FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

El flujo de electrones está íntimamente acoplado al proceso de fosforilación, y no ocurre a

menos que también pueda verificarse este último. Esto, en un sentido, impide el desperdicio
ya que los electrones no fluyen a menos que exista la posibilidad de formación de fosfatos
ricos en energía. Si el flujo de electrones no estuviera acoplado a la fosforilación, no habría
formación de ATP y la energía de los electrones se degradaría en forma de calor.

Puesto que la fosforilación del ADP para formar ATP se encuentra acoplada a la oxidación
de los componentes de la cadena de transporte de electrones, este proceso recibe el
nombre de fosforilación oxidativa.

En tres transiciones de la cadena de transporte de electrones se producen caídas

importantes en la cantidad de energía potencial que retienen los electrones, de modo que
se libera una cantidad relativamente grande de energía libre en cada uno de estos tres
pasos, formándose ATP.

Fig.9.5- Diagrama de la cadena respiratoria y de la fosforilación oxidativa asociada

HIPÓTESIS QUIMIOSMÓTICA
Durante mucho tiempo se intentó explicar la naturaleza del enlace entre la cadena
respiratoria y el sistema de fosforilación. En 1961, Mitchell propuso la hipótesis
quimiosmótica, que es la que actualmente se acepta en general.

Esta hipótesis ha sido apoyada por las evidencias experimentales encontradas en distintos
laboratorios, lo que le valió a Mitchell el premio Nobel en 1978.

La misma propone que el transporte de electrones y la síntesis de ATP están acopladas por
un gradiente protónico a través de la membrana mitocondrial.

Según este modelo, el transporte de electrones paso a paso, desde el NADH o el FADH2
hasta el oxígeno a través de los transportadores de electrones, da por resultado el bombeo
de protones a través de la membrana mitocondrial interna hacia el espacio entre las
membranas mitocondriales interna y externa.

Este proceso genera un potencial de membrana a través de la membrana mitocondrial

interna, ya que el medio que ocupa el espacio intermembranoso se carga positivamente.

La diferencia en concentración de protones entre la matriz y el espacio intermembranoso

representa energía potencial, resultado en parte de la diferencia de pH y en parte de la
diferencia en la carga eléctrica de los lados de la membrana. Cuando los protones pueden
fluir de regreso a la matriz, descendiendo por el gradiente protónico, se libera energía
utilizable en la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi.

Los protones regresan a la matriz a través de conductos especiales situados en la

membrana interna. Estos conductos están dados por un gran complejo enzimático, llamado
ATP SINTETASA. Este complejo consta de dos proteínas: F0 y F1.

Las partículas F0 están incluidas en la membrana mitocondrial interna y la atraviesan desde

afuera hacia adentro. Se presume que poseen un conducto o poro interior que permite el
paso de los protones. Las partículas F1 (que ya habíamos mencionado, al describir la
estructura mitocondrial) son proteínas globulares grandes consistentes en nueve
subunidades polipeptídicas unidas a las partículas F0 en el lado de la membrana que linda
con la matriz. Se comprobó que propulsa la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi. Conforme
los protones descienden a lo largo del gradiente de energía, dicha energía utiliza para
sintetizar ATP. De esta manera, el gradiente protónico que existe a través de la membrana
mitocondrial interna acopla la fosforilación con la oxidación.
Fig. 9.6 - Esquema comparativo de la quimiósmosis en la mitocondria y el cloroplasto. Observe el
bombeo de protones desde la matriz mitocondrial al espacio intermembrana (sombreado). El ATP se
forma del lado de la membrana que mira a la matriz, por la difusión de los H + a través del complejo
ATPsintetasa. En el cloroplasto, a través de la membrana tilacoidal se bombean protones desde el
estroma al compartimiento tilacoidal (sombreado). Como los H+ atraviesan la membrana a través de la
ATPsintetasa, la fosforilación del ADP tiene lugar del lado de la membrana que mira al estroma.

La molécula de glucosa que inició la glucólisis está completamente oxidada. Parte de su

energía se ha invertido en la síntesis de ATP. Sin embargo, la mayor parte de la energía
está en los electrones capturados por el NAD+ y el FAD.

Los electrones procedentes de la glucólisis, de la oxidación del ácido pirúvico y del ciclo de
Krebs se encuentran en un nivel energético aún muy alto. En el transporte de electrones
éstos son conducidos a través de una cadena con múltiples y sucesivos aceptores. Cada
uno de los cuales es capaz de aceptar electrones a un nivel ligeramente inferior al
precedente. Los transportadores pueden existir en dos estados de oxidación próximos,
pasando del uno al otro según acepten o desprendan electrones.

Cada par redox sólo puede recibir electrones de otro par que tenga potencial de reducción
más negativo y solo puede cederlos al par que lo tenga menos negativo. El potencial mas
negativo de la cadena respiratoria es el NAD+ con -0,32 voltios. En el otro extremo está el
agua con +0,82 voltios.

Cuando los electrones se mueven por la cadena transportadora salen a niveles energéticos
inferiores y van liberando energía. Esta energía se emplea para fabricar ATP, a partir de
ADP, en el proceso de fosforilación oxidativa.

Por cada dos electrones que pasan del NADH al oxígeno se forman 3 moléculas de ATP.
Por cada dos electrones que pasan desde el FADH 2 al oxígeno forman 2 de ATP. El
mecanismo por el cual se produce ATP se explica por la teoría del acoplamiento
quimiosmótico.

Actividad de investigación 5: Acoplamiento quimiosmótico

Introducción: El transporte de electrones, a través de la

membrana mitocondrial, produce una liberación de energía
imprescindible para la síntesis de las moléculas
energéticas como el ATP a nivel de unas ezimas llamadas
ATPsintetasas. Este ATP es el que después se usará en las
distintas reacciones bioquímicas de la célula que
requieran un aporte energético.

La célula viva es más eficaz que cualquier motor. Cerca del 40% de energía liberada de la
combustión de la glucosa se emplea en convertir ADP en ATP. Resumiendo todo lo
anteriormente explicado podemos hacer un balance energético global de los procesos de
catabolismo de los azúcares:

 La glucólisis produce 2 moléculas de ATP y 2 de NADH.

 En la cadena transportadora de electrones cada molécula de NADH se convierteen
3 de ATP (2 NADH x 3 = 6 ATP).
 La conversión de acido pirúvico en AcetilCoA en la matriz mitocondrial da 2 de
NADH por cada molécula de glucosa. (2 NADH x 3 ATP= 6 ATP).
 En el ciclo de Krebs entran 2 moléculas de acetil-CoA y dan dos de GTP y 6 de
NADH y 2 de FADH2:

2 GTP= 2 ATP
6 NADH X 3 ATP= 18 ATP
2 FADH X 2 ATP= 4 ATP

Total de moléculas de ATP en ciclo de Krebs: 24 ATP.

La suma de todas las moléculas de ATP, formadas en el mecanismo de oxidación completa

de una molécula de glucosa, arroja un balance de 36 moléculas de ATP sintetizadas.

LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
Se realiza en las crestas de la
mitocondria. La teoría quimiosmótica
propuesta en 1961 por Peter Mitchell,
explica como un gradiente de
concentración de protones vincula el
transporte de electrones con la síntesis
de ATP.
La oxidación de NADH y FADH2 se
lleva a cabo en la cadena de electrones,
se reducen de los más bajos a los más
altos.
Por cada 2 electrones que ingresan a la
cadena, se reduce un átomo de oxígeno
y se producen 2,5mol de ATP.
La ATP sintasa cataliza la síntesis de ATP mediante un mecanismo de cambio y unión.

Inhibidores de la cadena de electrones:

• Rotenona o amital
• Antimicina A
• Cianuro La síntesis de ATP a partir de ADP y Pi en la mitocondria
Coenzima Q Citocromo c ADP + Pi ATP Fumarato Succinato FADH2 ADP + Pi ATP
ADP + Pi ATP 2e- 2e- NAD NADH 2e- 2H+ + ½ O2 H2O Cianuro Antimicina A
Rotenona o amital

Fosforilación oxidativa Fosforilación oxidativa

La Fosforilación
oxidativa.Es un proceso
bioquímico que ocurre en las
células. Es el proceso
metabólico final
(catabolismo) de la
respiración celular, tras la
glucólisis y el ciclo del ácido
cítrico. De una molécula de
glucosa se obtienen 38
moléculas de ATP mediante
la fosforilación oxidativa.

Dentro de las células, la

fosforilación oxidativa se
produce en las membranas Concepto: Es la transferencia de electrones de los
biológicas. En procariotas es
la membrana plasmática y equivalentes reducidos NADH y FADH, obtenidos en
en eucariotas es la la glucólisis y en el ciclo de Krebs hasta el oxígeno
membrana interna de las dos molecular, acoplado con la síntesis de ATP. Este
de que consta la
proceso metabólico está formado por un conjunto
mitocondrial. El NADH y
FADH2, moléculas de enzimas complejas, ubicadas en la membrana
donadores de electrones que interna de las mitocondrias, que catalizan varias
"fueron cargadas" durante el reacciones de óxido-reducción, donde el oxígeno es
ciclo del ácido cítrico, se
utilizan en un mecanismo el aceptor final de electrones y donde se forma
intrincado (que implica a finalmente agua.
numerosas enzimas como la
NADH-Q reductasa, la citocromo c oxidasa y la citocromo reductasa), gracias a la bomba
H+ que moviliza los protones contra un gradiante de membrana
Transferencia de energía por quimiosmosis
La fosforilación oxidativa funciona con dos tipos de reacciones que están acopladas, una
utiliza reacciones químicas que liberan energía, mientras que la otra utiliza esa energía
para llevar a cabo sus reacciones.El flujo de electrones a través de la cadena de transporte
de electrones, desde donantes de electrones como NADH a aceptores de electrones tales
como oxígeno, es un proceso exergónico – libera energía, mientras que la síntesis de ATP
es un proceso endergónico, el cual requiere de energía. Tanto la cadena de transporte de
electrones como la ATP sintasa, están embebidos en la membrana, y la energía es
transferida de la cadena de transporte de electrones a la ATP sintasa por el movimiento de
protones a través de la membrana, en un proceso llamado quimiosmosis.En la práctica, se
comporta de manera similar a un simple circuito eléctrico, con una corriente de protones
siendo transportados desde el lado negativo, lado N de la membrana hacia el lado positivo,
lado P, por las enzimas de la cadena de transporte de electrones que bombean protones.
Estas enzimas son como una batería, ya que realizan trabajo, para llevar corriente a través
del circuito. El movimiento de protones crea un gradiente electroquímico a través de la
membrana, el cual es llamado generalmente fuerza protón-motriz. Este gradiente tiene dos
componentes: una diferencia en la concentración de protones (un gradiente de pH) y una
diferencia en el potencial eléctrico, con un lado N, que posee carga negativa. La energía
es almacenada mayormente como la diferencia de potenciales eléctricos en la mitocondria,
pero también como un gradiente de pH en los cloroplastos.

La ATP sintasa libera esta energía almacenada completando el circuito y permitiendo a los
protones fluir a través del gradiente electroquímico, de nuevo hacia el lado N de la
membrana.17 Esta enzima se comporta de manera similar a un motor eléctrico ya que
utiliza la fuerza protón-motriz para llevar a cabo la rotación de parte de su estructura y
acoplar este movimiento con la síntesis de ATP.

La cantidad de energía liberada por la fosforilación oxidativa es elevada, comparada con la

cantidad producida por la fermentación anaeróbica. La glucólisis produce solo 2 moléculas
de ATP, en cambio entre 30 y 36 ATPs son producidos por la fosforilación oxidativa de los
10 NADH y 2 succinato obtenidos a través de la conversión de una molécula de glucosa en
dióxido de carbono y agua. Este resultado de ATP es el máximo teórico, ya que en la
práctica algunos protones se filtran a través de la membrana, disminuyendo así la
producción de ATP.

El ATP- sintasa
Un gran complejo proteico llamado ATP-sintasa situado en la membrana mitocondrial
interna (MMI), permite a los protones pasar a través en ambas direcciones; genera el ATP
cuando el protón se mueve a favor del gradiente. Debido a que los protones se han
bombeado al espacio intermembranoso de la mitocondria en contra de gradiente, ahora
pueden fluir nuevamente dentro de la matriz mitocondrial y mediante la vía ATP-sintasa, se
genera ATP en el proceso. La reacción es:

|ADP3- + H+ + Pi ↔ ATP4- + H2O|

Cada molécula de NADH contribuye suficientemente a generar la fuerza motriz de un

protón que produzca 2,5 moléculas de ATP. Cada molécula de FADH2 produce 1,5
moléculas de ATP.Todas juntas, las 10 moléculas de NADH y las 2 FADH2 provenientes
de la oxidación de la glucosa (glucólisis, descarboxilación oxidativa de piruvato en acetil-
CoA y ciclo de Krebs) a formar 28 de las 36 moléculas totales de ATP transportadoras de
energía. Hay que decir que estos valores de moléculas de ATP son máximos. En realidad
cada molécula de NADH contribuye a formar entre 2 y 3 moléculas de ATP, mientras que
cada FADH2 contribuye a un máximo de 2 moléculas de ATP.
.La fosforilación oxidativa es un proceso metabólico que utiliza energía liberada por
la oxidación de nutrientes para producir adenosina trifosfato (ATP). Se le llama así para
distinguirla de otras rutas que producen ATP con menor rendimiento, llamadas "a nivel
de sustrato". Se calcula que hasta el 90 % de la energía celular en forma de ATP es
producida de esta forma.[1]

Consta de dos etapas: en la primera, la energía libre generada mediante reacciones

químicas redox en varios complejos multiproteicos —conocidos en su conjunto
como cadena de transporte de electrones— se emplea para producir, por diversos
procedimientos como bombeo, ciclos quinona/quinol o bucles redox, un gradiente
electroquímico de protones a través de una membrana asociada en un proceso
llamado quimiosmosis. La cadena respiratoria está formada por tres complejos de
proteínas principales (complejo I, III, IV), y varios complejos «auxiliares», utilizando una
variedad de donantes y aceptores de electrones. Los tres complejos se asocian en
supercomplejos para canalizar las moléculas transportadoras de electrones, la coenzima
Q y el citocromo c, haciendo más eficiente el proceso.
La energía potencial de ese gradiente, llamada fuerza protón-motriz, se libera cuando se
translocan los protones a través de un canal pasivo, la enzima ATP sintasa, y se utiliza en
la adición de un grupo fosfato a una molécula de ADP para almacenar parte de esa
energía potencial en los enlaces anhidro «de alta energía» de la molécula
de ATP mediante un mecanismo en el que interviene la rotación de una parte de la
enzima a medida que fluyen los protones a través de ella. En vertebrados, y
posiblemente en todo el reino animal, se genera un ATP por cada 2,7 protones
translocados. Algunos organismos tienen ATPasas con un rendimiento menor.
Existen también proteínas desacopladoras que permiten controlar el flujo de protones y
generar calor desacoplando ambas fases de la fosforilación oxidativa.
Aunque las diversas formas de vida utilizan una gran variedad de nutrientes, casi todas
realizan la fosforilación oxidativa para producir ATP, la molécula que provee de energía
al metabolismo. Esta ruta es tan ubicua debido a que es una forma altamente eficaz de
liberación de energía, en comparación con los procesos alternativos de fermentación,
como la glucólisis anaeróbica.
Pese a que la fosforilación oxidativa es una parte vital del metabolismo, produce una
pequeña proporción de especies reactivas del oxígeno tales como superóxido y peróxido de
hidrógeno, lo que lleva a la propagación de radicales libres, provocando daño celular,
contribuyendo a enfermedades y, posiblemente, al envejecimiento. Sin embargo, los
radicales tienen un importante papel en la señalización celular, y posiblemente en la
formación de enlaces disulfuro de las propias proteínas de la membrana interna
mitocondrial. Las enzimas que llevan a cabo esta ruta metabólica son blanco de
muchas drogas y productos tóxicos que inhiben su actividad.