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UNIVERSIDAD SANTO TOMÁS

LABORATORIO Nº 11 y 12 DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS


BIO 002 - SEM I - 2017
Mitosis y meiosis ENFERMERÍA
SEDE ARICA

LABORATORIO N° 11: DIVISIÓN CELULAR O MITOSIS

Objetivos:

 Reconocimiento de las distintas etapas de la mitosis


 Observar e interpretar figuras de distintas fases de la mitosis en las células vegetales
de la cebolla

Existe un proceso celular destinado a producir células idénticas genéticamente, la mitosis.


Por el contrario, la mayoría de los organismos vivos utilizan parte de su vida o tejidos especializados
para producir células esencialmente diferentes de las progenitoras en cuanto a las combinaciones
posibles de su material hereditario. Este mecanismo celular está enclavado en un proceso especial
de división celular, la meiosis.

El proceso de reproducción celular conocido con el nombre de mitosis puede ser estudiado
eligiendo un material constituido por células que se hallen en continua división. Esta condición la
reúnen los meristemos terminales o primarios, tales como los que se encuentran en el ápice de las
raíces. Un bulbo de cebolla o ajo cuya base se mantenga en contacto con el agua durante 4 o 5 días,
nos proporciona abundante cantidad de raicillas jóvenes, muy apropiadas para la obtención de
muestras destinadas a observar.

Ciclo celular: Mitosis

Todos los seres vivos, unicelulares y pluricelulares tienen como misión fundamental la de
reproducirse preservando sus características esenciales a través de las generaciones. Los
fenómenos que tienen lugar durante la reproducción celular corresponden a una de las etapas del
proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la coordinación de una serie de procesos
que involucran la integración de diferentes señales que conducen a la duplicación de DNA, su
condensación, segregación y posterior descondensación. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa
durante la cual una célula da origen a dos células hijas con igual dotación de cromosomas. Aunque
la mitosis, de por sí es un proceso continuo, para su estudio se divide en diferentes etapas
consecutivas de acuerdo a los cambios morfológicos que va experimentando la célula y que se
continúan con la citocinesis.

El ciclo celular es el período comprendido entre la formación de una célula, por división de otra
precedente, y el momento en que ella misma se divide para originar dos células hijas. El ciclo celular
se puede dividir en dos grandes períodos: interfase y mitosis, cada uno de los cuales se subdivide
en varias fases o etapas. La interfase se encuentra subdividida en 3 etapas:
a) Período G1. Comienza la síntesis de ARN y proteínas, la cual perdura durante toda la
interfase
b) Período S donde ocurre la duplicación del ADN.
c) Período G2, fase postsintética que va desde el final de S hasta el comienzo de la mitosis.

Por otro lado, en la mitosis ocurren 2 procesos altamente sincronizados: la cariocinesis (división
del núcleo) y la citocinesis (división del citoplasma). En la cariocinesis se reconocen distintas fases:
profase, metafase, anafase y telofase. Algunos autores reconocen a la prometafase como un
estadio entre profase y metafase. La mitosis finaliza con la citocinesis, la cual es diferente en
animales y vegetales. Para estudiar los parámetros del ciclo celular se utilizan tejidos en constante
renovación (tejidos en proliferación), en los que la duración total del ciclo con determinadas

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condiciones es constante. Cuando las células de un meristemo de Allium cepa se encuentran en
equilibrio proliferativo, la duración de cada uno de los períodos del ciclo celular permanece constante.
De esta forma, el número de células que están en una fase determinada es también constante y
proporcional a la duración (en tiempo) de la misma. Teniendo en cuenta esto, se puede calcular la
duración relativa de las diferentes fases del ciclo, es decir de la interfase y de la mitosis, así como
de cada una de las etapas de ésta.

Fases de la mitosis

a) Interfase: La célula está ocupada con la actividad metabólica y realizando sus tareas como
parte de un tejido. El ADN se duplica durante la interfase para prepararse para la mitosis (las
cuatro próximas fases que conducen a e incluyen la división nuclear). Los cromosomas no
están claramente discernidos en el núcleo, sin embargo un punto oscuro llamado nucléolo
puede ser visible.
b) Profase: La cromatina en el núcleo comienza a condensarse y se vuelve visible en el
microscopio óptico como cromosomas. La membrana nuclear se disuelve, marcando el
comienzo de la prometafase. Proteínas se adhieren a los centrómeros creando los
cinetocoros y los cromosomas comienzan a moverse.
c) Metafase: Fibras del huso alinean los cromosomas a lo largo del medio del núcleo celular.
Esta línea es referida como el plato de metafase (plano ecuatorial). Esta organización ayuda
a asegurar que en la próxima fase, cuando los cromosomas se separan, cada nuevo núcleo
recibirá una copia de cada cromosoma.
d) Anafase: Las cromátidas hermanas se separan y comienzan a migrar hacia los polos
opuestos de la célula, esta migración resulta de una combinación de movimiento del
cinetocoro a lo largo de los microtubulos del huso y de interacción física de los microtubulos
polares. Ahora los cromosomas se observan formados por una sola cromátida, con los
centrómeros dispuestos hacia los polos y los telómeros hacia el centro de la célula.
e) Telofase: Nuevas membranas se forman alrededor de los núcleos hijos mientras los
cromosomas se dispersan y ya no son más visibles con el microscopio óptico. La citocinesis
o la partición de la célula puede también comenzar durante este estadio.

ETAPAS DE LA MITOSIS

ETAPAS DE LA MITOSIS EN RAIZ DE CEBOLLA (Allium cepa)

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ACTIVIDAD PRÁCTICA

Materiales:
 Raicillas de cebolla, cebollín o ajo
 Vidrio reloj
 Bisturí
 Orceína A
 Orceína B
 Mechero
 Pinzas finas
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Aguja enmangada
 Papel filtro
 Microscopio
 Aceite de inmersión

Procedimiento
1) Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla (Allium cepa) sujeto
con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. Al cabo de
4 a 5 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento.
2) Cortar unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y depositarlo en un vidrio de reloj en el que
se han vertido 3 mL de orceína A.
3) Calentar suavemente el vidrio a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la
ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.
4) Con las pinzas tomar uno de los extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos,
añadir una gota de orceína B y dejar actuar durante 1 minuto.
5) Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja
enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede
extendida.
6) Sobre la preparación colocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo pulgar sobre
el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el
cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha
presión que se realice. Luego observar al microscopio

7) Calcular el índice mitótico (Im) del tejido de Allium cepa a partir de la observación de 50
células barriendo el campo, de acuerdo con la siguiente fórmula:

𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑒𝑛 𝑑𝑖𝑣𝑖𝑠𝑖ó𝑛 × 100


𝐼𝑚 =
𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑜𝑏𝑠𝑒𝑟𝑣𝑎𝑑𝑎𝑠

8) Calcular la duración relativa de cada etapa de la mitosis (índice de fases). Use la fórmula:

𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑓𝑎𝑠𝑒 × 100


𝐼𝑓 =
𝑁ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑒𝑛 𝑚𝑖𝑡𝑜𝑠𝑖𝑠

Debe observar 50 células de Allium cepa en división y anotar la etapa en que se encuentran. Luego
calcule el If de cada una de las etapas. ¿Cómo interpreta los valores de Im e If?

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LABORATORIO N° 12: MEIOSIS

Objetivos:

 Reconocimiento de las distintas etapas de la meiosis.


 Identificar células sexuales femeninas y masculinas.

En algunas especies de protozoarios, algas y hongos existe un único tipo de división celular:
la MITOSIS. Pero en muchos otros organismos simples y en casi todos los complejos, existe además
otro proceso de división celular: la MEIOSIS. Este tipo de división genera células esencialmente
diferentes de las progenitoras en cuanto a las combinaciones posibles de su material hereditario, su
número cromosómico y su cantidad de DNA.

En resumen se puede visualizar la Meiosis como una sola duplicación del material genético
y dos divisiones celulares, originando como producto 4 células hijas haploides que pueden ser
genéticamente diferentes. Este proceso de división está asociado a las células germinales.

Al igual que en la Mitosis, está precedida de una fase S, durante la cual ocurre la mayor parte
de la síntesis del DNA (También ocurre algo de síntesis de DNA durante la primera fase meiótica).
Las dos divisiones celulares sucesivas de la Meiosis se denominan Meiosis I y Meiosis II. Cada
división meiótica está formalmente dividida en: Profase, Metafase, Anafase y Telofase. De estas la
de mayor complejidad y lentitud es la Profase I, la cual está dividida en Leptoteno, Zigoteno,
Paquiteno, Diploteno y Diacinesis.

La división especial que se produce en las células que originarán los gametos, llamada
División Meiótica, es el eje del proceso de diferenciación celular que culmina en las células que
podrán formar un nuevo individuo de la especie, pues es durante esta doble división, con una sola
duplicación del material genético, que se produce la reducción del número cromosómico (de diploide
a haploide), y el reordenamiento del material genético procedente de cada uno de los progenitores.

La meiosis consta de dos divisiones sucesivas: en la primera etapa de la primera (Profase),


se aparean los cromosomas homólogos, y se separan durante la Anafase. Los cromosomas
homólogos son los miembros de cada par de cromosomas, en los que uno de ellos proviene del
padre y lleva su versión de los genes y el otro miembro del par proviene y es portador de los genes
de origen materno.

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EL CROMOSOMA MEIÓTICO

El cromosoma meiótico se forma durante la primera etapa o Profase de la 1ª división


meiótica, como resultado de la aproximación y unión (apareamiento cromosómico), de los
cromosomas homólogos (paterno y materno) de cada par cromosómico.

Durante la primera etapa o Profase de la 1ª división, también se forman sobre o en el interior


del Complejo Sinaptonémico, unas estructuras. Generalmente esféricas, aunque en algunas
especies pueden ser alargadas, a las que se ha denominado Nódulos de Recombinación (señalados
por flecha). Aparecen en número alto en etapas tempranas y quedan reducidos a un número
equivalente al de recombinaciones concretadas por cromosoma. Es en estos Nódulos de
Recombinación que se encuentran las enzimas responsables del proceso de recombinación o
intercambio entre el ADN de los cromosomas paterno y materno.

Es durante la primera etapa (Profase) de la primera división de la meiosis que se produce la


Recombinación Génica. Al aparearse los cromosomas homólogos, mediados por una estructura
denominada Complejo Sinaptonémico, se ponen en contacto el ADN de las moléculas de ambos
cromosomas, en zonas o genes que transportan información similar (alelos). Durante esa etapa se
produce un elevado número de fracturas en las moléculas del ADN, que posibilitan que, al repararse
en forma controlada, (Recombinación), se produzca de uniones entre las moléculas en forma
cruzada, generándose moléculas que tienen entremezclados fragmentos del ADN de origen materno
y paterno.

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RECOMBINACION

Al separarse los cromosomas homólogos, se habrán producido un número bajo de


Recombinaciones, al menos 1 por cromosoma, en cromosomas largos pueden llegar a 5 o 6. De
esta manera, los cromosomas que entran en la 2ª división meiótica, ya tienen una mezcla al azar del
material genético materno y paterno. En este proceso de recombinación participan unas estructuras
llamadas Nódulos de Recombinación, en los que se encuentran las proteínas responsables del
proceso.

SEGUNDA DIVISION MEIOTICA

En la segunda división, se separan las dos cromátidas que constituyen cada cromosoma
(elementos duplicados que constituyen cada cromosoma). Como consecuencia de esa doble división
se producen 4 células que contienen la mitad del número cromosómico característico de la especie
(células haploides).

La División Meiótica, se produce en las células de las llamadas líneas germinales, en los
órganos genitales o reproductivos, en los que se produce ese proceso de diferenciación celular
profunda, que genera en los machos los gametos masculinos o espermatozoides y en los individuos
hembra, los ovocitos.

En los grupos más simples de la escala evolutiva, los individuos no se diferencian


exteriormente, y la información diferencial solo codifica para la diferenciación de las células
reproductivas, mientras que en los grupos más complejos (más diferenciados), estos genes se
agrupan en un par de cromosomas especializados o cromosomas sexuales, resultando la expresión
de esta información (fenotipo), en individuos de características morfológicas diferentes en ambos
sexos, siendo la principal la formación de los órganos genitales, es decir donde se producen los
gametos en cada uno de los sexos, y en los órganos destinados a facilitar el apareamiento y la
fecundación.

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Durante la espermatogénesis, proceso de formación de los gametos masculinos, que se
desarrolla en los testículos, (órganos sexuales primarios de los individuos machos), se superponen
dos “programas” de diferenciación: el primero es el de la División Meiótica, en la que se reduce el
número cromosómico y se reordena (recombina) el material genético, mientras que en el segundo
“programa”, o “Espermiogénesis”, se producen los cambios estructurales muy profundos,
compactación de la cromatina, aparición del Acrosoma (aparato destinado a la penetración del
espermatozoide en el óvulo), y el desarrollo del flagelo, estructura destinada a dotar de movilidad al
gameto maduro.

Durante el proceso de la ovogénesis (generación del óvulo o gameto femenino), el proceso,


si bien comparte el programa meiótico, se diferencia profundamente en la ovogénesis, ya que de
cada célula originaria (oogonia), se produce una sola célula madura como gameto, (las otras 3 se
descartan), y la diferenciación del citoplasma consiste en la progresiva acumulación de material de
reserva, que será el que proveerá de nutrientes durante las primeras etapas de desarrollo del
embrión que se genere.

ACTIVIDAD PRÁCTICA

Observe al microscopio corte de testículos (espermatogénesis) y ovarios (ovogénesis) y


realice un esquema a partir de lo observado.

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