INFORME DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

INTRODUCCIÓN:

Las enzimas son biocatalizadores de estructura proteínica cuya función es aumentar la

velocidad de las reacciones químicas, es decir capaz de agilizar los procesos específicos
en un medio acuoso las enzimas se caracterizan por actuar en baja concentración mucho
menor que la del reactivo sobre la cual funciona, debido a que solo se necesitan pocas
concentraciones de enzima para catalizar una función dada.

La forma de una enzima con un sustrato es perfecta por esta razón la enzima no participa
en reacciones equivocadas alguna enzima solo requiere estructura aminoácidica para
desarrollar su actividad mientras otras necesitan un cofactor ya que estos son
generalmente estables frente al calor dado que algunas enzimas "pierden su actividad por
calefacción

El efecto que produce las enzimas está asociado a la temperatura y al tiempo de dicha
exposición, al pH de la concentración de la enzima el grado de hidratación, la
concentración de sustrato y la presencia de activadores e inhibidores.

OBJETIVO

OBJETIVO GENERAL

Confrontar los conocimientos teóricos adquiridos en clases con las actividades

experimentales en el laboratorio.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimática, como la temperatura, el pH,
la concentración del sustrato y de la enzima y la presencia de inhibidores.

Observas la presencia de enzimas en diferentes sustancias y determinar cómo se ve

afectada la velocidad de una reacción al añadir diferentes cantidades de sustrato.

Demostrar la presencia de azucares reductores a través de la utilización de reactivo

Benedict

Reconocer el sustrato residual utilizando solución yodada

MARCO TEORICO

Las enzimas:

Las enzimas son biomoléculas especializadas en los catalizadores de las reacciones

químicas que tienen lugar en las células. son muy eficaces como catalizadores ya que son
capases de aumentar la velocidad de las reacciones químicas mucho más que cualquier
catalizador, además son altamente específicos ya que cada uno de ellos induce la
transformación de un solo tipo sustancia y no de otras que se pueden encontrar en el medio
de reacción.

Características de las enzimas

Funcionan como un catalizador orgánico y aceleran las reacciones químicas

Las enzimas presentan dos atributos:

Son específicas y regulan la rapidez de las reacciones químicas

El proceso metabólico se asegura gracias al: poder catalítico, especificidad, regulación.

Presentan los cuatro principios de los catalizadores:

Aceleran las reacciones.

No permiten que sucedan reacciones desfavorables, es decir, solamente pueden acelerar

las reacciones que ocurren de manera espontánea.

No cambian el punto de equilibrio de una reacción (convertidor catalítico)

No se consumen en las reacciones que promueven. No importa el número, permanecen

sin cambio.

Estructura de Enzimas

Cada enzima tiene una muesca o ranura llamada sitio activo.

La sustancia sobre la cual actúa la enzima se llama sustrato.

El sustrato y la enzima forman un complejo llamado enzima-sustrato (sistema llave-

cerradura).

Desnaturalización de las Enzimas

Temperatura

pH (funcionan a pH entre 6 y 8, excepto la pepsina)

Sales

Venenos

Sustrato:

El sustrato se une a una región concreta de la enzima, llamada sitio activo este sitio
comprende una requieren cofactores sitio de unión formado por los aminoácidos que
están en contacto directo con el sustrato y un sitio catalítico, formado por los aminoácidos
implicados en el mecanismo de reacción.

Cofactores:

Pueden ser iones inorgánicos casi un tercio de las enzimas requieren cofactores. Cuando
el cofactor es una molécula orgánica se le llama coenzima es una reacción cataliza por
una enzima.

MATERIALES UTILIZADOS

Gradilla

6 tubos de ensayo

Pipetas

Incubadora para (Baño María a 37°

Cocina eléctrica

REACTIVOS A UTILIZAR

Solución de almidón pH 6.6 al 1%

Cloruro de sodio solución 0.1M

Enzima al 1%

Acido clorhídrico 0.05N

Solución yodada
PROCEDIMIENTOS

Primeramente, utilizamos 6 tubos de ensayo

ETAPA (A)

Al tubo I y II se le agrega 5ml solución de almidón, PH 6,6 y luego se le agrega 1ml de

cloruro de sodio 0,1M al tubo I y II y nuevamente se le agrega agua destilada al tubo I y
II al tubo I se le agrega 4ml y al tubo II se le agrega 3ml y se coloca al Baño María a 37°C
por 5minutos, agregar 1ml de amilasa salival al tubo dos sin retirar del baño maría y
dejarlo por 30minutos al tubo II.

ETAPA (B)

De los tubos I y II de la Etapa A se trasmite 01ml al tubo IA Y IIA luego corresponde a

la etapa B y se lo deja en incubación 30 minutos y luego se le agrega 1ml ácido clorhídrico
0,05N al tubo I Y II y también se le agrega solución yodada 0.5ML al tubo I Y II

ETAPA (C).

De los tubos I y II de la etapa A se le agrega benedict 1ml a cada tubo y poner a hervir
por 10 minutos y luego observar de los resultados

OBSERVACIONES

En el tubo 1, la Reacción de Benedict da negativa por que no existe cambio de colores

En el tubo 3, la reacción de Benedict, da positiva y su coloración cambia de azul a un

verde medio amarillo.

El tubo 1 del grupo A sale morado azulado y el tubo dos de color amarrillo maíz

CONCLUSIONES

Se caracterizó cualitativamente las dos enzimas ocupadas en la práctica realizada y se

puede concluir que ambas enzimas son de naturaleza distinta, la amilasa es una hidrolasa,
mientras que la catalasa es una enzima de naturaleza oxidorreductasa, que mediante
procesos REDOX descompone el peróxido de hidrógeno en agua y en oxígeno molécula
CUESTIONARIO

1 ¿Cómo demuestra usted la presencia del sustrato en los tubos de ensayo?

la presencia que demuestra es el cambio de color en los tubos.

2 ¿Cómo demuestra usted si se a producido o no reacción enzimática en el

experimento realizado?

demostramos la reacción con los cambios de colores de los tubos por las reacciones
realiza por la solución yodada.

3 ¿Cómo demuestra usted los productos de la reacción enzimática en el experimento

realizado?

bueno el producto lo demostramos mediante las reacciones que íbamos viendo en el

transcurso de la práctica.

4 ¿Qué diferencia y semejanza encontró entre los experimentos 4 y 5 para

determinar actividad enzimática?

bueno las diferencias que notamos son los cambios de color que realiza cada tubo según
su color y que contiene la amilasa salival.

12 BIBLIOGRAFIA

http://es.scribd.com/doc/17469299/Informe-N9-laboratorio-de-BioquimicaI

http://jose-canel.blogspot.com/p/presencia-y-desnaturalizacion-de-la.html
INFORME DE PEROXIDASAS PEROXIDASAS
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Diferencial un catalizador de un biocatalizador por desprendimiento de oxigeno
molecular
OBJETIVOS ESPECIFICO
Demostrar la presencia de peroxidasas en los diferentes tipos de células
Demostrar el efecto oxidante del O2 sobre el alcohol etílico mediante el reactivo schiff
Demostrar cómo se evalúa la actividad catalítica de las de las peroxidasas
3 MARCO TEORICO
Las peroxidasas son enzimas que degradan ácidos grasos y aminoácidos, también
contienen grandes cantidades de enzima catalasa la cual degrada al peróxido de
hidrogeno
Es una enzima que catalasa la oxidación de un amplio número de sustratos orgánicos e
inorgánicos, utilizando el poder oxidante del peróxido de hidrogeno.
LA CATALASA es una enzima antioxidante presente en la mayoría de los organismos
aeróbicos. Y también puede catalizar ciertas reaccione como per oxidasas.
Esta enzima utiliza como cofactor el grupo hemo. Es utilizada ampliamente en
bioquímica clínica.

MATERIALES UTILIZADOS
Agua oxigenada de 10vol
Gradillas
Tubos de ensayo Buffer fosfato 7,2
Reactivos schiff
Rabanito
Carne o hígado
Levadura de hierro
hierro
Alcohol etílico
6 PROCEDIMIENTOS
Armamos una serie de ochos tubos de ensayo a cada tubo se le agrega 2ml de buffer
fosfato pH 7,2 y luego se agrega al tubo 1, 4ml de agua destilada y al tubo dos 1ml de
agua destilada al tubo dos y luego al tubo 3 se le agrega 0,5gramos de hierro y al tubo 4
le agregamos 0,5gramos de rabanito, y luego al tubo 5 le agrega 0,5gramos de
zanahoria y luego al tubo 6 le agrega 0,5gramos de hígado de pollo, y al tu tubo 7 le
pusimos levadura de pan y después al tubo 2le agregamos 3ml de agua oxigenada de
tres volúmenes y también al tubo 3,4,5,6,7 y lo observamos ´por 15minutos y luego
Alos tubos 1,2,3,4,5,6,7 le agregamos 2ml de alcohol etílico y también le agregamos a
todos los tubos del 1 al 7 1ml de reactivo de schiff y hubo una reacción en el tubo 3
hubo desprendimiento de oxigeno del 20%, el tubo 4 hubo un desprendimiento del
40%y el tubo 5 hubo un desprendimiento del 60% y el tubo 6 el 70% y al tubo 7 hubo
un desprendimiento del 90% por la misma levadura y se izó parecido a un volcán con la
misma levadura y por el oxígeno, después de 15minutos se le agrega el reactivo de
schiff y tuvimos un resultado del tuvo 1 un fucsia clarito y abajo trasparente y él tuvo 2
salió fucsia bajito y se dividió en dos partes y el tubo 3 nos salió un fucsia oscuro la
mitad y debajo de limadura de hierro y el tubo 4 salió fucsia clarito y se evapora el
rabanito y abajo trasparente, y el tubo 5 fucsia bajito y el contorno la zanahoria y al tubo
6 salió fucsia clarito la mitad y abajo trasparente y en la parte superior hígado y el tubo
7 y esta con mayor desprendimiento como un volcán
7 CONCLUSIONES
En esta práctica liberamos oxígeno a través del agua oxigena.
8 CUESTIONARIO
1 ¿Mencione usted en que organelo se encuentran las per oxidasas?
Se encuentra en las catalasas y lape oxida de los alimentos y también en el almidón.
2 ¿Cuál es la función de las per oxidasas en las células?
una enzima que cataliza la oxidación de un amplio número de sustratos orgánicos e
inorgánicos

3 ¿Qué diferencias hay entre per oxidasa y catalasas?

La Catalasa es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la
descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en oxígeno y agua. El peróxido de
hidrógeno es un residuo del metabolismo celular de muchos organismos vivos, pero
dada su toxicidad debe transformarse rápidamente en compuestos menos peligrosos.
Para ello se usa con frecuencia esta enzima que cataliza su descomposición en agua y
oxígeno. Además, la catalasa se usa en la industria textil para la eliminación del
peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la limpieza de lentes de
contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de hidrógeno.
4 ¿Explique usted como en la célula se forma los peróxidos y que acción tiene?
Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
¿Cómo interviene la catalasa en la oxidación del alcohol etílico?
El proceso de oxidación de etanol implica al menos tres vías enzimáticas distintas. ...
ocurrir en los peroxisomas a través de la actividad de la catalasa.
9 BIBLIOGRAFIA
https://es.wikipedia.org/wiki/Peroxidasa
https://www.google.com/search?q=peroxidasa&oq=peroxidasa&aqs=c

INFORMES DE IHIBIDORES
Introducción
Los inhibidores enzimáticos se clasifican en dos grandes grupos: reversibles e
irreversibles, que se pueden distinguir en base de un criterio experimental. Si después de
hacer actuar el inhibidor sobre la enzima eliminamos por algún método como podría ser
la diálisis, el exceso de inhibidor, la enzima recupera la actividad original, se dice que el
inhibidor es reversible. A la inversa si la enzima continúa inhibida después de la
reacción del exceso de inhibidor, se dice que el inhibidor es irreversible.
Es importante destacar que la interacción entre inhibidores y la enzima se traduce en
varios tipos de inhibición perfectamente diferenciables experimentalmente.
Objetivos
Objetivo general
Caracterizar a los inhibidores enzimáticos. También son usados como herbicidas y
pesticidas.
objetivos específicos
demostrar el efecto reversible del cloruro de mercurio, por adición de mayor
concentración de sustrato y valoración final del viraje del color del indicador 2,6-
diclorofenolindofenol.
Marco teórico
Reactivos utilizados:
Buffer fosfato 0,1MpH 7.2
Succinato de sodio 0.1M
Succinato de sodio 0.5M
2.6-diclorofenolindofenol
Malo nato de sodio 0.1M
Homogenizado hepático 10%
Metodología
Lugar de ejecución
Procedimiento
Armamos una serie de cinco tubos de ensayo al primer tuvo se le agrega 2,0ml de buffer
fosfato 0,1M pH 7,2, al segundo tuvo se le agrega 1,0ml de 0ml de buffer fosfato 0,1M
pH 7,2, al tercer tuvo se le agrega 1,3ml de buffer fosfato 0,1M pH 7,2, al tercero se le
agrega igual y finalmente al cuarto tuvo 1,0ml.Al tuvo 2 ,3,4 se le agrega 0,2ml de
succinato de sodio 0.1M.al quinto tuvo se le agrega 0,5ml de succinato de sodio
0.5M.AL TERCERO y cuarto tuvo se le agrega 0.5ml de malo nato de sodio de 0,1m.
después se le agrega 1.oml de 2,6-diclorofenolindofenol a todos los cinco tubos de
ensayo. Finalmente, se le agrega 1,0ml de homogenizado hepático de 10% a todos los
cinco tubos de ensayo.
Después se deja en reposo por 30 minutos a la temperatura del ambiente.
En el primer tubo observamos un color verde bajito en la parte superior y en la parte
superior un color ladrillo, en el segundo observamos un color ladrillo, en el tercero
observamos mitad verde y mitad color ladrillo, en el cuarto tubo observamos un color
celeste en la parte inferior y azul oscuro en la parte superior, finalmente en el tubo seis
observamos un color verde en la parte superior, y en la parte central se ve un color
amarillo, y e n la parte inferior se observa un color anaranjado claro.
conclusión

cuestionario
1¿Por qué el malonato es inhibidor competitito?
2¿Por qué el cloruro de mercurio es inhibidor no competitivo?
3en la presente practica ¿Cómo podría demosrar que la inhibición producida por el
cloruro de mercurio es o no reversible
4 de por lo menos dos ejemplos de sustancias que producen inhibición competitiva en el
sistema succionato deshidrogenada -succinato, además del malonato anotado utilizado
en el presente documento?
5señale por lo menos 3 ejemplos de sustancias quebpueden producirb inhibición no
competitiva reversible,sin considerar el cloruro de mercurio
6¿Qué diferencias pueden establecer entre la inhibición competitiva la inhibición
alosterica?
7 De por lo menos 2semajansas entre la inhibición no competitiva reversible e
inhibacion alosterica.
bibliografía
anexos
TEMA FACTORES FÍSICOS Y QUÍMICOS
2 OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GENERAL
El objetivo general encontramos las reacciones enzimáticas diversas de agentes físicos y
químicos de la amilasa salival y el almidón
2.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Verificar que la reacción enzimática sea lenta en un medio acido o en un medio básico
Comprobar que a una temperatura muy alta la enzima se desnaturaliza o muy baja la
enzima se inhibe.
3 MARCO TEORICO
Además del componente proteico, muchas enzimas requieren constituyentes no
proteicos para su función como catalizadores. Estas sustancias accesorias reciben
diversos nombres, grupo prostético, cofactor o enzima. El grupo prostético es cualquier
porción no aminoácido de una proteína que confiere a esta alguna propiedad especial.
Los cofactores son pequeñas moléculas esenciales para la catálisis. El termino enzima
se aplica a moléculas orgánicas, derivadas a menudo de una vitamina y que son
esenciales para una enzima algunas coenzimas se hallan estrechamente unidas a la
porción proteica de una determinada enzima; esta puede desnaturalizarse si se intenta
separar la enzima.
La teoría cinética conocida también teoría de colisiones como de la cinética química
establece que para que dos moléculas reaccionen deben; aproximarse entre si a la
distancia de formación del enlace o bien chocar y deben poseer suficiente energía
cinética.
4 MATERIALES UTILIZADOS
La solución del almidón al 1%
Fufer fosfato 0,1M pH 6,6
buffer acetato 0,1M pH3,6
buffer fosfato 0,1M PH 10, O
solución cloruro de sodio al 2%
amilasa salival dializado al 0,25%
ácido clorhídrico al 0,5N
solución yodada (yoruro de potasio)
solución cúprico alcalina
solución fosmolibdica
agua destilada
5 DIBUJAR
6 PROCEDIMIENTOS
se utiliza 8 tubos de ensayo se coloca solución de almidón al 1% de 1ml a los tubos
1,2,4,5,6,7,8 excepto al tubo 3 que se coloca 2ml de solución de almidón después de
eso se coloca buffer acetato 0.1M PH 3.6 al cuarto tubo de ensayo, buffer fosfato 0,1M
PH 6,6 se agrega 5ml a los tubos de ensayo 1,2,3,5,7,8, buffer fosfato 0,1M PH 10,0 SE
LE AGREGA 5ml al tubo 6, solución cloruro de sodio al 2% se coloca 1,4ml al
1,3,4,5,6,7,8, agua destilada al tubo 1 se le agrega 2,6ml, al tubo 2 se le agrega 3ml, al
3,4,5,6,8 se le agrega 1,6 y al 7 se le agrega 0,6m el preparado enzimático se le agrega a
los tubos 2,3,4,5,6,8 la cantidad 1ml, preparado enzimático hervido se le agrega al
tubo de ensayo 7, la cantidad 1.0
8 DISCUSIONES
9 OBSERVACIONES
10CONCLUSIONES
11 CUESTIONARIO
12 BIBLIOGRAFIA