Fluitest GGT

-GLUTAMYLTRANSFERASE

Order information: Limitations - interference:

Criterion: Recovery within 10% of initial values
Catalog No. Contents Icterus: No significant interference up to an index I of 30 (approximate bilirubin
2628 R1 8x 15 ml R2 1x 25 ml concentration 30 mg/dl)
Hemolysis: No significant interference up to an Index H of 150 (approximate
2625 R1 4x 50 ml R2 4x 10 ml
hemoglobin concentration: 150 mg/dl).
H7501 Hit I / (ILab*) R1 6x 47 ml R2 6x 11 ml Lipemia (Intralipid): No significant interference up to an index L of 1074
(approximate triglycerides concentration: 2148 mg/dl).
H7503 Hit 917 / (AU*) R1 6x 60 ml R2 6x 14 ml
There is poor correlation between turbidity and triglycerides concentration.
AU7503 AU R1 6 x 60 ml R2 6x 14 ml When performing -microglobulin and -2- microglobulin assays, use the Evasion
( * ) Kit contains only reagent barcode for Hitachi system. software with SMS/acid wash in order to avoid probe carry over from GGT to the
above mentioned tests on Roche/Hitachi 717/902/911 analyzers.
System information: The effect of drugs or their metabolic products on the test is not known in all cases.
Hitachi 911/917: ACN 479 In case of doubt it is recommended to repeat the test after the medication has been
For application on the Hitachi 912, please use an open system or contact the discontinued. However, the medication may only be discontinued according to
Analyticon Customer Support. instructions of the attending physician.

Intended use: Testing procedure:

In vitro test for the quantitative determination of gamma-Glutamyl-transferase (GGT) Applications for automated systems are available on request.
in human serum and plasma.
Materials provided
• Working solutions as described above
Summary: Additional materials required
Gamma-glutamyltransferase (GGT) is used in the diagnosis and monitoring of • Calibrators and controls as indicated below
hepatobiliary diseases. The enzymatic activity of GGT is often the only parameter • 0.9% NACl
with increased values when testing for such diseases, and is one of the most
sensitive indicators. Gamma-glutamyltransferase is also a sensitive screening test Manual procedure for substrate start:
for occult alcoholism. Elevated GGT activities are found in the serum of patients Wavelength: Hg 405 nm (400-420nm)
requiring long-term medication with phenobarbital and phenytoin. Temperature: +25 / +30 / +37°C
In 1969, Szasz published the first kinetic procedure for GGT in serum using γ- Cuvette: 1 cm light path
glutamyl-p-nitroanilide as substrate and glycylglycine as acceptor. In order to Zero adjustment: air or distilled water
circumvent the poor solubility of γ-glutamyl-p-nitroanilide, Persijn and van der Slik
investigated various derivatives of the compound with respect to solubility. The Macro Semi-Micro Micro
substrate L-γ-glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide is superior in terms of stability and
solubility. R1 2500 µl 1000 µl 500 ml
The assay described below uses the water-soluble substrate L-γ-glutamyl-3- Sample 250 µl 100 µl 50 µl
carboxy-4-nitroanilide. The results correlate with those derived using the original R2 500 µl 200 µl 100 µl
substrate.
Mix, read initial absorbance and start stopwatch simultaneously. Read again after
exactly 1, 2 and 3 minutes and calculate ΔA.
Test principle:
Enzymatic colorimetric assay
Calculation for substrate start:
• Sample and addition of R1 (Buffer/Glycylglycine)
• Addition of R2 (substrate) and start of reaction ΔA/min x 1369 = Activity (U/l)

-GT Manual procedure for sample start:

L--Glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide + Glycylglycine L--glutamyl-glycylglycine
Wavelength: Hg 405 nm (400-420nm)
+ 5-amino-2-nitrobenzonate
Temperature: +25 / +30 / +37°C
Gamma-glutamyltransferase transfers the -glutamyl group of L--glutamyl-3- Cuvette: 1 cm light path
carboxy-4-nitroanilide to glycylglycine. The amount of 5-amino-2-nitrobenzonate Zero adjustment: air or distilled water
liberated is proportional to the GGT activity and can be determined photometrically.
Macro Semi-Micro Micro
Reagent concentration: Working reagent 2500 µl 1000 µl 500 ml
R1: Sample 250 µl 100 µl 50 µl
Tris Glycylglycin buffer pH 8.25 100 mmol/l
R2: Mix, read initial absorbance and start stopwatch simultaneously. Read again after
L--Glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide 2.9 mmol/l exactly 1, 2 and 3 minutes and calculate ΔA.

Preparation and stability: Calculation for sample start:

Sample start:
Mix 5 volumes of R1 with 1 volume of R2. This working solution is stable: A/min x 1158 = Activity (U/l)
28 days at + 2°C to + 8°C
7 days at +20°C to +25°C
Substrate start: Measuring /reportable range:
R1: ready for use 3 - 280 U/l (0.05 - 4.67 µkat/l)
R2: ready for use In case of higher results, dilute sample 1:10 with NaCl solution and repeat test.
Unopened reagents are stable up to the expiry date on the label when stored at Multiply result by 10.
+2°C to +8°C. Roche/Hitachi
Onboard stability: R1: 21 days 3-1200 U/l or 0.05 – 20.00 µkat/l
R2: 21 days Determine samples having higher activities via the rerun function. On instruments
without rerun function, manually dilute the samples with 0.9% NaCl or distilled/
Specimen: deionized water (e.g. 1 + 4). Multiply the result by the appropriate dilution factor
Collect serum using standard sampling tubes. (e.g. factor 5).
Li-, heparinized- or EDTA-plasma.
Stability: 7 days at +20°C to +25°C Expected values:
7 days at + 2°C to + 8°C Men 37°C 8 –- 61 U/l (0.13 – 1.02 µkat/l)
Centrifuge samples containing precipitate before performing the assay. Women 37°C 5 –- 40 U/l (0.08 – 0.65 µkat/l)
Each laboratory should investigate the transferability of the expected values to its
Notes: own patient population and if necessary determine its own reference range. For
For in vitro diagnostic use. diagnostic purposes the GGT results should always be assayed in conjunction with
The material safety data sheet contains further safety-related information. It is the patient's medical history, clinical examinations and other findings.
available for download from our homepage http://www.analyticon-diagnostics.com.
Exercise the normal precautions required for handling all laboratory reagents.
Analytical sensitivity (lower detection limit)
Detection limit: 3 U/l (0.05 µkat/l)
The lower detection limit represents the lowest measurable GGT activity that can be
distinguished from zero.

Analyticon® Biotechnologies AG (PGGT_GB-D_21_001_09.01_2018-08-14) S1/4

Am Mühlenberg 10, 35104 Lichtenfels / Germany
 Fluitest GGT
-GLUTAMYLTRANSFERASE

Imprecision:
Reproducibility was determined using controls. The following results were obtained:
Within run
Sample Mean SD CV
U/l U/l %
Sample 1 41.6 0.60 1.44
Sample 2 105 0.65 0.62
Sample 3 169 0.62 0.37
Between day
Sample Mean SD CV
U/l U/l %
Sample 1 39.5 0.66 1.67
Sample 2 87.1 1.42 1.63
Sample 3 215 2.91 1.35

Method comparison:
A comparison of the Analyticon Fluitest® GGT (y) with a commercial obtainable
assay (x) gave with samples the following result:
y = 0.993 x + 0.595; r = 0.999

Quality control:
Human Control Serum
Contronorm® Plus 5 x 5 ml #1205
20 x 5 ml #1220
Contropath® Plus 5 x 5 ml #1305
20 x 5 ml #1320
The control intervals and limits must be adapted to the individual laboratory and
country-specific requirements. Values obtained should fall within established limits.
Each laboratory should establish corrective measures to be taken if values fall
outside the limits.

Calibration for Hitachi Systems:

S1: 0.9% NaCl
S2: Bio Cal® E 10 x 3 ml #1430

Calibration frequency:
Two-point calibration is recommended
▪ after lot change
▪ as required following quality control procedures

Disposal:
Please note the legal regulations.

Literature:
1. Glick M.R.. Ryder K.W.. Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences
in Clinical Chemistry Instrumentation, Clin Chem 1986;32:470-474
2. Persijn JP, van der Silk W. A mew method for the determination of gamma-
glutamyltransferase J Clin Chem Biochem 1976;4:421
3. Shaw L M .Keeping pace with a popular enzyme GGT. Diagnostic Medicine
1982; may/June1-8
4. Szasz G.. A kinetic photometric method for serum -glutamyl-transferase J.
Clin Chem 1969;15:124-136
5. Szasz G.. Methods of Enzymatic Analysis 2nd English ed New York: Academic
Press Inc. 1974:717
6. Szasz G.. Persijn J.P. et al. Z Klin Chem Klin Biochem 1974;12:228
7. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 4th ed. Marburg: Die Medizinsche
Verlagsgesellschaft; 1992
8. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests 3rd ed. Philadelphia, Pa.
W.B.Saunders Company. 1995:286
9. Zawta B. Klein G. Bablock W. Temperature Conversion in Clinical
Enzymology Klin Lab 1994;40:33-42
10. Thomas L, Klein G. Neue vorläufige Normalbereiche für neun Serumenzyme.
Deutsches Ärzteblatt 2006;103;Heft 7.

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of this package insert.

Analyticon® Biotechnologies AG (PGGT_GB-D_21_001_09.01_2018-08-14) S2/4

Am Mühlenberg 10, 35104 Lichtenfels / Germany
 Fluitest GGT
-GLUTAMYLTRANSFERASE

Bestellinformation: Einschränkungen des Verfahrens – Interferenzen:

Als Bewertung gilt Wiederfindung  10% vom Ausgangswert.
Katalog-Nr. Inhalt Ikterus: keine Beeinflussung bis zum Index I von 30 (entsprechend ca. 30 mg/dl
2628 R1 8x 15 ml R2 1x 25 ml Bilirubin).
Hämolyse: Keine wesentliche Beeinflussung bis zum Index H von 150 (ca. 150
2625 R1 4x 50 ml R2 4x 10 ml
mg/dl Hämoglobin)
H7501 Hit I / (Ilab*) R1 6x 47 ml R2 6x 11 ml Lipämie (Intralipid): Keine wesentliche Beeinflussung bis zum Index L von 1074 (
ca. 2148 mg/dl Triglyceride).
H7503 Hit 917 / (AU*) R1 6x 60 ml R2 6x 14 ml
Es besteht keine zufriedenstellende Übereinstimmung zwischen L-Index (Trübung)
AU7503 AU R1 6 x 60 ml R2 6x 14 ml und Triglyceridkonzentration.
( * ) Kit enthält nur Reagenzien-Barcodes für Hitachi Systeme. Wenn auf Roche/Hitachi 717/902/911 Geräten -1-Microglobulin und -2
Microglobulin-Tests gefahren werden, ist die Evasion software mit SMS/Acid Wash
Systeminformation: einzusetzen, um Nadelverschleppungen von GGT auf diese Tests zu vermeiden.
Hitachi 911/917: ACN 479 Die Auswirkung von Medikamenten oder deren Metaboliten auf den Test ist nicht in
Für die Benutzung am Hitachi 912 verwenden Sie bitte ein offenes System oder allen Fällen bekannt. Im Zweifelsfall wird deshalb empfohlen, den Test nach
wenden Sie sich an den Analyticon Kundensupport. Absetzen der Medikation zu wiederholen. Ein Absetzen der Medikation darf
allerdings nur nach Anweisung des behandelnden Arztes erfolgen.
Anwendungszweck:
In vitro Test zur quantitativen Bestimmung der Gamma-Glutamyl-transferase (GGT) Testverfahren:
in Humanserum und -plasma. Applikationen für automatisierte Systeme sind auf Anfrage erhältlich.
Gelieferte Materialien
Zusammenfassung: •Gebrauchsfertige Lösungen wie vorher angegeben
Die Gamma-Glutamyltransferase dient zur Diagnose und Verlaufsbeurteilung von Zusätzlich benötigte Materialien
Erkrankungen der Leber und Gallenwege. Die häufig allein erhöhte Enzymaktivität • Kalibrations- und Kontrollmaterial wie nachfolgend beschrieben
ist einer der empfindlichsten Indikatoren für eine Leber-Gallenerkrankung. Die •Natriumchlorid-Lösung (0.9%)
Gamma-Glutamyltransferase wird außerdem als sensitiver Screening-Test zur Er-
kennung eines versteckten Alkoholismus eingesetzt. Bei Patienten mit langzeitiger Manuelle Testdurchführung:
Medikation von Phenobarbital und Phenytoin finden sich ebenfalls erhöhte GGT- Substratstart:
Aktivitäten im Serum.
1969 wurde von Szasz die erste kinetische Bestimmung der GGT im Serum mit Wellenlänge: Hg 405 nm (400-420 nm)
dem Substrat γ-Glutamyl-p-nitroanilid und dem Akzeptor Glycylglycin beschrieben. Reaktionstemperatur: +25°C/ +30°C/ +37°C
Wegen der schlechten Löslichkeit des γ-Glutamyl-p-nitroanilids untersuchten Persijn Schichtdicke: 1 cm
und van der Silk zahlreiche Varianten des Substrats auf ihre Löslichkeit. Das Sub- Messung: gegen Luft oder Aqua dest.
strat L-γ-Glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilid zeigte sich hinsichtlich Löslichkeit und
Makro Halbmikro Mikro
Stabilität überlegen. Die vorliegende Bestimmung verwendet bei gleicher Überein-
stimmung der Ergebnisse mit dem alten Substrat das wasserlösliche Substrat L-γ- R1 2500 µl 1000 µl 500 µl
Glutamyl-3-carboxylat. Probe 250 µl 100 µl 50 µl
R2 500 µl 200 µl 100 µl
Testprinzip:
Enzymatischer Farb-Test Mischen und Extinktionen ablesen. Gleichzeitig die Stoppuhr starten. Im Abstand
. Probe und Zugabe von R1 (Puffer/Glycylglycin) von 1, 2 und 3 Minuten weitere Ablesungen durchführen und E/min bilden.
. Zugabe von R2 (Substrat) und Start der Reaktion
Berechnung für Substratstart:
-GT
L--Glutamyl-3-Carboxy-4-Nitroanilin + Glycylglycin L--Glutamyl-Glycylglycin E/min x 1369 = Aktivität (U/l)
+ 5-Amino-2-Nitrobenzonat
Die GGT überträgt den -Glutamylrest von L--Glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilid auf Manuelle Testdurchführung:
Glycylglycin. Das dabei freigesetzte 5-Amino-2-nitro-benzoat ist proportional der Probenstart:
GGT-Aktivität und wird photometrisch gemessen.
Wellenlänge: Hg 405 nm (400-420 nm)
Reaktionstemperatur: +25°C/ +30°C/ +37°C
Konzentration der gebrauchsfertigen Lösung: Schichtdicke: 1 cm
R1: Messung: gegen Luft oder Aqua dest.
Tris-Glycylglycin-Puffer, pH 8.25 100 mmol/l
R2: Makro Semi-Makro Mikro
L-γ-Glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilid 2.9 mmol/l
Arbeitsreagenz 2500 µl 1000µl 500 µl
Probe 250 µl 100 µl 50 µl
Herstellung und Haltbarkeit:
Probenstart: Mischen und Extinktion ablesen. Gleichzeitig die Stoppuhr starten. Im Abstand
Arbeitsreagenz: 5 Volumenteile R1 werden mit 1 Volumenteil R2 gemischt. von 1, 2 und 3 Minuten weitere Ablesungen durch-
Haltbarkeit: 28 Tage bei + 2°C bis + 8°C führen und E/min berechnen.
7 Tage bei +20°C bis +25°C
Substratstart: Berechnung für Probenstart:
R1: Inhalt ist gebrauchsfertig
E/min x 1158 = Aktivität (U/l)
R2: Inhalt ist gebrauchsfertig
Ungeöffnete Packungsbestandteile sind bei +2°C bis +8°C bis zum angebebenen
Verfallsdatum haltbar. Messbereich:
Onboard Stabilität: R1: 21 Tage 3 - 280 U/l bzw.0,05 – 4,67 µkat/l
R2: 21 Tage Bei höheren Aktivitäten wird die Probe 1:10 mit Natriumchlorid-Lösung verdünnt, die
Bestimmung wiederholt und das Ergebnis mit 10 multipliziert.
Untersuchungsgut: Roche/Hitachi
Serum, entnommen mit Standard-Probenentnahmeröhrchen. Li-, Heparin- oder 3 – 1200 U/l bzw. 0,05 – 20,00 µkat/l
EDTA-Plasma. Proben mit höheren Aktivitäten werden über eine Rerun-Funktion bestimmt. Bei
Haltbarkeit: 7 Tage bei +20°C bis +25°C Geräten ohne Rerun-Funktion werden Proben mit manuell mit Natriumchlorid-
7 Tage bei + 2°C bis + 8°C Lösung (0.9%) verdünnt (z. B. 1+4). Das Ergebnis mit dem entsprechenden
Proben, die Präzipitate enthalten, müssen vor dem Test zentrifugiert werden. Verdünnungsfaktor multiplizieren (z. B. Faktor 5).

Hinweis: Referenzbereich:
In vitro Diagnostikum.
Männer 37°C 8 –- 61 U/l (0.13 – 1.02 µkat/l)
Weitere sicherheitsrelevante Informationen sind im Sicherheitsdatenblatt enthalten.
Frauen 37°C 5 –- 40 U/l (0.08 – 0.65 µkat/l)
Dieses steht auf unserer Homepage http://www.analyticon-diagnostics.com zum
Download bereit. Jedes Labor sollte die Übertragbarkeit der Referenzbereiche für die eigenen
Die beim Umgang mit Laborreagenzien üblichen Vorsichtsmaßnahmen beachten. Patientengruppen überprüfen und gegebenenfalls eigene Referenzbereiche
ermitteln. Für diagnostische Zwecke sind die GGT-Ergebnisse stets im
Zusammenhang mit der Anamnese, der klinischen Untersuchung und anderen
Untersuchungsergebnissen zu werten.

Analyticon® Biotechnologies AG (PGGT_GB-D_21_001_09.01_2018-08-14) S3/4

Am Mühlenberg 10, 35104 Lichtenfels / Germany
 Fluitest GGT
-GLUTAMYLTRANSFERASE

Sensitivität (analytische Nachweisgrenze):

3 U/l bzw. 0,05 µkat/l
Die Nachweisgrenze entspricht der niedrigsten messbaren GGT- Aktivität, die von
Null unterschieden werden kann.

Impräzision:
Die Reproduzierbarkeit wurde mit Kontrollproben bestimmt und ergaben folgende
Ergebnisse:
Tag / Tag
Probe MW SD VK
U/l U/l %
Probe 1 39,5 0,66 1,67
Probe 2 87,1 1,42 1,63
Probe 3 215 2,91 1,35

In der Serie
Probe MW SD VK
U/l U/l %
Probe 1 41,6 0,60 1,44
Probe 2 105 0,65 0,62
Probe 3 169 0,62 0,37

Methodenvergleich:
Bei einem Vergleich von Analyticon Fluitest® GGT (y) mit einem kommerziell
erhältlichen Test (x) wurden folgende Ergebnisse erzielt:
y = 0,993 x + 0,595; r = 0,999

Qualitätskontrolle:
Humanes Kontrollserum
Contronorm® Plus 5 x 5 ml #1205
20 x 5 ml #1220
Contropath® Plus 5 x 5 ml #1305
20 x 5 ml #1320
Die Kontrollintervalle und Kontrollgrenzen sind den individuellen Anforderungen
jedes Labors und den länderspezifischen Richtlinien anzupassen. Die Ergebnisse
müssen innerhalb der festgesetzten Bereiche liegen. Jedes Labor sollte
Korrekturmaßnahmen für den Fall beschreiben, dass Werte außerhalb des
Bereiches liegen.

Kalibration:
S1: 0.9% NaCl
S2: Bio Cal® E 10 x 3 ml #1430

Kalibrationshäufigkeit:
Eine Zweipunktkalibration wird empfohlen:
▪ nach Reagenzchargenwechsel
▪ wenn Qualitätskontrollverfahren dies erfordern.

Entsorgung:
Bitte beachten Sie die jeweiligen gesetzlichen Vorschriften.

Literatur:
1. Glick M.R. Ryder K.W.. Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in
Clinical Chemistry Instrumentation, Clin Chem 1986;32:470-474
2. Persijn JP, van der Silk W. A mew method for the determination of gamma-
glutamyltransferase J Clin Chem Biochem 1976;4:421
3. Shaw L.M.Keeping pace with a popular enzyme GGT. Diagnostic Medicine
1982; May/June1-8
4. Szasz G. A kinetic photometric method for serum -glutamyl-transferase J. Clin
Chem 1969;15:124-136
5. Szasz G. Methods of Enzymatic Analysis 2nd English ed New York: Academic
Press Inc. 1974:717
6. Szasz G. Persijn J.P. et al. Z Klin Chem Klin Biochem 1974;12:228
7. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 4th ed. Marburg: Die Medizinische
Verlagsgesellschaft; 1992
8. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests 3rd ed. Philadelphia, Pa. W.B.
Saunders Company. 1995:286
9. Zawta B. Klein G. Bablock W Temperature Conversion in Clinical Enzymology
Klin Lab 1994;40:33-42
10. Thomas L, Klein G. Neue vorläufige Normalbereiche für neun Serumenzyme.
Deutsches Ärzteblatt 2006;103;Heft 7.

Grau hinterlegte Textpassagen wurden in der letzten Überarbeitung dieser

Gebrauchsanweisung geändert.

Analyticon® Biotechnologies AG (PGGT_GB-D_21_001_09.01_2018-08-14) S4/4

Am Mühlenberg 10, 35104 Lichtenfels / Germany