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Universidad Rafael Landivar

Biología Forense
Practica No. 15
ESTUDIOS ENZIMÁTICOS
Una enzima es una proteína que cataliza las reacciones bioquímicas del metabolismo. Las enzimas
actúan sobre las moléculas conocidas como sustratos y permiten el desarrollo de los diversos procesos
celulares. Es importante determinar además de todo lo expuesto que las enzimas se caracterizan por
contar con una serie de señas de identidad propias que las determinan en todos y cada uno de sus
aspectos. En este sentido podemos exponer, por ejemplo, que poseen la capacidad para contar con unos
tamaños muy diferentes de tal modo que hay desde las que tienen 2.500 aminoácidos hasta las que, sin
embargo, rondan los 50. Y además poseen elementos fundamentales para su funcionamiento tales como
el centro activo o la cadena de aminoácidos, entre otros muchos más.

Es importante destacar que las enzimas no modifican el balance energético ni el equilibrio de


aquellas reacciones en las que intervienen: su función se limita a ayudar a acelerar el proceso. Esto
quiere decir que la reacción bajo el control de una enzima alcanza su equilibrio de manera mucho más
rápida que una reacción no catalizada. Se estima que las enzimas catalizan cerca de 4.000 reacciones
bioquímicas diferentes.

Existen distintas moléculas que afectan la actividad de las enzimas. Se conoce como inhibidor
enzimático, por ejemplo, a la molécula que impide la actividad de la enzima o que disminuye su efecto.
Existen fármacos y drogas que actúan como inhibidores. Los activadores enzimáticos, en cambio,
incrementan su actividad. Hay que tener en cuenta que el pH, la temperatura y otros factores físicos y
químicos inciden en la actividad enzimática.

Los especialistas distinguen entre seis grandes tipos de enzimas de acuerdo a la reacción que se
encargan de catalizar: las oxirreductasas, las transferasas, las hidrolasas, las isomerasas, las liasas
y las ligasas. Se conoce como número EC al esquema de clasificación numérica de las enzimas que se
basa en las reacciones químicas que catalizan.

Las enzimas suelen ser utilizadas a nivel comercial e industrial para la producción de alimentos, el
desarrollo de biocombustibles y la elaboración de productos de limpieza (como detergentes), por ejemplo.
Además de todo lo expuesto no podemos pasar por alto el hecho de que en los últimos meses se ha
convertido en un auténtico boom de ventas un libro que usa en su título el concepto que ahora estamos
abordando. Nos estamos refiriendo a la obra “La enzima prodigiosa”, que ha sido escrita por el doctor
Hiromi Shinya.

OBJETIVOS:

A. El estudiante podrá experimentar reacciones enzimáticas con productos biológicos


B. El estudiante reconoce la función de las enzimas en los procesos bioquímicos.
C. El estudiante identifica las manchas de saliva en sustratos sólidos no absorbentes.

1) HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN POR LA SALIVA:

Técnica:
Primero se hace un tubo patrón con 2ml de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de disolución
de yodo (lugol). Observar el resultado. Después se calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla
pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar lo sucedido.
Colocar en un segundo tubo 2ml de la disolución de almidón y una cierta cantidad de saliva, mezclar bien
la saliva con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos. Añadir unas gotas de
lugol. Anotar los resultados y dar una explicación a lo ocurrido.

a. De acuerdo a sus observaciones, explique el fundamento de la reacción enzimática del tubo 1 y


del tubo 2
b. Cuál fue la función de la saliva en el tubo No.2.
c. Que función tiene la enzima hidrolasa y/o amilasa presente en la saliva, en la digestión de los
limentos
d. Que pruebas podemos analizar en la saliva
e. Por qué se recomienda la salíva como fluido principal para análisis de ADN.

 2) RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA EN TEJIDOS:


TÉCNICA

 Poner en cinco tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos (más o menos el mismo peso de
cada tejido). HIGADO ZANAHORIA, PIMIENTO, ARVEJAS VERDES Y APIO
 Añadir 5ml de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede.

 Explicar lo ocurrido y ordenar los tejidos según su actividad.

 Repetir el proceso anterior, pero hervir antes los tejidos durante diez minutos.

 Explicar los resultados obtenidos.


¿Cuál es la función de la catalasa?
¿Qué reacción tiene la catalasa sobre el agua oxigenada?

3) ACTIVIDAD CATALÍTICA DE LA CATALASA:

FUNDAMENTO & TÉCNICA:


En un tubo de ensayo se coloca un trozo de hígado (o 1ml de extracto de hígado) y 10ml de agua
oxigenada. Se cierra el tubo con un tapón, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos
en la reacción, en cuyo centro exista un orificio por el cual se pueda introducir un termómetro. Así, hemos
hecho un calorímetro.
Se anota la temperatura ambiente, que se toma como temperatura inicial de la reacción, y después se va
anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calorímetro cada treinta
segundos durante un período de cinco minutos. Hacer la gráfica de la reacción y explicar los resultados.

CUESTIONARIO:

a. ¿Cuáles son las funciones de las enzimas?


b. ¿Qué efecto tienen en el proceso de descomposición de los cadáveres?
c. Investigue la importancia forense o su aplicación en el campo de la criminalística
d. Elabore un caso hipotético sobre la aplicación de las enzimas.
e. ¿Qué función tienen las enzimas en la síntesis de ADN?
f. Describa las enzimas que participan en la síntesis de ADN
g. Que función tienen las enzimas digestivas
h. Explique la técnica para identificar saliva en una escena del crimen. (Identificación o
localización, verificación o confirmación de saliva)
i. Busque un caso hipotético o real donde la saliva tome un rol principal de un análisis
forense.
j. Que función tienen las enzimas en las muestras biológicas expuestas al ambiente?? Como
le ayuda o perjudica en la colección, embalaje y transporte de muestras biológicas
forenses?

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