UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

Escuela Profesional de Farmacia y Bioquímica

LABORATORIO DE TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL

CURSO: TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL

PROFESOR: APESTEGUÍA INFANTES, José A

PRACTICA Nº 13

TITULO:

EXTRACCION DE TOXICOS ORGANICOS FIJOS MARCHA ANALÍTICA DE

SEPARACIÓN; TOXICO ÁCIDOS DÉBILES FUERTES, NEUTROS Y
ALCALINOS

Grupo Nº1.

INTEGRANTES:

GUERRA URIBE, Misael

HERNÁNDEZ TORRES, Cristian Anthony
REGALADO ESCOBEDO, Jean Pierre
SEGOVIA HUARCAYA, Juan Jharol

HORARIO DE PRACTICAS
DIA: Lunes
HORA: 10:00-13:20 pm

FECHA de REALIZACIÓN de la PRACTICA: 13-05-2019

FECHA de ENTREGA del INFORME: 20-05-2019

LIMA-PERU
A. TÍTULO:

EXTRACCION DE TÓXICOS ORGÁNICOS FIJOS MARCHA ANALÍTICA DE

SEPARACIÓN; TOXICO ÁCIDOS DÉBILES FUERTES, NEUTROS Y
ALCALINOS.

B. OBJETIVOS
 Obtener una muestra de análisis libre de contaminantes.
 Realizar la identificación de compuestos tóxicos en las muestras.
C. FUNDAMENTO TEORICO
Los tóxicos orgánicos fijos son tóxicos sólidos o líquidos que forman sales y que
pueden separarse de acuerdo a su solubilidad en solventes orgánicos y en el
agua y a diferente pH. Se van a encontrar al ser ingeridos por el hombre en los
medios biológicos que se solubilizan en la circulación bajo la forma de
albuminados. Ahora bien, estas combinaciones de sustancias orgánicas de los
tejidos con los venenos metálicos están enmascaradas y para llegar a
descubrirlas, es necesario ante todo destruir la materia orgánica.1
El objetivo del toxicológico en la búsqueda de los venenos minerales es, por
tanto, aislar de los órganos no la sustancia química exacta que ha provocado
los accidente, sino el elemento toxico que es el principio activo de los mismos.
El aislamiento de este en ciertos casos puede efectuarse de acuerdo con
diversas técnicas basadas en la volatilidad relativa.1
Pero en la mayor parte de los tóxicos minerales la separación se efectúa
después de la destrucción de la materia orgánica de forma que se simplifique el
problema en el que se encontraran los elemento buscados en forma ionizada
que es la que se presta a su identificación por los métodos analíticos clásicos.1

CLASIFICACIÓN DE TÓXICOS ORGÁNICOS:

A. ÁCIDOS: Dentro de estos tenemos lo ácidos débiles como por ejemplo
los barbitúricos o también tenemos los ácidos fuertes por ejemplo los
salicilatos, unos y otros extraíbles con disolventes orgánicos en medio
acido.
B. BÁSICOS: Extraíbles con disolventes orgánicos en medio básico como
los alcaloides, antidepresivos tricíclicos
C. NEUTRO: Extraíbles con disolventes orgánicos en medio acido o básico

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D. METODOLOGIA.

Método de Curry
5mL o 5g (contenido: gástrico, orina, sangre)

1. 6 mL de Tungstato de sodio al 10%

2. 9 mL de Ácido Sulfúrico 2/3 N
3. 5mL de agua destilada
4. 1 mL de Hidroxido de Sodio al 10%

Baño María por 15 minutos

Filtrar en caliente Sol. Trasnparente

Extraer con 1/3 vol. De CHCl3

Fase Orgánica Agitar por Fase Acuosa

3 min.

Extraer NaOH 10%

hasta pH +/- 9.5
Evaporar a -Órgano: Fosforado,
sequedad 10 Clorado, Carbámico
gotas de - Salicilatos
cloroformo - Barbituricos Extraer con 1/3 vol. De CHCl3
- Benzodiacepinas
- Cumarinas
- Sulfas Residuo Fase
Cromatografía - Digitalicos Acuoso Orgánica
SS (MeOH : -Marihuana
Acetona) 1:1 - Tóxicos
- Ácidos fuertes y débiles Evaporar a - Alcaloides
-Toxicos Neutros sequedad 10 - Benzodiacepinas
gotas de - Fenotiacinas
cloroformo - Tóxicos alcalinos

Cromatografía SS
(MeOH : Cloroformo)

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Método de Curry

Tóxicos Alcalinos (TA) Tóx. Ac. Fuertes (TAF)

Tox. C. Debiles (TAD)
Tox. Neutros (TN)

+ NH4OH, pH 9.5
+ Extraer 50 mL Cl3CH + 50 mL + 50 mL NaHCOO3 5%
Agitar 3-5 min. Agitar 4-5 min. Agitar 3-5 min.

TAD
TAF
TN

Evaporar Cl3CH

+ 5 mL
+ Gts HCl pH: 3 NaOH
Agitar con Cl3CH 2.5%
R4
TA Agitar 3
min.

Evaporar Cl3CH
+ 2 Gts
HCl pH
TAD 3
R1
TAF Extraer
Cl3CH

Evaporar Evaporar
Cl3CH

R2 R3
TAD TN

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E. RESULTADOS

De los 4 compuestos que se extrajeron se analizó solo el ácido débil, para

este caso salicilatos.
Se realizó una cromatografía en capa fina, teniendo como sistema de solventes
metanol y acetona en proporción 1:1.

Figura 1. Resultado de la cromatografía, donde se

observa que ninguna muestra tenía salicilatos.

F. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Los métodos de separación de tóxicos fijos orgánicos como el método de Curry,

si bien es cierto son aplicables para la separación de tóxicos ácidos débiles
fuertes, neutros y alcalinos, pueden presentar algunas desventajas como el
tiempo de extracción y la utilización de solventes tóxicos, además de que

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algunos compuestos no son fácilmente extraídos con este método. Por lo que
algunos compuestos presentan una metodología especial para su extracción2.

Bogusz3 indica que el paso más crítico en el análisis toxicológico es el

pretratamiento de muestras humanas. En general, la precipitación de proteínas
(PP), la extracción líquido-líquido (LLE) y la extracción en fase sólida (SPE) son
las que actualmente se utilizan como técnicas de pretratamiento en el análisis
toxicológico. Aunque el PP y el LLE son métodos sencillos, la purificación
inadecuada de las muestras puede causar la contaminación del instrumento y
de las muestras problema con la fiabilidad de los valores cuantitativos. Mientras
que la SPE tiene una alta sensibilidad y el extracto puede contener menos
sustancias interferentes que después de PP o LLE, el procedimiento de
extracción es relativamente laborioso y lleva mucho tiempo. Drummer4
menciona que en la extracción de drogas básicas se emplea una columna de
sephadex para lo cual se toma el pH de la muestra y de acuerdo a su valor se
alcaliniza la muestra con amoníaco hasta pH 9-10. Se carga la columna con un
volumen de la misma, se espera 15 minutos para que la muestra penetre en la
columna y la impregne. Se eluye con un solvente adecuado (cloroformo, o
cloroformo:isopropanol 9:1). El eluído se separa en dos cápsulas de porcelana.
Se evaporan los extractos, que contendrán los tóxicos orgánicos fijos de carácter
básico, a sequedad y se procede luego a su investigación.

G. CONCLUSIONES
 Mediante los métodos de purificación se logró obtener una muestra de
análisis libre de contaminantes.
 Utilizando diversos métodos de aislamiento se logró realizar la
identificación de compuestos tóxicos en las muestras.

E.-RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar toda la marcha de purificación en una campana

extractora y rotular correctamente el material de laboratorio con la finalidad de
evitar errores durante las extracciones sucesivas.

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F.-FUENTES DE INFORMACIÓN

1. Gilbert JA. MEDICINA LEGAL Y TOXICOLOGIA. 5ta ed. Barcelona. 2001

2. Bogusz MJ. Liquid chromatography–mass spectrometry as a routine
method in forensic sciences: a proof of maturity. J Chromatogr B Biomed
Sci Appl 2000;748(1):3–19.
3. Drummer OH. Requirements for bioanalytical procedures in postmortem
toxicology. Anal Bioanal Chem 2007;388(7):1495–503.
4. Herrin GL, Mccurdy HH, Wall WH. Investigation of an LC–MS-MS (QTrap)
method for the rapid screening and identification of drugs in postmortem
toxicology whole blood samples. J Anal Toxicol 2005;29(7):599–606.

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