EXTRACCIÓN CASERA DE ADN

Ayala Ibarra, José; Durango Naranjo, María; Pérez Arrieta, Gustavo, Rodríguez Álvarez,
Angélica. Facultad de ciencias básicas, Programa de Biología, Laboratorio de Biología
molecular; Universidad de Córdoba-Colombia.

RESUMEN.
En el siguiente trabajo se desea identificar las biomoléculas presentes en los alimentos,
en este caso se quiere obtener material genético ADN de las células de espinaca
realizando diferentes procesos básicos de extracción del ADN.
En primer lugar se rompe la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder
al núcleo de la célula, también se rompe la membrana nuclear para dejar libe el ADN, por
último se protege el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que
hacer que se precipite en el alcohol, el ADN es soluble en agua, pero cuando se
encuentra en el alcohol se desarrolla y se precipita en la interfase entre el alcohol y el
agua, además nos permite ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes
celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa, la sal evita la unión de las
proteínas del ADN.
Palabras Claves: Enzimas, extracción, material genético.

ABSTRAC.
In the following work we want to identify the biomolecules present in food, in this case we
want to obtain DNA genetic material from spinach cells by performing different basic DNA
extraction processes. First, the cell wall and the plasma membrane are broken to gain
access to the nucleus of the cell, the nuclear membrane is also broken to release the
DNA, finally the DNA is protected from enzymes that can decrease it and to isolate it, it
must be done that is precipitated in the alcohol, the DNA is soluble in water, but when it
is in the alcohol it develops and it is precipitated in the interface between the alcohol and
the water, in addition it allows us to see the DNA, the alcohol separates the DNA from
other cellular components, which are left in the aqueous solution, the salt prevents the
binding of DNA proteins
Keywords: Enzymes, extraction, genetic material.

INTRODUCCIÓN.
El ADN presenta la información genética que usan los seres vivos para funcionar. Este
ácido nucleico también posibilita que los datos sean transmitidos a través de la herencia.
Al ser una biopolímero, el ADN se compone de múltiples unidades simples que están
relacionadas entre sí, formando una cadena. Los diferentes elementos que componen el
ADN son los nucleótidos, formados a su vez por un grupo fosfato, una base nitrogenada y
un azúcar. (Pérez, 2016). La extracción de ADN es el método por el cual se obtiene
el ADN a partir de material biológico, utilizando técnicas físicas y químicas. La extracción
consiste en la separación y purificación del ADN con el fin de poder estudiarlo, analizarlo
o manipularlo. En la investigación biomédica el ADN se utiliza para analizar y diagnosticar
a pacientes con enfermedades neurodegenerativas, cáncer, infecciones, etc. (Checa,
2016). En este caso se realizó una extracción casera de ADN de espinaca con la ayuda
de materiales que podemos encontrar en nuestra casa (alcohol, detergente líquido, jugo
de piña, etc.)

OBJETIVO.
 Aislar el ADN de forma casera.

METODOLOGÍA.
Se agregaron 200 ml de agua en un beacker, y media cucharada de sal, luego se llevó a
licuar junto con 10 hojas de espinaca durante 15 segundos a máxima velocidad, luego de
licuarse se filtró en un colador; una vez realizado este proceso se le agregó detergente
líquido a esa mezcla (1/6 de la cantidad total del líquido anteriormente licuado), se
revolvió suavemente con una espátula hasta formar una mezcla homogénea. La cual se
dejó reposar durante 10 minutos, luego se agregó el líquido en un tubo de ensayo a 1/3
de su capacidad, posteriormente se agregó jugo de piña, también 1/3 de la capacidad del
tubo, se agito suavemente invirtiendo él tubo de arriba asía abajo 5 veces para no romper
el ADN, después se agregó alcohol por las paredes del tubo hasta llenarlo y se dejó en
reposo hasta observar la elevación del ADN hasta la interface, para luego ser extraído
con la ayuda de una pipeta de Pasteur y agregado en un tubo de eppendorf, el cual se
debía observar detenidamente para detectar alguna impureza en la muestra y extraerla
con el fin de obtener el ADN los más puro posible con este método casero y finalmente
se le agregó 50ul de solución de rehidratación de ADN, el cual fue conservado para
próximos estudios.

RESULTADOS.
El ADN se logró aislar quedando en la columna de alcohol (Figura 1); fue envasado en
un tubo de eppendorf (Figura 2) y finalmente almacenado en una incubadora.
Fig. 1. ADN suspendido en alcohol. Fig. 2. ADN almacenado en tubo de eppendorf.

ANÁLISIS.
El ADN en el núcleo se encuentra rodeado por numerosas proteínas las cuales lo
mantienen unido y compactado. Para poder aislarlo y observarlo fue necesario el
rompimiento de la membrana plasmática y nuclear, además de la desnaturalización de
las proteínas. El jugo de piña contiene una enzima proteolítica. La bromelaína es la
encargada de hidrolizar o separar las proteínas (histonas) del ADN (Cochran, et al, 1952).
La sal con el agua forma una mezcla isotónica evita que el ADN se una a las proteínas y
lo vuelve insoluble evitando que se disuelva en alcohol. En la licuadora se rompen las
hojas de la espinaca pero las células vegetales están muy pequeñas para esto se utiliza
el detergente líquido para ayudar a romper la bicapa de fosfolípidos de la membrana
plasmática y la membrana nuclear, permitiendo así la liberación del ADN. El licuado sirve
para homogeneizar los elementos. El alcohol estabiliza el ADN, se usa alcohol porque el
ADN tiene más afinidad con el que con el agua lo cual hace que se precipite. La presencia
de ADN se evidencio mediante la formación de grumos blancos en la fase del alcohol.
Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero
las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la
regulación del uso de esta información genética (Crick, 1989).

CONCLUSIÓN.
A partir de los resultados obtenidos en la práctica se puede concluir que los objetivos
planteados en nuestra práctica de laboratorio fueron satisfactorios pues se llevaron a
cabo de manera adecuada los procedimientos planteados y para ello contamos con la
ayuda y explicación brindada por parte de nuestro profesor y nuestra auxiliar de
laboratorio, donde nos guiaron en cada paso a seguir.
 BIBLIOGRAFÍA
 Checa, G. (2016). Extracción de ADN http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-
adn.pdf
 Cochran, W., Crick F.H.C., Vand V. (1952) The Structure of Synthetic
Polypeptides. I. The Transform of Atoms on a Helix. Acta Cryst. 5, 581-586.
 Crick F.H.C. (1989) What Mad Pursuit. A Personal View of Scientific Discovery.
Penguin Books, England.
 Pérez, H. (2004). Extracción y purificación del ADN. Recuperado de
http://www.labome.es/method/DNA-Extraction-and-Purification.html
 Pérez, J. y Gardey, A. (2015). Definición de ADN. Recuperado de
https://definicion.de/adn/)

PREGUNTA COMPLEMENTARÍA
 Compare el procedimiento de extracción casera con una realizada con un kit
comercial.
Seleccionar el kit correcto puede ahorrar un valioso tiempo en la optimización del kit y la
ejecución del experimento. Los factores a considerar para seleccionar un kit incluyen:
1. Origen de la muestra: diferentes kits son utilizados para diferentes orígenes, incluyendo
tejidos humanos, sangre, pelo, tejidos de roedores, hojas, bacterias, levaduras, hongos,
insectos, heces, fluidos corporales, esporas, suelo, muestras clínicas (por ej. muestras
de biopsias, aspirados), muestras forenses (por ej. manchas de sangre seca, hisopados
bucales) y huellas dactilares.
2. Método de preparación: la preparación de la muestra puede ser: precipitados frescos o
previamente congelados, secciones de tejidos embebidos en parafina o fijados con
formalina, secciones de tejido congelado, células fijadas en etanol y muestras
preservadas en Orange® .
3. Uso previsto: la calidad y pureza del ADN obtenido con el kit debe ser la adecuada para
las subsiguientes aplicaciones, las cuales pueden ser secuenciación, determinación del
perfilgenético, PCR, qPCR, Southern blot, RAPD, AFLP y RFLP, digestiones con
enzimas de restricción, preparación de bibliotecas génicas mediante secuenciación por
“shotgun”.
4. Contenido húmico: si la muestra presenta contenido húmico tal como compost,
sedimento y estiércol, se debe utilizar un kit/método que elimine tales substancias, ya
que podrían inhibir las subsiguientes aplicaciones como la PCR.
5. Cantidad de muestra: el kit a ser utilizado depende del número de células de mamífero
cultivadas (105-107) y células bacterianas (106-1011), tejido (mg), cantidad de sangre
(100 ul to 1 ml), suelo (250 mg - 10 g), tejido de hoja de planta (mg), etc.
A diferencia del casero, el kit comercial es más efectivo y el procedimiento es más seguro
sin presencia de agentes contaminantes (Pérez, 2004).
ANEXOS FOTOGRÁFICOS.