CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA

Guía de Ejercicios Prácticos

INDUSTRIAL Competencia asociada
TECNOLÓGO EN PROCESOS
BIOTECNOLÓGICOS APLICADOS A LA
INDUSTRIA

Línea tecnológica: MATERIALES Y HERRAMIENTAS

Red Tecnológica: BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL
Centro de CENTRO DE BIOTECNOLOGÍA Regional: Valle
Formación: INDUSTRIAL
Nombre del Selección de la cepa- escalado invitro- escalado en planta - proyectos hijos
Ejercicio Práctico
Contexto: Un microorganismo de uso industrial debe producir la sustancia de interés;
debe estar disponible en cultivo puro; debe ser genéticamente estable y debe
crecer en cultivos a gran escala. Otra característica importante es que el
microorganismo industrial crezca rápidamente y produzca el producto
deseado en un corto período de tiempo. El microorganismo debe también
crecer en un relativamente barato medio de cultivo disponible en grandes
cantidades. Además, un microorganismo industrial no debe ser patógeno para
el hombre o para los animales o plantas.
Nombre de la PAUTAS PARA EL DESARROLLO DE LOS PROYECTOS HIJOS
Actividad: TECNOLOGO EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A
LA INDUSTRIA.

MARCO CONCEPTUAL

MICROORGANISMOS EN LA INDUSTRIA

La microbiología industrial es la microbiología que estudia la aplicación de la biotecnología de los

microorganismos en la industria. Esto implica la utilización de sistemas biológicos en diferentes
procesos industriales. En general puede abarcar diferentes ámbitos:
 Fabricación de diferentes compuestos orgánicos.
 Transformación de productos, hecho que cada día tiene más importancia, puesto que las
reacciones mediadas por los seres vivos ocurren en condiciones de presión, temperatura,
normales. Por lo tanto puede ser más barato el uso de seres vivos, ya que no se requieren
condiciones especiales.
 Reacciones con compuestos inorgánicos, como puede ser el caso de la lixiviación de metales.
 Producción de biomasa, con diferentes finalidades. A menudo el producto final de las
reacciones son los propios microorganismos, por su valor en alimentación humana, como
Saccharomyces o animal, como las SCP.
 Degradación de sustancias, como puede ser la depuración de aguas, el tratamiento de
Residuos.
 Biosensores, determinación de la presencia de sustancias, mediante sistemas biológicos.
 También puede servir en los controles de calidad. Está adquiriendo una gran importancia en
los últimos años, ya que es una muy importante herramienta de análisis.

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Ing. Yuria Martinez

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MEDIOS DE CULTIVO

Los medios de cultivo usados para hacer crecer los microorganismos han de tener todos los elementos
necesarios en la forma y las proporciones adecuadas para la síntesis de material celular y la
producción de metabolitos. En un laboratorio se pueden usar productos químicos, de composición
conocida, para la obtención de medios de cultivo, que son medios sintéticos, pero en las
fermentaciones industriales los medios han de ser lo más baratos posibles. En microbiología industrial
raramente se usan medios óptimos, equilibrados o definidos, sino que en muchos casos los medios
usados están formados a partir de subproductos de otras industrias. Serán medios muy variados en su
composición, nunca óptimos ni equilibrados, ni mucho menos definidos. Esto presenta una serie de
consecuencias sobre el desarrollo de los organismos y sobre el control de la fermentación.

SUSTRATOS USADOS COMO FUENTE DE CARBONO Y DE NITRÓGENO

Los carbohidratos son las fuentes de energía por excelencia en la industria de la fermentación. Por
Razones económicas, la glucosa o la sacarosa son usadas muy raramente como única fuente de C,
excepto en procesos que requieran un control muy preciso de la fermentación. Los sustratos usados
más abundantemente en las fermentaciones son:

Melazas. Subproducto de la industria azucarera, son los restos del refinado del azúcar. Son una de
las fuentes más baratas de carbohidratos. Además de una elevada cantidad de azúcares contienen
sustancias nitrogenadas, vitaminas y elementos traza. En cualquier caso, su composición varía en
función de la materia prima usada para la obtención del azúcar, las condiciones climáticas, la
localidad y el proceso usado en la industria azucarera.

Extracto de malta. Es el extracto acuoso de la cebada malteada. Se trata de un sustrato excelente

para muchos hongos, levaduras y actinomicetos. El extracto seco de malta contienen entre un 90 y
un 92 % de carbohidratos, concretamente hexosas, que son glucosa y fructosa, disacáridos como la
maltosa y la sacarosa, e incluso trisacáridos como la maltotriosa. Las sustancias nitrogenadas en el
extracto de malta incluyen péptidos, proteínas, aminoácidos, purinas, pirimidinas y vitaminas. La
composición de aminoácidos varía en función del grano usado, pero la prolina siempre constituye
más de un 50%.

Uno de los problemas que presentan los sustratos ricos en azúcares es lo que se conoce como reacción
de Maillard, que se da a bajo pH y elevadas concentraciones de azúcares reductores. Los grupos NH2
de las aminas, aminoácidos y proteínas reaccionan con los grupos CHO de los azúcares reductores,
lo que resulta en la formación de productos de condensación de color tostado, empeorando el aspecto
del producto y que no pueden ser usados por los microorganismos, restando así nutrientes.

Almidón y dextrinas. Pueden ser metabolizados directamente por los organismos productores de
amilasas. El almidón ha adquirido importancia en la producción de etanol.

Líquidos sulfíticos de las papeleras. Se trata de productos residuales que contienen azúcar de la
industria del papel. Los líquidos sulfíticos de coníferas contiene entre el 2 y 3 % de azúcares, de los
cuales el 80 % son hexosas y el resto pentosas. En el caso de los árboles de hoja caduca, el contenido
es principalmente de pentosas.

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Celulosa. Debido a su gran disponibilidad y bajo coste, la celulosa está siendo utilizada como
sustrato de fermentación. Proviene de la paja, restos de mazorcas, turba, papel, a menudo no puede
ser utilizada directamente como fuente de carbono, por lo que se deberá hidrolizar en primer lugar,
ya sea química o enzimáticamente, dando el jarabe de glucosa, que se usa en la producción de etanol,
butanol, acetona e isopropanol.

FUENTES DE CARBONO Y ENERGÍA DIFERENTES DE LOS CARBOHIDRATOS

Aceites vegetales, como aceite de soja, de algodón o de palmera. Son usados como ingredientes
secundarios, cuando se usa ya una fuente de carbohidratos como principal aporte de energía.

Etanol. Es el producto de la fermentación del almidón sacarificado o de la celulosa y puede ser usado
como única fuente de carbono o como fuente complementaria para muchos organismos.

Alcanos. Alcanos de 12 a 18 C son rápidamente metabolizados por muchos microorganismos. Estos

alcanos son residuos del refinado del petróleo y su uso como alternativa a los carbohidratos depende
de su precio.

SUSTRATOS USADOS COMO FUENTES DE NITRÓGENO

En lo que respecta a los sustratos usados como fuentes de nitrógeno, en muchos procesos industriales
se usan los siguientes.
 NH4+, sales, urea o NH4+ gaseoso.
 Líquido de maceración del maíz. Se trata de un subproducto de la producción de almidón a
partir del maíz. El extracto concentrado tiene un 4% de N y numerosos aminoácidos, como
son: Ala, Arg, Glu, Ile, Tre, Val, Fenil Alanina, Met y Cis.
 Extracto de levaduras. Es un sustrato excelente para muchos microorganismos. Se produce a
partir de levaduras de panificación, induciendo su autólisis a 50 – 55º C o por plasmólisis en
alta concentración de NaCl. Contiene aminoácidos, péptidos, vitaminas solubles en agua y
carbohidratos. El glucógeno y la triohalosa se hidrolizan a glucosa durante la producción del
extracto.
 Peptonas. Se trata de hidrolizados de proteínas, de manera que contendrá aminoácidos y
péptidos. Pueden ser usadas por muchos microorganismos, pero son bastante caras para la
producción industrial, aunque pese a este su uso está muy extendido. Las peptonas pueden
tener dos orígenes. Proteínas animales. Caseína, gelatina, queratina. Proteínas vegetales.
Semillas de cacahuete, harina de soja, semillas de algodón y girasol. Todo esto aún retiene
mucho nitrógeno, aun siendo subproductos de otras industrias.
La composición de aminoácidos y de péptidos variará según el origen. Por ejemplo, la gelatina es rica
en prolina e hidroxiprolina, pero casi no contiene aminoácidos con azufre. En cambio los péptidos
de la queratina tienen una elevada concentración en prolina y cisteína, pero carecen de lisina. La
composición del producto final está determinado también por el tipo de hidrólisis a que se someta,
que puede ser ácida o enzimática. Especialmente afectado se ve el contenido en triptófano, ya que la
hidrólisis ácida reduce su nivel mucho.

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METODOLOGIA PRODUCCIÓN DE ETANOL

PROCEDIMIENTO PRÁCTICO

A. Utilice el uniforme de Laboratorio

1. Gorro
2. Tapabocas
3. Bata
4. Uniforme de seguridad, botas

CONSIDERACIONES DE SEGURIDAD

 Usar uniforme adecuado para el muestreo

 Los materiales como reactivos y vidrio se transportan en cavas de icopor
 No comer ni ingerir bebidas durante la manipulación de reactivos para el monitoreo
 Adecuar el sitio de trabajo evitando los menores Factores de riesgo
 Distribuirse según los grupos asignados por el Instructor.

PRUEBAS DE CALIDAD MANIPULADORES Y OPERARIOS

DEFINICIONES
1. Contaminación Manipulador / proceso
2. Contaminación Ambiente / proceso
3. Contaminación Equipos-Instrumental/

MATERIAL DE LABORATORIO Y EQUIPOS

 Hisopos de algodón estériles
 Tubos con caldo peptona
 Medios de cultivo PDA, Chromocult, EMB, Nutritivo

1. Contaminación Manipulador / proceso

PROCEDIMIENTO
1. Utilizando isópos con algodón estéril impregnarlos con Caldo, realizar el frotis antes de
usar el jabón, área de muestreo de 2cm (izquierda – derecha luego arriba – abajo)
2. Sembrar en la mitad de la caja rotulada con el nombre del operario en cada medio.
3. Solicitar al operario que lave sus manos con el jabón a evaluar. Realizar el frotis después de
usar el jabón
4. Incubar por 24 horas a 37ºC. El medio de PDA se deja por 5 días a 30°C.

Nota: Este procedimiento se realiza antes de iniciar la práctica de Invitro y antes de iniciar la
práctica de montaje en planta.

2. Contaminación Ambiente / proceso: El proceso se realiza de la misma manera que en el operario.

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3. Contaminación Equipos-Instrumental: El proceso se realiza de la misma manera que en el

operario.

PREPARACIÓN DE INOCULOS MICROBIANOS

PROCEDIMIENTO:
1. Calidad del operario
2. Identificación del microorganismo a trabajar
3. Caracterización microscópica y macroscópica
4. Siembra de microorganismos en el medio seleccionado (Tener en cuenta las técnicas de
siembra)
5. Purificación de la cepa
6. Conservación

ESCALADO IN VITRO

Caracterización de la materia prima (Ver procedimientos POE)

1. Escoger el medio de cultivo alternativo rico en carbohidratos

2. Realizar los diferentes análisis fisicoquímicos a la materia prima
3. Determinación de Nitrógeno (método Kejldal)
4. Amino nitrógenos
5. Acidez Volátil
6. Azucares reductores totales (ATR)
7. Grados Brix
8. Densidad
9. pH
10. Temperatura
11. Peso seco
12. Peso Húmedo
13. Sólidos
14. Cenizas

Nota: Según indicaciones del instructor se realizarán algunas técnicas durante el tiempo que dure
el ensayo.

Esterilización del Medio de Cultivo

Pasteurizar o esterilizar el medio dependiendo de las características del mismo

Procedimiento escala banco escalado In-Vitro

1. Preparar el material de vidrio previamente esterilizado antes de iniciar el proceso de escalado

2. Identifique el tipo de levadura a trabajar
3. Tener la levadura previamente purificada en caja de Petri o tubo en slant.

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4. Preparar el pre-inoculo, utilizando caldo glucosado de 150 mL (glucosa anhidra) al 2% y 1% de

extracto de levadura - autoclavar a 121C° * 15min
5. Dejar enfriar el sustrato
6. Antes de inocular la levadura al caldo de 150ml, Tomar de la caja de Petri las colonias de
levadura con una asa previamente estéril e introdúzcalo a un caldo de 10ml, homogenizar y
realizar conteo por cámara de Neubauer.
7. Una vez realizado el conteo reportando 107 ufc/ml. Pasar al pre-inoculo de 150ml previamente
estéril.
8. Dejar el pre-inoculo en la zaranda por 24 horas a una temperatura de 30°C
9. Pasado las 24hr realizar conteo por cámara de Neubauer reportando 108 ufc/ml

Inoculación de mieles

10. Realizar el escalado a 1,5L partiendo de 500ml con los siguiente sustratos: (urea=0,408gr/l +
Melaza 474.1gr/1000ml) autoclavar a 121°C * 20min, teniendo en cuenta los ATR
Nota: el cálculo de la miel se obtiene a partir de la concentración conocida de azucares
fermentables en la industria (52,5 g)
11. Dejar enfriar
12. Agregar ácido fosfórico al 0,825ml/l al 80% el cual permite adecuar el pH
13. Agitar muy bien el caldo glucosa con crecimiento y proceder a inocular al sustrato de miel
previamente estéril
14. Incubar los Erlenmeyer ya inoculados con agitación durante 24hr a 28-30°C
15. Realizar los análisis de calidad microbiológicos y fisicoquímicos solicitados por el instructor

Nota:
- Los ensayos se debe realizar por duplicado
- Realizar pruebas de calidad evitando contaminación en la levadura
- La levadura que mejor se comporte se escala a la planta piloto de 100L
- Realizar análisis microbiológicos durante el proceso del escalado, al sanitizar la planta y
al final del proceso de fermentación, observando la calidad del proceso y la manipulación
en asepsia. Medios como chromocult, EMB, Plate Count, PDA.

Grupo de trabajo

Los equipos de trabajo, realizara ensayos por duplicado hasta un volumen de 1.5 L, utilizando dos
materias primas (melaza-miel B- Vinaza) de acuerdo a las indicaciones dadas por el instructor, de
acuerdo a los análisis realizados se escogerá el mejor sustrato con su respectivo inóculo, y se
iniciará de nuevo el montaje hasta 3 Litros por duplicado, finalmente se lleva a 6 litros, en un
montaje fed batch, partiendo de un inoculo de 8 grados brix 108 células, se dosifica con un medio a
8 grados brix y el medio de espera en el reactor será de 3 grados brix.

1. Levadura 1= 70/30
2. Levadura 2= 60/40
3. Levadura 3= 50/50
4. Levadura 4= 80/20

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ESCALADO EN PLANTA

Propagación

1. Identificar las variables de la Planta de Fermentación de 100L

2. Realizar por listas de chequeo procesos de Asepsia, Desinfección, Esterilización, Hold up
Gaseoso y Sanitización del Fermentador.
3. Tarar el tanque
4. Pasteurizar o Esterilizar el medio de Interés (80% del volumen del tanque)
5. Incubar el inóculo del microorganismo (3000ml)
6. Monitorear el proceso de propagación cada 2 horas y realizar los respectivos análisis (ATR,
AR, Acidez volátil, Amino nitrógenos, pH, Brix y peso húmedo)
7. Evaluar la cinética del microorganismo(Aumento de Biomasa, estabilización de azucares
Reductores, Brix)

Fermentación

1. Después de evaluar la cinética microbiana y el consumo de sustrato se toma la decisión de

detener aireación y dar inicio al proceso fermentativo.
2. Monitorear el proceso
3. Determinar grados alcohólicos, Medir con Densímetro ° Gay Lussac para Alcohol.
4. Destilar el producto
5. Verificar los productos obtenidos
6. Separar (Método de destilación simple, método de destilación fraccionada, determinación del
punto de ebullición de los compuestos, decantación, centrifugación y filtración)

PROYECTOS HIJOS

NOTA: Cada proyecto HIJO tiene su propia metodología de trabajo, esta guía sirve de instrumento
modelo.

TECNICAS DE RECUENTO CELULAR

A. Método por Peso Seco (Método Tubo de centrífuga)

1. Tomar un volumen de muestra del Biorreactor.
2. Secar los tubos previamente lavados en el horno de secado a 105 °C/6 horas.
3. Disponer en el desecador por 20 minutos.
4. Llevar a la balanza analítica de precisión en el desecador.
5. Pesar los tubos de centrífuga.
6. Reportar W1
7. Tomar 10 o 15 ml con pipeta de acuerdo al volumen o capacidad del tubo centrifuga.
8. Llevar la muestra a la centrifuga.
9. Encender la centrífuga.
10. Ejecutar la instrucción de las condiciones de operación 6000 rpm/5 min.

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11. Insertar el tubo de muestra en el sitio dispuesto en la Centrifuga.

12. Cerrar la cubierta de seguridad
13. Ejecutar la instrucción de las condiciones de operación 6000 rpm/5 min.
14. Al detenerse la centrífuga, sacar el tubo de muestra.
15. Eliminar el sobrenadante sin desperdiciar el pellet o centrifugado
16. Lavar con solución salina isotónica y llevar a volumen nuevamente del tubo centrifuga
más el pellet.
17. Agitar en Vortex
18. Realizar repetición de los pasos 10 al 16 dos veces más
19. El pellet definitivo y lavado, dentro del tubo, introducirlo en el Horno de secado a 105°C/
6- 8 horas.
20. Retirarlo del Horno de secado, dejar enfriar en el desecador, para eliminar humedad por
30 minutos.
21. Pesar el tubo nuevamente, lo más rápido posible, determinar el valor de M2
22. Valorar por la siguiente fórmula:

Peso Seco (g/L): Masa final – Masa inicial/ Volumen de muestra (Tubo centrifuga)

23. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de fermentaciones

(horas o días) propuesto en la práctica.
24. Informar resultados, conclusiones y gráfica.

B. Método por Peso Seco (Equipo de Filtración al vacío)

1. Tomar un volumen en condiciones asépticas de la muestra del Biorreactor.

2. Secar el(los) filtros de celulosa 47 mm 0.22 – 0.45 micras en el horno de secado a
105 °C/1 horas.
3. Disponer en el desecador por 20 minutos.
4. Llevar a la balanza analítica de precisión en el desecador.
5. Prepesar los filtros utilizando una pinza.
6. Reportar W1.
7. Envolver en papel Krafft y esterilizar las campanas, los portafiltros y las tapas del
equipo de filtración en el horno de esterilización a 121 ° C/ 2 horas.
8. Sacar del horno y atemperar.
9. Realizar el procedimiento de dilución Factor de dilución 1/1000
10. Tomar 1 ml con pipeta y aforar en balón de fondo plano de 1000 mL
11. Llevar la muestra a un balón aforado de fondo plano de 100 mL.
12. Disponer del montaje del equipo de filtración al vacío, solicitar apoyo del Instructor
para el montaje.
13. Encender la bomba de vacío manteniendo las llaves de las campanas cerradas.
14. Instalar el filtro con una pinza, en condiciones asépticas sobre el portafiltros estéril.
15. Agregar los 100 mL de la dilución con un beaker, previamente trasferir del balón
aforado.
16. Abrir la válvula de la campana
17. Filtrar en vacío y dejar

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18. Cerrar la llave

19. Enjuagar con 100 mL de agua destilada estéril.
20. Abrir la válvula de la campana
21. Filtrar en vacío y dejar
22. Cerrar la llave
23. Levantar la campana
24. Con las pinzas, tomar el filtro y llevarlo al horno
25. Introducirlo en el Horno de secado a 105°C/ 1 hora.
26. Retirarlo del Horno de secado, dejar enfriar en el desecador, para eliminar humedad
por 30 minutos.
27. Pesar en la balanza analítica de precisión, lo más rápido posible, determinar el valor
de M2
28. Valorar por la siguiente fórmula:

Peso Seco (g/mL): Masa final – Masa inicial/ Volumen de muestra

29. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de

fermentaciones (horas o días) propuesto en la práctica.
30. Informar resultados, conclusiones y gráfica.

C. Método por Peso Húmedo

1. Tomar un volumen de muestra, en condiciones asépticas del puerto dispuesto para

tal fin en el Biorreactor.
2. Pesar el tubo centrifuga previamente lavado y completamente seco, escribiendo su
valor como Masa inicial del tubo vacío.
3. Tomar 10 o 15 ml con pipeta estéril de acuerdo al volumen o capacidad del tubo
centrifuga.
4. Llevar la muestra a la centrifuga.
5. Agitar en Vortex
6. Encender la centrífuga.
7. Insertar el tubo de muestra en el sitio dispuesto en la Centrifuga.
8. Cerrar la cubierta de seguridad
9. Ejecutar la instrucción de las condiciones de operación 4500 rpm/5 min.
10. Al detenerse la centrífuga, sacar el tubo de muestra.
11. Eliminar el sobrenadante sin desperdiciar el pellet o centrifugado
12. El pellet definitivo, dentro del tubo, pesarlo en la balanza para hallar la masa final.
13. Regirse por la siguiente fórmula:

Peso Húmedo (g/L): Masa final – Masa inicial/ Volumen de muestra (Tubo centrifuga)

14. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de

fermentaciones (horas o días) propuesto en la práctica.
15. Informar resultados, conclusiones y gráfica.

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D. Método PCV (Volumen de Células Empacadas)

1. Tomar un volumen de muestra, en condiciones asépticas del puerto dispuesto

para tal fin en el Biorreactor.
2. Utilizar un tubo de centrífuga de vidrio graduado.
3. Tomar 10 o 15 ml con pipeta estéril de acuerdo al volumen o capacidad del tubo
centrifuga.
4. Llevar la muestra a la centrifuga.
5. Agitar en Vortex
6. Encender la centrífuga.
7. Insertar el tubo de muestra en el sitio dispuesto en la Centrifuga.
8. Cerrar la cubierta de seguridad
9. Ejecutar la instrucción de las condiciones de operación 6000 rpm/5 min.
10. Al detenerse la centrífuga, sacar el tubo de muestra.
11. Medir el pellet definitivo , dentro del tubo centrífuga graduado
12. Regirse por la siguiente fórmula:

PCV (mm/mL): Presencia métrica de la visual de sólidos / Volumen de muestra (Tubo

centrifuga)

13. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de

fermentaciones (horas o días) propuesto en la práctica.
14. Informar resultados, conclusiones y gráfica

E. DILUCIÓN SERIADA

Preparar diluciones seriadas a partir de la solución madre o stock, y diluir hasta 106, teniendo en
cuenta que si se refiere a un soluto la solución stock tendrá una dilución inicial de 10 1 y si es una
solución tendrá una dilución inicial de 100.
Reportar teniendo en cuenta la formula
C=N x FD x 10 donde
C= será las UFC por ml

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FD= Factor de Dilución

F. Recuento en Cámara de Neubauer

1. Tomar un volumen de muestra, en condiciones asépticas del puerto dispuesto para tal fin en
el Biorreactor.
2. Preparar una dilución seriada
3. Tomar 1 ml con pipeta estéril y llevar a un tubo de ensayo tapa rosca con 9 ml en agua
destilada estéril o balón aforado de fondo plano según volumen requerido.
4. Agitar la muestra en el vortex o manualmente.
5. Por medio de un tubo capilar se llena la cámara de Neubauer
6. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de fermentaciones
(horas o días) propuesto en la práctica.
7. Informar resultados, conclusiones y gráfica.

Expresión de resultados:

C = K * N* D

Donde:
C: Concentración de células, Células/ml
K: Constante de la cámara, 25 cuadrantes= 5*104 o de 16 cuadrantes = 6,5*104
N: Cantidad de conidios, levaduras o esporas contados en 4 o 5 cuadrantes
D: Cantidad sucesiva de diluciones, 10 n veces

G. Densidad celular por Picnometría

1. Tomar un volumen de muestra, con el envase ámbar estéril, en condiciones asépticas del
puerto dispuesto para tal fin en el Biorreactor.
2. Utilizar un picnómetro.
3. Pesar el picnómetro vacio
4. Tomar el volumen necesario de acuerdo a la capacidad del picnómetro.
5. Pesar en la balanza para hallar la masa final.
6. Si es el densímetro, observar el valor medido en la escala presente.
7. Realizar la gráfica de la curva de la cinética de crecimiento, por ciclos de fermentaciones
(horas o días) propuesto en la práctica.
8. Informar resultados, conclusiones y gráfica.

Regirse por la siguiente fórmula:

Peso Húmedo (g/L): Masa final – Masa inicial/ Volumen de muestra (Picnómetro)

Nota: Tomar muestras cada 2(dos) horas para determinar las siguientes variables de Propagación y
Mantenimiento celular:

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EVIDENCIA DE LA ACTIVIDAD

Por Equipos de trabajo entregar para el procedimiento de obtención de etanol y de sus proyectos hijos.

INFORME FINAL con normas Icontec que contiene

1. Diagrama de flujo(Procedimiento sin gráficos)

2. Diagrama de cada proceso del Proyecto con sus respectivas imágenes y gráficos
3. Tabla de análisis fisicoquímicos caracterización de la materia prima
4. Caracterización microbiológica: Cuadro comparativo de Microorganismos de interés en el
proyecto que contenga. Nombre (Género y especie), macroscópia de la cepa con sus
características, microscopia de la cepa con sus características, Medio de cultivo
(componentes), Función en el proyecto.
5. Matriz del proyecto
6. Ficha del proyecto
7. Anexos fotográficos
8. Cronograma señalando Programado y cumplido.
9. Bibliografía

PRESENTACION DEL PROYECTO

Criterio de Evaluación:Determina las técnicas de análisis microbiológicos y fisicoquímicos de

materias primas para fermentaciones Industriales.
Evidencia: Resultado de la valoración de la bitácora, tabla de recolección de datos,
Diagrama de flujo, cronograma de actividades, Fichas de Proyecto.
Presentación de los proyectos Hijos.
Técnica e Instrumentos Entregables: Informe FINAL, avances(Tabla de DATOS, diagrama de
de Evaluación: flujo, Cronograma, Matriz de Proyecto).
Presentación.
Palabras clave: Fermentación aerobia y anaerobia, Propagación
Bibliografía: No aplica
Webgrafía: http://www.unh.edu.pe/facultades/fca/escuelas/agroindustrias/biblioteca/
LIBRO%20DE%20MICROBIOLOGIA%20INDUSTRIAL.PDF
Anexos: No aplica

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