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UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE INGENIERÍAS
DEPARTAMENTO DE INGENIERÍA DE
ALIMENTOS

Nombre del Programa: INGENIERÍA DE ALIMENTOS


Nombre del laboratorio: Laboratorio de Microbiología de Alimentos I
Nombre de la asignatura: Microbiología General
Práctica de laboratorio N°: 3
Nombre de la práctica de laboratorio: Morfología de Microorganismos

DESCRIPCIÓN DEL LABORATORIO


1. INTRODUCCIÓN
Una vez teñidas las preparaciones, se observan al microscopio utilizando un objetivo de
inmersión (100 X). De esta forma las bacterias se pueden clasificar según su tinción (Gram
positivas o negativas) y además permite el estudio de su morfología.

Se distinguen las siguientes formas y agrupaciones bacterianas:


a) Cocos: Son bacterias de forma esférica, que pueden presentarse aisladas o reunidas de
diferentes maneras de acuerdo a su multiplicación que se efectúa por división directa. Según su
agrupación se distinguen:
 Diplococos: permanecen unidos de a 2 posterior a su división
 Estreptococos: cocos unidos en cadena
 Estafilococos: cocos que forman grupos irregulares en forma de racimos
 Tétradas: cocos dispuest0s de a 4
 Sarcinas: cocos formando grupos en forma de cubos
- Según su tinción pueden ser Gram positivos o negativos

b) Bacilos: Son bacterias alargadas, en las cuales predomina en diámetro longitudinal sobre el
transversal.
- Según su forma pueden ser: • largos y delgados • cortos y gruesos • con bordes paralelos y
extremos cortados en ángulo recto • con bordes convexos y extremos de bordes que se juntan
en los extremos • con un extremo más grueso que el opuesto.
- Según su agrupación se distinguen: • Diplobacilos: unidos de a 2 • Estreptobacilos: unidos
en cadena
- Según su tinción pueden ser: Gram positivos o negativos, Zeilh Neelsen positivos o negativos

c) Espirilos: Son bacterias delgadas que presentan incurvaciones en varios planos (tienen
forma helicoidal). También existen espirilos con una sola incurvación, llamados Vibrios.

También es posible examinar con detención algunas estructuras presentes en las bacterias,

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como por ejemplo:


d) Esporas: Es una formación endocelular presente en algunas especies de bacilos.

e) Flagelos: Son apéndices cilíndricos, flexibles y frágiles, de longitud variable. La poseen


determinadas especies bacterianas y su presencia sólo se evidencia mediante tinciones
especiales
- Según su número y disposición pueden ser
• Monótricas ( 1 solo flagelo polar ) • Lofótricas ( poseen un haz de flagelos en un polo )
• Anfítricas ( tienen flagelos en ambos polos ) • Perítricas ( bacterias rodeadas de flagelos )

f) Pili o Fimbrias: Son apéndices más finos cortos y más numerosos que los flagelos. Se
encuentran el algunas especies y sólo pueden observarse por microscopía electrónica.

g) Cápsula: Es una estructura que rodea la pared celular y la presentan sólo algunas especies
bacterianas. Se puede observar al microscopio de luz corriente mediante Coloración de Hiss.

Otros microorganismos son los hongos, algas, parásitos y los virus.

Microalgas: Las algas son protistas, es decir, unicelulares o pluricelulares que carecen de
tejidos, autótrofos fotosintéticos. Las algas microscópicas son en su mayoría unicelulares, viven
en medios acuáticos formando el fitoplancton. Dentro de las algas microscópicas se encuentran
las euglenófitas, las diatomeas y los dinoflagelados.

Parásitos: Un parásito es un organismo que vive sobre un organismo huésped o en su interior y


se alimenta a expensas del huésped. Hay tres clases importantes de parásitos que pueden
provocar enfermedades en los seres humanos: protozoos, helmintos y ectoparásitos.
2. OBJETIVOS
- Reconocer diversas formas de microorganismos
- Reforzar los conocimientos en las tinciones adecuadas para cada forma microbiana
3. MATERIALES Y EQUIPOS
Todo el material debe estar estéril. Portaobjetos, cubreobjetos, bajalenguas, asas
bacteriológicas, mecheros, microscopios, cultivos en medios sólido y líquido, trípodes, mallas de
asbesto, colorantes de las diferentes tinciones.
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Montaje en fresco: identificación de microalgas
1. Colocar una gota del agua sucia estancada sobre el portaobjetos
2. Cubrir la gota de agua con un cubreobjetos
3. Observar al microscopio con objetivo de 10x y 40x

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4. Recorrer unos 10 campos y reportar las formas microscópicas observadas

4.2. Identificación de parásitos FLOTACIÓN CON SOLUCIÓN DE SHEATHER (cualitativo)


1°- separar de la muestra de 2 a 5 gramos de heces en un recipiente de boca ancha (taza o
mortero).
2°- agregar de 30 a 50 cc de solución sheather.
3°- disolver muy bien las heces con un baja lenguas o varilla de vidrio.
4°- colar en una gasa.
5°- llenar un tubo de ensayo con el líquido filtrado hasta el borde, dejando un menisco
convexo.
6°- eliminar con un palillo las burbujas o sustancias que flotan.
7°- colocar una laminilla y esperar unos 12 a 15 minutos. No superar los 30 minutos.
8°- retirar cuidadosamente la laminilla y colocarla sobre un portaobjetos.
9°- mirar al microscopio con el objetivo de 10x los ooquistes de coccidias, muchos huevos de
nematodos y
algunos cestodos flotan y se adhieren a la laminilla. En esta solución no flotan algunos
huevos de trematodos
(Fasciola hepática), de cestodos (Taenia solium y Dipylidium caninum) y de nematodos
(Metastrongylus apri y Spirocerca lupí).
4.2.1. Coloración de Gram: identificación morfológica de bacterias
1. Realizar dos frotis: uno a partir de un cultivo en medio sólido y otro a partir de un medio
liquido
2. Dejar secar al aire y fijar con calor
3. Cubrir el portaobjetos con CRISTAL VIOLETA por 1 minuto
4. Lavar con agua destilada
5. Adicionar LUGOL por 1 minuto
6. Lavar con agua destilada
7. Decolorar con ALCOHOL ACETONA por 14 segundos
8. Lavar con agua destilada
9. Cubrir la lámina con SAFRANINA DE GRAM por 30 segundos
10. Lavar con agua destilada
11. Dejar secar y observar al microscopio con objetivo de inmersión
12. Reportar la morfología y disposición de las bacterias

5. USO DE SUSTANCIAS PELIGROSAS

SI X NO

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¿Cuáles?: Cristal violeta, Lugol, Safranina, alcohol cetona, Sulfato de cobre, verde de
malaquita, safranina 0.5 %, alcohol ácido,
Grado de peligrosidad:
Cristal Violeta : corrosivo, peligro grave para la salud riesgo a la salud para el medio
ambiente.

Lugol: Nocivo para los organismo acuáticos, con efectos nocivos duraderos.
Alcohol Cetona: Inflamable y riesgo para la salud.

Safranina de Gram: Inflamable

6. INTERPRETACIÓN Y REPORTE
Describir las características y la morfología de cada microorganismo observado, documentando
a través de foto o dibujo de las diferentes muestras de microorganismos en relación a la forma,
tamaño y tipo de microorganismo.

Muestra 1 Muestra 2
BIBLIOGRAFÍA

KONEMAN, Elmer W. Y Cols. Diagnostico Microbiológico. Editorial Panamericana. Buenos

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Aires Argentina

JOKLIK, Wolfgang; WILLET, Hilda P; AMOS D, Bernard. Zinsser Microbiología. 20ª Ed.
Editorial Panamericana.

PUMAROLA A. y Cols. Microbiología y Parasitología Médica. 2ª Ed, Editorial Salvat S.A.


Barcelona España, 1994.

JAWEST, Ernest; MELNICK, Joseph L; y ADELBERG, Eduard A. Microbiología Médica. 14ª


Ed. Editorial Manual Moderno. México, 1992.

NECESIDADES PARA EL LABORATORIO


Agua sucia estancada
Alcohol, algodón, encendedor
Cinta de enmascarar
Marcador
ANEXOS
No Aplica

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