Universidad Mayor

Facultad de Estudios Interdisciplinarios

Núcleo de Química y Bioquímica
Bioquímica BQUM-1000 – Tecnología Médica

INFORME N°3
ENZIMOLOGÍA II

INTEGRANTES: ____________________________________ NOTA: _____________

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FECHA: _________________________________

NOTA: Debe registrar todos los cálculos en el informe, la falta de éstos implica
un descuento en su nota final.

PARTE I: EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO SOBRE LA ACTIVIDAD

ENZIMÁTICA

1) Registre y anote los valores de las absorbancias de los tubos 1 al 5 en la siguiente

tabla:

1 2 3 4 5

Absorbancia

2) Con los datos anteriores y con la curva de calibración obtenida en el Paso Práctico
N°2, complete la siguiente tabla (0,5 puntos):

1 2 3 4 5
Cantidad de
producto (mol)

3) Determine la velocidad de reacción (V=Producto/tiempo de incubación) y complete la

siguiente tabla (0,5 puntos):

1 2 3 4 5
Cantidad de Sustrato
(sacarosa) (µmol)

Velocidad de reacción
(mol/minuto)

4) Grafique los valores de velocidad de reacción versus cantidad de sustrato (1

punto).
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5) Calcule los inversos de la Concentración de Sustrato (1/[S]) y los inversos de la

Velocidad de reacción (1/[V]) para cada tubo, y registre sus valores en la siguiente tabla
(0,5 puntos):

TUBO 1 2 3 4 5

1/[S]

1/[V]

6) Grafique 1/[V] versus 1/[S] (Gráfico de Lineweaver–Burk), obteniendo la ecuación de

la recta correspondiente (1 punto).

7) A partir del gráfico anterior determine los valores de la Km y la Vmax (0,5 puntos).
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Parte II. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

1) Registre las temperaturas al ser expuestas a: agua hielo, ambiente y ebullición:

Agua a
Temperatura de Agua hielo: Ambiente:
ebullición:
Incubación (°C) _____ _____
______

2) Anote las lecturas de absorbancia en la siguiente tabla.

1 2 3
(hielo) (ambiente) (ebullición)
Absorbancia 00000 00000

3) Con los datos anteriores, y utilizando la curva de calibración obtenida en el

Paso Práctico N°2, obtenga la cantidad de producto y complete la siguiente tabla
(0,5 puntos):

Temperatura Agua Hielo Ambiente Ebullición

Cantidad de
producto (μmol)

4) Grafique Cantidad de producto versus temperatura y determine cuál es la

temperatura óptima sobre la actividad de la enzima Invertasa (0,5 puntos).