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ASUNCIÓN
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
INGENIERIA BIOQUIMICA
Integrantes:
2018
Contenido
Introducción ............................................................................................................................ 3
Materias Primas ...................................................................................................................... 4
Descripción del Proceso. .......................................................................................................... 4
Efecto de las condiciones ambientales sobre el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae ........... 5
Temperatura. ............................................................................................................................... 5
pH. ............................................................................................................................................... 5
Aireación y Agitación. ................................................................................................................ 5
Medio de Cultivo......................................................................................................................... 6
Cinética Del Crecimiento De Biomasa ....................................................................................... 6
Escalamiento De Fermentaciones ............................................................................................... 7
Limpieza en fábrica de Producción de Levaduras ....................................................................... 9
Limpieza CIP .................................................................................................................................. 9
Fermentadores: ........................................................................................................................... 9
Sistema de separación: ............................................................................................................. 11
Residuos ................................................................................................................................ 12
Pretratamiento ............................................................................................................................... 13
Tratamiento primario .................................................................................................................... 13
Tratamiento secundario ................................................................................................................. 13
Tratamiento de fangos ................................................................................................................... 13
Conclusión.............................................................................................................................. 14
Bibliografia ............................................................................................................................. 14
Introducción
Las levaduras son hongos que forman sobre los medios de cultivo colonias pastosas, constituidas en
su mayor parte por células aisladas que suelen ser esféricas, ovoideas, elipsoideas o alargadas. Unas
pocas presentan hifas. Las dimensiones pueden oscilar de 1 a 9 µm de ancho y 2 a más de 20 µm de
longitud según la especie, nutrición, edad y otros factores. Las levaduras pertenecen a dos clases de
hongos: ascomicetos o basidiomicetos, aunque muchas de ellas se presentan comúnmente en la
forma imperfecta. Las levaduras ascomicéticas forman ascas libres, con 1 a 8 ascosporas, y en las
especies hifales las ascas están desnudas. Las ascoporas de las levaduras son algo más resistentes al
calor y la desecación que las células vegetativas, si bien tienen mucha menor resistencia térmica que
las esporas bacterianas, por lo que mantienen la viabilidad de la especie durante los cambios
adversos del medio ambiente.
Anaerobia
Ante la ausencia de aire, el azúcar se transforma principalmente en alcohol, para detrimento de la
energía liberada. Esto ocurre en el caso de la elaboración de pan. La levadura no puede conseguir
más oxígeno. El azúcar proporcionado por la harina se transforma en alcohol (este se evapora
durante la elaboración de pan) y dióxido de carbono, demostrando el proceso metabólico de
la fermentación. En la elaboración de pan, la producción de dióxido de carbono hace que la masa
suba. Nuevamente, se libera energía, pero en una cantidad lo bastante baja para vivir más no para
multiplicarse. AZÚCAR --> CO2 + ALCOHOL + BAJA ENERGÍA
Aerobia
Ante la presencia de aire, las levaduras respiran y se multiplican abundantemente, sin formar
alcohol. El azúcar del que se alimentan se transforma en dióxido de carbono y agua. Este fenómeno
se acompaña de una tremenda liberación de energía para permitir que crezcan y se multipliquen.
Cuando las dos células han alcanzado el mismo tamaño, se separan y continúa el proceso de
multiplicación. Este proceso metabólico se llama respiración. Es utilizado por los productores de
levaduras para multiplicar las células.
AZÚCAR + OXÍGENO --> CO2 + AGUA + ALTA ENERGÍA
Saccharomyces Cerevisiae
La levadura Saccharomyces Cerevisiae tiene una temperatura óptima de crecimiento que varía entre
los 22 y 29ᵒC y no sobrevive a más de 53ᵒC. Se puede almacenar a temperaturas de 7ᵒC o menores.
Fermenta una solución de azúcar con una concentración inferior al 12% y se inactiva cuando la
concentración de azúcar supera el 15% por la presión osmótica del medio.
Materias Primas
La melaza de caña es la materia prima para la producción de levadura. Estas proveen de todos los
azucares para que la levadura se desarrolle, la energía y algo del nitrógeno necesario. Antes de
suministrársele a la levadura, estas melazas son diluidas con agua, clarificadas, y esterilizadas con
calor. Luego se le suministran a la levadura, junto con nitrógeno adicional, fosfato, vitaminas y
minerales.
Urea es la fuente de nitrógeno utilizada.
Ácido Fosfórico es la fuente de fosforo que se utiliza, además que es el agente que mantiene el
control del pH óptimo para el crecimiento de las levaduras.
Micronutrientes Vitaminas del complejo B y sales minerales
Temperatura.
La temperatura es un factor relevante en los procesos de fermentación, debido a que desde el punto
de vista microbiológico los microorganismos presentan temperaturas óptimas para su crecimiento
donde se obtiene el mayor rendimiento. Esta temperatura suele encontrarse muy cerca de la
temperatura máxima soportada y varía según la clase de microorganismo (Gómez, 2003). En las
levaduras la temperatura afecta la capacidad de éstas para desdoblar los azúcares, la reproducción y
el crecimiento celular, con temperaturas mínimas permisibles entre 0.3 y 0.5 ºC, y las máximas
entre 34 y 47 ºC.
Las fermentaciones aeróbicas de S. cerevisiae son exotérmicas, por lo tanto, el fermentador debe
enfriarse para mantener la temperatura en el rango óptimo para el crecimiento (CNMA, 1998)
pH.
El pH es, al igual que la temperatura, una variable significativa en la producción de biomasa (Sen y
Babu, 2004). Cada microorganismo presenta un rango de pH donde su crecimiento es posible e
incluso algunos presentan un pH óptimo, puesto que cambios en el pH son causantes de la
desnaturalización de enzimas y de problemas en el intercambio de iones en la membrana celular.
Tiene además influencia en la inhibición por pH debido al efecto que esta variable tiene sobre los
centros activos de las enzimas, en la variación en las proporciones de los constituyentes del
producto final de una fermentación, en el conjunto de las floculaciones coloidales y en las
características organolépticas del medio de cultivo tales como color y sabor (Ramírez y Pedroza,
2001). En la fermentación de levaduras, los valores de pH entre 3 y 6 generalmente favorecen el
crecimiento y la actividad fermentativa (Ramírez y Pedroza, 2001). En la producción industrial de
S. cerevisiae para uso en panadería, el pH se ajusta entre 4.5 y 5 (CNMA, 1998), permitiendo un
crecimiento más rápido que en las bacterias, por lo tanto se tiene la ventaja de operar una
fermentación con un menor riesgo de contaminación. Si se usa sacarosa como fuente de carbono el
sistema es más sensible al pH que al utilizar glucosa, debido a que la inversión de la sacarosa se
acelera a pH bajos (Ramírez y Pedroza, 2001).
Aireación y Agitación.
La actividad celular, la secreción de enzimas y la velocidad de fermentación al inicio del proceso,
dependen estrechamente de las condiciones de aireación, por lo tanto, es conveniente airear el
medio hasta el máximo. Aunque este proceso se dificulta por la poca solubilidad del gas en el medio
de cultivo (líquido), este inconveniente puede superarse en parte si se logra una agitación adecuada
dentro del fermentador (Ramírez y Pedroza, 2001; Gómez, 2003; Guilliermond, 1920).
Generalmente la aireación del medio se realiza mediante el suministro de oxígeno (gas), el cual
constituye un factor determinante para lograr un alto rendimiento en el crecimiento de los
microorganismos aeróbicos, debido a que cuando el suplemento de aire se reduce, el
microorganismo, deja o suprime casi completamente su multiplicación (Guilliermond, 1920). La
glucosa puede ser utilizada de muchas maneras por S. cerevisiae dependiendo de la presencia de
oxígeno y otras fuentes de carbono (Feldmann, 2005).
Medio de Cultivo.
La producción de levadura, requiere además de unas condiciones ambientales óptimas, de una
variedad de nutrientes esenciales y vitaminas (Gómez, 2003). Los nutrientes existentes en los
medios de cultivo dan a la célula microbiana todos los ingredientes requeridos para que produzca
más células semejantes a ella misma (Ramírez y Pedroza, 2001). Por lo tanto, es conveniente
considerar un diseño de medio de fermentación que genere las mejores garantías de crecimiento, el
mejor desarrollo para el microorganismo y el máximo rendimiento de producción. El medio debe
satisfacer los requerimientos nutricionales y ambientales del microorganismo, además de las
restricciones técnico-económicas para minimizar los costos de separación y purificación. La
determinación de los requerimientos nutrimentales, ambiéntales y la composición, dependen de la
estequiometría de crecimiento y formación de producto (Duarte, 1998).
Para la fabricación industrial de levadura de panadería las principales materias primas son el cultivo
puro de levadura y la melaza de caña que constituye la principal fuente de carbono del medio de
cultivo, debido a su alto contenido de azúcares fermentables (45 a 55% en peso) en forma de
sacarosa, glucosa y fructosa.
ESCALAMIENTO DE FERMENTACIONES
Escalamiento significa un cambio en la escala de volumen de proceso. El objetivo principal es
cambiar la escala de una reacción biológica aumentando o disminuyendo el volumen de trabajo,
evitando que se reduzca su productividad. Por lo general el escalamiento consta de tres etapas. A
nivel de laboratorio se opera en frascos agitados (∼ 500 mL) o pequeños fermentadores. En la
planta piloto (5-500 L), se selecciona un parámetro de escalamiento y se estudian efectos de
aireación, agitación, temperatura y control de pH. En los fermentadores de producción (5.000-
400.000 L) se validan los resultados obtenidos en la planta piloto y se debe operar siguiendo un
calendario fijo.
Flujograma del proceso de COPALSA
Slants (Cepa pura). Levadura en Agar cubierto de parafina, los Slants son los cultivos puros que
son comprados del proveedor criogenizados, están en tubos de ensayos.
1 Slant – 1 Ciclo de fermentación. Aproximadamente 104 slant en 1 año
Tiempo de almacenamiento aproximado 2 años en condiciones de refrigeración
Las cepas puras se inoculan una vez al año.
Pasteur (Levadura + proteína+ maltosa) Capacidad: 1 L
Tanque (Cultivo Puro): Ingresa aire comprimido, este consta de un filtro de aire, miel (Melaza+
Agua), Vitaminas y Nutrientes. Capacidad del Tanque: 1000 L. Bach (No Alimentado)
Control: Temperatura pH °Brix
Tanque (Cultivo Puro II): Ingresa Miel, Aire, Vitaminas + Nutrientes. Bach Discontinuo (Semi
Alimentado) Capacidad del Tanque: 10.000 L
Control: Temperatura pH °Brix Biomasa
Fermentación Pre-Comercial: Ingresa miel, urea y ácido fosfórico (Macro Nutrientes), Aire,
Vitaminas (Micro Nutrientes). Capacidad del Tanque: 110.000 L. Bach Continuo
Control: Temperatura pH °Brix Biomasa
Fermentación Comercial: Ingresa: miel, Urea, Acido fosfórico, aire, vitaminas. Capacidad del
tanque: 120.000L. Bach Continuo
Control: Temperatura pH °Brix Biomasa
De la fermentación comercial pasa por un Separador de centrifuga, obteniéndose la crema, el
efluente de separación es utilizado en la industria cervecera. La Crema pasa por un lavado con
carbonato de sodio que es recirculada, luego esta pasa por un intercambiador de calor, que utiliza
como refrigerante propilenglicol. Este pasa a un tanque de almacenamiento donde se inyecta agua
fría, este va al tanque pulmón, antes de pasar al filtro rotativo de lavado se pone en contacto con una
solución de sal muera, luego la levadura pasa por una estrucionadora y luego por una envolvedora
para ser finalmente almacenada.
La carga contaminante de tipo biológico (DBO) proviene fundamentalmente del nutriente agotado
siendo este entre un 75 y un 80%. Los sulfatos, por otro lado, se encuentran en mayor cantidad en
las aguas residuales procedentes de los filtros. Los sólidos se encuentran prácticamente disueltos y
en forma de coloides, su concentración apenas supera los 200 ppm. Es muy difícil determinar las
condiciones exactas a las que se encontrará el agua residual que se va a depurar, pues esto
dependerá del caudal y la carga contaminante de cada corriente en cada caso. Sin embargo, sí es
posible realizar una estimación.
Pretratamiento
Se dispondrá de un tanque de homogeneización y de almacenamiento. Su función es, por un lado,
permitir el control de los parámetros fisicoquímicos del agua (temperatura, pH, nutrientes) para que
sean los adecuados a la entrada del reactor anaerobio y, por otro lado, servir de ‘buffer’ a toda la
estación depuradora, de tal modo, que se pueda llevar a cabo una operación en continuo. La función
del tanque de homogeneización logra una mayor estabilidad y eficacia, cosa que permite reducir el
tamaño de los equipos. El tanque deberá constar de dosificadores, que permitan la adición de
reactivos ácido/base y de nutrientes.
Tratamiento primario
En una estación depuradora donde las aguas se vierten posteriormente en terreno para riego o en los
que se utiliza un sistema biológico de lechos bacterianos, la decantación primaria es siempre
obligatoria.
Tratamiento secundario
Debido a la alta carga de materia biodegradable en estas aguas residuales, se procederá a un
tratamiento biológico con dos etapas: en primer lugar un tratamiento anaerobio y, posteriormente,
un tratamiento aerobio.
Junto al tratamiento aerobio, se llevará a cabo un desnitrificación por inyección de metano, para una
mayor purificación del agua. Tras esta etapa de reacción aerobia con desnitrificación, será necesaria
una operación de separación, que elimine los lodos que se hayan formado. Esto se llevará a cabo en
un decantador final.
Tratamiento de fangos
Existen varios posibles tratamientos de fangos según la aplicación que se les quiera dar en cada
planta. En este caso, se desea obtener fangos secos que se puedan almacenar en contenedores para
su posterior utilización o eliminación por incineración.
Conclusión
La producción de levaduras S. cerevisiae a nivel industrial se lleva a cabo mediante
fermentaciones aeróbicas, teniendo en cuenta los factores para su propagación adecuada
que son: Temperatura, pH, Aireacion y Agitacion y los nutrientes
Se describe el Flujograma de proceso de una industria productora de levaduras, los
controles y los procesos de tratamiento de efluentes, asi como los cuidados en la
manipulación de las materias primas, y la limpieza de los equipos utilizados.
Bibliografia
CNMA-CHILE. Comisión Nacional del Medio Ambiente-Región Metropolitana (1998). Guía para
el control y prevención de la contaminación industrial: Fabricación de Levaduras. Santiago. 57 p.
FELDMANN, Horst. (2005). Yeast Molecular Biology: A short compendium on basic features and
novel aspects. Munich: University of Munich. Adolf Butenandt Institute.
GUILLIERMOND, A. (1920). The yeast. New Cork: John Wiley and Sons Inc. 442 p.
SEN, Ramkrishna y BABU, Srinivasa. (2005). Modeling and optimization of the process conditions
for biomass production and sporulation of a probiotic culture. EN: Process Biochemistry. Vol. 40,
Nº. 7 (Jun. 2005); p 2531- 2538.
http://www.unsa.edu.ar/biblio/repositorio/malim2007/4%20levaduras.pdf