FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

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PRÁCTICA N° _2_

Título de la Práctica: Determinación de minerales (P, K, Mg, Ca, Zn, Al) en muestras vegetales
DETERMINACION DE MINERALES EN MUESTRAS VEGETALES
Asignatura: Bioquímica Semestre: IV

1. OBJETIVOS.

General:
1.1. Determinar contenido de minerales en muestra de tejido vegetales

Específicos
1.2.1: Determinación del contenido de Humedad
1.2.2: Digestión de muestra vegetales para la determinación de minerales
1.2.3: Análisis del contenido de minerales en muestras vegetales

2. INFORMACIÓN BÁSICA PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO

En todos los laboratorios de química se requiere por necesidad el establecimiento de ciertas reglas de
conducta y normas de seguridad, de cuyo cumplimiento dependen el orden en el trabajo, la comodidad y la
seguridad de todos los estudiantes y docentes dentro del laboratorio. La mesa, materiales y equipos
utilizados deben quedar limpios y en su lugar correspondiente antes de salir del laboratorio. Las llaves del
gas y del agua deben quedar debidamente cerradas.
A continuación se enuncian algunas reglas generales que se deben leer cuidadosamente:
 Previamente para cualquier práctica de leer las instrucciones dentro de esta guía de laboratorio y
experimento antes de ir al laboratorio.
 Utilizar los implementos para su seguridad definidos en esta práctica de laboratorio.
 No toque nunca los compuestos químicos con las manos a menos que se le autorice.
 Para la manipulación de compuestos químicos, utilizar espátulas, pinzas, etc.
 Lavarse las manos antes de salir del laboratorio.
 Deje pasar suficiente tiempo para que se enfríen el vidrio y los objetos calientes antes de manipularlos.
 Todos los sólidos y papeles que sean desechados se deben arrojar a un recipiente adecuado para
desechos contenedores y caneca de color rojo.
 No arroje al sifón cerillas, papel de filtro o sólidos poco solubles.
 Compruebe cuidadosamente los rótulos de los frascos de reactivos antes de usarlos.
 No devuelva nunca a los frascos de origen los sobrantes de compuestos utilizados, a menos que se le
indique.

3. FUNDAMENTO TEÓRICO

El análisis de tejido vegetal se refiere al análisis químico cuantitativo de los nutrientes esenciales en los
tejidos de las plantas. Por varios años, este tipo de análisis se realizó para determinar el estado nutricional
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de los cultivos arbustivos debido a su naturaleza y al extenso sistema radicular que poseen; sin embargo,
el análisis de tejido vegetal ha adquirido mayor importancia a medida que se desarrolla el conocimiento
acerca de la nutrición de las plantas, de los requerimientos de nutrientes durante todo el ciclo del cultivo, y
la posibilidad de aplicarlos mediante modernos sistemas de riego.

La parte foliar de las plantas es la más utilizada para realizar el análisis de tejido vegetal ya que es el
órgano principal donde se elaboran las sustancias nutritivas y refleja el estado nutricional (ICA, 2012).
Varias investigaciones han documentado una alta correlación entre el contenido de nutrientes a nivel foliar
y el desarrollo y producción del cultivo (Ulrich, 1972). Desde hace décadas se ha utilizado la técnica de
absorción atómica de llama para la determinación de elementos en muestras foliares. Afectan a la técnica,
en distintos grados, el tipo de matriz, el rango de concentración de los elementos a analizar, además, los
digestados de las muestras requieren usualmente un tratamiento adecuado para llevar la concentración de
los analítos al rango analítico adecuado para el análisis; por estas razones, la técnica se vuelve lenta y
problemática, comparada con técnicas instrumentales multielementales como la espectroscopia de emisión
acoplada inductivamente a plasma (Briceño & Pacheco, 1984).

Existen 16 elementos que son esenciales para el crecimiento de la planta. Los elementos que se requieren
en cantidades mayores son calcio. Magnesio. Nitrógeno. Fósforo. Potasio y azufre. Los elementos
menores son boro. Cloruro. Hierro. Manganeso. Molibdeno y zinc. Hay otros que pueden ser necesarios
como silicio y níquel y otros que afectan el crecimiento pero que no son esenciales como sodio. Cobalto.
Selenio. Aluminio y vanadio. Igual que el análisis de suelo.

La espectroscopia de emisión por acoplamiento de plasma se ha vuelto una técnica ampliamente

empleada para el análisis de soluciones, con inclusión de los digestados de tejidos vegetales, está
relativamente libre de los efectos de matriz y tiene una excelente sensibilidad en concentraciones muy
bajas (partes por billón) con un rango de concentración utilizable de cuatro a cinco cifras (Alvarado,
Iglesias, & Güel, 2005).

EL MUESTREO
El muestreo es una parte muy importante del análisis. Se debe tener en cuenta la especie de la planta. su
edad. la parte de la planta muestreada y el tiempo de muestreo porque • todos pueden afectar la
Interpretación de los resultados. Normalmente no se muestrea toda la planta sino una parte. Diferentes
partes de la planta contienen diferentes concentraciones de algunos elementos. La hoja es el sitio de las
transformaciones bioquímicas las cuales son esenciales para la vida de la planta. Cuando no hayan
Instrucciones específicas para el muestreo, se muestrea las hojas maduras evitando las; hojas que estén
infectadas. Muertas etc. El análisis de la hoja generalmente Incluye el peciolo. Para Indentlcar un síntoma
de deficiencia o toxicidad. Normalmente se muestrean unas hojas enfermas y unas sanas.
La precisión que se necesita determina el número de hojas y el número de plantas para seleccionar. Como
en el muestreo de suelo. Se toma una muestra compuesta para reflejar mejor la variabilidad entre plantas.
Cuando las plantas estén bajo estrés hay más variabilidad. Cuando las plantas estén viejas la
concentración de algunos elementos en las hojas cambia.

Antes del análisis químico, las muestras del tejido vegetal generalmente se someten a cuatro fases de
preparación (Jones y Steyn, 1973).
1. Limpieza del material vegetal para remover la contaminación superficial
2. Secado del material, para detener las reacciones enzimáticas que puedan ocurrir en la muestra y
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prepararlo para la molienda

3. Molienda mecánica, para dar al materia una finura apropiada para el análisis químico
4. Secado final a peso constante, para obtener un valor uniforme que sirva de base para referir los
resultados analíticos.

CALCIO, SODIO, MAGNESIO Y POTASIO

El contenido total de Ca, Mg, K Y Na se determina después de la destrucción de la materia orgánica en el
tejido por medio de una digestión ácida (Método 1M) o una calcinación (Método 136). Para medir los
niveles de los elementos, se usa el procedimiento de absorción atómica.

El calcio es importante en la nutrición de la planta para combatir toxicidades de metales pesados. También
mantiene la permeabilidad de las membranas de las células y tiene un papel en la activación de unas
enzimas. El contenido de calcio en tejido puede variar de 0.20 a 3.00 % del peso seco. En el caso de una
deficiencia de calcio los puntos de crecimiento de las hojas y las ralees mueren. Un exceso de calcio
produce una deficiencia de magnesio o potasio.

El magnesio es un componente de la clorofila y un cofactor de unas enzimas. Su contenido en la planta

varia de 0.15 a 1.00 %. Un síntoma de la deficiencia de magnesio es el amarillentamente de las hojas más
viejas y una clorosis intervenal.. Un exceso del elemento no Induce síntomas pero el desequilibrio de
nutrientes puede causar un crecimiento reducido.

El potasio es uno de los elementos mayores en la nutrición de la planta. Tiene un papel muy importante
muy importante en el uso eficiente del agua en la planta y en la síntesis de algunas proteínas, El contenido
de potasio en la planta puede estar entre 1 y 5 % del peso seco. Un síntoma de la deficiencia de potasio es
la deshidratación de la planta y baja resistencia a la sequía. También las hojas viejas parecen quemadas y
la planta puede ser más sensible a las enfermedades. El exceso del elemento puede causar una
deficiencia del magnesio o posiblemente del calcio."

El sodio no llene un papel esencial en la planta. Pero en algunas circunstancias de deficiencia de potasio,
el sodio puede reemplazarlo. En los suelos alcalinos. El contenido de sodio en la planta puede llegar a ser
alto y esto resulta en enfermedades fisiológicas.

4. TRABAJO PREVIO

4.1: En que se basa la digestión acida de una muestra vegetal?

4.2: Que problemas fisiológicos puede presentar la deficiencia de Mg en las plantas?
4.3: Cual es la importancia de contenido de P en las plantas?
4.4: Cual es el problema en los contenidos elevados de Al en suelo para los procesos productivos?.

5. ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA

5.1 Materiales y Equipos

Vasos de precipitado x 250 mls (1)
Vaso de precipitado x 50 mls (1)
Probeta graduada x 100 mls (1)
Pipeta graduada por 5 mls (1)
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Micro espátula (1)

Balanza analítica
Crisol de porcelana (1)
Espátula (1)
Balón aforado de 50ml con tapa (1)

5.2 Reactivos
Ácido nítrico 65%
Acido perclórico 70%
Ácido Clorhídrico 6M
Oxido de lantano (II)

5.3 Elementos de Protección Personal

Bata, guantes y tapabocas.

6. DESARROLLO EXPERIMENTAL

6. 1 Preparación extracto:

Pesar 0,25g de tejido vegetal molido y seco en estufa a 65°C/24h y poner en un vaso de precipitado.
Agregar 3ml de ácido nítrico y calentar a baja temperatura (150°C) en una plancha durante 30min. Dejar
enfriar durante 15min. Agregar 2ml de ácido perclórico y continuar el calentamiento a alta temperatura
(220°C) en una plancha durante 60min o más; hasta que parezca humus blanco y se obtenga un líquido
blanco. Dejar enfriar y agregar 3ml de HCl 6M, completar el volumen a 50ml en balón aforado con agua
doblemente de ionizada o destilada y agitar completamente, antes de finalizar el aforo adicionar 3gotas de
óxido de lantano para evitar problemas en la lectura de las muestras.
La solución obtenida constituye el extracto del tejido vegetal en el cual se determinan los elementos: P, K,
Mg, Ca, S y Al. (CIAT, 1985)

6.2 Toma de datos

Los extractos obtenidos se leerán en un espectrofotómetro de Absorción Atómica.

7. RESULTADOS

Tabla 1. Contenido de minerales en muestras vegetales.

Muestra problema
mg/L Media DVS %CV
G1 G2 G3 G4 G5 G6
Peso muestra (g)
Dilución
Mg
Na
Ca
K
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6.1 Determinar del contenido de minerales en disoluciones

Mg/100gMS= =((Pf*10*0,05*100)/(Q30*1000))

Debe verificar que el contenido de minerales en las muestras caigan dentro de la cura de titulación delo
contrario debe diluir las muestras y de ella dependerá cambios en la fórmula para determinación de
concentración de minerales en muestra vegetales

7.2. Cuestionario
Que sustancias usaron como muestra patrón.
En que se basa la ley de beer?
Cuál es la concentración teórica reportada para minerales en muestras vegetales como las estudiadas en
este trabajo?
Indique que otras técnicas analíticas pueden usarse para realizar análisis de minerales.

8. BIBLIOGRAFÍA

DANIEL C. HARRIS. 2006. “Análisis químico cuantitativo”. Ed. Reverte. 3ra edición.
DAVID HERVEY. 2008. “Química Analítica Moderna”. Ed. Mc Graw Hall Hispanoamericana, 9ra ed. México.
DIAZ de SANTOS. “Métodos Normalizados para Análisis de Aguas APHA-AWWA-WPCF” .Ed. Díaz de
Santos ed. 3ª 2008
DOUGLAS A. SKOOG 2008. “Fundamentos de Química Analítica. Ed. Mc Graw Hill Interamericana S.A.,
7ta ed. México
RODRÍGUEZ ALONSO, JUAN JOSÉ. “Química y análisis químico”. Barcelona, ES: Cano Pina, 2014.
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