TOMA, CONSERVACIÓN Y ENVÍO

DE MUESTRAS PECUARIAS Y
AGRÍCOLAS AL CENTRO DE
DIAGNÓSTICO

GOBERNACIÓN DE ANTIOQUIA
CONVENIO ICA- SECRETARÍA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO
RURAL MEDELLÍN, 2009
La propiedad intelectual de este material
pertenece a la Gobernación de Antioquia,
Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural.
Prohibida la reproducción total o parcial,
por cualquier medio o con cualquier
propósito, sin la autorización escrita de
estos.

Segunda edición: Diciembre de 2009

Financiación de la publicación:
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural

Diseño, diagramación e impresión

Digital Express Ltda. - Medellín

Colaboradores
Funcionarios Instituto Colombiano
Agropecuario ICA Área Pecuaria

Sandra Patricia Acevedo

Garcés y Amparo Gómez
Ramírez.
Bacteriólogas Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural

Fotografías
Todas las fotografías utilizadas en la impresión de
esta cartilla, fueron aportadas por funcionarios de
la Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural de
Antioquia
Impreso y hecho en

Colombia Medellín,

2009.
TOMA, CONSERVACIÓN Y ENVÍO DE MUESTRAS
PECUARIAS Y AGRÍCOLAS AL CENTRO DE
DIAGNÓSTICO

Luis Alfredo Ramos Botero

Gobernador de Antioquia

Edgar Arrubla Cano

Secretario de Agricultura y Desarrollo Rural

Juan Guillermo Vélez González

Director Desarrollo Rural

Nestor Yarce García

Coordinador Regional
Antioquia Instituto
Colombiano Agropecuario

Cristobal Jose Díaz Anaya

Coordinador Equipo Técnico de Sanidad
Preparado por:
Francisco Javier Pabón
Hernández
Médico Veterinario

Gloria Elena Guzmán Restrepo

Ingeniera Agrónoma, M. Sc

Susana Maya Bolívar

Ingeniera Agrónoma, Ph. D

Gobernación de Antioquia
Convenio ICA - Secretaría de Agricultura y Desarrollo Rural
Medellín, 2009
 ÍNDICE

1. Diagnóstico pecuario 13
1.1 Factores básicos en la toma y envío de muestras al centro de diagnóstico
13
1.1.2 Calidad de la muestra 13
1.1.3 Cantidad de la muestra 13
1.1.4 Tiempo en la ruta crítica de la muestra 14
2. Recomendaciones generales para el envío de
muestras al centro de diagnóstico 16
2.1 Pruebas diagnósticas solicitadas al centro de diagnóstico 17
2.2 Sugerencias para toma de muestras de sangre 18
2.2.1 Sugerencias para hematología 18
2.2.2 Anticoagulantes mas usados 18
2.2.3 Sugerencias para química sanguínea, suero o plasma 19
2.3 Sugerencias en toma y envío de muestras para bacteriología 20
2.3.1 Secrecion de oidos 20
2.3.2 Secreciones oculares 21
2.3.3 Secreciones vaginales 21
2.3.4 Líquido cefalorraquídeo 21
2.3.5 Liquidos diferentes al cefalorraquídeo 22
2.3.6 Hemocultivos 22
2.3.7 Urocultivos 23
2.3.8 Sugerencias en cultivo bacteriológico de leches 23
2.4 Recuento de celulas somáticas en leche (rcs) 24
2.5 Sugerencias en la toma y envío de muestras para un estudio parasitológico
24
2.5.1 Coprológicos 24
2.5.2 Hemoparasitos – parásitos en sangre 25
2.5.3 Ectoparasitos - parásitos externos 26
2.5.4 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico en pelos 27
2.5.5 Recomendaciones para el estudio cultivo micológico 27
2.6 Recomendaciones para el estudio de patología 28
2.7 Recomendaciones para examen de citologías 30
2.8 Procedimiento frente a una patología (enfermedad) en un predio 30
2.9 Equipo básico en oficinas de sanidad para la toma de muestras pecuarias
32
3. Diagnóstico agrícola 44
3.1 Factores básicos en la toma y envío de muestras agrícolas 45
3.1.1 Calidad de la muestra 45
3.1.2 Cantidad de la muestra 46
3.1.3 Tiempo en la ruta crítica de la muestra 46 5
3.2 Toma de diferentes tipos de muestras 46
3.2.1 Plantas grandes 47
3.2.2 Plantas pequeñas 47
 4. Diagnóstico de daños causados por insectos
plagas (diagnóstico entomológico) 48
4.1 Procedimiento general de diagnósticos entomológicos 48
4.1.1 Estructura afectada sin presencia del insecto causante 49
4.1.2 Área lesionada y presencia del insecto causante 50
4.2 Como enviar muestras que contengan insectos 50
4.3 Muestra para determinar organismos benéficos en insectos 52
4.3.1 Muestras a enviar al laboratorio 52
4.4 Equipos de recolección de insectos 53

5. Diagnóstico de daños causados por

enfermedades (diagnóstico fitopatológico) 57
5.1 Diagnóstico de la enfermedad 57
5.1.1 Síntomas por causas bióticas 57
5.2 Frutos y otros tejidos frescos o suculentos: 58
5.3 Flores y frutillos cuajados 59

6. Toma y envío de muestras para análisis nematológico 60

7. Síntomas por circustancias particulares del ambiente 61

8. Instrumentos para muestreo de enfermedades 62

9. Muestras para determinar hongos antagónicos 63

10. Síntomas de presunción viral 63

11. Muestras para determinar daño por herbicidas 64

12. Muestras para determinar viabilidad de semillas 65

13. Anexos 66

6
 ÍNDICE DE TABLA

Tabla Muestras para exámenes bacteriológicos 3

1. 3
Tabla Muestras para exámenes bacteriológicos (continuación) 3
1. 4
Tabla Muestras para exámenes bacteriológicos (continuación) 3
1. 5
Tabla Muestras para exámenes de virología 3
2. 6
Tabla Muestras para exámenes de histopatología 3
3. 7
Tabla Muestra para exámenes de parasitología (parásitos 3
4. internos) 7
Tabla Muestras para exámenes de ectoparásitos (parásitos 3
5. externos) 8
Tabla Muestras para electrolitos (Ionogramas) 3
6. 8
Tabla Muestras para exámenes de hematozoarios (parásitos en 3
7. sangre) 9
Tabla Muestras para exámenes de enfermedades reproductivas 4
8. 0
Tabla Muestras de química sanguínea para enfermedades 4
9. metabólicas 1
Tabla Muestras de biología molecular PCR (Reacción de la 4
10. Polimerasa en Cadena) 1
Tabla Muestras para exámenes de toxicología 4
11. 2
Tabla Muestras para exámenes de toxicología (continuación) 4
11. 3
Tabla Síntomas más comunes encontrados en plantas
12. asociados a daños 5
por insectos o artrópodos 5
7
 PRESENTACIÓN

El Centro de Diagnóstico Agropecuario Convenio Ica Secretaria de

Agricultura y Desarrollo Rural, cuenta con profesionales calificados en
las diferentes áreas de la sanidad, los cuales además de desempeñar
labores de diagnóstico como un servicio a la comunidad, se encargan
de apoyar la vigilancia zoo y fitosanitaria de nuestro Departamento a
través del desarrollo de campañas de sanidad agropecuaria y proyectos
de investigación aplicada en los temas de interés para nuestra nación y
los países con los cuales se quiere llegar a tener un comercio de
productos de este subsector, con miras al establecimiento y
permanencia en los mercados internacionales.

Ha sido para el centro de diagnóstico agropecuario del convenio una

gran preocupación el poco uso que se da al laboratorio para el
diagnóstico de enfermedades y plagas, principalmente en el área
agrícola y es su deseo motivar el uso de una herramienta tan
importante como el laboratorio para la obtención de diagnósticos
acertados, con lo cual se puedan hacer manejos y controles mas
efectivos disminuyendo así los riesgos de perdidas económicas en la
producción agropecuaria en un alto porcentaje . Por esta razón el
equipo técnico de este centro Agropecuario Convenio Ica – Secretaria
de Agricultura, se dio a la tarea de elaborar una cartilla en forma
ordenada, clara y práctica, con criterios precisos en lo técnico a fin de
que se convierta en una guía para los procedimientos a nivel de campo
en el correcto manejo, toma, conservación y envió del material vegetal
y muestras pecuarias al centro de diagnóstico.

Se espera que esta cartilla sea un manual de procedimientos que

permita a profesionales, técnicos y productores del sector agropecuario
prevenir, corregir o mitigar los impactos negativos generados por
plagas, enfermedades y sustancias nocivas de la manera mas amigable
y racional con el medio ambiente, procurando la seguridad alimentaría,
obtención de productos inocuos, la investigación y el desarrollo
tecnológico, haciendo así mas eficientes las actividades agrícolas y
pecuarias de Antioquia.
EDGAR ARRUBLA CANO
Secretario de Agricultura y
Desarrollo Rural Departamento
de Antioquia
Medellín, octubre 2009.

9
 INTRODUCCIÓN

Los servicios que brinda el Centro de Diagnóstico agrícola y pecuario

del convenio ICA-SECRETARIA DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL,
dan a los profesionales del sector herramientas para desarrollar su
trabajo de asistencia técnica y asesoría a los diferentes productores.
Los resultados del laboratorio son valiosos siempre que se valide la
información en campo.

Aunque la experiencia y el ojo clínico conducen a los profesionales a un

diagnóstico presuntivo, no siempre aquellos son confiables, pues las
patologías pueden tener sintomatologías semejantes que pueden llevar
a diagnosticar y tratar equivocadamente la problemática, con un
incremento en los costos de producción, desmereciendo la calidad y
cantidad del producto final. Por tal motivo el uso del laboratorio es la
mejor herramienta para la toma de decisiones, además, en el Centro de
Diagnóstico se tiende a la búsqueda de técnicas cada vez más rápidas,
sensibles, específicas y confiables para un correcto diagnóstico.

En el Centro de Diagnóstico se reconocen e identifican enfermedades y

plagas que afectan la producción agropecuaria, mediante la aplicación
de modernos métodos y procedimientos diagnósticos e investigación
aplicada de laboratorio y de campo.

Los diagnósticos de laboratorio, permiten ir creando un historial

fitosanitario y zoosanitario de las patologías de un municipio, una
región o un Departamento, enfocando estas problemáticas desde el
punto de vista de riesgo poblacional, y no individual, contribuyendo a
formular los diferentes planes, programas y proyectos a través de
campañas de prevención, control y manejo que conducen a una
verdadera vigilancia epidemiológica.

El centro de diagnóstico cuenta con un equipo de profesionales

altamente calificados y con experiencia, que brindan la asesoría
indispensable en estas áreas. Además garantizamos oportunidad y
calidad en los servicios brindados.
 “UN DIAGNÓSTICO A TIEMPO ES MÁS
EFECTIVO Y ECONÓMICO QUE UN BUEN
CONTROL”

11
 1. DIAGNÓSTICO PECUARIO

1.1 FACTORES BÁSICOS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS AL

CENTRO DE DIAGNÓSTICO

El éxito para un diagnóstico correcto y oportuno depende de tres factores:

• Calidad de la muestra
• Cantidad de la muestra
• Tiempo transcurrido en la ruta crítica

1.1.2 CALIDAD DE LA MUESTRA

La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad

o aparición del problema, para evitar contaminación, principalmente
por bacterias, hongos o microorganismos del medio ambiente.

El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no

contaminado, ni con otros productos que permitan alterar la muestra.

Igualmente, se debe tener presente de no maltratar al animal cuando

se vaya a tomar la muestra ya que nos puede alterar los resultados,
por lo tanto sujetar bien y adecuadamente el animal, sin causarle
traumas.

Cuando utilicemos medios o líquidos conservadores como glicerina

tamponada, medios de enriquecimiento y otros, no deben estar
adulterados, ya que no cumplen con el objetivo de conservar la
muestra hasta su procesamiento. Además, se debe utilizar el medio
adecuado para el transporte de la muestra como refrigeración o
congelación si la muestra lo requiere.

Los instrumentos para tomar las muestras como: Tubos, agujas, pinzas,
tijeras, jeringas y otros, al igual que los recipientes a usar deben ser
estériles y cerrados herméticamente. La muestra debe ser transportada
al laboratorio en el menor tiempo posible, toda muestra debe ser
remitida con la mayor información posible, ya que los datos allí
consignados son vitales para un buen diagnóstico y una buena
recomendación.
1.1.3 CANTIDAD DE LA MUESTRA

Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona una

enfermedad, y que permite al laboratorio identificar su causa. Esta puede ser:
Fluidos corporales, sangre, suero, 13
semen, orina, secreciones, materia fecal, órganos y tejidos.
La muestra debe ser lo más representativa en cantidad, tanto del
animal como del hato (porcentaje de animales de la finca).

En trastornos nerviosos: enviar fragmentos de

cerebro y/o cerebelo. Trastornos digestivos:
fragmentos de intestinos y/o estómagos.
Trastornos respiratorios: fragmentos de pulmones y/o tráquea.
Lo anterior puede ir acompañado de otro tipo de muestra como orina,
sangre, secreciones, materia fecal y otras.

“Una muestra suficiente, reciente y limpia, tiene alta

probabilidad de diagnóstico”

1.1.4 TIEMPO EN LA RUTA CRÍTICA DE LA MUESTRA

Es el tiempo transcurrido entre la notificación del caso y la entrega de
los resultados del laboratorio, es un tiempo controlado por el hombre
aumentándolo o disminuyéndolo, entre más corto sea el tiempo se va
obtener un diagnóstico correcto y oportuno.

Factores que intervienen:

• Notificación del caso

• Visita a la finca
• Toma de muestras
• Envío de muestra al laboratorio
• Recibo de muestras en el laboratorio
• Resultado de laboratorio

El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que

puedan ser útiles para el diagnóstico.
SIGNOS Y SÍNTOMAS

Secreción vulvar
en búfala
14 Vulvovaginitis en bovinos Trastornos nerviosos en ternera

Signo nervioso en bovino Erupciones en pezones bovino

Diarrea en
lechones
 Hematuria enzoótica bovina Caquexia muscular
distrófica

Desprendimiento del
epitelio gingival en bovinos

Equino caquéctico

LESIONES MACROSCÓPICAS

Lesiones petequiales Áreas hemorrágicas Úlceras en botón en intestino

en riñón en vejiga

Órganos cavidad abdominal

Inflamación y material
purulento en tonsilas Placentitis en bovinos

15

Pulmón bovino, con lesiones Bovino con úlceras en lengua

granulomatosos por
tuberculosis
2. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL ENVÍO
DE MUESTRAS AL CENTRO DE DIAGNÓSTICO

• Al Laboratorio, se pueden enviar animales pequeños (especies

menores) enfermos, órganos, tejidos, secreciones, líquidos del
cuerpo, parásitos y otros.

• Enviar muestras de animales recientemente fallecidos, en menos de

2 horas, ya que comienza el proceso de autolisis en los tejidos. En
especies de gran tamaño (bovinos, equinos y otros) es preferible
enviar determinadas muestras.

• Cuando el animal lleve más de dos horas de muerto y no se le ha

dado refrigeración adecuada, no deben enviarse muestras al
laboratorio para el análisis microbiológico, ya que puede haber
contaminación por otros microorganismos diferentes al agente
causal.

• Toda muestra que llegue al laboratorio debe ir acompañada de su

respectivo protocolo completamente identificado.

• Cuando se realicen necropsias, primero tome muestras para

bacteriología, virología y posteriormente para histología (tejidos) y
luego para parasitología.

• Los animales denominados “colas” (pobre condición física) no deben

ser enviados para exámenes, excepto si son los únicos animales
enfermos.

• Cuando no se tenga conocimiento sobre que muestras tomar en

caso de una enfermedad, se debe llamar al Centro de Diagnóstico
preferiblemente para solicitar la asesoría e información requerida.

• Rotule e identifique la muestra adecuadamente, no utilice tinta ni

cinta que se desprenda por acción de la humedad.

• Siempre utilice instrumental y recipientes estériles, limpios y secos

para microbiología, así como para los otros tipos de muestras.

ENVÍO, TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS

 Tejidos separados en Transporte de tejidos separados Transporte de tejidos en
bolsas plásticas y tubos en bolsas plásticas y termo con bolsa plástica con
plásticos estériles bien refrigeración y su respectivo protoloco refrigeración en caja de
identificados cartón herméticamente
cerrada y su respectivo
protocolo
2.1 PRUEBAS DIAGNÓSTICAS SOLICITADAS AL CENTRO DE
DIAGNÓSTICO

• Aislamiento e identificación del agente patógeno de las muestras

tomadas del animal, como: Bacterias, virus, hongos, parásitos y
otros.

• Aumento o descenso de títulos de anticuerpos en suero de un animal

como respuesta a un estímulo inmunógeno determinado.

• Determinación de las variaciones cualitativas en muestras como

orina, sangre, materia fecal (aspecto, olor, color, otros) y
cuantitativas como (densidad, pH, hemoglobina, hematocrito,
huevos por gramo), con respecto a los niveles establecidos según la
especie animal.

SIGNOS DE ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS

Aborto en bovinos, es de las principales manifestaciones observadas en enfermedades

reproductivas por causas infecciosas y estos se presentan generalmente después de los 45
días de gestación.

ENFERMEDADES REPRODUCTIVAS
Abortos y momificaciones en bovinos

17
Abortos en porcinos
2.2 SUGERENCIAS PARA TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE
La alteración de los valores en la sangre, es por lo general debido a la Hemolisis,
causada por:

• Jeringas, agujas o tubos húmedos.

• Tubos calientes por los rayos solares.
• Movimientos bruscos en la muestra tanto en la toma como el transporte.
• Congelación de la muestra.
• Contaminación bacteriana de la muestra.
• Fricción por agujas de reducido calibre.

2.2.1 SUGERENCIAS PARA HEMATOLOGÍA

El anticoagulante de elección es el EDTA, por preservar mejor los
elementos celulares por 6 horas. También se puede usar Heparina,
oxalatos y citratos. El suero y el plasma no deben ser conservados más
de 6 horas en refrigeración sin ser separados de los demás
componentes sanguíneos, ya que esto trae como consecuencia
alteración en los diferentes metabólicos de la sangre y por lo tanto
errores en los resultados del laboratorio.

• Desinfección de las zonas donde se va hacer la punción.

• Relación sangre - anticoagulante, es muy importante, la dosis es un
miligramo del anticoagulante por 1 ml de sangre.
• Mezclar la muestra sangre-anticoagulante por inversión más o
menos 10 veces y suavemente para evitar hemólisis.
• No causar punción traumática en el animal para evitar hemólisis

TOMA, ENVÍO Y CONSERVACIÓN DE SUEROS

Inserción de la Toma de sangre en bovino Separación del suero Empaque,

aguja en con vacutainer en vena conservación
el caudal, previa e
capuchó desinfección del sitio identificación
n del suero en
viales
 2.2.2 ANTICOAGULANTES MAS USADOS

EDTA (sales de potasio o de sodio en concentración de 1mg / 1 ml de

18 sangre), valido en todas las especies. Heparina (0.5 Mg. por 4.5 ml de
sangre), oxalatos (potasio y sodio) y citrato de sodio al 3.8
 ENFERMEDADES HEMOPARASITARIAS

A Babesia en bovinos Tripanosoma en bovinos

n
a
p
l
a
s
m
a

e
n

b
o
v
i
n
o
s

2.2.3 SUGERENCIAS PARA QUÍMICA SANGUÍNEA, SUERO O PLASMA.

• La posición adecuada y sujeción afectiva del animal son esenciales

para un muestreo con éxito, un tiempo adicional para ganar
confianza del animal es generalmente de gran utilidad.

• Minimizar manejo físico humano, ya que un animal asustado,

adrenalizado puede originar resultados equivocados en varios
análisis, por ejemplo, la glucosa.

• La asepsia debe realizarse en sentido contrario al crecimiento del

pelo del animal y en forma circular del centro hacia la periferia
.Después de la punción el sitio debe dejarse seco, limpio y libre de
sangre, ya que cualquiera humedad o materia orgánica favorece las
infecciones.

• Las técnicas y sitios de punción varían de una especie a otra, según

la localización de los vasos sanguíneos convenientes y el espesor y
dureza de la capa de la piel, por ejemplo la vena yugular, mamaria,
caudal y radial ( alar) .La cantidad máxima de sangre a extraer será
 la estrictamente necesaria para las pruebas, mas o menos 2
mililitros.

• La muestra debe separarse según el caso en plasma o suero,

rotularse correctamente, analizarse inmediatamente o conservarse
adecuadamente refrigerada a 4 grados C, para el posterior análisis
de las diferentes pruebas bioquímicas.

TOMA DE SANGRE EN PORCINOS

Sujeción e inmovilización de porcinos en toma de sangre en la vena cava, previa desinfección

del sitio

Serología: En el suero se detectan anticuerpos específicos contra determinados

antígenos, para 19
lo cual se recomienda tomar muestras pareadas, de un mismo animal
con un intervalo de 15 días entre ellas. Las muestras pueden ser 10 ml
de sangre sin anticoagulante conservadas en refrigeración o 2 ml de
suero conservado en congelación para la prueba deseada.
 2.3 SUGERENCIAS EN TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA BACTERIOLOGÍA

Las muestras para estudio deben ser lo más frescas posibles,

conservadas en refrigeración (no congelar), tomadas asépticamente y
antes del tratamiento con antibióticos. En caso de ser hisopados,
conservar en medio de mantenimiento.

2.3.1 SECRECIÓN DE OIDOS

Materiales: Escobillones estériles, porta objetos estériles, guantes,
Solución salina estéril, mechero y medio de transporte.

• Recolección de la muestra: La muestra se debe mantener y preservar en

solución salina si se va a enviar de inmediato al laboratorio, de lo
contrario se mantiene en medio de transporte (Stuart).

• En las secreciones y exudados la interpretación del examen directo

es difícil, tanto por la contaminación que generalmente se produce
durante la obtención, como por el escaso numero de
microorganismos en la muestra, por esta razón el examen definitivo
es el cultivo y para la toma de la muestra deberán emplearse
técnicas de asepsia rigurosa.

• La secreción de oído se obtiene con escobillones estériles con el cual

se toma la cantidad mayor posible de ambos oídos en caso de que
esta este seca o muy escasa se impregna los escobillones con
solución salina estéril en ambos casos la muestra se toma mediante
el frotis del conducto auditivo externo sin profundizar el tímpano.

• Se hace el extendido en placa previamente desinfectada

necesariamente haciéndolo en forma circular para la coloración de
Gram ya que esta es una ayuda valiosa, para observar reacción
leucocitaria, bacterias y hongos; se introducen los escobillones en
medio de transporte adecuado, es necesario tomar de ambos oídos
con el fin de establecer una comparación en el crecimiento de la
flora.

• El volumen de la muestra debe ser representativo, al igual los

algodones de escobillones impregnados del material.

BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA

20
Hisopado nasal en porcinos Hisopado traqueal en aves Hisopados y medio de
conservación para cultivo
bacteriológico o viral
2.3.2 SECRECIONES OCULARES
Materiales: Guantes, escobillón estéril o espátula estéril, medio de
transporte, placas estériles y solución salina.

• Recolección de la muestra: La muestra para el estudio de una

conjuntivitis, se obtiene frotando con un escobillón estéril los fondos
de los sacos conjuntivales o el material que se acumula en el ángulo
lagrimal.

• Las muestras de úlceras cornéales las debe obtener el médico

veterinario, quien lo hace raspando la lesión muy cuidadosamente
con una espátula estéril, se debe realizar en ambos ojos y hacer
extendido en placa estéril para ambos casos.

• El volumen de la muestra debe ser representativo, el algodón del

escobillón impregnado del material; la muestra se debe mantener y
preservar en el medio de transporte (Stuart).

2.3.3 SECRECIONES VAGINALES

Materiales: Especulo estéril, escobillones estériles, porta objetos

estériles, medio de transporte y guantes.

• Recolección de la muestra: Se debe realizar un lavado estricto de los

genitales externos con agua y jabón, secando en lo posible con
toallas desechables. Realizar desinfección con alcohol yodado y
alcohol antiséptico (3 veces cada uno). Se introduce el especulo
estéril para proceder a la toma de la muestra con un escobillón
estéril el cual se introducirá por todo el centro hasta llegar al cérvix
tratando de no tocar las paredes, se saca el escobillón con la
muestra, se hace el extendido para la coloración de Gram y se
coloca en el medio de transporte adecuado.

• En caso de sospechar hongos o tricomonas colocar una muestra en

solución salina estéril para la realización del directo.

• La muestra se debe preservar y mantener en el medio de transporte

adecuado.

• El volumen de la muestra debe ser representativo.

2.3.4 LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO

Materiales: Jeringa estéril, tubos estériles tapa rosca, algodón estéril y alcohol.

• Recolección de la muestra: La punción lumbar realizada por el médico

veterinario se debe llevar a cabo bajo condiciones asépticas estrictas
para evitar introducir al canal raquídeo bacterias, también para
prevenir la contaminación de la muestra. La muestra se recoge en 21
tubos estériles tapa rosca para evitar la pérdida del liquido o
contaminación, por ningún motivo se debe utilizar tubos tapa de
algodón, es necesario desinfectar rigurosamente el área que se va a
puncionar.
 • Esta muestra es necesario enviarla de inmediato al laboratorio. Ya
que algunas bacterias que no sobreviven con el almacenamiento
prolongado o cambios bruscos de temperatura.

• El volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente de 3 a 4

mililitros.

2.3.5 LÍQUIDOS DIFERENTES AL CEFALORRAQUÍDEO

Materiales: Alcohol antiséptico y yodo, jeringa estéril, algodones estériles.

• Recolección de la muestra: La aspiración percutánea de líquido como

pleural, peritoneal, sinovial debe ser realizada asépticamente con
desinfección previa, jeringas y agujas estériles la mayor cantidad de
líquido debe ser remitida al laboratorio. Debe agregarse heparina
estéril en caso de grandes volúmenes de líquido pleural y peritoneal
(0.5 centímetros por 100 mililitros de muestra para prevenir los
coágulos que atrapen los microorganismos).

• La muestra debe ser enviada inmediatamente al laboratorio. El

volumen de la muestra debe ser representativo, aproximadamente
3-4 ml.

Recolección de semen en toro

2.3.6 HEMOCULTIVOS

Materiales: Alcohol yodado y antiséptico, jeringa estéril, mechero,

algodones estériles y frascos con el medio de cultivo.

• Recolección de la muestra: Después de haber sujetado al paciente y

haber seleccionado cuidadosamente el sitio de punción, debe

22
hacerse una asepsia cuidadosa de la piel para reducir la incidencia
de contaminación del hemocultivo. La piel debe de desinfectarse y
luego con alcohol por 3 veces del centro a la periferia. Las tapas de
caucho de los frascos que contienen el medio de cultivo mas el
anticoagulante que potencialmente pueden estar contaminadas,
deben de desinfectarse con una solución de yodo y el exceso de
sustancia descontamínate debe removerse antes de tomar la
muestra. En todos los casos debe actuar el antiséptico durante un
minuto, una vez que se ha descontaminado el sitio de la punción no
debe tocarse nuevamente con el dedo a menos que este haya sido
desinfectado de igual manera o que se usen guantes estériles para
hacer la punción.
• La muestra debe tomarse con una jeringa de 5 ml, para pequeñas
especies y de 10 ml para grandes especies, aunque es preferible
hacerlo directamente por medio de un aditamento especial con el
cual pueden tomarse directamente en el frasco con el medio de
cultivo.

• Los recipientes en que se toman las muestras directamente, deben

colocarse por debajo del sitio de la punción, para evitar el reflujo de
la sangre. La aguja se introduce directamente en la vena, si esta se
pierde o hay que efectuar una segunda punción debe usarse una
nueva aguja o un nuevo equipo para la toma de la muestra, estas
precauciones deben tenerse en cuenta para reducir el riesgo de
contaminación de la muestra con flora normal de la piel. Las
muestras deben mezclarse cuidadosamente e inmediatamente
enviarla al laboratorio.

2.3.7 UROCULTIVOS

Materiales: Sondas estériles, catéteres estériles, guantes, frascos estériles

de boca ancha y alcohol yodado y antiséptico.

• Recolección de la muestra: En general todos los animales para la toma

hay que realizar un lavado riguroso de los genitales externos con el
fin de remover los organismos contaminantes, se debe utilizar jabón
y abundante agua limpia.

• En grandes especies la muestra de orina se puede recolectar por

micción limpia y debe ser de la mitad del chorro de la orina, la
muestra se debe tomar en un frasco estéril el cual no se debe
destapar hasta el momento de la toma de la muestra, no tocar la
boca de este y tomarla directamente en el frasco con una cantidad
apropiada para el procedimiento de esta, enviar inmediatamente al
laboratorio de lo contrario se debe refrigerar. Otros métodos muy
utilizados en pequeños animales son la utilización de sondas catéter
y punción vesical, siendo esta ultima la más utilizada. Después de
localizar la vejiga lavar y desinfectar, puncionar con jeringa estéril y
tomar aproximadamente 5 ml, y enviarla al laboratorio.

• El catéter es considerado uno de los mejores métodos pero no se ha

tenido en cuenta que este puede introducir infecciones. La muestra
por ningún motivo debe ser guardada en nevera ya que los cambios
de temperatura afectan la viabilidad de los microorganismos.
• No recoger muestras del suelo porque estas llevan consigo bacterias
contaminantes que se encuentran allí y pueden llevar a un
diagnóstico errado.

• La muestra se debe mantener y preservar en el medio de transporte

adecuado, se debe procesar inmediatamente llegue al laboratorio.

2.3.8 SUGERENCIAS EN CULTIVO BACTERIOLÓGICO DE LECHES

Materiales: Alcohol yodado y antiséptico, tubos estériles con preservativo y

nevera. 23

• Recolección de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con

agua y jabón, se desinfectan con alcohol yodado y antiséptico cada
pezón, se eliminan los primeros chorros
 y se recolecta la muestra de cada cuarto individual en tubos estériles que
contenga el preservativo.

• La muestra se debe preservar y mantener refrigerada mientras llega al

laboratorio.

• Se debe tomar aproximadamente 10 ml de cada pezón.

Toma de muestra de leche en bovino

2.4 RECUENTO DE CÉLULAS SOMÁTICAS EN LECHE (RCS).

Materiales: Tubos estériles secos y nevera.

• Recolección de la muestra: Se lavan cuidadosamente los pezones con

agua y jabón, se secan y se desinfectan con alcohol yodado luego se
debe limpiar el extremo del pezón con una torunda de algodón
empapada de alcohol al 70 ejerciendo presión sobre el esfínter
externo para asegurar la salida de la suciedad y sustancias céreas
por el orificio.

• L a muestra debe llegar al laboratorio antes de las 2 horas, si no es

posible se debe refrigerar hasta su procesamiento.

• También en las primeras 24 horas de la toma de la muestra se puede

agregar formalina lo que impedirá la lisis de las células.

• Existe una variación en los recuentos celulares según el momento

del ordeño, las muestras más útiles son las obtenidas
inmediatamente antes del ordeño del atardecer.

• Si las muestras se obtienen de un solo pezón bastara unos 30 ml de leche

aproximadamente.
 2.5 SUGERENCIAS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA
UN ESTUDIO PARASITOLÓGICO
Éste análisis comprende: Endoparásitos, Ectoparásitos y Hemoparásitos.

24 2.5.1 COPROLÓGICOS
Con guante o funda plástica introducir la mano en el recto del animal y
estimular mediante masajes el esfínter anal.
 Recolección de material fecal en bovino a través del recto

• Cuando se haya obtenido la cantidad suficiente de materia fecal de

20 a 40 gramos, el guante es reversado hacia adentro.

• Si la muestra tardara más de 2 horas en llegar al laboratorio, pasar

una parte de la muestra a un recipiente con formalina al 10  y otra
sin formalina, ni refrigeración, especialmente cuando se desea
investigar parásitos pulmonares (identificación de larvas) y
coccidias.

• Si la muestra puede llegar al laboratorio en menos de 2 horas, cerrar el

guante o la funda.

• Identificar y enviar la muestra refrigerada.

• Cuando se quiera evaluar el estado de infestación de un grupo de

animales, deben tomarse muestras por edades. En este caso, se
recolectaran pequeñas muestras de heces tomadas al azar.

2.5.2 HEMOPARÁSITOS – PARÁSITOS EN SANGRE

Enfermedad hemoparasitaria (Anaplasma) en bovinos Enfermedad hemoparasitaria (Babesia) en bovinos

• El sitio de punción debe estar limpio; esto incluye, recorte de pelo,
desinfección con solución yodada por 2 veces y finalmente limpiar
con alcohol.

• Tomar la muestra preferiblemente en estado febril y antes de tratamiento. 25

• La mejor muestra es de sangre capilar (Cola u oreja).

• Las placas para el extendido de sangre deben ser nuevas, libres de rayas y
grasas.
• Los extendidos deben ser muy delgados para que los glóbulos rojos
queden separados y facilite la observación de los hemoparásitos

• Los frotis deben protegerse de las moscas y rayos solares.

• Una vez secados los extendidos se envuelven en papel absorbente o

papel higiénico en placas separadas y se envían al laboratorio.

• Se recomienda recoger sangre con EDTA como anticoagulante a

concentración de 1 mgrs/ ml de sangre, esto con el fin de hacerle el
hematocrito y conocer el estado de deshidratación del animal.

• También puede hacerse un montaje en fresco y hacer micro

hematocrito para observar tripanosomas en movimiento.

• Rotular correctamente la muestra.

HEMOPARÁSITOS EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA

2.5.3 ECTOPARÁSITOS - PARÁSITOS EXTERNOS.

• Utilizando una gasa impregnada en glicerina y sostenida por una

pinza, limpiar la zona, separando las costras poco adheridas y las
escamas que se encuentren sobre o alrededor de la lesión que se va
a investigar.

• Colocar una gota de glicerina o aceite mineral sobre un portaobjetos.

• Hacer un doblez en la piel del animal a nivel del área sospechosa.

26 • Con la hoja de un bisturí raspar la parte superior del doblez varias
veces hasta lograr algo de sangrado en la zona.

• Transferir el material raspado a la gota de aceite o glicerina colocada sobre el

portaobjeto.
• Colocar una laminilla (Cubre objeto) sobre el material a observar, y enviar al
laboratorio.

• Tener en cuenta que los raspados se deben hacer cerca de los

bordes de las lesiones activas, evitando incluir costras secas, pelos o
lanas.

2.5.4 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLÓGICO

EN PELOS

Materiales: Pinzas estériles, papel de aluminio nuevo, guantes, formato

de laboratorio, tijeras, cajas de Pietri y mechero.

• Recolección de la muestra: Después de sujetar al paciente para dicha

toma, observe cuidadosamente la zona afectada y encontrará que
algunos de los pelos se encuentra partidos, carentes de brillo,
seleccione algunos de ellos y con la ayuda de una pinza arránquelos
si se trata de pelos que están infectados en todo su recorrido,
seleccione la zona más infectada y con una pinza arranque algunos
de ellos, tome la muestra en papel aluminio, caja de Petri, séllela con
esparadrapo o cinta de enmascarar y envíela al laboratorio.

• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada y en un lugar libre de

humedad y seco.

• La cantidad de la muestra debe ser representativa de acuerdo al examen

solicitado.

• Para la identificación se debe utilizar formatos especificando los

datos correspondientes, es muy importante saber si el paciente ha
estado en tratamiento con algún antibiótico local o sistémico, ya que
este puede inhibir el desarrollo fúngico, por lo tanto es necesario
suspenderlo 5 días antes de solicitar el servicio al laboratorio.

• De la recolección y transporte adecuado de las muestras depende el

éxito del proceso y confiabilidad de los resultados.

2.5.5 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO CULTIVO MICOLÓGICO

• Materiales purulentos de lesiones cerradas: Algodón estéril, jeringas y
agujas estériles, guantes estériles, alcohol yodado, tubo tapa rosca
estériles.
• Recolección de la muestra: De este tipo de lesiones es aconsejable que
sea el médico veterinario quien haga la punción. Después de sujetar
el paciente para la toma de la muestra limpie cuidadosamente la
zona afectada y su periferia con algodón empapado de alcohol
yodado por tres veces, con la ayuda de una jeringa estéril puncione
el absceso y extraiga la cantidad necesaria del material, coloque el
material en un tubo de ensayo estéril tapa rosca preferiblemente, o
en una jeringa haciendo uso del tapón.

• La muestra se debe mantener y preservar bien sellada en un lugar libre de

humedad y seco
o en la jeringa haciendo uso del tapón envíela al laboratorio inmediatamente
27
por no tener
medio de transporte.

• El volumen de la muestra es de 1 a 2 ml de material aproximadamente.

• Material purulento de lesiones abiertas: Escobillones estériles, tubos tapa
rosca con solución salina, agua destilada y guantes.

• Recolección de la muestra: Estas lesiones pueden ser fistulas y úlceras

entre otras. Para obtener la muestra limpie la zona afectada con
agua destilada estéril, nunca use alcohol yodado porque este lesiona
los tejidos y afecta los resultados de los cultivos.

• Después de sujetar el paciente prosiga con un escobillón y de un

sitio poco expuesto al ambiente, tome la muestra impregnando
completamente el algodón con la misma, ponga el escobillón en un
tubo tapa rosca que contenga solución salina estéril, la cual debe
tapar por completo la parte del escobillón que contiene la muestra.

• El volumen de la muestra es algodón del escobillón completamente

impregnado del material.

2.6 RECOMENDACIONES PARA EL ESTUDIO DE PATOLOGÍA

Diagnóstico integral, comprende: Necropsia, histopatología y aislamiento
bacteriológico. La muestra se considera cada especie bovino, equino,
ovino, felino o porcino (mayor de 6 meses), o un grupo de animales (3
porcinos menores de 6 meses o 10 aves) de la misma edad y alojadas
en el mismo galpón, preferiblemente animales vivos.
VIROLOGÍA

Cerebro hemorrágico en bovio y signos nerviosos. Conservar un fragmento en refrigeración y

otro en formol al 10

Selección del especímen: Los siguientes son los parámetros para una
adecuada remisión de los tejidos.

• Seleccione los tejidos con lesiones y muestras de órganos que

tengan lesiones, si no hay evidencia de lesiones, seleccionar tejidos,
órganos y sistemas que den cuenta de los signos clínicos del animal.
 • Si no hay lesiones macroscópicas, ni signos de una enfermedad
especifica, se toma la muestra de varios órganos

• Ocasionalmente se envía el animal completo de especies menores y vivos

para patología.
28
• Una muestra inapropiada bien sea por mala fijación, mala escogencia
en las muestras que se envían, lisis en los órganos no permite llegar
a un diagnostico correcto.

• Manipulación de los tejidos: La manipulación de los tejidos debe ser cuidadoso

y delicado.
• Fijación de los tejidos en formol al 10 .

• Es importante incluir partes normales del órgano enviado.

• El alcohol no es un sustituto del formol como tampoco lo son el agua o la

congelación.

• Los fragmentos enviados deben tener un espesor máximo de 0.5 centímetros.

• La relación tejido formol es de 10 a 1.

• Los recipientes deben ser de boca ancha y en lo posible plásticos.

• Empacar las muestras con el formol lo más pronto posible después de la

remoción.

• Colocar los especímenes de diferentes sitios anatómicos en frascos

separados y con el fijador adecuado.

• Marcar cada frasco con la relación del sitio anatómico de la muestra.

• Hacer una lista de las muestras enviadas y descripción de cada una

(Forma, color, aspecto, tamaño y otros).

• Consistencia, tamaño, distribución de las lesiones y relación con el sitio

anatómico.

• Llenar el formato con la reseña completa, se requiere de la

información esencial y pertinente de una manera concisa.

Cabeza de bovino con Tallo cerebral con médula oblonga Obex con tallo encefálico
médula Médula
oblonga en formalina
al 10

TRANSPORTE, ENVÍO Y CONSERVACIÓN DE TEJIDOS

29
Transporte y conservación de tejidos separados en refrigeración y formol al 10  para
identificación de patógenos y lesiones, se adjunta protocolos
2.7 RECOMENDACIONES PARA EXAMEN DE CITOLOGÍA

Se realiza a partir de improntas de tejido o extendido de líquidos

corporales en laminas portaob- jetos para estudios preliminares de
lesiones tisulares y observación de agentes infecciosos.

• Envió: Pueden fijarse de dos maneras: Fijador líquido que puede ser
alcohol absoluto, isopropanol, etanol o alcohol al 96 .

• Fijación al aire.

• Marcar las placas por el sitio donde se hizo el extendido.

• Diligenciar muy bien la historia clínica.

Resultados:

Los informes de patología son leídos por patólogos veterinarios

y en ellos se incluye: Descripción.
Diagnostico.
Notas o comentarios.

Notas: El procesamiento de las muestras en el laboratorio de patología

una vez estén fijados los especímenes es largo por lo cual los
resultados pueden entregarse en un lapso de 4 a 10 días hábiles.
El tiempo máximo para la entrega de resultados de citología es de 48 horas.

2.8 PROCEDIMIENTO FRENTE A UNA PATOLOGÍA (ENFERMEDAD) EN UN

PREDIO

• Notificación

Puede ser realizada por: el propietario, un tercero o

vigilancia oficial Se debe recolectar la mayor
información posible del predio.

• Preparación del material

Prepare el material y equipo para la atención del caso.

• Visita a la finca:
 Comience diligenciando el protocolo del caso a atender, “trate de definir el origen del
problema
30 y los riesgos de difusión” según la información recolectada.

• Examen clínico de los animales.

Comience inspeccionando los animales sanos o aparentemente sanos,

observe síntomas y signos clínicos de todos los animales y obtenga un
“DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO”, de lo que está sucediendo en la finca.

Si el caso lo amerita y si es posible continúe con los siguientes pasos.

• Toma de muestras

Tome muestras recientes, suficientes y adecuadas según el número de animales

afectados o un porcentaje de los animales del hato.

• Limpieza y desinfección

Limpie y desinfecte antes y después de la toma de la muestra los

elementos, equipo y lugar donde se tomo la muestra. Cambie la ropa
utilizada en el procedimiento

• Envío de muestras al laboratorio.

o Use recipientes y medios de conservación adecuada.

o Rotule cada muestra
o Anexe el protocolo, o la información del caso.
o Confirme con el laboratorio si las muestras llegaron y en qué estado.

• Diagnóstico del laboratorio

Los resultados reportados en el laboratorio, son una herramienta

fundamental para la toma de decisiones.

• Vigilancia y seguimiento epidemiológico.

Consiste en recolectar la mayor información concerniente a la

presentación de la enfermedad y sus análisis para la toma de acciones
en su prevención, control o erradicación. Es una herramienta básica
para la planificación del hato.

Ante un caso proceda de la siguiente forma:

• Identifique las fuentes de infección Biológicas (insectos, roedores y
otros) y mecánicas (vehículos, agujas, utensilios en general).

• Priorice los factores de riesgo que facilitaron su presentación.

• Determine el área de riesgo focal (finca o predio) y peri focal 31

(predios alrededor donde se presento la enfermedad).

• Plantee recomendaciones para la prevención, control y erradicación de la

enfermedad.

SIEMPRE REALIZAR EL DIAGNÓSTICO DE CUALQUIER

ENFERMEDAD,
EN FORMA POBLACIONAL

2.9EQUIPO BÁSICO EN OFICINAS DE SANIDAD PARA LA TOMA

DE MUESTRAS PECUARIAS.
• Balde Bolsas plásticas
• Botas Cepillo de cerdas
• Cinta elástica Cinta indicadora de pH
• Cinta para rotular (Enmascarar). Desinfectante
• Formol Frascos de boca ancha
• Guantes de caucho Glicerina tamponada
 • Hisopos Jeringas desechables
• Mangas desechables Nariguera
• Pinzas de disección Portaobjetos
• Protocolos Soga o lazo
• Termómetro Termos plásticos
• Tijeras Toallas desechables
32 • Tubos vacutainer (Tubos al vacio) con y sin anticoagulante

Observación: Es importante estar verificando el estado de los instrumentos y

medios de conservación para la toma de las muestras.
 C
O
N
V
E
NI
O
IC
A
Recipiente: Frasco, tubo estéril o cuando se especifique se puede usar bolsa plástica
-
S
estéril.
E
C
R
ET
A
RÍ
A
D
E
A
G
RI
C
UL
T
U ENFERMEDA MUESTRA M CONSERVACI OBSERVACIO
R
A D (S) E ÓN NES
Y
D
D
E
S
I
A
R
O
R
Sangre con Lavado y
O Jeringas o Refrigeración
Anticoagulan desinfección
Recipient
Septicemia te (EDTA) de área
e estéril
ó Hemocultivo. donde se va
Bacteriemia Fragmentos a puncionar.
Refrigeración
de órganos: No congelar
Recipientes
(bazo, hígado,
estériles
Riñones, Muestras por
ganglios separado de
linfáticos cada tejido
Líquidos de Recipiente con
Carbón Refrigeración ---
tejidos de los Tioglicolato.
Sintomático
músculos
afectados.
Impregnar
tiza, algodón, ---
Carbón o material Recipiente --- No hacer
Bacteridian absorbente estéril necropsia
o ó Ántrax limpio con .
sangre o Refrigeración (Zoonosis
líquido de Bolsa plástica ).
orificios
naturales. ---
Enviar oreja
desde la base.
No haber
Leche del Recipiente tenido
Mastitis Refrigeración tratamientos
cuarto (s) esteril.
afectado( Antes de con
s). las 24 antibióticos
horas en los 8 días
anteriores.
 3
4

Tabla 1. MUESTRAS PARA EXAMENES BACTERIOLÓGICOS

C ENFERMEDAD MUESTRA (S) MED CONSERVACIÓN
O
N IO
V
E Recipiente o bolsa Refrigeración
NI Materia
O plástica estéril. Refrigeración
IC fecal para
A Enteritis
Coprocultivo
-
Tubos con medio
S .
E nutritivo Caryblair ó
C
R Tioglicolato.
ET Hisopos estériles.
A
RÍ
A
D Semen. Recipiente estéril. Refrigeración
E
A Infertilidad
G
RI
Recipiente estéril
C Secreciones Refrigeración
UL con medio BHI
T vaginales
U
R
A Enviar 20-30
Y
D mililitros de
E
S Problemas orina, tomar por Recipiente estéril Refrigeración
A
R
Renales sonda ó punción
R vesical.
O

Uro cultivo.

Enviar 100
Enfermedades Recipiente estéril Refrigeración
mililitros de
Hídricas
agua

NOTA: El laboratorio prefiere preparar los extendidos a partir de los tejidos enviados
C
O
N ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN
V
E Fragmentos de:
NI
O Encéfalo, hígado,
IC Listeriosis Recipiente Refrigeración
A riñón Bazo. Carne.
- estéril
S
E
C
sangre, leche y
R orina
ET
A Ganglios
RÍ
A Salmonelosis linfáticos Recipiente Refrigeración
D
E mesentéricos estéril
A
G
, bazo,
RI pulmón e
C
UL hígado
T
U Exudado
R Tétano Recipiente Refrigeración
A del área
estéril
Y
D
afectada
E
S
(Herida)
A
R
Ganglios tracto
R respiratorio
O Recipiente con
Tuberculosis mesentéricos y/o Refrigeración
ácido bórico al 1 .
mamarios.

Secreciones,
leche.
Fragmentos de:
Pasteurelosis
3
pulmón, bazo, Recipiente Refrigeración
5 hígado, sangre estéril
con
anticoagulante
Raspado de la Recipiente ó
Paratuberculosis Refrigeración
mucosa bolsa
intestinal plástica
estéril
Exudado - Secreciones Recipiente Refrigeración
trasudado líquidas estéril
 3
6

Tabla 2. MUESTRAS PARA EXAMENES DE VIROLOGÍA

C
O
N ENFERMEDAD MUESTRA (S) MED CONSERVACIÓN
V
E IO
NI
O B
IC Leucosis,
A 10 mililitros de Refrigeración o A
IBR, DVB, Recipiente estéril
-
sangre sin Congelación H
S EEV,
E Anticoagulante (Sueros). v
C Neosporosis
R (Suero). E
ET y otras.
A
RÍ Tejidos, líquidos
A Refrigeración o T
D Aislamiento de con antibióticos Recipiente estéril
Congelación. r
E
Virus (Penicilina y/o
A
G Estreptomicina). I
RI
C
m
UL
T
Epitelio Recipiente estéril Refrigeración o T
U mamario, padal con glicerina congelación. i
R Enfermedades
A y/o lingual. tamponada o
Y vesiculares
D Solución saturada
E
S de azúcar
A
R Liquido vesicular. Jeringa Congelación T
R
O
i
Cerebro entero T
Recipiente Refrigera
Rabia bovina o la cabeza del i
hermético (bolsa ción -
animal que P
murió. plástica) Congelac b
ión Z
NOTA: En general para enfermedades virales enviar: Sangre, cerebro, ganglios linfático
tonsilas o amígdalas, riñón, pulmón; siempre por separado y congelado. Igualmente s
medio de Hanks, glicerina tamponada más antibióticos.
IBR: Rinotraquitis Infecciosa Bovina, D.V.B: Diarrea Viral Bovina y E.E.V: Encefalitis Eq
C Tabla 3. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HISTOPATOLOGÍA
O
N
V
E
ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN
NI
Órgano(s), tejido Formol tamponado
O Alteración
IC sano y afectado Frascos de boca al 10 y cubrir
A Patológica
- ancha toda la muestra.
S (Neoplasias ó
E
C Tumores).
R
ET Papilomas ó
10 gramos de Bolsa plástica ó Sin preservativos
A
Verrugas
RÍ
papiloma frasco
A
D
(Autovacunas)
E
A
G
RI
C
UL
T Tabla 4. MUESTRAS PARA EXAMENES DE PARASITOLOGÍA
U
R (PARÁSITOS INTERNOS)
A
Y
3
D 7
E ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDI CONSERVACIÓN
S
A O
R
R Parásitos
O 10 gramos de Frascos, bolsas Refrigeración o
Gastrointestinales
materia fecal. plásticas limpias y adicionar 1 ml de
y Fasciola
Hepática. secas. formol al 10 .
Parásitos
10 gramos de Frascos o bolsas No utilizar
Pulmonares y
materia fecal Plásticas limpias y refrigeración ni
Protozoarios
fresca secas. preservativos
(Balantidium),
Coccidia.
 3
8

C
O
Tabla 5. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ECTOPARÁSITOS
N
V
E
(PARÁSITOS EXTERNOS)
NI
O
IC ENFERMEDAD MUESTRA (S) MED CONSERVACIÓN
A
- IO
S
E Adicionar 1-2
Sarna Raspado profundo Frasco estéril de
C
ml de
R
de la piel. boca ancha.
ET
A
glicerina o
RÍ aceite.
A
D Raspado de piel,
E Dermatofitos Papel o porta No usar
A folículos pilosos
G (Hongos). objetos preservativos
RI (pelos).
C
UL
T
U
NOTA: Para análisis de productos garrapaticidas, enviar garrapatas vivas en frasco
R tapado y con orificios en la tapa y para la identificación o clasificación, enviar en
A
Y recipientes con alcohol etílico al 70 .
D
E
S
A
R
R
O
Tabla 6. MUESTRA PARA ELECTROLITOS (IONOGRAMAS)
ITEM MUESTRA (S) MEDI CONSERVACIÓN
O
Ionogramas
Suero ó plasma Frasco estéril Refrigeración
calcio, sodio,
potasio y pH
C
O
N
V
E
NI
O
IC
Tabla 7. MUESTRAS PARA EXAMENES DE HEMATOZOARIOS
A
- (PARASITOS EN SANGRE)
S
E
C
R ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN
ET
A Frotis de sangre Extendi No Prefe
RÍ
A periférica (oreja dos refrigeración, en e
D
E Babesia -cola) y sangre delgado transporte en trata
A
G
Anaplasma y con s en seco ó fijar
RI Tripanosoma anticoagulante portaob placas con
C
UL (EDTA). jetos. alcohol metílico
T
U
por 3 minutos.
R 10 ml de sangre Prue
A
Y
3 sin Tubos Congelación cada
D 9 anticoagulante. estériles del suero hem
E
S
A (Suero).
R
R Tran
Sangre con Refrigeraci
O
Hemograma Tubos inme
anticoagulante ón. No
Completo estériles pará
EDTA. congelació clínic
n.
 4
0

C Tabla 8. MUESTRAS PARA EXAMENES DE ENFERMEDADES

REPRODUCTIVAS
O
N
V
E
NI
O ENFERMEDAD MUESTRA (S) MEDI CONSERVACIÓN
IC
A O
-
S
E
Solución salina
C Lavado prepucial
R Frasco oscuro fisiológica o
ET Tricomoniasis con 100 ml. de
A estéril. No Ringer lactato.
RÍ solución salina
A refrigerar. No refrigerar y
D fisiológica.
E evitar rayos
A
G
solares.
RI
C
UL
T
U
R
A
Y
D 100 ml.
E
S
Campilobacte Esmegma Frasco oscuro solución salina
A r (Vibrio prepucial. estéril fisiológica con
R
R Foetus) (raspado Refrigeración. Tioglicolato.
O
prepucial). Refrigeración

Brucelosis,
Leucosis I.B.R,
10 mls. Sangre
D.V.B, Tubos estériles Refrigeración
sin
Leptospirosis secos
anticoagulante
Anemia
(sueros)
Infecciosa
Equina, Neospora
y otras.
 Tabla 9. MUESTRAS DE QUÍMICA SANGUÍNEA PARA
ENFERMEDADES METABÓLICAS
PRUE MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN
C
BA
O
N
V
E
NI
O
IC
A
Enzimas:
- ALT ó
S
E GPT
C
R AST ó 10 ml de sangre
Frascos Refrigeración
ET
GOT sin anticoagulante
A estériles
RÍ
A
ALP, Glucosa, ó (Suero)
D Urea, Colesterol
E
A total, Creatinina,
G
RI Proteínas Séricas
C
UL
Totales, Albumina,
T Bilirrubina Total.
U
R
A
Y
D
E
S
A
R
R
O
ALT o GPT: Alamina aminotransferasa o Transaminasa glutamico pirúvica, AST o GOT: Aspartato
aminotransferasa o transaminasa oxaloacetica, ALP: Fosfatasa alcalina

Tabla 10. MUESTRAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PCR (Reacción

de la Polimerasa en
Cadena)
ITEM MUESTRA (S) MED CONSERVACIÓ
IO N
Semen 2 Pajillas o Congelación
Genotipificación de
ampolletas
la Kappa Caseína
Sangre con anticoagulante Refrigeración
4 (EDTA) Frasco estéril
1
 4
2

C
O
N
V
E
NI
Tabla 11. MUESTRAS PARA EXÁMENES DE TOXICOLOGÍA
O
IC
A ITE MUESTRA (S) MEDIO CONSERVACIÓN
-
S M
E
C Sangre con
R
ET Fosforados Orgánicos y anticoagulante, Frasco estéril Refrigeración
A
RÍ
Carbamatos orina, hígado,
A riñón, lavado
D
E gástrico.
A
G Alimento,
RI Congelación o
C Urea contenido Frasco estéril
refrigeración
UL
T
estomacal,
U
R
hígado, riñón y
A orina.
Y
D Mercurio Hígado y riñón. Frasco estéril Refrigeración
E
S
A
Plomo Orina, hígado y Frasco estéril Refrigeración
R riñón.
R
O Pelo, contenido
Talio Frasco estéril Refrigeración
gástrico, orina y
riñón.
Cianuro Alimento, contenido Frasco estéril Refrigeración
ruminal.

OBSERVACIÓN: En tejidos se debe enviar por separado una cantidad no inferior a 100 gramos.
C
O
N
V
E
NI
O
IC
A
-
Tabla 11. MUESTRAS PARA EXÁMENES DE TOXICOLOGÍA
S
E
C
R
ITE MUESTRA MEDIO CONSERVACI
ET
A
M (S) ÓN
RÍ Contendo estomacal, Sangre, orina,
A
D
Clorados cérebro, Grasa Frasco Refrigeració
E
mesentérica e hígado. estéril n
A
G
RI Warfarinas Sangre sin anticoagulante, hígado, Frasco Refrigeració
C
UL contenido gástrico. estéril n
T
U Mico Alimento, hígado y riñones. Frasco Refrigeració
R
toxinas estéril n
A
4
Y
D 3 Sangre con anticoagulante (EDTA),
E Amoníaco suero, orina, Frasco Refrigeració
S
A contenido ruminal. estéril n
R
R Colinestera Cerebro, suero. Frasco Refrigeració
O
sa estéril n
3. DIAGNÓSTICO AGRÍCOLA
44
3.1 FACTORES BÁSICOS EN LA TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS
AGRÍCOLAS

El éxito en el manejo de una plaga o enfermedad depende de su

identificación correcta y oportuna; por lo tanto, cuando no se define a
tiempo y correctamente el agente causal de un problema fitosanitario,
se pierde tiempo en su manejo y se aumentan los costos de producción
en los cultivos. Por lo cual toda muestra debe cumplir con unos
requisitos mininos que son:

1. Calidad de la muestra
2. Cantidad de la muestra
3. Tiempo en la ruta crítica de la muestra

3.1.1 CALIDAD DE LA MUESTRA

La muestra debe ser fresca y seleccionada de plantas o de las

estructuras de estas que presenten la afección en diferentes estados
de evolución.

La muestra debe ser tomada en los primeros estados de la enfermedad

o aparición del problema, para evitar contaminación, principalmente
por bacterias, hongos o insectos secundarios.

El material a enviar debe ser limpio, sin desinfectantes, no

contaminado, ni con otros productos que permitan alterar la muestra.

Al enviar una muestra, se debe proteger para que no se reseque o

dañe por calor, no es posible hacer diagnósticos correctos sobre
muestras marchitas, maltratadas o en estado avanzado de
descomposición, esto conduce a diagnósticos erróneos.

45
Tome las muestras a media mañana o media tarde cuando la
intensidad del sol no sea muy fuerte, evite tomar muestras
inmediatamente después de una lluvia o de aplicar algún producto por
vía foliar.

Toda muestra debe ser remitida con la mayor información posible, ya

que los datos allí consignados son vitales para un buen diagnóstico y
una buena recomendación.
3.1.2 CANTIDAD DE LA MUESTRA
La cantidad necesaria es variable según el tipo y fracción del cultivo de que se
trate.

Muestra: Es el material biológico tomado de las lesiones que ocasiona

una enfermedad o plaga, que permite al laboratorio identificar su
causa.

La muestra vegetal puede estar constituida por hojas, frutos, tallos,

raíces, si las plantas son de gran tamaño se toma parte del tejido
afectado del órgano correspondiente y si son plantas pequeñas en lo
posible enviar la planta completa y varias de ellas en las que se pueda
observar diferentes estados de avance de la enfermedad o plaga.

La muestra, debe estar constituida de tejidos u órganos tanto de las

partes sanas como de las enfermas.

Tome un número suficiente de plantas que sean representativas del

lote en estudio. Traslade la muestra al laboratorio el mismo día que la
tome, de lo contrario manténgala en refrigeración para evitar que el
tejido se deteriore ó se formen hongos, es recomendable que se
manejen las muestras en bolsas de papel.

Comuníquese al laboratorio antes de muestrear o Consulte la guía respectiva.

3.1.3 TIEMPO EN LA RUTA CRÍTICA DE LA MUESTRA

Es el tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y la entrega de
los resultados del laboratorio. Es un tiempo controlado por el hombre,
aumentándolo o disminuyéndolo, entre más corta sea esta ruta se
obtendrá un diagnóstico mas oportuno y eficiente para el manejo del
problema fitosanitario.

Factores que intervienen:

Detección del
problema Toma de
muestras
Envío de muestra al
laboratorio Recibo de
muestras en el laboratorio
Proceso de muestra en el
laboratorio Resultado de
laboratorio
 El protocolo debe ser diligenciado correctamente, sin omitir datos que
puedan ser útiles para el diagnóstico y recomendación

3.2 TOMA DE DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS

46
Debido a la gran diversidad de síntomas que se pueden presentar a
nivel de campo en los diferentes cultivos, se hace necesario realizar
muestreos diferenciales, los cuales son planteados a continuación.
La parte a muestrear depende del cultivo y etapa de desarrollo del mismo.

3.2.1 PLANTAS GRANDES

Por su gran tamaño, se hace necesario enviar las partes afectadas que
sean más representativas

• Raíces
Se debe enviar cuando se sospeche daño por nemátodos, hongos del
suelo, bacterias o por insectos que atacan raíces. La sintomatología se
puede presentar como quemazón en las puntas de las hojas,
defoliación, marchitez, clorosis, enanismo, agallas, nódulos o presencia
de insectos a nivel de raíz. Envié la muestra acompañada de raicillas,
enviar suelo y los insectos que se encuentren presentes en frascos con
suelo.

• Hojas
Cuando se observen manchas foliares, deformación de las hojas,
engrosamiento de venas, agallas, aclaramiento de venas, ampollas,
clorosis, corte de hojas, raspaduras y perforaciones.

• Flores, yemas y ramas

Presencia de superbrotamientos, estrangulamiento de tallos o ramas,
cáncer o callosidades, perforaciones, caída de estructuras.

• Frutos tubérculos y bulbos

Presencia de manchas, pudriciones, roñas y perforaciones. Este
material se debe dejar secar, se recomienda no recoger los frutos del
suelo, se prefiere material de la planta que presente la sintomatología.

3.2.2 PLANTAS PEQUEÑAS

Lo ideal es colectar la planta completa, seleccionando dos o tres

plantas para su envío al laboratorio. Se debe guardar en una bolsa
plástica, envolviendo la parte aérea en papel absorbente, para que en
el transporte no se contamine con el suelo.
47
4. DIAGNÓSTICO DE DAÑOS CAUSADOS POR INSECTOS
PLAGAS (DIAGNÓSTICO ENTOMOLÓGICO)

Consiste en determinar el insecto que por su comportamiento o sus

hábitos causa un daño directo o indirecto en la producción (calidad o
cantidad) de una especie vegetal de interés para el hombre.

Luego de que se ha identificado el insecto que esta causando el daño

se procede a dar las recomendaciones, que consisten en seleccionar los
diferentes componentes de manejo que se deben realizar para
disminuir la incidencia de éstos en el cultivo.

Una adecuada recomendación se fundamenta no solo en la

identificación del insecto sino que es necesario el análisis de las
condiciones en que se presenta el problema, en especial el manejo del
cultivo y las interacciones planta - insecto - organismos benéficos -
condiciones agroclimáticas, es decir, se requiere de un análisis integral
que conlleva a un acertado juicio sobre la causa del problema y los
factores que lo favorecen.

Es de suma importancia tener presente que para tomar la decisión del

envió de una muestra al laboratorio, no se debe esperar hasta que todo
el cultivo presente los síntomas del deterioro, dado que en estos casos
se logra realizar la determinación del causante del daño pero es muy
complicado recuperar los cultivos o plantaciones.

4.1 PROCEDIMIENTO GENERAL DE DIAGNÓSTICOS ENTOMOLÓGICOS

Cuando un cultivo presenta daños causados por insectos es necesario

realizar una observación detallada de las estructuras vegetales, esto
debido a algunas características especiales de los insectos como:

a. Tamaño pequeño (que en muchos casos es imperceptible al ojo humano).

b. Capacidad de movimiento.
c. Diferentes estrategias de defensa (que van desde quedarse quietos,
huir de la planta al sentir peligro o inclusive camuflarse o sea
parecerse a las estructuras de la planta que están consumiendo).
d. Hábitos nocturnos o diurnos.
e. Alimentarse de estructuras vegetales internas o a nivel radical.
 Estas características hacen que los insectos, que están causando el
daño puedan pasar desapercibidos o no se encuentren en el tejido al
momento de tomar la muestra. Por esto en un laboratorio de
48
diagnóstico vegetal se presentan dos tipos de situaciones con las
muestras entomológicas enviadas, la primera, cuando el insecto
causante del daño se encuentra presente y la segunda cuando el daño
se observa pero el insecto causante no se encuentra.
4.1.1 ESTRUCTURA AFECTADA SIN PRESENCIA DEL INSECTO 49
CAUSANTE

Este es un tipo de muestra común. Para obviar esta situación se

sugiere recoger todo material representativo del problema en el
campo.

Para el caso de plantas de PORTE BAJO (plantas pequeñas) enviar de 2

a 3 plantas completas y para plantas de gran tamaño enviar las
estructuras o partes de la planta que muestren los síntomas más
característicos en los diversos estados de desarrollo del problema.

Es básico realizar una observación detenida de las plantas para tratar

de buscar y capturar los insectos asociados al problema, para esto se
puede entrar al cultivo y quedarse un tiempo quieto, para que los
insectos reinicien su actividad, igualmente sacudir fuertemente la
planta colocando en la parte baja de la misma una hoja blanca grande,
una carpeta o algo similar que facilite la recolección de los insectos que
caigan para su envío al laboratorio.
 4.1.2 ÁREA LESIONADA Y PRESENCIA DEL INSECTO CAUSANTE

Es la muestra ideal dado que a través de la determinación o

identificación del insecto se establece el agente causal del problema.
En este caso, se debe procurar enviar el mayor número de insectos
adultos o larvas (gusanos) y la parte de la planta que presenta la
lesión.

4.2 COMO ENVIAR MUESTRAS QUE CONTENGAN INSECTOS

• Adultos

Se deben depositar en frascos con alcohol comercial al 70 , el

recipiente debe quedar lleno, bien tapado y sellado con cinta. Los
insectos guardados en alcohol, pueden quedar en un lugar fresco por
varios días. Pero debemos tener presente que entre más rápido se
envíen al laboratorio con toda la información, más pronto se obtendrán
los resultados y las recomendaciones del caso.

• Las mariposas, polillas o insectos de cuerpo delicado no se deben depositar

en frascos con alcohol ni manipular demasiado, para éstos se trabaja
en empaques transitorios que consiste en hojas de papel, cartulina o
papel mantequilla, dobladas en forma de triangulo. En cada una
coloque un solo ejemplar.

50
• Larvas (gusanos) y ninfas.

Depositar en frascos con alcohol al 70 . Si el número de larvas o ninfas

es alto, se deposita una parte en un frasco con alcohol y el resto en
otro frasco con el substrato o material de donde se encontró. Esto
permite hacerles a los insectos vivos un seguimiento en cámaras de
cría, encontrándose en muchos casos sus enemigos naturales ya sean
parasitoides u hongos entomopatógenos.

Para recolectar muestras de insectos que atacan frutos como por

ejemplo moscas, recoja las frutas puede constatar la presencia de
larvas, pero evite enviar las frutas partidas. Puede observar primero las
frutas caídas que posean larvas de mayor tamaño y próximas a
empupar, estas frutas se depositan en bolsas o frascos con un poco de
aserrín, suelo o papel.

Cuando las frutas tienen tejidos suculentos (muy acuosos) deposite una
buena cantidad de aserrín o papel para evitar que los jugos de la fruta
produzcan encharcamiento en la bolsa o frasco.

• Pupas

51
Se depositan en frascos con aserrín y con sustrato o material (tierra u
hojarascas) de donde se encontró. No las deposite en alcohol porque se
necesitan vivos para hacerles seguimiento en cámaras de cría, hasta
obtener adultos, los cuales pueden ser identificados mas fácilmente.

4.3 MUESTRA PARA DETERMINAR ORGANISMOS BENÉFICOS EN

INSECTOS
Los insectos están en continua relación con todo lo que los rodea,
presentándose una gran cantidad de interrelaciones que regulan sus
poblaciones como factores abióticos y bióticos.
Los factores bióticos como hongos, bacterias, virus, parasitoides,
depredadores, etc, pueden ser algunas veces detectados en el campo
por algunas sintomatologías típicas que presentan y pueden llegar a

constituirse en herramientas para el manejo de los insectos plagas.

CARACTERÍSTICAS A NIVEL DE CAMPO

Manifestaciones visibles:

o Estructuras extrañas (crecimiento micelial o esporulaciones) sobre el

cuerpo del insecto, insectos muertos momificados, muerte con
flacidez en los tejidos y olores fétidos.
o Cambio en el comportamiento común de los insectos: como
dificultades en el vuelo, movimientos lentos, disminución de las
posturas, disminución y suspensión de la alimentación.

4.3.1 MUESTRAS A ENVIAR AL LABORATORIO

 Se debe recolectar la mayor cantidad de insectos, tanto los que se
sospecha están enfermos o tienen los síntomas y signos específicos
como los que están aparentemente sanos.

52 Este material se debe enviar al laboratorio en el medio donde se

encontró (suelo, hojas, troncos, etc.) o en frascos con tul o una tapa
perforada, que garanticen la llegada de los insectos vivos al
laboratorio, se deben transportar lo más rápido posible. Si los insectos
se encuentran muertos se envían en frascos sin adicionar ninguna
sustancia.
• Número de especímenes a enviar

El número ideal es de 10 especímenes.

• Horas de recolecta

Depende de la actividad particular de cada insecto (hábitos) de manera

muy general para los insectos diurnos a partir de la 10 de la mañana y
para los de hábitos crepusculares y nocturnos a partir de la 6 de la
tarde.

Sin embargo hay que tener en cuenta que las condiciones ambientales
como lluvias, vientos excesivos, granizadas, bajas temperaturas, entre
otros, pueden reducir la actividad de muchos insectos, lo que hace
difícil visualizarlos y recolectarlos.

4.4 EQUIPOS DE RECOLECCIÓN DE INSECTOS

o Red entomológica o jamas (insectos que saltan o vuelan)

o Bolsas plásticas claras para facilitar ver los insectos capturados.
o Frascos letales u otros materiales letales (alcohol, agua caliente, acetato de
etilo)
o Frasco aspirador o de succión
o Carpeta de recolección (hojas de papel, cartulina, costales, etc) se
utiliza para los insectos que se encuentran en árboles y arbustos en
vez de utilizar la jama, se utiliza por comodidad. Esta consiste en un
retazo de lona o tela de 50 x 60 cms aproximadamente de color
blanco. Este debe tener dos ejes diagonales de soporte que pueden
ser varillas de alambre o madera; se coloca debajo de la rama con el
objeto de que los insectos caigan. Por último se realiza la recolección
manual o con el tubo aspirador, según el caso.
o Cribas o angeo (Esto sirve para insectos que viven dentro del suelo o
deambulan por la superficie)
o Trampa de caída
o Embudo de berlese 53
o Trampa de luz
o Cebos trampas
o Trampas específicas
 • Instrumentos de muestreo

• Empaques transitorios: estos se utilizan cuando se trata de

recolecciones o muestras muy abundantes, son los adecuados
para guardar mariposas o libélulas.
• Palas de jardinería: esta es muy útil para captura de insectos subterráneos
• Pinzas: más usado en laboratorio o para manipular insectos que
pueden causar picaduras o mordeduras.
• Papel absorbente
• Bolsas plásticas
• Tijeras podadoras o machete
• Lápiz para el marcado de la muestra

54
Tabla 12. SÍNTOMAS MÁS COMUNES ENCONTRADOS EN
PLANTAS ASOCIADOS A DAÑOS POR INSECTOS O
ARTRÓPODOS.
ESTRUCT
AGE URA
SÍNTOM TOMA DE MUESTRA OBSERVACIONES
NTE VEGETA
AS
CAU L
SAL DONDE
SE
UBICA
Ácaros
H Estas se envían
Salta Recolectar hojas,
Agallas oj envueltas en papel
hojas tallos y raíces con
as absorbente y en una
Larvas sintomatología
Tal bolsa plástica.
de
lo
mosca
s
s
Ra
íc
es
Los insectos que se
Nódu Gus Raíz y encuentren se
los y ano suelo Recolectar raíces empacan en frascos
agall s alreded y suelo con alcohol y si son
as en Perl or de numerosos se
raíce as estas. envían en el
s de sustrato o
Tier estructura afectada.
ra
Ác Hojas, Recolectar todas En el formulario
Torcimient aro Ramas las estructuras con enfatice labores
o s Tallos, la sintomatología culturales, factores
Thr Cogollo más típica. ambientales y de
ips s manejo
Mo
sca
s
Recolectar Enfatice humedad
Tal
Edema Insecto del suelo,
s los
toda las condiciones
Fr
estructuras con ambientales y de
ut
sintomatología manejo
os
Se deben
recolectar muchos No tome muestras en
Roña Ácaros Frutos frutos con esta 55
avanzado estado de
sintomatología. No descomposición.
se recomienda
recoger las
muestras del
suelo.
 ESTRU
AG CTURA
SÍNTOM TOMA DE OBSERVACIONE
ENT VEGET
AS MUESTRA S
E AL
CA DONDE
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Hojas Estas se envían
aro Resaltar prácticas
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s, culturales, y
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Thr condiciones
torcidas una bolsa plástica.
ips climáticas
y
otr
os
insecto
s
La muestra se
Tubérc envía igual que las
Estructura Gus ulos de muerte Resaltar prácticas
s ano Tallos repentina. culturales
perforada s Ramas Se recomienda no
s Ter Frutos recoger los frutos
mit del suelo, se
as prefiere material
del árbol que
presente la
sintomatología
Plantas La mayoría de los
cortadas Gusano Tallos Plantas pequeñas insectos que causan
a ras de s este problema son
suelo de hábitos
nocturnos
En plantas
pequeñas Empaque por
recolecte una o separado la raíz y el
Larvas Ra dos plantas con suelo de tallos,
de íce diferente estado ramas y hojas.
Defoliaci
marip s de desarrollo del
ones
osas Tal problema. Algunos de los
Larvas los Plantas de porte insectos causantes
de Ra alto recolecte una se pueden quedar
cucarr m porción de cada quietos o
ones as estructura envíe camuflarse con el
Ho muestra de las tejido vegetal.
jas diferentes partes
de la planta (raíz,
ramas, hojas)
 Poliniz Estas se envían
ación envueltas en papel
Flores
deficie Se envían flores, absorbente y en una
abortada
nte Flores bolsa plástica.
s Muerte cogollos y ramas
Larvas Especifique
del
de condiciones
cogollo
mosca climáticas de la
s zona (lluvias,
Condic veranos
iones prolongados,
ambie vientos fuertes)
ntales
extre
mas
Cucar
rones
Hojas con peque
agujeros ños a Estas se envían
pegadas menu Hojas envueltas en
tatuadas do de papel
o con colore absorbente y en
minas s una bolsa
brillan plástica.
tes.
Gusan
os
Hormi
gas
Grillos
Chinc
hes

Estos síntomas pueden ser causados por otros organismos como hongos,
bacterias, micoplasma,
56 virus, nematodos o problemas abióticos ver diagnóstico de daños causados por
enfermedades.
 5. DIAGNÓSTICO DE DAÑOS CAUSADOS POR
ENFERMEDADES (DIAGNÓSTICO
FITOPATOLÓGICO)

5.1 DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD

A continuación se presentan una serie de síntomas típicos, para los

cuales se determinan algunos de sus agentes causales en orden de
importancia.

Entre paréntesis se indica como clave la primera letra de

las siguientes causas: Hongo(H), Bacteria(B),
Micoplasma(M), Virus(V), Nematodo(N) y Abiótica(A).

5.1.1 SÍNTOMAS POR CAUSAS BIÓTICAS

• MANCHAS FOLIARES (royas, oidiosis, mildius, sarna, antracnosis, tizones, etc.)

Cloróticas (A,B,H,M,V), oscuras (H,N), mosaicos(V), traslúcidas (B),

venales (V,H), intervenales (H,B,V,A), redondas (H,B), angulares (H,B),
alargadas (H,N), corchosas (V), necróticas (H,B,V), gomosas (V),
pústulas (H), y chancros (H,B). Ocurren en necrosis terminal (H,B,A):
destruyen la punta de crecimiento en tallo, tubérculo o raíz y matan un
órgano como la flor, órganos sexuales y frutos.
En este caso colecte al menos 15 hojas representativas de todos los
estadíos de infección. Para plantas con hojas pequeñas, corte una rama
con sus hojas intactas. Empaque en papel toalla y luego en bolsa 57
plástica sellada. Para las hojas muy suculentas limpie el exceso de
humedad y empáquelas individualmente en doble papel toalla seco y
colóquelas en una bolsa de plástico. Adjunte información sobre
aplicación de pesticidas y condiciones ambientales que precedieron la
toma de la muestra.
• MARCHITEZ, MUERTE REGRESIVA, PUDRICIONES
RADICULARES Y DEFOLIACIÓN, TAPONAMIENTOS
VASCULARES, AMARILLEZ (H,B,M,A):
Las sustancias producidas o inducidas por determinados patógenos,
reducen la translocación en el xilema (marchitez) o en el floema
(tuberización aérea, malnutrición subterránea). Otros factores

causantes de esta sintomatología pueden ser el exceso de agua, sales

solubles, sequía o toxicidad.
En este caso colecte toda la planta, de ser posible, con raíz y suelo.
Extraiga las plantas herbáceas cuidadosamente del suelo, de tal forma
que las raíces se mantengan intactas con su rizósfera (suelo alrededor
de las raíces), Coloque las raíces con su rizósfera en una bolsa plástica;
y empaque la parte aérea con papel toalla y bolsa plástica sellada.

En el caso de plantas perennes colecte un manojo generoso de las

raíces alimenticias (las más delgadas) con su rizósfera y empaque en
una bolsa plástica sellada; incluya además raíces largas que muestren
pudrición con suelo.

En este caso colecte además varias ramas o ramillas con follaje

mostrando un rango de síntomas, empaque con papel toalla y bolsa
plástica sellada. Describa correctamente la sintomatología observada
como decoloración de raíces, chancros, etc.

• PUDRICIÓN (B,H):
La desintegración de tejidos ocurre por acción de patógenos. Mas
común en órganos de reserva (frutos, raíces, tubérculos)

5.2 FRUTOS Y OTROS TEJIDOS FRESCOS O SUCULENTOS:

 Evitar empacar frutos u otros órganos frescos mostrando estados
avanzados de pudrición. Seleccione muestras con estados tempranos
de la infección o daño. Limpie el exceso de humedad y envuelva los
frutos o vegetales individualmente en doble papel toalla seco y
colóquelo en una
58
bolsa de plástico.

Envíe el material en un empaque a prueba de choque (nevera de icopor

y papel toalla de relleno). Para evitar la maceración de los tejidos.
5.3 FLORES Y FRUTILLOS CUAJADOS:

Colecte buena cantidad de flores y frutillos con pedúnculos y ramas,

empaque en papel toalla y luego en bolsa plástica sellada, evite que la

muestra esté húmeda.

• CRECIMIENTO ANORMAL:

Se hace evidente en las formas de hipertrofia, hiperplasia, fasciación,

epinastia, distorsión abscisión prematura (B,H,N,V)

• CHANCROS Y AGALLAS:

Seleccionar ramas o ramillas con agallas jóvenes. Cortar ramas sanas y

afectadas. Colocar las muestras sin humedad en un papel grueso
sellado o en un envase hermético, no en bolsa plástica.

Colecte el suelo circundante al pie de la planta y empaque en una bolsa plástica

sellada.

• CARBONES EN ESPIGAS, MAZORCAS, TUBÉRCULOS:

Colecte varias espigas (cereales, pastos, forrajes, caña de azúcar, etc.)

y frutos (mazorcas de maíz, tubérculos de papa, etc.) y envuélvalos
individualmente en papel toalla y luego en bolsa de plástico selladas.
Empaque la muestra en el sitio de infección del cultivo dado que este
patógeno se distribuye fácilmente y contamina el resto del cultivo.

59
 6. TOMA Y ENVÍO DE MUESTRAS PARA
ANÁLISIS NEMATOLÓGICO

En cualquier ambiente que los nematodos se encuentren, su

distribución es irregular. Debido a su poca movilidad, se encuentran
localizados en ciertas zonas de un campo. Como no es posible
examinar todo el ambiente en que los nematodos se encuentran y
muchas veces no se sabe en qué zonas están, es necesario hacer un
muestreo según la finalidad que se persiga:
• Con fines de diagnosis:
Se realiza cuando se observan los síntomas en el campo, a fin de
relacionar la sintomatología con la densidad poblacional de nemátodos.
• Muestreo de Cultivos anuales
Con un barreno o una palita se toman tres muestras por parche o zona
afectada. La primera muestra se toma dentro del parche; la segunda
en el límite entre el parche y las plantas sanas; y la tercera fuera del
parche donde crecen plantas aparentemente sanas.
• Muestreo de Cultivos perennes (frutales):
En árboles se deben tomar muestras alrededor del árbol, justo en la
proyección de la copa, las que luego se mezclan. A veces es
recomendable muestrear árboles con diferentes grados de la
enfermedad.
• Con fines de determinación de la densidad media
Se realiza para determinar la población de nemátodos presentes en el
campo. Los resultados se utilizan para decidir las medidas de control a
implementar.
Se recomiendan tomar muestras de 30 puntos por hectárea, quitar la
capa superficial del suelo, luego se toma la submuestra hasta una
profundidad entre 0 – 30 cm. las que se juntan en un balde. No tome
muestras en las calles ni de plantas muertas y evite el efecto de borde
(orillas del cultivo).
• NODULACIONES:
Colecte suelo y los tejidos con diferentes grados de síntomas, empaque
conjuntamente en bolsa plástica sellada.

60
 7. SÍNTOMAS POR CIRCUSTANCIAS PARTICULARES
DEL AMBIENTE

Los factores del ambiente no biótico (temperatura, humedad, toxicidad,

deficiencias nutricionales etc.), pueden afectar las plantas
directamente o predisponerlas al ataque de agentes causantes de
enfermedades.

• CAUSAS ABIÓTICAS

Las enfermedades pueden resultar de temperaturas inapropiadas,

exceso o falta de agua o nutrientes, toxicidad por residuos de cultivos
anteriores o productos químicos aplicados a estos, toxicidad ambiental
y hasta la caída de un rayo.
La distribución de la enfermedad en un campo puede ser la clave de algunas de
éstas.

Deficiencia de calcio Estrés hídrico Daño por granizo

Recolecte: todos los detalles de la afección, especifique humedad del

suelo y las condiciones ambientales precedentes, anote la distribución
de la sintomatología en la planta y en el campo, así como las labores
culturales realizadas (aplicaciones de plaguicidas, herbicidas,
fertilizantes etc.).

• FACTORES DE PREDISPOSICIÓN

Los factores ambientales que favorecen la incidencia y afección por los

patógenos son temperaturas y humedades desfavorables a la planta y
favorables al patógeno; deficiencias nutricionales o excesos de
fertilización favorables para el crecimiento de patógenos; acumulación

61
de sustancias metabólicas en condiciones de almacenaje; carencia de
oxígeno (por exceso de agua); carencia o exceso de radiación solar;
efecto residual de herbicidas usados para otros cultivos no
susceptibles; prácticas culturales inapropiadas (daño a la deshierba,
riegos o podas inoportunas y suelos compactos).
 • SIGNOS DEL PATÓGENO

Algunos patógenos son reconocidos a simple vista sobre las plantas

afectadas. El aspecto algodonoso o pulverulento de otros, los delata.
Los picnídios de algunos hongos, en cambio, son apenas perceptibles,
pero con una lupa de 10X se observa su presencia. Las hembras de
algunos nemátodos forman quistes o agallas característicos en ciertos
cultivos, que pueden ser reconocidos a simple vista por los
especialistas. Las bacterias pueden formar exudados característicos,
pero los micoplasmas y virus, solo se pueden ver con equipos
especializados. Cuando las causas del daño fitopatológico no pueden
determinarse en forma directa, es necesario seguir una serie de
técnicas de laboratorio que nos permitan llegar a la conclusión del
diagnóstico.

Carbón del maíz Monilia en cacao Roya Escoba de bruja

Por lo anteriormente expuesto, cada sintomatología de campo requiere

de un material vegetal y de unas técnicas de diagnóstico especificas.

8. INSTRUMENTOS PARA MUESTREO DE ENFERMEDADES

Se requiere:

o Papel absorbente, el cual puede remplazarse por hojas de papel periódico

o Bolsas plásticas en lo posible de color oscuro
o Tijeras podadoras o machete para tomar el trozo de la planta a enviar
o Cinta de enmascarar
o Lapicero para el marcado de la muestra
o Nevera de icopor con hielo seco o en su defecto con bolsas con agua
congeladas aisladas de la muestra para evitar que esta se queme

62
por el frío, o se moje al descongelarse, tener a la mano el protocolo
para consignar la información, o en su defecto una hojas en blanco
donde se recopile los datos mas relevantes.
 9. MUESTRAS PARA DETERMINAR
HONGOS ANTAGÓNICOS

Para el diagnóstico de hongos antagónicos, se recomienda observar en

el cultivo que esta siendo afectado, las plantas que aparentemente se
encuentran más sanas o que muestren tolerancia a la enfermedad, de
estas se debe tomar en diferentes partes una cantidad de
aproximadamente 500 gramos del suelo que esta alrededor de las
raíces, el cual se empaca y envía al laboratorio, para que los hongos
sean diagnosticados, aislados y repicados masivamente.

Trichoderma sp Beauveria bassiana

10. SÍNTOMAS DE PRESUNCIÓN VIRAL

DEFORMACIÓN DE HOJAS, MOSAICO, ACLARACIÓN DE VENAS,

MANCHAS ANILLADAS, ENANISMOS.

Colecte tres o cuatro hojas del cogollo (hojas más jóvenes) y otras dos
o tres con la expresión de los síntomas representativos, las hojas deben
ir envueltas en papel aluminio o papel toalla y con bolsa plástica
sellada. Si el envío va tardar más de un día debe enviarse refrigerado
evitando a toda costa que la muestra se moje, en caso de que el envío
se haga el mismo día puede enviarse las hojas en un sobre de Manila.
El mantenimiento de muestras frescas es esencial para el diagnóstico de virus.

63
Virus en papa Virus en tomate
 11. MUESTRAS PARA DETERMINAR DAÑO
POR HERBICIDAS

Este tipo de diagnóstico se realiza en laboratorios especializados, y

necesita ser especifico en la demanda del servicio o sea tener claro de
cual grupo de herbicida se sospecha.

La visita del técnico, en este caso es importante dado que realiza una
observación integrada de la problemática como el estado del cultivo,
área afectada, estado de las malezas, revisión de la sintomatología,
tanto en el cultivo como en las malezas de hoja ancha.

Cuando se toman este tipo de muestras se deben hacer observaciones

a nivel de campo que pueden ayudar al diagnóstico como son:
encrespamiento de hojas nuevas, engrosamiento de venas, la lamina
foliar aparece encorvada hacia arriba o hacia abajo, observar si la
sintomatología es generalizada o en focos, si los potreros cercanos
están quemados o no, si la sintomatología es mas fuerte en las orillas
del cultivo, si las malezas dentro del cultivo se encuentran afectadas.

Aclarar si la toxicidad es por una aplicación o por la utilización de

abono orgánico no madurado y con residuos de herbicidas.

Para el diagnóstico se debe recolectar material de planta severa,

mediana y levemente afectadas y enviar material suficiente de hojas,
tallos a fin de determinar el producto que causó la toxicidad.

Fototoxicidad
64
 12. MUESTRAS PARA DETERMINAR VIABILIDAD 65

DE SEMILLAS

Las semillas son las estructuras responsables de perpetuar la especie,

éstas se encuentran biológicamente en reposo, contienen un embrión
con actividad metabólica.
Poseen la facultad de germinar, emerger y dar origen a plantas sanas y
vigorosas. Para lo cual deben estar intactos sus componentes, de
manera que le permitan mantenerla no solo viva, sino con altos índices
de vitalidad.

La semilla tiene 3 partes básicas: el embrión, tejidos de reserva

alimenticia y la cubierta. La cual va siendo modificada durante el
desarrollo, en la madurez presenta una apariencia característica,
generalmente seca, endurecida, engrosada y de color café. La
envoltura proporciona a la semilla protección mecánica para el
embrión, haciendo posible manejar la semilla sin dañarla, pudiendo así
ser almacenada por períodos considerables de tiempo.

La viabilidad es la capacidad de la semilla para conservarse viva y germinar.

La prueba estándar para determinar la viabilidad es la prueba rápida de
TZC (tetrazolio) que es un compuesto orgánico que en contacto con las
partes vivas de la semilla colorea los tejidos de rojo, siendo esta una
reacción enzimática.

La cantidad de muestra a enviar es de más o menos 100 gramos de

semilla. La prueba tiene una duración de 18 a 24 horas. Esta prueba no
diferencia semillas vivas de semillas latentes.
 13. ANEXOS

No.
SERVICIO NACIONAL DE DIAGNÓSTICO
VETERINARIO FORMATO ÚNICO DE RECEPCIÓN USO DIAGNÓSTICO
Y PROCESAMIENTO
DE MUESTRAS1.OFICINA RECEPTORIA

FECHA DE RECEPCIÓN:
D M A
2.IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN
PROPIETARIO: PREDIO: TELÉFONO:

MUNICIPIO: VEREDA: DEPARTAMENTO:

MED. VETERINARIO: TELÉFONO:

3.MOTIVOS DE SOLICITUD

Diagnóstico Movilización Cuarentena Compraventa

Otro Cuál

4.TPO DE EXPLOTACIÓN
BOVINOS AV PORCINOS EQUINOS OVINOS- OTRA
ES CAPRINOS ESPECIE

Le Comercial postura Comercial cría Labor Comercial Cuál

ch Comercial engorde Comercial engorde Deporte Urbano
e Comercial completo Paso fino Rural
Ca Comercial reproducción Urbano Raza: Raza:
rn Comercial postura engorde Rural
e Traspatio
Doble Raza:
propósito Raza:
Raza:

5.NOTIFICACIÓN
6.CRONOLOGÍA
Dí M Añ
Predios vecinos afectados a es o
SÍ NO
Primer enfermo
CUÁNTOS Notificación
Primera visita Méd. Vet.
7. SINTOMATOLOGÍA
8.LESIONES EN LA NECROPSIA
66 9. DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO:
 10. IDENTIFICACIÓN - MANEJO

Ident Se E
da Vacunas y fecha (mes y SISTEMA DE ALIMENTACIÓN:
if. xo año)
d
me
se
s
TRATAMIENTO:

11. TOMA DE MUESTRAS

Tipo de muestra: Día Me Añ
s o
Lugar y nombre laboratorio de envío:
TOMA

Edad: Sexo: ENVÍO

12. POBLACIÓN
ESPECIE POBLACIÓN POBLACIÓN
ESPECIE
Enfermos Muertos(1) Total Enfermos Muertos(1)Total
B Terneros (as)< 1 año C Hembras 1-2 años
O A Hembras>2 años
Hembras 1-2 años N
V I Machos 1-2 años
I Hembras>2 años N
N Machos 1-2 años S Machos>2 años
O
O TOTAL
S Machos>2 años
TOTAL F Hembras 1-2 años
P Lactantes<2 meses E Hembras>2 años
L
O
R Machos 2-6 meses I Machos 1-2 años
N
CI
N Hembras 2-6 meses O Machos>2 años
S
O
S Machos>6 meses TOTAL
Hembras>6 meses S Hembras 1-2 años
I
TOTAL L Hembras>2 años
V
OVI-CAPRINOS E
S
Machos 1-2 años
T
EQUINOS R Machos>2 años
E
<4 semanas TOTAL
A
V 4-7semanas OTROS
E 8-22semanas
S >22 semanas
TOTAL
(1) Los muertos se consideran que enfermaron, inclúyalos en los enfermos.

13. PRUEBAS SOLICITADAS

VIROLOGÍA TOXICOLOGÍA / PARASITOLOGÍA BACTERIOLOGÍA HISTOPATOLO
QUÍMICA GÍA

14. RESULTADOS

67
 DIAGNÓSTICO VEGETAL Muestra Fecha
INFORMACIÓN QUE DEBE ACOMPAÑAR SU
MUESTRA
Seccional: ANTIOQUIA

1.INFORMACIÓN GENERAL

1.2 Ciudad:
1.1 Interesado:
Análisis

1.3 FAX: 1.4 Teléfono: DIRECCIÓN: Patológico

Entomológico

2.INFORMACIÓN FINCA

2.1 Nombre de la finca: 2.2 Vereda:

2.3 Municipio: 2.4 Departamento:

PROPIETARIO:
TEMPERATURA MEDIA:

2.5 Altitud msnm:

TEXTURA DEL SUELO PESADA MEDIA LIVIANA

3.INFORMACIÓN CONDICIONES CLIMÁTICAS UNA SEMANA ANTERIOR A LOS

PRIMEROS SÍNTOMAS

3.1 Vientos Escasos Normales Fuertes

3.2 Lluviosidad Alta Media Baja

3.3 Humedad Relativa Alta Media Baja

4.INFORMACIÓN SOBRE EL CULTIVO AFECTADO

4.1 Nacional 4.2 Material importado

• Especie/Cultivo
4.2.1 Procedencia

(país de origen)

• Área cultivada
4.2.2 Firma

68
• Variedad 4.6 Edad

PROCEDENCIA DE LA SEMILLA

2.5 Estado de desarrollo del cultivo: (marcar con x)

 5.INFORMACIÓN DE LA PARTE AFECTADA (indique con X)

EXTENSI CULTIVADA EXTENSIÓN AFECTADA

ÓN

5.1 Semilla 5.2 Raíz 5.3 Tallo 5.4 Hojas 5.5 Ramas

5.6 Flores 5.7 5.8 Bulbos 5.9 Tubérculo Otro

Frutos
Cuales:

6.INFORMACIÓN SOBRE APARIENCIA GENERAL (Solo para muestras fitopatológicas)

(Indique con X)

6.1 Marchitez 6.2 Con áreas muertas 6.3 Amarillamiento 6.4 Quemazón

6.5 Enanismo 6.6 Pudrición 6.7 Manchas Otro

Cuales:

7.INFORMACIÓN DAÑOS (Solo para muestras entomológicas) (Indique con X)

Estado:

7.1 Adulto 7.2 Larva 7.3 Ninfa 7.4 Otros Cuales

7.5 Barrenador 7.6 Raspador 7.7 Minador 7.8 Chupador Cuales

7.9 Comedor de follaje Otros Cuales:

8.INFORMACIÓN DAÑOS (Indique con X)

Distribución:

8.1 General 8.2 Por Zonas 8.3 Plantas aisladas 8.4 Pendiente
8.5 Plano 8.6 Zonas altas 8.7 Zonas bajas 8.8 Zonas
húmedas Severidad:
8.9 Alta 8.10 Media 8.11 Baja

9.AGROQUÍMICOS APLICADOS (fungicidas, insecticidas, herbicidas, fertilizantes, etc.)

 NOMBRE DOSIS FRECUENCIA DE APLICACIÓN

10. 69
RESULTADO
S