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Microbiología de alimentos
COLORACION GRAM
Coloración Gram:
Conceptos básicos:
Colorantes
Tipos de colorantes:
1. Observación en fresco
Debido a que la morfología de las bacterias se altera
cuando se tiñen.
Se usan Observación en fresco:
Cuando las bacterias se observan para determinar su
movilidad.
Para observar los cambios citológicos que ocurren
durante la división celular.
Tipo de Tinciones:
Tinción de esporas:
Se usa verde de malaquita en contraste con
safranina.
El de Wirtz-Conklin o tinción con verde malaquita.
Este colorante se une fuertemente a las esporas
gracias a la utilización de calor como mordiente.
La fase de decoloración en este caso se realiza
con agua abundante.
Las formas vegetativas pierden el color verde y
se tiñen con el colorante de contraste (fucsina o
safranina).
Tinción de cápsula: Colorante Nigrosina
Tinción negativa
1.- Colocar una gota 2.- Tomar muestra 3.- Mezclar con la
de Nigrosina en un del Nigrosina y
porta microorganismo extender por todo
con el asa, flamear el porta. Secar al
el tubo y tapar aire y observar
TIPO DE TINCIONES SEGÚN EL METODO
Coloración primaria.
Decoloración, que remueve el colorante.
Coloración con un colorante de contraste, o coloración
secundaria.
1. PREPARACIÓN DE UN FROTIS.
2. FIJACIÓN DEL FROTIS.
3. APLICACIÓN DE COLORANTES.
PREPARACIÓN DE UN FROTIS
Aplicación de colorantes
Las células fijadas al calor se tiñen, primero con cristal
violeta.
Luego son lavadas para quitar el exceso de colorante.
En este estado, todas las células, tanto las Gram
positivas como las Gram negativas, están teñidas de
azul.
El portaobjetos se cubre entonces con yodo-yoduro,
lugol que es soluble en agua.
El I2 entra en las células y forma un complejo cristal
violeta iodo haciéndolo insoluble en agua.
Procedimiento de la tinción GRAM
3. Secado al aire
Enterococcus
Gr. Staphylococcus.
Crecen a T° de 30 a 37° C
Gr. Clostridium
Bacillos cortes
Bacterias intestinales: grupo entéricos.
Bacterias de agua.
Eschericha Coli
No patógenas aunque puede haber cepas que causen
problemas intestinales.
ESCHERICHIA
Genero Vibrio
Es Patógena
Principales Especies:
- S. Typhi (Fiebre Tifoidea)
- S. Choleraesuis
- S. Enteritis