Aula 1 Controle Microbiologico e Apresentação Jhonatta Alexandre

SOCIEDADE DE ENSINO SUPERIOR DE SERRA TALHADA
FACULDADE DE INTEGRAÇÃO DO SERTÃO – FIS

COORDENAÇÃO DO CURSO DE FARMÁCIA
Microbiologia Clínica
Fevereiro de 2019
APRESENTAÇÃO
• Prof. Msc. Jhonatta Alexandre Brito http://lattes.cnpq.br/9541468963421792
- Biomédico (FMN-2012)
- Farmacêutico Generalista (UEPB- 2014)
- Especialista em Microbiologia (FMN-2013)
- Especialista em Farmácia Clinica e Atenção Farmacêutica (FIP-2016)
- Mestre em Farmacologia (UFPE-2017)
- Doutorando em Ciência. Farma/ Farmacologia (UFPE-2017)
- Disciplinas Ministradas
- Atendimento Pré-
Farmacologia (Ed. Física) - Introdução ás Ciên. Farmacêuticas
Hospitalar ao Paciente
Toxicologia Clínica (Farmácia) - Farmacologia e Cosmetologia (Estética) Intoxicado (Esp. De
Cancerologia (Medicina) Urgência e Emergência)
APRESENTAÇÃO
• Prof. Msc. Jhonatta Alexandre Brito Dias
-Prof. de estágio supervisionado em Analises Clínicas (ENSC-2014)

- Experiência em Analises Clínicas
-Experiência em Farmacologia experimental (Inflamação, dor e
Câncer)
-Experiência em Acidentes por animais Peçonhentos (Identificação e
tratamento)
APRESENTAÇÃO
Disciplinas ministradas Curso de Farmácia
8º Período
• Imunologia Clínica
• Microbiologia Clínica
9º Período
• Hematologia Clínica
• Bioquímica Clínica
10º Período
• Estagio supervisionado em Análises Clínicas

A disciplina
➢ Cronograma
➢Material didático
✓ Livros, artigos
➢Avaliações
✓ 1ª avaliação: prova e Relatórios de Aulas Praticas
✓ 2ª avaliação: prova e Relatórios de Aula Práticas
A disciplina
➢ Exercícios
➢Aulas práticas
✓ Relatórios
REVISÃO DE MICROBIOLOGIA
BÁSICA
Revisando sobre Bactérias...
✓ Estrutura simples
✓ Procariotos
✓ Unicelulares
✓ Sem membrana nuclear

mitocôndria
complexo de Golgi ou retículo endoplasmático
✓ Reproduzem por divisão assexuada
✓Parede celular bacteriana complexa:

camada espessa de peptidioglicano (Gram +)
camada fina de peptidioglicano e uma membrana externa
sobreposta (Gram -)
✓ Algumas não apresentam parede celular

Sobrevivem no interior da célula hospedeira
Ambiente hipertônico
✓ Tamanho
1 a 20 μm ou maior
✓ Forma
Esferas, bastões, espirais
✓ Arranjo espacial
Células isoladas, cadeias, aglomerados
Classificação preliminar + Propriedades fenotípicas e genotípicas

✓O corpo humano é habitado por

milhares de diferentes espécies
✓ A doença pode resultar do efeito tóxico de produtos

bacterianos
✓Toxinas
✓Ou a bactéria invade sítios anatômicos

que são normalmente estéreis
Importância da Aula
Área Farmacêutica
✓ Área de Análises Clínicas Diagnóstico laboratorial
✓ Área Magistral e Industrial
Contaminação microbiana de medicamentos eafins

Alterações das características sensoriais, tornando-os impróprios
Degradação de componentes da formulação
Comprometimento da eficácia e segurança
Causa danos à saúde, dependendo do tipo do microrganismo

presente, da via de administração utilizada e do estado de saúde
do usuário do produto
AULA 1 - CONTROLE MICROBIANO
1 INTRODUÇÃO
Microrganismos
Inofensivos Nocivo para um debilitado
Pequena parcela
PATOGÊNICA
2 HISTÓRICO
➢ 1665 - Robert Hooke

Fina fatia de cortiça
Início da teoria celular
➢ 1723 – van Leeuwenhoek

Primeiro a observar microrganismos
➢ Séc. XIX – Teoria da geraçãoespontânea
As formas de vida surgiam da matéria morta

2 HISTÓRICO
➢ 1858 - Virchow Derrubou a teoria da geração espontânea

Teoria da biogênese
Uma célula surge de outra pré-existente
➢ 1861– Pasteur
Demonstrou conclusivamente que a vida microbiana pode ser

destruída pelo calor
Podem ser elaborados métodos para bloquear o acesso de micro-

organismos do ar aos ambientes nutritivos
2 HISTÓRICO
➢ 1858 - 1914 Idade de Ouro daMicrobiologia
Pasteur e Robert Koch estabeleceram a microbiologia como

ciência;
Descobriram agentes de muitas doenças como o papel da

imunidade na prevenção e cura;
Atividades químicas de micro-organismos;
Melhoraram as técnicas de microscopia e cultivo de micro-

organismos;
Desenvolveram vacinas e técnicas cirúrgicas.

2 HISTÓRICO
➢1858 - 1914 Idade de Ouro daMicrobiologia
Semmelweis e Lister
Médicos que implantaram práticas que incluíam a LAVAGEM DAS

MÃOS com hipoclorito de cálcio;
Técnicas de cirurgia assépticas para impedir a contaminação

microbiana de feridas cirúrgicas;
Infecções nosocomiais
Morte em pelo menos 25 %de mortes em
10 %das cirurgias parturientes
2 HISTÓRICO
Base das técnicas de assepsia, que previnem a contaminação por
micro-organismos indesejáveis
Práticas rotineiras para procedimentos médicos elaboratoriais

As técnicas modernas de assepsia estão entre os primeiros e
mais importantes conceitos que um iniciante em
microbiologia aprende
3 CONCEITOS
O controle científico do crescimento microbiano começou
somente há cerca de 100 anos
No último século, os cientistas continuaram a desenvolver uma

série de métodos físicos e agentes químicos para controlar o
crescimento microbiano
Controle Microbiano
Procedimentos com a finalidade de reduzir a quantidade,

eliminar ou impedir a multiplicação de microrganismos existentes
em um determinado equipamento, ambiente, em alimentos ou
em superfícies vivas.
3 CONCEITOS
Controle Microbiano
É de extrema importância apresentando inúmeras

aplicações práticas na área médica e de alimentos
A conservação de medicamentos envolve sempre o uso de uma

ou mais técnicas empregadas no controle microbiano
3 CONCEITOS
❖ Esterilização
Destruição, inativação definitiva e/ou remoção completa dos

microrganismos em ambientes ou materiais.
Inclui os esporos, as formas mais resistentes de vida.
Éum processo absoluto, não há graus de esterilização.

3 CONCEITOS
❖ Desinfecção – Redução do número de microrganismos em

superfícies inanimadas (ambiente ou materiais) e consequente
eliminação de sua potencialidade infecciosa.
Reduzem ou inibem o crescimento, não esterilizam

mas necessariamente.
Geralmente é feita com substâncias químicas.
3 CONCEITOS
❖ Sanitização – mesmo significado de desinfecção, porém
utilizado rotineiramente em indústria dealimentos;
❖ Antissepsia – é um caso particular de desinfecção. Significa

desinfecção química que leva à redução do número de
microrganismos em tecidos vivos, pele, mucosas;
3 CONCEITOS
❖ Assepsia – Ausência de contaminação significativa
(microrganismos em uma área).
As técnicas assépticas representam uma série de cuidados que
previnem a contaminação;
❖ Degerminação - Remoção de micro-organismos de uma área

limitada, como a pele ao redor do local da aplicação de uma
injeção;
3 CONCEITOS
❖ Germicida – agentes químicos genéricos que matam germes
ou micróbios (bactericida, fungicida, esporocida, virucida).
-cida = morte, inibem o crescimento e multiplicação debactérias
-stase ou –stático = agente removido, crescimento retomado

4 MÉTODOS DE CONTROLE
O controle de microrganismos pode ser feito por agentes físicos

ou químicos.
4.1 AGENTESFÍSICOS
❖ Calor
Éo método mais empregado para destruição demicrorganismos;
Barato, eficaz e prático;
Quando se tem finalidade esterilizante deve ser calculado para a

destruição das formas esporuladas de bactérias, mais resistentes.
TIPOS
CALOR SECO– Ausência de água
Mecanismo: Mata microrganismos através daoxidação
- Flambagem: contato direto do material a ser tratado com o

fogo, é um tipo deesterilização.
Muito utilizada para esterilizar as alças de platina no laboratório

de microbiologia;
- Estufa: material submetido a uma temperatura de 170 a 180
°C por 1-2 horas, é um tipo de esterilização, porém não é
qualquer material que pode ser submetido a essetratamento.
Utilizado principalmente para vidraria e metais (instrumentos

cirúrgicos)
- Incineração: é a queima total de um material, método utilizado
com materiais descartáveis, principalmente aqueles materiais
hospitalares.
CALORÚMIDO – Presença de água
Mecanismo: Mata através da desnaturação

microrganismos
proteica.
Além disso, o calor úmido é um método de maior eficiência

devido à água ser um melhor condutor de calor do que oar.
- Fervura = 100 °C
Método desinfetante
O alimento ou objeto é submetido a uma temperatura igual a
100 °Cpor até 15minutos
Eficiente contra as formas vegetativas bacterianas mas não

destrói completamente as formas esporuladas
Alguns endósporos resistem até 20 horas de fervura
- Pasteurização < 100° C
Método desinfetante;
Louis Pasteur
Muito utilizado para alimentos ebebidas
Elimina cerca de 99,5% de microrganismos

Esporulados são termorresistentes
- Pasteurização < 100° C
A pasteurização rápida do leite emprega uma temperatura em

torno de 72° C por 15 a 20 segundos, seguida de resfriamento
rápido.
- Autoclavação >100°C
Método esterilizante
Os materiais submetidos a 121° Cpor 15-30 minutos
Tempo e temperatura bem inferiores àqueles empregados

em calor seco
Alta pressão interna (1 ATM) na autoclave
Similar a uma panela de pressão
Empregada para esterilizar materiais que suportem altas
temperaturas e pressões
Produtos que não permitem a entrada de umidade, como o óleo

mineral ou a vaselina, não são esterilizados pelos mesmos
métodos usados para soluções aquosas
Cuidados ao autoclavar:
✓ Esterilização de sólidos requer que o vapor realmente entre

em contato com todas assuperfícies
Vidros secos, bandagens e similares
✓ Folhas de papel alumínio

Não são afetadas pelo vapor
Não devem ser usada para

embalar materiais s serão
esterilizados que
Papel comum
Evitar o aprisionamento de ar no fundo do recipiente seco
Ar aprisionado não é substituído pelo vapor
Mais leve que o ar
Recipientes em posição invertida
O vapor força o ar para fora

❖ Radiação
Efeitos Dependem do Comprimento de onda

Intensidade
Duração
Distância da fonte
Dois tipos empegados no controle de microrganismos:
IONIZANTE – Destrói o DNA
Comprimento de onda maiscurto

Carrega mais energia
Radiação gama emitidas por isótopos radioativos (Cobalto 90)

Utilizado na esterilização de produtos hospitalares descartáveis
Radiação
ionizante
Ioniza aágua
Inativação da
ou irradia a
bactéria
célula
Reage com
Formação de
componentes
superóxido
celulares DNA
NÃO-IONIZANTE – Danifica o DNA
Atividade máxima no comprimento de onda de 260nm
Mais eficaz Mais absorvido pelo DNA

Desinfetantes e usados em ambientes
Lâmpadas germicidas Controle dos microrganismos do ar
Desvantagem:
Baixo poder de penetração;
Embalados/vidro não é desinfetado;
Após 200 horas de uso da lâmpada sua eficiência é diminuída;
Efeitos deletérios sobre a pele e os olhos (queimaduras).
❖ Filtração
Passagem de soluções ou gases através de filtros com diminutos

poros que retém osmicrorganismos
Removem bactérias e fungos, mas deixam passar a maioria dos

vírus
Os filtros podemser:
Clarificantes: filtros domésticos, retém as impurezas grosseiras,

desinfetantes;
Esterilizantes: poros iguais ou menores a 1µm, podendo reter

❖ Filtração
Principal aplicação Esterilizar soluções termossensíveis

Entradas de salas
No passado, eram utilizadas velas de

porcelana, que foram substituídas por
membranas filtrantes de nitrocelulose e
acetato de celulose
❖ Outros
Pressão Osmótica (Salga);
Dessecação (prod. Alimentícios em pó, liofilização);
Uso de baixas temperaturas (refrigeração, congelamento).

4.2 AGENTES QUÍMICOS
Esterilizantes Desinfetantes
Morte de todos os
Redução da carga
microrganismos em um
microbiana
ambiente ou material
Desinfetante – agente químico capaz de provocar a desinfecção

em superfícies inanimadas
Fenóis e derivados
Desinfetante fraco
Referência para ser comparado com outros produtos
Lister foi o primeiro a usar fenol para controlar infecções

cirúrgicas na sala de operação
Raramente é usado como antisséptico ou desinfetante

Irrita apele
Odor desagradável
Compostos fenólicos
Propriedades irritantes diminuídas
Aumento da atividade antibacteriana Lesão da membrana
Atuação: fenóis/cresóis – desnaturam proteínas
Os cresóis são ótimos desinfetantes de superfície
Dos cresóis o mais importante é acreolina

pisos e sanitários
Bifenóis
Derivados do fenol
Hexaclorofeno é muito usado na antissepsia cirúrgica
Estafilococos e estreptococos gram-positivos são sensíveis
Triclosano
Sabonetes antibacterianos e pastas de dente
Resistência bacteriana
Inibe a ação de uma enzima necessária para a biossíntese de

ácidos graxos
Integridade da membrana plasmática
Efetivo Gram-positivos, negativos e fungos

*Pseudomonas aeruginosa
Biguanidas
Mecanismo de ação: membranas celulares bacterianas

Efetivas em Gram-positivas e negativas
*Pseudomonas
Não apresentam atividade esporocida, mas possuem

alguma ação contra vírus envelopados
Clorexidina
Pele e mucosas
Alexidina
Ação mais rápida
Halogênios
Iodo
Um dos antissépticos mais antigos e mais eficazes
Eficiente contra todos os tipos de bactérias, muitos endosporos,

vários fungos e alguns vírus
Impede a síntese de algumas proteínas

Alterações nas membranas celulares microbianas
Formação de complexos irreversíveis com

Desnaturação
aminoácidos e ácidos graxos insaturados
Cloro
Desinfetante de águas, alimentos e pisos

Mecanismo de ação: oxidante
Cl2 + H2O HCl + HClO
Ácido hipocloroso instável

Espontaneamente forma mais HCl e oxigênio nascente
Mecanismo de morte
Álcool Etílico
Desinfetante ou antisséptico
Mecanismos de ação:
Solventes de lipídios Ação detergente
Desidratantes Retiram a água das células
Desnaturam proteínas
Álcool absoluto (não hidratado) é fraco germicida

Parcialmente hidratado (60- 70%) é mais ativo que o absoluto
Detergentes catiônicos (agentes de superfície)
Alteram a permeabilidade de membrana
Compostos quaternários de amônio
Cloreto de benzalcônio
Mais ativo contra Gramnegativos

Sais de Metais Pesados
- Mercúrio (Hg): antisséptico

Em desuso pelo risco de intoxicação por absorção
- Sulfato de Cobre (CuSO4): desinfetante para águas de

recreação
- Nitrato de Prata (AgNO3): antisséptico

Eficiente contra gonococos
Oftalmia e gonorréia
Mecanismo: Afinidade por proteínas, inativando enzimas, por
isso é importante não ingeri-los.
Uso tópico apenas.
Ácidos orgânicos einorgânicos
Conservação de alimentos
Ácidos acético, lático, benzóico
Álcalis
Hidróxido de Sódio (NaOH)= sabões com ação antisséptica
Corantes Básicos: mais eficientes contra Grampositivos

Cristal violeta, azul de metileno
Oxidantes e Redutores
Oxidantes: oxidam componentes celulares levando à morte das

células
Ozônio (O3), água oxigenada (H2O2), permanganato de potássio,
peróxido de zinco
Usados como antissépticos
Redutores: Reduzem compostos celulares levando à morte das

células
Aldeídos e derivados
Formaldeído/ formalina:
Muito irritante
São usados para desinfetar paredes e pisos
Glutaraldeído:
Mais ativo e menos tóxico que oformaldeído

Esporocida após 6 horas de contato
Óxido de Etileno (gás)
Agente alquilante
Inativando proteínas e ácido nucléico
Usado em um recipiente fechado 52° C
Vapores são esterilizantes
Materiais de borracha ou plástico
Antimicrobianos
Ao contrário dos anteriores
Ação seletiva contra microrganismos
Nova discussão

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FACULDADE DE INTEGRAÇÃO DO SERTÃO – FIS

• Prof. Msc. Jhonatta Alexandre Brito Dias

-Prof. de estágio supervisionado em Analises Clínicas (ENSC-2014)

Disciplinas ministradas Curso de Farmácia

• Estagio supervisionado em Análises Clínicas

✓ Sem membrana nuclear

✓ Reproduzem por divisão assexuada

✓Parede celular bacteriana complexa:

✓ Algumas não apresentam parede celular

Células isoladas, cadeias, aglomerados

Classificação preliminar + Propriedades fenotípicas e genotípicas

✓O corpo humano é habitado por

✓ A doença pode resultar do efeito tóxico de produtos

✓Ou a bactéria invade sítios anatômicos

✓ Área de Análises Clínicas Diagnóstico laboratorial

✓ Área Magistral e Industrial

Contaminação microbiana de medicamentos eafins

Causa danos à saúde, dependendo do tipo do microrganismo

Inofensivos Nocivo para um debilitado

➢ 1665 - Robert Hooke

➢ 1723 – van Leeuwenhoek

➢ Séc. XIX – Teoria da geraçãoespontânea

As formas de vida surgiam da matéria morta

➢ 1858 - Virchow Derrubou a teoria da geração espontânea

Demonstrou conclusivamente que a vida microbiana pode ser

Podem ser elaborados métodos para bloquear o acesso de micro-

Pasteur e Robert Koch estabeleceram a microbiologia como

Descobriram agentes de muitas doenças como o papel da

Atividades químicas de micro-organismos;

Melhoraram as técnicas de microscopia e cultivo de micro-

Desenvolveram vacinas e técnicas cirúrgicas.

Médicos que implantaram práticas que incluíam a LAVAGEM DAS

Técnicas de cirurgia assépticas para impedir a contaminação

Práticas rotineiras para procedimentos médicos elaboratoriais

No último século, os cientistas continuaram a desenvolver uma

Procedimentos com a finalidade de reduzir a quantidade,

É de extrema importância apresentando inúmeras

A conservação de medicamentos envolve sempre o uso de uma

Destruição, inativação definitiva e/ou remoção completa dos

Inclui os esporos, as formas mais resistentes de vida.

Éum processo absoluto, não há graus de esterilização.

❖ Desinfecção – Redução do número de microrganismos em

Reduzem ou inibem o crescimento, não esterilizam

❖ Antissepsia – é um caso particular de desinfecção. Significa

❖ Degerminação - Remoção de micro-organismos de uma área

-cida = morte, inibem o crescimento e multiplicação debactérias

-stase ou –stático = agente removido, crescimento retomado

O controle de microrganismos pode ser feito por agentes físicos

Éo método mais empregado para destruição demicrorganismos;

Barato, eficaz e prático;

Quando se tem finalidade esterilizante deve ser calculado para a

CALOR SECO– Ausência de água

Mecanismo: Mata microrganismos através daoxidação

- Flambagem: contato direto do material a ser tratado com o

Muito utilizada para esterilizar as alças de platina no laboratório

Utilizado principalmente para vidraria e metais (instrumentos

Mecanismo: Mata através da desnaturação

Além disso, o calor úmido é um método de maior eficiência

Eficiente contra as formas vegetativas bacterianas mas não

Elimina cerca de 99,5% de microrganismos

A pasteurização rápida do leite emprega uma temperatura em

Tempo e temperatura bem inferiores àqueles empregados

Produtos que não permitem a entrada de umidade, como o óleo