extracción de estos a partir de tejidos de origen animal.
CONCLUSIÓN.
De acuerdo con los resultados de este experimento y el parámetro dado en la bibliografía, puede
decirse que la obtención de nuestro producto es aceptable ya que presenta un poco de dificultad
al extraer lípidos de dicho cerebro de pollo ya que existe una interacción con proteínas también
contenidas la cual imposibilita el 100% de extracción y también del experimento ( podemos
agregar que no se verifico la pureza de los solventes) ya que se utilizó el solvente correcto para
cada sustancia como lo es el etanol para la extracción de glucolípidos, la acetona para el
colesterol y el éter comenzando la extracción y la acetona para los fosfolípidos. Se agrega un
comentario para mejorar la manera de analizar las mezclas de ácidos grasos es por medio de la
técnica de cromatografía liquido - gaseosa en columna. El primer paso es convertirlos a ésteres
en una columna caliente formada por un tubo en espiral. Este tubo se empaca con un material
cubierto por una sustancia liquida. Al inyectar, esta se vaporiza y se mezcla con un gas inerte.
Luego, al aplicar la mezcla de gases pasa a través de la columna y las sustancias se separan
debido a sus diferentes solubilidades en la fase líquida estacionaria.
Como la fase líquida está caliente, las sustancias se re evaporan continuamente para volver a
mezclarse con la fase gaseosa en movimiento. El gas que sale de la columna ingresa a un aparato
que detecta y registra la presencia y cantidad de sustancias en cada zona. Único requisito para
poder utilizar la cromatografía para el análisis de cualquier tipo de material no polimérico es la
volatilidad.
CUESTIONARIO
1.Durante la extracción de los lípidos, ¿Qué ocurrió con las proteínas del
tejido? Explique.
2. Haga una lista de disolventes orgánicos en orden decreciente de
polaridad.
Mielin indicios
a
Sustan
cia sujeto: 9
gris años
28.4 25.1 7.9 34.7 32.5
Sustan 7.9
23.7 12.5 42.8 85.1 85.6
cia
blanca 4.3
17.4 9.0 46.0 87.1 89.4
Mielin 3.7
a
Sustan
cia sujeto: 55
gris años
41.0 48.5 25.5 90.2 90.0
Sustan 7.6
15.5 14.9 63.2 86.4 82.1
cia
blanca 2.1
4.1 4.4 59.8 87.5 86.0
Mielin 0.4
a