ARTÍCULO ESPECIAL

Importancia de la investigación en modelos Experimental,

¿qué sesgos debemos de evitar para poder publicar?
Giancarlo Castillo Tarrillo1,2,3, Lindsay Benites Yshpilco1,2, José Carlos Murillo-Padilla 4,5 , José Cláudio
da Silva 6, Lysien Ivania Zambrano 7,8, Altay Alves Lino de Souza9.
1
Estudiante de quinto año de medicina de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos - Perú.
2
Sociedad Científica de San Fernando. Facultad de Medicina. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Lima, Perú.
3
Editor en Jefe de la Revista CIMEL.
4
Estudiante del sexto año de Medicina de la Universidad Nacional Autónoma de Honduras (UNAH).
5
Miembro de la sociedad científica de estudiantes de medicina (ASOCEM- UNAH).
6
Departamento de fisiología humana y neurociencias de la Universidade estadual de Ciências da Saúde de Alagoas- UNCISAL, Maceió, Alagoas, Brasil.
7
Departamento de Ciencias Morfológicas, de la Facultad de Ciencias Médicas, de la Universidad Nacional Autónoma de Honduras (UNAH).
8
Asesora de la asociación científica de estudiantes de medicina ASOCEM- UNAH.
9
Departamento de Psicobiologia de la Universidade Federal de São o Paulo (UNIFESP), Brasil. 

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RESUMEN
Los modelos experimentales en animales son los principales estudios que permiten el aumento del conocimiento científico a pasos agigantados, ya que constituyen el
primer paso antes de la investigación clínica, observando mediante estos la fisiopatología, patogenia, tratamiento y prevención de las enfermedades. Sin embargo, en
la mayoría de los países latinoamericanos se tiene poca experiencia con el área experimental. Por lo que es importante tener en cuenta una serie de recomendaciones
y pautas a seguir en su realización. Debemos saber que todo trabajo experimental debe cumplir con los 3 principios de Russel (3R´s), además de evitar los sesgos a los
que están expuestos, asegurando la validez interna y externa. Asimismo la metodología utilizada en cada grupo de experimentos es un punto clave para la reproduc-
tibilidad de estos estudios a posterior, conociendo que un buen diseño experimental nos augura un éxito en los ensayos clínicos en humanos.
Palabras clave: Modelos Animales de Enfermedad, Ciencia de los Animales de Laboratorio (DeCS)

IMPORTANCE OF RESEARCH IN EXPERIMENTAL MODELS. WHAT BIASES MUST WE AVOID TO PUBLISH?

ABSTRACT
Experimental animal models are the main studies to increase scientific knowledge by leaps and bounds, as they constitute the first step before clinical research, looking
through them the physiopathology , pathogenesis, treatment and prevention of diseases. However, in most Latin American countries there is little experience with the
experimental area. So it is important to consider a number of recommendations and guidelines to follow in their realization. All experimental work must accomplish the 3
principles of Russel (3R’s), and avoid the biases to which it is exposed, ensuring internal and external validity. Likewise, the methodology used in each set of experiments is a
key point for the reproducibility of these studies later, knowing that a good experimental design augurs success in clinical trials in humans.
Keywords: Disease Models, Animal, Laboratory Animal Science (MeSH)

La base de la ciencia se da en los laboratorios de modelos ex-
perimentales, los cuales han sido indispensables para los pro-
cesos siguientes, esta idea nace desde que el monje austríaco
en el siglo XIX Gregor Mendel identifica las leyes fundamen-
tales en la herencia mediante la observación de las plantas de
guisantes, después las investigaciones posteriores nacen por
otros científicos de diferentes áreas.
Los animales padecen muchas enfermedades similares a
los que afectan a las personas y los investigadores del área
de la salud, mediante los estudios experimentales, podemos
aprender la fisiopatología, la prevención, el descubrimiento
de nuevos tratamientos o posibles curas de las diversas en-
fermedades. Actualmente la mayoría de los países latinoa-
mericanos tienen poca experiencia en el área experimental
correspondiente a medicina; sin embargo, debemos tener en
cuenta que la mayoría de los manejos y tratamientos que uti-
lizamos en el presente han nacido del área experimental, re-
cordando la necesidad de realizar experimentos en modelos
experimentales con animales antes de los estudios clínicos.(1)
Muchos profesionales de la salud, principalmente profesores
de ciencias biológicas, bajo la modalidad de iniciación cien-
tífica, realizan investigaciones que se basan en modelos ex-
perimentales, donde pequeños proyectos de corta duración
responden a preguntas simples pero con importancia en el
desarrollo de proyectos a futuro, además de la creación de una
mentalidad de investigación dentro del desarrollo profesional.
Son múltiples las ventajas que se obtienen al desarrollar estu-
dios de tipo experimental, por lo que se debe asegurar la reali-
zación de proyectos que tengan buena fundamentación en el
estudio del problema propuesto, los cuales suelen correspon-
der a tópicos poco investigados o que causan controversia,
generando hipótesis, y objetivos claros que serán priorizados
en el desarrollo del estudio; asimismo, la metodología es un
punto clave que será analizado en el proceso de aprobación
del comité de ética en investigación experimental, ya que sin
este último no podrá ser posible la publicación del trabajo rea-

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lizado. Dentro de la metodología, el tipo de análisis mediante
métodos estadísticos es definido a partir de los objetivos con
el fin de obtener los resultados esperados. (2)
Todo trabajo experimental debe cumplir con los 3 principios
de Russel (3R´s): reducción, refinamiento y reemplazo, que
no sólo ayudan en el aspecto ético sino que también asegu-
ran que el estudio sea estadísticamente válido y tenga como
resultado un artículo de muy buena calidad. Estos principios
aseguran el bienestar de los animales (Refinamiento) y un nú-
mero óptimo de animales (Reducción y Reemplazo). Como
se sabe, la experimentación en animales es el primer paso an-
tes de la investigación clínica; es por ello que un buen diseño
experimental nos augura un éxito en los ensayos clínicos en
humanos. (2)
Para entender los sesgos que se presentan en los estudios del
área experimental, es muy importante tener claros los concep-
tos de validad interna y externa. Vale la pena tener claro que
no existe validad externa sin validad interna, pero la presencia
del segundo no garantiza el primero. (1)
Daremos un ejemplo de estos conceptos. En una investiga-
ción que vamos a realizar, nuestra pregunta de investigación
es:” ¿El exceso de sacarina puede causar cáncer de vejiga? ”;
para ello consideraremos dos puntos importantes sobre el
proceso de recolección de los datos y selección de los sujetos
de estudio.
I) Normalmente en estudios de laboratorio se utilizan
ratas de la especie Wistar Blancas (que son genéticamente más
similares entre sí que las demás especies de ratas encontradas
en la naturaleza), de esta forma, podemos tener una muestra
más homogénea para verificar el efecto que tenemos interés
de investigar; en este caso, el efecto de la sacarina sobre la ocu-
rrencia de cáncer de vejiga.
II) Sin embargo, también podríamos utilizar ratas de la
calle en la investigación, si bien tienen una alta variabilidad
genética y gran heterogeneidad; estos son más representativos
de la población de ratas que existen en la naturaleza, por lo que
en el caso de que el efecto de la sacarina sobre la ocurrencia de
cáncer de vejiga se verifique en este grupo, podríamos afirmar
de forma más confiable que nuestra hipótesis es correcta.
Tomando en consideración los puntos I y II, las cuales son
más relacionadas con la validad interna y externa. Vamos a
definir cada uno de estos conceptos, de forma didáctica, para
facilitar la construcción de la respuesta. (3)
Validad Interna: Representa la capacidad que el conjunto de
datos (muestra) tiene para mostrar el efecto esperado con res-
pecto a variable de interés. En otras palabras,será la relación de
exposición (Sacarina) y el resultado (cáncer de vejiga en ratas)
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que existe, por lo menos en la muestra a estudiar.
Validad Externa: Representa la capacidad de la muestra de es-
tudio en identificar la diferencia, que esperamos obtener en la
población (en el caso que esta exista).
En otras palabras: ¿será que la relación de la exposición (sa-
carina) y el resultado (cáncer de vejiga en ratas) encontrada
en mi muestra de estudio pueda ser generalizada para toda la
población?
Es así que si quiero verificar si la muestra es capaz de detectar
de forma adecuada lo que espero obtener en nuestro estudio,
asegura una validez interna.
En el ejemplo de la investigación con ratas y el cáncer de veji-
ga, si el investigador optara por hacer la selección de los ratas
en base a la consideración II, las ratas tendrán una gran va-
riación en sus resultados, generando resultados inconclusos, o
encontrando sesgos de la selección de la muestra, donde una
solución para ello sería aumentar el tamaño de la muestra, de
forma que esta se torne representativa de la población de las
ratas de la calle en el estudio. Esto llevaría a otros 2 problemas:
costos y tiempo. El tamaño de la muestra debería de ser mu-
cho más grande y por lo tanto tomaría más tiempo la realiza-
ción del experimento. (4)
Es por ello que muchos investigadores optan por escoger ra-
tas de laboratorio (genéticamente más homogéneos) para au-
mentar la seguridad de que la relación entre el resultado (cán-
cer de vejiga) y la exposición (sacarina) exista, y en el caso de
que se encuentra una evidencia significativa, podemos con-
tinuar con un estudio en la siguiente fase, recién allí con una
mayor heterogeneidad de la muestra. (5)
Se debe tener en claro que el investigador que inicia con un
proyecto de investigación o una serie de experimentos, debe
conocer que un buen estudio tiene un equilibrio entre vali-
dez interna y externa, respetando las normas vigentes de ade-
cuada ejecución de una investigación ( escoger las variables
adecuadas, revisión de la literatura, cálculo de la muestra ade-
cuada, escoger el tipo de lineamiento experimental adecuado
para responder la pregunta de investigación) y también los as-
pectos logísticos ( tiempo de realización de estudio y el costo
de investigación). Actualmente es muy improbable conseguir
elaborar un estudio con el máximo de validez interna y ex-
terna necesaria para afirmación categóricamente y completa
de una pregunta de investigación. De forma general los estu-
dios terminan escogiendo la priorización de la validez interna,
con mayor homogeneidad en la muestra y consecuentemente
mayor tamaño del efecto esperado entre las diferencias de los
grupos, necesitándose un tamaño de muestra menor, redu-
ciendo el costo y el tiempo de ejecución. (6)
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Pero cabe destacar el problema con respecto a estudios basa-
dos en muestras muy homogéneas (ratas de laboratorio) ya
que el investigador puede encontrar una gran diferencia entre
los grupos y medidas observadas (sacarina aumenta el riesgo
de cáncer de vejiga en ratas), sin embargo si este estudio se
aplicara a una población más heterogénea (ratas de la Calle),
¿Esta diferencia aún seguirá existiendo?
Lo mismo pasa en la industria farmacéutica y grandes centros
de investigación sufren con problemas de la falta de validez
externa en los estudios. Un estudio publicado en la revista
Nature en 2010, realizó una revisión de estudios clínicos que
utilizaban solo participantes hombres para observar el efecto
de algunos medicamentos, esto debido a que los hombres te-
nían mayor probabilidad de obtener un efecto esperado como
muestra asegurando su validez interna, y pues se necesitaría
de una menor muestra para buscar las diferencias esperadas
por la hipótesis planteada en la investigación. Esta situación
llevó a un mayor número de efectos colaterales en mujeres
cuando el medicamento fue lanzado al mercado (7).
Es así que cuando el producto estudiado es aplicado en una
población mucho más heterogénea (incluyendo hombres con
características diferentes de aquellos que fueron incluidos en
el estudio clínico, además mujeres), resulta generando efectos
adversos: desde la mayor presencia de contraindicaciones en
mujeres o también la reducción del efecto esperado en la po-
blación como un todo. (7)
Estas son apenas algunas de las preguntas que rodean los con-
ceptos de validez interna y externa.
Además debemos pensar muy bien en las preguntas y desa-
fíos de iniciar el delineamiento de un estudio clínico ya que
puede ser de gran valor para dimensionar los costos perso-
nales como financieros y también prever problemas, siempre
haciendo un delineamiento experimental adecuado y consi-
derando los sesgos que pueden surgir en el proceso, no solo
por las limitaciones de un método determinado. Así también,
durante la recolección de datos nos encontraremos con una
serie de problemas que pueden comprometer los resultados
de la investigación.
La metodología utilizada en cada grupo de experimentos es
un punto clave para la reproductibilidad de estos a posterior
y por otros investigadores interesados en el tema. Agregado a
ello, el maximizar los detalles permitirá que se puedan agru-
par los estudios para elaborar los metanálisis, y poder tomar
decisiones para pasar al siguiente nivel que son los ensayos clí-
nicos. Dentro de la descripción que debe contener un artículo
de este tipo, se encontrarán los siguientes ejes: descripción del
bioterio central, ambiente y cajas, intervención y resultados de
las variables estudiadas. Dentro de ambiente se encontrarán
los datos de temperatura, humedad, ventilación, ciclo circa-
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diano controlado. En este último especificar datos como
el número de horas de luz y oscuridad(12 horas de Luz 12
horas de oscuridad) debido a que determinará el ciclo cir-
cadiano.
Dentro del Hogar, se incluirán los ítems como número de
animales por caja, además de la nutrición y el agua que re-
ciben; la cantidad y tipo de alimentos, en la mayoría de los
casos es a libre demanda, teniendo excepciones según los
protocolos estudiados. (1)
Con respecto a los animales, se debe consignar el número de
animales por grupo (el cual es importante puesto que luego
en la sección de análisis estadístico debe describir como se
realizaron los cálculos para el tamaño y potencia de la mues-
tra). El sexo y peso semanal (en la mayoría de los protocolos
se utilizan machos) deben ser considerados ya que interfie-
ren en la mayoría de experimentos como variables; sin em-
bargo, también es importante considerar la edad. (6)
A continuación se procede a describir la intervención. Co-
mienza con los días y horas de la intervención prevista en
el experimento, el tiempo entre la intervención y toma de
muestras o la transformación, tipo de intervención, descrip-
ción de las técnicas de operación u otras técnicas y materiales
utilizados, la dosis y / o frecuencia de la intervención, vía de
administración, drogas y dosis probadas (nombre del producto,
el fabricante, la concentración).
Luego de esto, se describe el método y la toma de las mues-
tras (sangre, orina, etc.), como se realizó la anestesia (dura-
ción, tipo de fármaco y método), la analgesia (tipo de fár-
maco y método) y la eutanasia (tipo de fármaco y método).
Se debe especificar las normas de bioética utilizadas para el
menor sufrimiento del animal.(8)
El diseño del estudio debe ser de acuerdo a los objetivos
planteados. Se debe describir correctamente las variables
dependiente e independiente y realizar un análisis y descrip-
ción de todos los factores que pueden amenazar la validez
interna y externa. Indicar si hubo división de los grupos en
subgrupos, según edad, sexo, peso, estado fisiológico, etc; o si
se controlaron tales variables. Se debe presentar la estadística
utilizada y su nivel de significancia.
Continuar con una descripción de forma precisa de la po-
blación, la muestra, y el método empleado para la obtención
de la muestra; actualmente en modelos experimentales no
se utilizan más de 10 animales por grupo, salvo protocolos
donde se necesite hacer correlaciones. Señalar de que forma
el grupo control y experimental fueron seleccionados.
Como parte del desarrollo del experimento, se debe tratar
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que cada grupo de tratamiento tenga iguales condiciones, 4. Nature (ed.) (2015): Let’s thinks about cognitive bias (526, pp.163,
número de animales o ensayos in vitro, y si no se da el caso, 2015).
5. Field, A. (ed.) (2009): Discovering Statistics with SPSS. Third Edition.
explicar claramente la razón de la desigualdad, ya que puede pág. 244–258.
llevar a una mayor incidencia de cometer error Tipo II. (9) 6. Festing M. Altman D. Guidelines for the design and statistical analysis
Existen múltiples factores que pueden confundir los resulta- of experiments using laboratory animals. ILAR journal / National Re-
dos de un estudio experimental, debido a ellos es necesario search Council, Institute of Laboratory Animal Resources. 2002. 43 (4),
que se delimite correctamente la población en estudio, tra- 7. Kim A. Tingen C. Woodruff T. Sex bias in trials and treatment must
end. Nature . 2010. 465 (7299), pág. 688–689. DOI: 10.1038/465688a.
tando de minimizar las diferencias en todos los sujetos de 8. Kilkenny C. Browne W. Cuthill I. Emerson M. Altman D. Animal
estudio. (9) research: reporting in vivo experiments: the ARRIVE guidelines. Bri-
tish journal of pharmacology.2010. 160 (7), pág. 1577–1579. DOI:
A la hora de escribir los resultados, como todo estudio epi- 10.1111/j.1476-5381.2010.00872.x.
demiológico, en un primer momento se debe describir las 9. Mullane K. Enna S. Piette J. Williams M. Guidelines for manuscript
submission in the peer-reviewed pharmacological literature. Bio-
características de los animales usados para luego escribir los chemical pharmacology.2015. 97 (3), pág. 225–235. DOI: 10.1016/j.
resultados obtenidos según las variables de estudio. Se debe bcp.2015.06.023.
describir los métodos estadísticos usados con suficiente de-
talle, a fin de que los lectores pueden tener facilidad de veri-
ficar los resultados con los datos originales de las variables
de los estudios. Cuando se tiene solo 2 grupos para ser com-
parados, la medida a utilizar son las proporciones en caso
de variables cualitativas y la diferencia de medias en caso de
variables cuantitativas, en este último caso también es im-
portante especificar la desviación estándar entre las unida-
des experimentales. El nivel de significancia usualmente es
menor al 5 %. (2) Cuando se menciona como característica
de una variable la distribución normal es necesario añadir el
método estadístico que haya confirmado esta característica.

Por último, agregar el número de comité de ética por el cual

el estudio fue aprobado previamente. Es importante colocar
la fuente de financiamiento, y negar algún tipo de conflicto
de intereses, ya que si los hay, podrían indicar que las acti-
vidades, conductas e interpretaciones fueron influenciadas
por algún tipo de ganancia material. (4)

Correspondencia:
Lysien Ivania Zambrano
lysien_j_zambrano@hotmail.com

Recibido: 17/07/16
Aprobado: 24/08/16

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Hulley et al. (ed.) (2007): Designing Clinical Research. Third Edition.

2. Hooijmans C. Leenaars M. Ritskes M. A gold standard publication
checklist to improve the quality of animal studies, to fully integrate the
Three Rs, and to make systematic reviews more feasible. Alternatives to
laboratory animals : ATLA. 2010. 38 (2). 167–182.
3. Nuzzo, R. How Scientists fool themselves. How Scientists fool themsel-
ves. Nature. 526. pág. 182–185.

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