Lectura 4 Histología

Funciones emergentes de
las células T reguladoras en
la homeostasis del tejido
Amit Sharma 1,2 y Dipayan Rudra 1,2 *

 1 Academia de Inmunología y Microbiología, Instituto de Ciencias Básicas (IBS),

Pohang, Corea del Sur
 2 División de Biociencias y Biotecnología Integrativas, Universidad de Ciencia y

Tecnología de Pohang (POSTECH), Pohang, Corea del Sur

CD4 + Foxp3 +las células T reguladoras (Treg) son un subconjunto

único de células T auxiliares, que regulan la respuesta inmune y
establecen la tolerancia periférica. Los Treg no solo mantienen el
tono y el tenor de una respuesta inmune por tolerancia dominante
sino que, en los últimos años, también se han identificado como
actores clave en la resolución de la inflamación del tejido y como
mediadores de la curación del tejido. Además de ser diversos en su
origen (tímico y periférico) y ubicación (linfocida y tejido
residente), los Treg también son fenotípicamente heterogéneos
según la orientación de la respuesta inmune en curso. En esta
revisión, discutimos los avances recientes en el campo de la
biología de Treg en general, y los Treg no linfoides y residentes de
tejidos en particular. Elaboramos sobre el bien conocido tejido
adiposo visceral, colon, piel y Treg infiltrantes de tumores y
poblaciones de Treg de tejidos recientemente identificadas como
en los pulmones, Músculo esquelético, placenta y otros
tejidos. Nuestro intento es diferenciar las Treg en función de las
propiedades distintivas de su ubicación, origen, especificidad de
ligando, quimiotaxis y mecanismos supresores específicos. A pesar
de los roles cada vez más amplios en el mantenimiento de la
homeostasis sistémica, los Treg son empleados por grandes
variedades de tumores para amortiguar la inmunidad
antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa de la
biología de Treg en el contexto de la inflamación puede ser
instrumental en el manejo efectivo del trasplante de tejidos, la
autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales. Tregs son
empleados por grandes variedades de tumores para amortiguar la
inmunidad antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa
de la biología de Treg en el contexto de la inflamación puede ser
instrumental en el manejo efectivo del trasplante de tejidos, la
autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales. Tregs son
empleados por grandes variedades de tumores para amortiguar la
inmunidad antitumoral. Por lo tanto, una comprensión completa
de la biología de Treg en el contexto de la inflamación puede ser
instrumental en el manejo efectivo del trasplante de tejidos, la
autoinmunidad y las respuestas inmunes antitumorales.
Introducción
El sistema inmune y el sistema nervioso de los vertebrados son dos
sistemas que son cognitivos y están en continua interacción con el
ambiente. Esto probablemente explica por qué ambos comparten
paradigmas comunes como el reconocimiento, el aprendizaje o la
modulación, y la memoria. Durante mucho tiempo, la inmunología se ha
definido como una ciencia de la discriminación "yo / no-yo" ( 1 ). Sin
embargo, a lo largo del tiempo, el concepto inmunológico de "yo" ha
evolucionado, donde la definición misma de un individuo con límites
anatómicos definidos, equilibrio compatible entre sus partes, autonomía
fisiológica y capacidad para replicarse como una unidad es desafiada
rápidamente por los simbiontes. La identidad inmune ahora se considera
más fluida que restringida en fronteras estrictas ( 2). Por lo tanto, además
de generar un fondo protector y ofensivo, el sistema inmunológico debe
trabajar para mantener una identidad del organismo mediante la
mediación de procesos de intercambio dinámico con el medio
ambiente. Esto no solo implica generar una defensa sólida contra
patógenos y toxinas, sino que también lo hace más importante para
suprimir una respuesta inmune demasiado ferviente, frenar las reacciones
autoinmunes y mantener el equilibrio hacia los comensales y los
alimentos. Varios mecanismos, como la eliminación clónica, la edición, la
anergia, la ignorancia y la desviación inmunológica, han evolucionado
para protegerse contra la inmunidad autodirigida ( 3 ). Células
especializadas con capacidades inmunosupresoras como las células
dendríticas tolerógenas (DC) ( 4 - 6 ), células B reguladoras ( 7 , 8).), las
células linfoides innatas reguladoras ( 9 ), las células T reguladoras tipo 1
(Tr1) ( 10 ) y las células T reguladoras Foxp3 + (Tregs) ( 11 - 13 ) también
han evolucionado.

Las células T reguladoras son posiblemente las células inmunosupresoras

más versátiles y funcionan como centinelas inmunológicos en varios
tejidos. Tanto en ratones como en hombres, la pérdida de estas células
esencialmente da como resultado la descomposición de la tolerancia y la
autoinmunidad multiorgánica. Desde su descubrimiento, la biología de
los Treg ha sido el campo más dinámico de la investigación inmunológica
y, como resultado, los Treg, que una vez se consideraron como una
población inmunosupresora homogénea, han demostrado ser un tipo
celular altamente adaptable y diversificado. Su heterogeneidad se aprecia
ahora en el contexto de origen, localización, diferenciación y mecanismos
de inmunosupresión. En la primera parte de esta revisión, analizaremos
brevemente los eventos que colocaron a los Treg en el centro de la
investigación inmunológica.

Concepto de tolerancia "dominante" y el

surgimiento de la investigación de células T
reguladoras
La tolerancia de las células T es fundamental para regular las respuestas
inmunitarias adaptativas, ya que la ayuda de las células T es esencial para
desarrollar una respuesta de anticuerpos a través de las células B ( 14 ). La
tolerancia de las células T durante mucho tiempo, se estudió a la luz de la
"tolerancia recesiva", en la que las células T con TCR de alta afinidad
hacia los autoantígenos se eliminan de forma clónica ( 15 ) o se someten a
"edición de receptores" en el timo ( 16 , 17 ). Las células fuera de control
que escapan de estos procesos centrales encuentran anergia o muerte
celular inducida por activación en la periferia ( 15 , 18 ). Sin embargo, los
estudios sobre la tolerancia dieron paso a una era "activa" o "dominante"
con el descubrimiento seminal de la supresión de CD4 +Células T que
expresan altos niveles de receptor de cadena α de IL2 (CD25) de alta
eficiencia ( 19 ).
El comienzo de la investigación Treg
Las evidencias preliminares de células supresoras mantenidas en el timo
comenzaron a aparecer cuando varios investigadores informaron que la
timectomía neonatal (3 días postnatal, 3dTx) podría inducir diversas
enfermedades autoinmunes en cepas de ratones adecuadas ( 20 - 25 ). Aún
más sorprendente fue el hecho de que los procesos patológicos inducidos
de manera similar en ratas podrían revertirse mediante la reconstitución
con células linfoides normales ( 26 ). Varios grupos intentaron identificar
marcadores específicos para distinguir las células supresoras de las
células T patógenas en el timo. Se informó que las células T agotadas de
CD4 + CD5 hi inducían un fenotipo autoinmune similar a 3dTx en ratones
BALB / cy C3H ( 27). Otros dos grupos demostraron la capacidad de las
células CD4 + CD45RB hi células T en la inducción de la enfermedad
inflamatoria intestinal en ratones BALB / c SCID ( 28 , 29 ) y su resolución
después de la reconstitución con células T totales. Si bien estos estudios
demostraron que distintos subgrupos fenotípicamente de células T son
capaces de desarrollar respuestas inmunes discretas, la identidad
específica de las contrapartes que inducen tolerancia sigue siendo difícil
de alcanzar. Sakaguchi et al. en 1995 ( 19 ) descubrió una alta expresión
superficial de CD25 en aproximadamente el 8-10% de las células T CD4 + ,
que eran CD5 hi y CD45RB a lo largo de concordancia con estudios
anteriores. Asano et al. ( 30) demostraron que las
células T CD4 + CD25 + aparecen alrededor del día 3 postnatal y aumentan
hasta los niveles de adultos para el día 10. Estos autores fueron los
primeros en proponer el término "regulador" para este subtipo.
Descubrimiento de foxp3
Si bien estudios posteriores con numerosos modelos experimentales de
autoinmunidad establecieron su existencia funcional ( 31 ), el uso de CD25
como marcador para las Tregs siguió siendo controvertido durante varios
años debido a su regulación positiva en todas las células T
activadas. Además, parecía posible que un subconjunto de las células T
activadas, en virtud de la marcada regulación al alza del receptor a2 de
IL2 en su superficie, restringiera la respuesta inmune simplemente
compitiendo por IL2.

Una línea de ratón denominada "scurfy", con autoinmunidad espontánea

(originalmente apareció como una mutación espontánea en el laboratorio
nacional Oak Ridge, EE. UU. Bajo el proyecto Manhattan), se caracterizó
inmunológicamente en 1991. Los ratones Scurfy tienen una mutación
recesiva ligada al X que conduce a Piel escamosa, linfoproliferación,
hipergammaglobulinemia, linfadenomegalia, anemia, correr y muerte
prematura ( 32 ). La timectomía redujo la gravedad de la enfermedad pero
no la mejoró totalmente. Sin embargo, cruzar la cepa con ratones nu /
nuprevino totalmente la enfermedad, lo que sugiere un origen tímico de
células causantes de la enfermedad. Varios otros estudios revelaron que el
escurfy es principalmente un trastorno dependiente de células T ( 33 -
35).) muy similar a la proteína 4 asociada a linfocitos T citotóxicos
(CTLA4) ( 36 ) y animales deficientes en el factor de crecimiento
transformante β1 (TGFβ1) ( 37 ). Estas similitudes instigaron
investigaciones para identificar el gen responsable del fenotipo de la
escoria. En 2001, Brunkow et al. ( 38 ) identificaron 20 genes putativos en
una región de 500 kb del cromosoma X mediante la secuenciación de
cuatro cromosomas bacterianos artificiales superpuestos. De estos, uno
poseía un ORF altamente homólogo con el dominio de unión al ADN de la
familia de proteínas forkhead / HNF3 / winged helix. Se descubrió que
este gen en el ratón de la escoria alberga una mutación de inserción de 2
pb, lo que da como resultado un producto génico truncado, que elimina el
dominio del extremo C-terminal ( 38 ). Los investigadores designaron este
gen comoFoxp3 . Los experimentos de complementación funcional
mediante el apareamiento de hembras portadoras de escurfy con líneas
transgénicas Foxp3 dieron como resultado el rescate completo del
fenotipo de escurfia, lo que corrobora la mutación de Foxp3 como la causa
( 38 ).

Alrededor del mismo tiempo, se confirmaron mutaciones en

el gen FOXP3 y su región no traducida 3 'en pacientes humanos con
síndrome de IPEX ( 39 , 40 ). El síndrome de IPEX es una
inmunodisregulación polidendinopatía enteropatía ligada al X,
originalmente descrita en 1982 por Powell et al. ( 41 ). La sorprendente
similitud en el fenotipo autoinmune de los pacientes con IPEX, scurfy y
ratones 3dTx llevó a varios grupos a examinar la función de Foxp3 en
Tregs. Posteriormente, en 2003, tres estudios informaron que, de
hecho, Foxp3 se expresa de forma única por los timocitos CD4 + CD8 -
CD25 + y CD4 + CD25 +Células T reguladoras periféricas ( 42 - 44 ) en
ratones. La transducción retroviral de Foxp3 indujo la expresión de CD25
en CD4 + CD25 -células T que eran funcionalmente supresivas y
expresaban las moléculas asociadas a Treg CTLA4 y GITR. La eliminación
de Foxp3 en ratones dio lugar a un trastorno linfoproliferativo idéntico a
los ratones con escoria ( 43 , 44 ). Los experimentos mixtos de quimera de
médula ósea demostraron que, de hecho, solo las médulas óseas
suficientes en Foxp3 eran capaces de generar CD4 + CD25 +Tregs ( 44). La
evidencia concluyente para Foxp3 como marcador específico de linaje
para ratones Treg provino de ratones Foxp3 eGFP reporter ( 45 ) en los que
la expresión de GFP se encontró solo en células TCRβ + T entre todos los
compartimentos celulares hematopoyéticos. La eliminación condicional
de Foxp3 en las células T CD4 + condujo a un trastorno linfoproliferativo
que refleja el fenotipo de escurfy. Estas series de experimentos
establecieron a Foxp3 como la identidad molecular responsable de
implementar la firma transcripcional Treg. Investigaciones posteriores
revelaron que el Foxp3El propio gen está regulado por tres secuencias no
codificadas conservadas (CNS) 1-3. Los análisis epigenéticos detallados
han identificado CNS1 como el elemento sensible a TGFβ que se requiere
para la generación periférica de Tregs, CNS2 está involucrado con el
mantenimiento hereditario de la expresión de Foxp3, mientras que CNS3
actúa como un elemento pionero para la inducción tímica
de Foxp3 ( 46 ). Los análisis proteómicos demostraron que Foxp3 está
interactuando con más de 350 proteínas en complejos multiproteicos,
muchos de los cuales son factores relacionados con la transcripción
( 47 ). Una revisión detallada sobre la regulación de Foxp3 y la regulación
mediada por Foxp3 del transcriptoma de Treg se puede encontrar en Lu et
al. ( 12 ).

Diversidad de desarrollo y fenotípica en

Tregs
Los experimentos de timectomía neonatal en ratones confirmaron sin
lugar a dudas que el desarrollo temprano de Treg ocurre en el timo. Una
discusión detallada sobre el desarrollo tímico de Tregs se puede encontrar
en la Ref. ( 13 , 48 , 49 ). Brevemente, los marcadores de superficie celular
indicativos de la fuerza de la interacción TCR (CD25, CD5, etc.) sugirieron
la participación de la señalización TCR. Los repertorios TCR de Treg
tienen una superposición limitada con la de los no Treg y son en gran
medida auto-reactivos ( 50 ). Los ratones informadores Nur77-GFP que
expresan GFP en el locus del gen Nur77 , un gen temprano expresado tras
la estimulación con TCR tienen una mayor expresión de GFP en Tregs
tímicos (tTregs) ( 51). Con respecto a las citoquinas, se informó
anteriormente que los ratones que carecen de IL2 o CD25 ( 45 ) son
capaces de generar Tregs, aunque a un nivel reducido. Sin embargo, si se
elimina la cadena γ común, las Treg no se forman ( 45 ). Esto sugiere la
cooperación entre las citoquinas γ en la expresión y el mantenimiento
de Foxp3 . Por lo tanto, el modelo actual de generación de Treg en el timo
gravita hacia uno instructivo en el que la señalización TCR
sustancialmente por encima de la fuerza requerida para la selección
positiva y relativamente cerca de la fuerza que induce la selección
negativa inicia la especificación hacia el estado pre-Treg. En el segundo
paso, las citoquinas inducen Foxp3.expresión. Más recientemente, se
demostró que Satb1, un genoma organizador y factor de transcripción,
medía al menos parcialmente la disposición genómica de los super
potenciadores responsables del desarrollo de Treg ( 52 ). Los patrones de
superacelerador específicos de Treg se encontraron "preparados" para la
activación incluso en las células T periféricas convencionales.

Aunque las células T reguladoras tímicas son adeptas a suprimir las

respuestas autoinmunes contra los autoantígenos, no se puede desarrollar
un entorno inmunitario razonablemente tolerante si se montan
respuestas inmunitarias repetidas contra microbios beneficiosos e
inocuos, así como también antígenos alimentarios. En parte, esto se logra
mediante la generación de Tregs en la periferia. De hecho, las evidencias
iniciales sugirieron que las Treg pueden generarse mediante la
alimentación con antígeno oral ( 53 , 54 ), así como por las APC específicas
para el antígeno ( 55 ) en ausencia de timo funcional. Además,
CD4 + CD25 convencionales - las células T vírgenes se podrían convertir a
CD4 + CD25 + CD45RB - / bajoCélulas supresoras por coestimulación con TCR
y TGFβ. El TGFβ activa los factores de transcripción Smad2 y 3 ( 56 ) que,
de manera redundante, ayudan en la generación de Treg periférica al
iniciar una cascada de interacciones con regiones potenciadoras
específicas dentro del locus Foxp3 ( 56 - 58 ).

Contrariamente a las interpretaciones iniciales de que las Treg son una

población inmunosupresora universal, las interrogaciones diligentes
llevaron a la identificación de un conjunto bastante diverso y distinto de
subconjuntos heterogéneos. Aparte del sitio de inducción, los Treg se
clasificaron en dos poblaciones separadas: Tregs centrales (cTregs) y
Tregs efectores (eTregs) ( 59 , 60 ). cTregs son Treg comparativamente
quiescentes en los tejidos linfoides. Expresan las moléculas homogéneas
linfoides CD62L y CCR7 y dependen de IL2 secretada por Tconv en zonas
de células T de tejidos linfoides ( 60). Por otro lado, los eTregs son
principalmente Treg no linfoides que regulan a la baja las moléculas de
alineación linfoides y regulan al alza CD44, ICOS, GITR y otros
marcadores inducidos por activación. Para el mantenimiento, dependen
de la señalización ICOS sostenida ( 60 ). La mayoría de estas células
expresan el factor de transcripción BLIMP1 y producen una alta IL10,
similar a una población de ICOS + IL10 + Treg en humanos ( 61 ).

Las investigaciones sobre la supresión mediada por Treg de distintas

respuestas inmunes de células T auxiliares implican un punto de vista
contextual T helper-Treg de la heterogeneidad de Treg. Se informó que las
Treg expresan una alta cantidad del factor regulador del interferón (IFN)
IRF4, cuya ablación específica de Treg dio como resultado patologías
selectivas relacionadas con Th2 ( 62). Estos hallazgos iniciaron
investigaciones similares en otros contextos de células T auxiliares y, de
hecho, ahora existe un paradigma bien establecido en el que, en un
contexto inflamatorio Th1, los Treg expresan el factor de transcripción
Tbet, responsable de la especiación Th1, y expresan CXCR3 para
acumularse en dichos sitios ( 63 ). El factor de transcripción STAT3 se
expresa en Tregs en un contexto Th17 ( 64) que ayuda en la regulación
positiva de CCR6 para migrar al intestino y la producción de IL10
( 65 ). De manera similar, la expresión de Bcl6 en Tregs demostró ser
importante para regular las células Tfh y la expresión de CXCR5 ( 66 , 67 ).

Avanzando un paso más y aumentando la complejidad y la diversidad

entre las Treg, se descubren varias subpoblaciones de Treg en tejidos no
linfoides. Estas Treg no solo son instrumentales para la supresión de las
respuestas inflamatorias, sino que también se integran en un paradigma
biológico más grande para el beneficio de la homeostasis de órganos y
organismos. En las siguientes secciones, revisaremos las características de
las Treg no linfoides, cómo se originan y funcionan para mantener la
homeostasis de los tejidos. Intentaremos dilucidar si, aparte de la
ubicación, estos tipos de células pueden identificarse aún más en virtud
de características fenotípicas y funcionales específicas del
tejido. Discutiremos detalladamente las poblaciones de Treg bien
caracterizadas en tejidos adiposos (AT), intestinos y piel. así como
intentar destacar algunos de los recientemente identificados en otros
tejidos como los músculos, los pulmones y la placenta. Si bien los Tregs
demasiado celosos en los tumores malignos no necesariamente pueden
ser aplastados con Tregs de tejidos normales, pero a cierto nivel, a medida
que los Treg perciben el contexto del entorno en el que residen y son
secuestrados por los tumores para su beneficio, también discutiremos los
Tregs infiltrados en tumores para: dilucidar sobre los principios generales
que podrían integrar dicha heterogeneidad.

Tregs Grasas: Inmunosupresión Para La

Homeostasis Metabólica
El tejido adiposo es el reservorio natural de calorías del cuerpo. En
general, el tejido se clasifica en dos tipos de tejido antagónicamente
funcional: tejido adiposo blanco (WAT) y tejido adiposo marrón
(BAT). WAT almacena el exceso de nutrientes en forma de gotas de grasa
durante la sobrealimentación y lo libera en condiciones de déficit de
energía. La MTD, en virtud de una mayor expresión de la proteína de la
proteína 1 de desacoplamiento (UCP1), aumenta la utilización de la
energía mediante termogénesis sin temblor ( 68 ). La WAT está disponible
en abundancia y se encuentra principalmente en el tejido subcutáneo,
omenta, mesenterios, tejidos perirrenales y médula ósea, mientras que la
BAT tiene una distribución restringida que se produce principalmente en
las regiones interscapulares e inguinales.
En arquitectura
Estructuralmente, la AT es un tejido conectivo suelto que consta
principalmente de células grasas (adipocitos), cada una rodeada por su
propia lámina basal y separada por una capa delgada de matriz
extracelular compuesta de fibras reticulares y de colágeno y provista de
numerosos capilares. Varias otras células residentes, así como también
transitorias, están esparcidas en AT, a saber, fibroblastos, miofibroblastos
y células inmunes como macrófagos, mastocitos, eosinófilos, neutrófilos y
células T. Los WAT son los depósitos de grasa profesionales ( 69 ) que
almacenan el exceso de energía como triglicéridos sin la lipotoxicidad
común que experimentan otros tipos de células ( 70).). Los adipocitos
WAT suelen ser esféricos con una gota de grasa única que ocupa el 90%
del volumen celular y una mitocondria alargada delgada en un lado. Por
otro lado, BAT integra las condiciones ambientales a través de respuestas
adrenérgicas del cerebro hacia las temperaturas frías. Los adipocitos en
BAT son típicamente poligonales, contienen triglicéridos en múltiples
vacuolas pequeñas y se caracterizan por numerosas mitocondrias
esféricas grandes.
Fat Treg origen y factores de acumulación
La plétora de adipocinas y las conversaciones cruzadas con el sistema
nervioso y el sistema inmune han subrayado la importancia de la AT como
un órgano endocrino con profundos efectos sobre la homeostasis
metabólica del cuerpo. Sin embargo, a medida que los adipocitos
aumentan de tamaño debido al exceso de calorías, la hipoxia provoca la
acumulación de macrófagos inflamatorios (Figura 1 ) en el tejido adiposo
obeso ( 71 ). La regulación posterior posterior de varias adipocinas
inflamatorias ( 72 ) puede activar las células T CD4 + independientemente
de los macrófagos. Cualquier respuesta inmune debe ser regulada para
que no sobreviva a su utilidad; una tarea lograda en gran medida por
varios tipos de células inmunes antiinflamatorias que ya residen en el
tejido adiposo ( 73 - 77 ).
FIGURA 1

Figura 1. Las células T reguladoras del tejido adiposo blanco (WAT)

visceral (Treg) están implicadas en la homeostasis metabólica. Los TAT de
WAT se adaptan al ambiente adiposo mediante la expresión de PPARγ
que regula los genes involucrados en el metabolismo de los lípidos. Estas
Treg también expresan el receptor de alarma IL33 ST2 y el receptor de
quimiocina adiposa CCR2. Las tregs son abundantes en el tejido adiposo
magro del ratón adulto; Sin embargo, si hay un balance energético
positivo sostenido como en el modelo animal con obesidad inducida por la
dieta y alto en grasas, los números de Treg disminuyen
drásticamente. Esto es concomitante a un cambio en el fenotipo de
macrófagos de antiinflamatorios M2 a macrófagos M1 inflamatorios e
hipertrofia malsana de adipocitos. La hipertrofia sostenida conduce a la
apoptosis de los adipocitos y la inflamación exacerbada. En general, la
disminución de las Treg adiposas se acompaña de obesidad, resistencia a
la insulina, dislipidemia,

En un estudio seminal, Feuerer et al. ( 76 ) identificaron Treg únicos que

residen en la grasa en ratones y humanos AT. Sorprendentemente, a
diferencia del compartimento linfoide periférico donde normalmente el
10-15% de las células T CD4 + son Treg Foxp3 + , casi la mitad de las
células T CD4 + gordas son Treg Foxp3 + , que se acumularon
principalmente en la grasa visceral durante un período de tiempo desde
su nacimiento, alcanzando un máximo alrededor de las 25 semanas de
edad. En un estudio, se encontró que esta acumulación característica de
Tregs estaba acompañada por una caída repentina a los niveles de la
quinta semana ( 78 ) en ratones de mayor edad, lo que sugiere una
correlación negativa entre la frecuencia de Treg residentes WAT viscerales
y la inflamación metabólica relacionada con la edad (Figura 2). En
contraste con este hallazgo, un estudio reciente, informó una acumulación
aún mayor de Treg en ratones más viejos, lo que implica un punto de vista
alternativo ( 79 ) (Figura 2 ). La causa de esta discrepancia puede ser
diferentes colonias, prácticas de cría, así como la composición microbiana
y dietética. No obstante, se encontró que los WAT Treg viscerales
envejecidos eran funcionales ( 79 ).
FIGURA 2

Figura 2. Dos escenarios contrastantes de números reguladores de

células T (Treg) y su resultado en tejido adiposo blanco envejecido
(WAT). Los WAT Tregs aumentan con la edad hasta alcanzar una meseta
y luego disminuyen abruptamente en ratones de edad avanzada (~ 45
semanas) (parte superior). Si esto se traduce en una inflamación que
conduce a la resistencia a la insulina asociada a la edad no se explora; sin
embargo, (la parte inferior) la evidencia contrastada sugiere que los Treg
adiposos blancos continúan aumentando incluso en el tejido adiposo
envejecido, que en concordancia con la "hipótesis de la capacidad de
expansión del tejido adiposo" (ver texto) da como resultado la supresión
de la inflamación saludable necesaria para la remodelación del
adiposo. Esto da como resultado un problema de espacio de
almacenamiento que conduce a la deposición ectópica de grasa en
órganos viscerales, como el hígado y el pericardio. Esto se acompaña de
lipotoxicidad inducida por ácidos grasos libres y resistencia a la insulina
asociada a la edad.

En lo que respecta al origen de los ATTreg, los WAT Treg viscerales

parecen ser en gran parte de origen tímico. Una timectomía más allá de
las 3 semanas de vida no afecta la población de WAT Tregs visceral en
ratones ( 80 ). Los experimentos de secuenciación de TCRα de ratones
"Limitados" [ratones con una limitada diversidad focalizada restringida a
CDR3α ( 81 )] mostraron que el repertorio de TCR de Tregs grasos son
diferentes de las células T grasas convencionales. Además, el repertorio de
Treg de grasa visceral era solo un subconjunto restringido del repertorio
de TCR de los ganglios linfáticos (LN) ( 76), sugestivo de un repertorio
TCR abdominal específico distinto de Tregs. Esto indica un suministro
continuo de Tregs desde LN periféricos o una siembra inicial de tTregs
seguido de una expansión clonal seleccionada en AT. La transferencia
adoptiva de las Treg marcadas de forma congénica confirmó que las TEG
de WAT viscerales no se derivan significativamente de las Treg circulantes
( 80 ). Además, la expresión muy alta tanto de Helios como de
Neuropilina1 (Nrp1), así como el análisis transcriptómico de los TAT de
WAT viscerales, sugieren su origen tímico y poca o ninguna conversión de
células T vírgenes en TAT de WAT viscerales ( 80 ).

Origen de WAT Tregs subcutáneos y BAT Tregs no se han estudiado con

mucho detalle. Sin embargo, las células T vírgenes aisladas de estos
tejidos producen un número significativamente alto de Treg inducidas
que el WAT visceral en los ensayos de conversión in vitro ( 82 ).
Adaptación del tejido y fenotipo
Que las Treg extralinfio se adapten al contexto y al microambiente se
explica mejor por la mayor expresión del factor de transcripción PPARγ
en las Treg grasas ( 83 , 84 ). Los estudios de co-inmunoprecipitación
confirmaron la interacción PPARγ con Foxp3, lo que sugiere un eje
visceral de expresión génica mediada por Foxp3-PPARγ específico para
WAT ( 83 ). Usando un ratón informador Blimp1-GFP, Vasanthkumar et
al. ( 84 ) demostraron que la mayoría de los WAT Treg viscerales se
encuentran en la categoría de eTregs. Para identificar los factores de
supervivencia para eTregs, informaron que las WAT Treg viscerales
expresan específicamente Il1rl1, que codifica el receptor de alarma IL33
ST2. Tanto la deficiencia de IL33 en general, como la deficiencia de ST2
intrínseca de células T dieron como resultado una reducción específica en
el número y porcentaje del compartimento de Wreg Treg visceral
( 84 ). En entornos in vitro , tanto IL2 como IL33 fueron capaces de
inducir la proliferación y la regulación positiva de ST2 en una fracción de
células T tras la estimulación con TCR que dependía de MyD88 ( 84 ). El
desarrollo y la proliferación de WAT Treg viscerales parece depender de
dos señales: (1) TCR reticulación que induce la expresión de PPARγ y ST2
a través de BATF e IRF4, ambas se unen a las regiones intrónicas de
los genes Pparge Il1rl1 ( 84 ) y ) IL33 quea través de MyD88 alimenta la
expresión de ST2 ( 84 ). De acuerdo con el concepto de adaptación local,
PPARγ en WAT Tregs visceral regula al alza la expresión de genes del
metabolismo de los lípidos como Dgat1 (diacilglicerol O -aciltransferasa
1), que codifica una enzima que cataliza el paso terminal en la síntesis de
triacilglicerol utilizando diacilglicerol y acilo graso. como
sustratos; y Pcyt1a (colina-fosfato citidilil transferasa A), una enzima
involucrada en la regulación de la biosíntesis de fosfatidilcolina ( 83). Es
posible que estos productos genéticos permitan a las TEG viscerales
sobrevivir en un ambiente lipotóxico y / o permitir la utilización de ácidos
grasos como combustible metabólico. Aparte de estos factores esenciales,
los WAT Treg viscerales también expresan altos niveles de GATA3, Klrg1,
el marcador de activación temprana CD69 y el receptor de quimiocinas de
firma adiposa CCR2. BAT Tregs son muy similares a WAT Tregs en el
nivel transcripcional con expresiones más altas de PPARγ, IL10 y
quimioquinas X ligandos 1 y 2 ( 85 ). Las transcripciones poco expresadas
fueron aquellas que codificaban el factor 7 de células T específicas de
señalización de TCR y la citoquina IFNγ ( 85 ).
Los regímenes de WAT son jugadores importantes
en el síndrome metabólico
Citoquinas proinflamatorias de origen adiposo, como TNFα, IL6 y IFN
tipo 1, se han sugerido como causantes de la resistencia a la insulina y el
síndrome metabólico ( 86 - 88 ). Además, se encontró que los sujetos
obesos humanos eran deficientes en las Treg circulantes, cuyos niveles
estaban correlacionados inversamente con el peso corporal y el IMC
( 89 ). Teniendo en cuenta el fenotipo principalmente inmunosupresor de
las Treg, se espera que las Treg grasas desempeñen un papel importante
en el control de la inflamación del tejido adiposo y, a su vez, afecten la
homeostasis metabólica general del cuerpo. De hecho,
en ratones Foxp3 DTR , en el que el gen que codifica el receptor de toxina
diftérica (DTR) se introduce en el locus Foxp3 ( 90), El agotamiento del
Treg tras la administración de toxina diftérica (DT), conduce a una
inflamación del tejido WAT visceral ( 76 ). Sin embargo, la eliminación
total de Treg también inicia una fuerte respuesta inflamatoria sistémica
( 90 ). Por lo tanto, se requería un modelo visceral WAT específico para la
eliminación de Treg. Esto se logró mediante la eliminación específica de
Treg de PPARγ, lo que resultó en una reducción de más del 80% en las
TEG viscerales, sin ningún efecto sobre la población de Treg esplénica
( 83 ). Esta disminución en la población de Treg se acompañó con una
marcada infiltración de células inflamatorias en WAT visceral ( 83 ). En
un modelo de obesidad inducida por la dieta alta en grasas, los números
de WAT Treg se reducen drásticamente (Figura 1), que puede rescatarse
mediante el tratamiento con un ligando de PPAR sintético pioglitazona,
que mejora la sensibilidad a la insulina al trabajar con PPARγ1 y 2 y afecta
el metabolismo de los lípidos ( 91 ). Su administración fue capaz de
mejorar los parámetros metabólicos en ratones de tipo salvaje pero no en
ratones que albergan Treg deficientes en PPARγ, lo que sugiere un papel
directo de la expresión de PPARγ en las TEG de WAT viscerales.

Curiosamente, se ha informado que el papel de los WAT Treg viscerales

en los animales que envejecen es opuesto a lo que se observó en animales
comparativamente jóvenes. Contrariamente a los animales obesos, el
agotamiento de WAT Treg visceral en animales de edad mejoró los
parámetros metabólicos y rescató la resistencia a la insulina inducida por
envejecimiento ( 79 ) (Figura 2 ). La eliminación específica de Treg de
PPARγ condujo a un menor aumento de grasa y más peso magro con la
edad (más de 45 semanas). El tamaño de los adipocitos fue menor y la
trigliceridosis hepática disminuyó. Un aumento en las Treg totales por el
complejo inmune del anticuerpo IL2-IL2 resultó en una reducción en la
absorción de glucosa por los adipocitos envejecidos, lo que sugiere una
función de almacenamiento comprometida ( 79). Se obtuvieron resultados
similares con la administración externa de IL33. En general, este estudio
revela un papel cooperativo inesperado de las TEG viscerales en la
resistencia a la insulina asociada a la edad y la inflamación
metabólica. Una explicación de este hallazgo aparentemente
contraintuitivo podría extenderse por la llamada hipótesis de la
"capacidad de expansión del tejido adiposo". Esta hipótesis postula que en
un estado de "balance energético positivo" surgen complicaciones
metabólicas porque WAT no es capaz de expandirse aún más y acomodar
el exceso de calorías, esencialmente alegando que el síndrome metabólico
que surge de la nutrición excesiva y la obesidad es en realidad un
problema de espacio de almacenamiento ( 92 ) . De hecho, los modelos
animales en los que se controla la inflamación de la AT provocan una
disminución de la hiperplasia de la AT en un modelo de obesidad en
ratones inducido por la dieta y alto en grasa ( 93), que causa depósitos de
lípidos ectópicos (esteatosis hepática, dislipidemia, etc.) y empeoramiento
de los parámetros metabólicos ( 93 ). Además, los ratones ob / ob obesos
que se hicieron transgénicos para la adiponectina de longitud completa y
por lo tanto tenían niveles de adiponectina equivalentes al tratamiento
con un agonista de PPARγ, mostraron una expansión de WAT desinhibida
que conduce a obesidad mórbida pero mejoró la sensibilidad a la insulina
y otros parámetros metabólicos ( 94 ) debido a reducción de la deposición
de lípidos ectópicos en el hígado y los músculos ( 94 ). Dadas estas
observaciones, aún está por verse si la acumulación de WAT Treg visceral
relacionada con la edad y la forma en que la produce.
BAT Tregs ayuda en la termogénesis
Una ablación Treg generalizada también altera el perfil metabólico de los
ratones con respecto a las BAT. La eliminación mediada por DT de Tregs
en ratones Foxp3 DTR dio como resultado un consumo reducido de oxígeno
en todo el cuerpo en un modelo de exposición a baja temperatura a corto
plazo ( 85 ). El hecho de que un estudio reciente analice en detalle los TAT
de BAT es un tema que está a la vanguardia de la homeostasis metabólica
y que sus intervenciones dependen en gran medida del contexto. Mientras
que una dieta a corto plazo (2 semanas) con alto contenido de grasa y alto
contenido de azúcar (HFHS), promoviendo la termogénesis ( 95 ), el
aumento de las BAT Tregs, en realidad disminuyó las WAT Treg viscerales
en ratones adultos jóvenes ( 82). Por el contrario, una dieta HFHS a largo
plazo (16 semanas) redujo significativamente las TEG viscerales pero no
tuvo impacto en el porcentaje de BAT. Esto sugiere que el tenor de la
ingesta calórica puede tener un efecto específico en los tejidos Treg. De
acuerdo con el papel de las BAT Treg en la termogénesis sin temblor, el
tratamiento con ADRB3 (receptor adrenérgico β-3) incrementó las Treg
en BAT. Sin embargo, los ratones "sin betal" que son deficientes en los
tres (receptores β-1, 2 y 3 adrenérgicos) no tenían un porcentaje reducido
de BAT Tregs, lo que sugiere un papel redundante de la señalización
adrenérgica en la acumulación de BAT Treg per se . El agotamiento de
Treg, seguido de la estimulación β-3, por otro lado, dio como resultado
niveles reducidos de genes termogénicos y lipolíticos BAT ( Ucp1,
Ppargc1a, Pparg, Prdm16, Lpl)., etc.) confirmando la funcionalidad de
Treg en la termogénesis BAT ( 82 ). Será interesante saber si esto resulta
en una adaptación metabólica reducida en la exposición al frío. Además, si
estos efectos son intrínsecos a los Tregs solo se puede determinar con
la eliminación de Adrb3 específica de Treg . Por lo tanto, estos estudios
confirman el papel de las Treg en las BAT que van más allá de la
inmunosupresión y asocian activamente las Treg con las adaptaciones
frías del cuerpo mediante la regulación de la lipólisis y la termogénesis.

Regulaciones Intestinales: Preservando El

Holobionte
El sistema digestivo de los mamíferos realiza dos funciones muy
importantes: la digestión y la absorción de alimentos y la conformación de
un ecosistema microbiano intestinal. Según estimaciones recientes, el
colon humano alberga aproximadamente 4 × 10 13 bacterias ( 96 , 97 ), una
densidad (10 11 / mL) más alta entre cualquier hábitat microbiano
( 98 ). Tiene una tarea desconcertante para implementar de manera
eficiente un balance de "cerdos de oro" entre dos eventos aparentemente
opuestos; permite la absorción de nutrientes pero controla la exposición a
sustancias nocivas, protege contra patógenos invasivos pero facilita la
colonización de comensales y los ayuda a prosperar.
Arquitectura
La provisión excesiva de antígenos microbianos y de alimentos ha
resultado en adaptaciones estructurales típicas en el intestino ( 99 , 100 ) y
en la evolución de células inmunes intestinales especializadas para la
vigilancia inmunológica y el mantenimiento de la tolerancia ( 101). El
intestino delgado (duodeno, yeyuno e íleon) con una superficie de
absorción máxima creada por grandes pliegues circulares (plicas) y
proyecciones similares a los dedos (vellosidades y microvilios), ha
evolucionado como el órgano primario para la absorción de alimentos. El
plegamiento da como resultado la formación de invaginaciones
profundas, criptas de Lieberkühn, que albergan células de Paneth que
secretan moléculas antimicrobianas tras la exposición a antígenos
bacterianos. Varias células enteroendocrinas y células mucosas
productoras de moco también se intercalan entre las células epiteliales del
intestino delgado. El intestino grueso (ciego, colon y recto) alberga la
mayoría de los comensales y realiza las funciones vitales de absorber el
agua y las vitaminas al mismo tiempo que convierte los alimentos no
digeridos en heces. Las grandes paredes intestinales están protegidas del
contenido luminal por dos capas de moco,102 , 103 ).

Histológicamente, el tracto intestinal contiene cuatro capas: mucosa,

submucosa, musculatura propia y adventicia o serosa. La mucosa es la
capa donde se producen la mayoría de los procesos inmunitarios. Consiste
en una capa epitelial, que tiene linfocitos intraepiteliales dispersos (IEL),
lámina propia subyacente (LP) y una mucosa muscular muscular de capa
delgada. El LP consiste en tejido conectivo no celular, como colágeno y
elastina, sangre y linfáticos, miofibroblastos y terminaciones nerviosas, y
está densamente lleno de células inmunes que incluyen células
mononucleares, células plasmáticas, linfocitos B y T, incluyendo Treg,
eosinófilos, macrófagos, y mastocitos ( 104 ).

Diferentes partes del intestino se drenan en LN separados, como drenajes

de duodeno en un LN incrustado en tejido pancreático; Los LN
mesentéricos drenan yeyuno, íleon, ciego y colon ascendente; dos LN
pequeños en el tejido pancreático drenan el colon transverso y el colon
descendente y el recto drena principalmente a los LN caudales ( 101). Las
variaciones anatómicas también definen en gran medida las variaciones
antigénicas del intestino. Mientras que el intestino delgado lucha por el
equilibrio contra los antígenos alimentarios, los intestinos grandes tienen
una carga abrumadora de antígenos microbianos. Por mucho que sean
extraños al cuerpo, son igualmente esenciales. Por lo tanto, para la
economía de la respuesta inmune es altamente deseable asimilar a
aquellos en el yo inmunológico. La población intestinal de Tregs es
posiblemente el tipo de célula más importante para contener la respuesta
inmune contra los antígenos microbianos de alimentos y inocuos y el
mantenimiento de la homeostasis intestinal ( 105 , 106 ).
Origen de las Tregs Intestinales
Al igual que otros tejidos no linfoides, las Treg también están
enriquecidas en LP intestinal con colon que alberga el 25–35% ( 107 - 109 )
y el intestino delgado con 10–15% ( 109 , 110 ) Treg entre el total de
células T CD4 + . A propósito del medio inflamatorio prevaleciente y del
ambiente antigénico, los Treg colónicos se desarrollan en gran medida
contra los antígenos microbianos. Los ratones GF, desprovistos de
cualquier microbiota, tienen varias veces menos cantidad de Treg
colónicos en comparación con los ratones libres de patógenos específicos
(SPF) ( 111 , 112 ). Un tratamiento antibiótico de amplio espectro a largo
plazo también reduce las Treg colónicas en ratones SPF ( 111). Como el
intestino delgado es el asiento para la absorción de nutrientes, la mayoría
de los Treg LP del intestino delgado (siLP) no se desarrollan contra
antígenos bacterianos, como lo demuestra un número comparable de
Tregs en ratones SPF y GF ( 109 ). Sin embargo, una vez que los ratones
GF se crían como ratones libres de antígeno (AF) mediante la provisión de
una dieta elemental solo después del destete, hay una marcada
disminución en las Tregs de siLP ( 109 ). Sin embargo, un subconjunto de
Tregs permanece en el colon y en el intestino delgado de los ratones GF y
AF, presumiblemente específicos de los autoantígenos gastrointestinales.
Secuenciación de Treg TCR de colon de ratones modificados
genéticamente con repertorios policlonales limitados encontró que el uso
de TCR de Treg de colon era diferente de la de otros tejidos
( 113 ). Además, hubo muy poca similitud en el uso de TCR entre Tregs y
células Foxp3 - T efectoras o efectoras ( 113 ). Quimeras estables hechas de
transducción retroviral de Treg TCR colónica a progenitores de médula
ósea dieron como resultado la inducción de TCR respectivos que expresan
Tregs preferentemente en colon mientras que no se encontraron células
con TCR específicas en el timo ( 113 ). La transferencia adoptiva de células
T vírgenes de las líneas transgénicas hechas de TCR colónicos resultó en
una conversión muy eficiente a Treg inducidas periféricamente (pTregs)
en LNs mesentéricos y colon (114 ). Además del repertorio de TCR
específico, se ha encontrado que la expresión en superficie alta de Helios,
un factor de transcripción de la familia Ikaros ( 115 ) y Nrp1, un co-
receptor unido a la membrana para el factor de crecimiento endotelial
vascular y la semafina ( 116 , 117 ), es asociado con tTregs. Aunque el
origen exacto de células T reguladoras en base a estos marcadores es
discutible ya que su expresión puede ser regulada en los entornos
inflamatorios ( 118 , 119 ), sin embargo, la mayoría de los estudios han
informado de enriquecimiento de Helios - y / o NRP1 - pTregs en el
compartimiento de Treg colon ( 107 , 114 ). Además, la frecuencia del
Foxp3 colónico.+ Helios - Nrp1 - Tregs se reduce significativamente en
ratones GF en comparación con ratones SPF ( 116 ). Además, el
tratamiento de ratones SPF con antibióticos de amplio espectro
disminuyó el Helios - Tregs colónico ( 111 ). Los estudios moleculares en
el locus del gen Foxp3 han identificado un potenciador, CNS1, que tiene
un papel prominente en la generación de pTreg en tejidos linfoides
asociados al intestino ( 46 ). CNS1 contiene un elemento de respuesta
TGFβ-NFAT ( 46 ) y sitios de unión para el receptor del ácido retinoico
(RAR) y el heterodímero del receptor X del retinoide, receptor del ácido
retinoico (RA) ( 120 ). Se ha demostrado que TGFβ y RA pueden
inducir de novogeneración de pTregs tras la activación del antígeno
a través de CD103 + DC ( 121 , 122 ) (Figura 3 ). De hecho, los ratones con
deficiencia de CNS1 tienen menos Treg LP al destete ( 46 ). Sin embargo,
recientemente se informó que la deficiencia de CNS1 en las células T
transgénicas TCR colónicas solo retrasa la generación de pTreg y, en
última instancia, las células T se convierten en Foxp3 + Tregs ( 114 ).
FIGURA 3

Figura 3 . Diferenciación de subtipos de células T reguladoras (Tregs) en

el intestino grueso. Las Treg colónicas se diferencian en tres subtipos
diferentes en función de RORγt (Rorc) y la expresión de GATA3 junto con
Foxp3. Foxp3 RORγt células comprenden ~ 15% de colon Tregs, su
+ -

función en el colon no es mucho dilucidado pero se supone que estos son

responsables de establecer la tolerancia a antígenos de la dieta. El
segundo y mayor subconjunto de Tregs colónicos es Foxp3 RORγt Tregs,
+ +

que constituyen aproximadamente el 50% del total de Tregs

colónicos. Estas células están involucradas principalmente en la
tolerancia microbiana y se han descrito varios mecanismos que
contribuyen a su generación. Desde la izquierda, los ácidos grasos de
cadena corta generados por la fermentación microbiana pueden
diferenciar las células T ingenuas en Foxp3 RORγt Tregs en lámina
+ +

propia (LP). El butirato, específicamente, puede contribuir a la expresión

y función de Foxp3 en virtud de su función inhibidora de histona
desacetilasa (HDAC), así como puede convertir las células dendríticas
(CD) en células tolerógenas generadoras de Treg al suprimir sus niveles
de IL12 e IL6 y la expresión de la subunidad NFκB Relb. El metabolito de
la vitamina D 1,25-dihidroxi vitamina D3 diferencia las células T vírgenes
en Tregs activando su receptor nuclear. TGFβ junto con el metabolito de
vitamina A generado en DC, el ácido retinoico todo trans diferencia las
células T vírgenes en Treg en presencia de antígenos
microbianos. Foxp3 RORγt Tregs despliega diversos mecanismos para
+ +

establecer la tolerancia dominante con la producción de IL10 y la

supresión directa de las células Th17 como prominentes. Un subconjunto
especial de Foxp3 RORγt Tregs expresan cMAF y es fundamental para
+ +

establecer la tolerancia a los patobiontes en la

homeostasis. Foxp3 RORγt cMaf Tregs se identifican contra epítopos
+ + +

específicos de Helicobacter hepaticus y suprimen las células Th17

específicas del epítopo. Se ha demostrado que en ausencia de pTregs, la
siembra temprana de Treg tímicos (tTregs) ocurre en el LP colónico. Estos
tTregs se expanden en un nicho que es independiente de la señalización
de MHCII e IL2 pero depende de los antígenos microbianos. Estos Tregs
llenan posteriormente el compartimiento Treg LP. Sin embargo, no se
sabe si estos pueden diferenciarse en todos los subtipos Treg. Un tercer
subtipo de Tregs expresa GATA3 (no RORγt) y constituye
aproximadamente un tercio del total de Tregs. Estos
Foxp3 GATA3 Tregs expresan el receptor ST2 que se une a la alarmina
+ +

inducida por daño tisular IL33. Foxp3 GATA3 Treg son fundamentales
+ +

para suprimir la inflamación y facilitar la reparación de tejidos mediante

la secreción de anfiregulina en caso de daño tisular.

Si bien los pTregs son ampliamente aceptados como la fuente principal de

la población intestinal de Treg, al menos en un entorno experimental
donde la generación de Treg extratímicos se ven comprometidos, los Treg
generados tímicamente pueden migrar a LP intestinal y proliferar para
llenar el nicho (Figura 3 ) . Se ha informado que en un modelo de TCR
limitado, el repertorio de TCR de tTregs y Tonic de colon se superponen
considerablemente ( 123 ). Otro estudio que utiliza ratones K14-Aβb
(Keratin 14 transgénicos, K14), que tienen una expresión restringida de
MHCII en el epitelio cortical tímico y, por lo tanto, no puede proporcionar
señales MHCII periféricas para la generación de Treg extraatímico,
mostró que mientras la población de Treg disminuyó significativamente
en mLN y bazo, el compartimento intestinal Treg estaba bastante intacto
( 124). Se encontró que el nicho LP Treg de estos ratones estaba habitado
por Tregs de origen tímico a temprana edad. Este fenómeno de llenado de
nicho no fue dependiente de IL2, sino que fue inducido por la presencia
microbiana, ya que el tratamiento con antibióticos de amplio espectro
disminuyó tanto los Treg grandes como los de siLP (siTregs)
(Figura 3 ). Sin embargo, a una edad más avanzada; los tTregs generados
recientemente se excluyeron del LP, probablemente debido al nicho Treg
ya ocupado ( 124 ). En conjunto, por lo tanto, los datos disponibles
sugieren un origen periférico de la mayoría de las Treg intestinales y el
origen tímico de un pequeño subconjunto. Sin embargo, estos
mecanismos de origen y desarrollo no pueden ser mutuamente
excluyentes y es probable que las contribuciones de diferentes vías afinen
la composición final del compartimiento de Treg intestinal.
Tregs se especializan en múltiples subconjuntos en
los intestinos
Los análisis transcriptómicos y funcionales de las Treg intestinales han
identificado en gran parte tres subconjuntos especializados. Sobre la base
del factor de transcripción y la expresión molecular de superficie, estos
subconjuntos son GATA3 + Helios + (Nrp1 + ), receptor huérfano
relacionado con el receptor retinoico γt (RORγt) que expresa
RORγt + Helios - y RORγt - Nrp1 - (Helios - ) subconjuntos
(Figuras 3 y 4 UNA).
FIGURA 4
Figura 4 . Diferenciación de subtipos de células T reguladoras (Tregs) en
el intestino delgado. (A) Lámina propia del intestino delgado (LP) Las
Treg se diferencian en los tres subtipos mencionados en la Figura 3 ; sin
embargo, Foxp3 RORγt Tregs son la población primaria que forma
+ -

aproximadamente el 50% del compartimiento siTreg. Se generan

principalmente en respuesta a macromoléculas dietéticas y se propone
que sean útiles para contener las alergias infantiles. Foxp3 RORγt y
+ +

Foxp3 GATA3 Treg son aproximadamente el 15% y el 35% del total de

+ +

siTregs, respectivamente. (SEGUNDO)Algunos siTregs se desplazan

continuamente dentro y fuera del compartimento epitelial del intestino
delgado. Mientras que la mayoría de estos Tregs regresan al LP, una
fracción de ellos pierde su expresión Foxp3 y reprime la expresión ThPOK
dentro de la capa epitelial. Posteriormente, desrepresan
ellocus CD8a para convertirlo en linfocitos intraepiteliales intra positivos
epiteliales CD4 CD8αα .
+ +

GATA3 se expresa en aproximadamente un tercio de las Treg intestinales

y se puede inducir en CD4 + Foxp3 + Treg con el compromiso TCR
( 110 ). Que la mayoría de estos Tregs sean Helios + y no se vean afectados
por la presencia microbiana, sugiere su origen tímico ( 107 ). Sin embargo,
tras la participación de TCR, GATA3 puede inducirse también en
CD4 + Foxp3 - células T vírgenes , tanto en in vivo como en Treg
polarizando in vitro ( 110 ). Si bien la expresión de GATA3 no es necesaria
en condiciones homeostáticas, en condiciones inflamatorias la falta de
GATA3 en Treg dificulta su acumulación en los sitios inflamatorios
( 110). GATA3 y Foxp3 interactúan tanto a nivel de proteínas como de
genes en Tregs ( 47 ). GATA3 se une al locus Foxp3 y su eliminación en
Tregs reduce la expresión de Foxp3 ( 47 , 125 ). Ocupa un número
significativo de genes, que son objetivos directos de Foxp3 y, por lo tanto,
colabora con Foxp3 para establecer el programa de expresión del gen
Treg. De hecho, la eliminación de GATA3 específica de Treg da como
resultado una patología intestinal con un aumento de la producción de
citoquinas Th2 a partir de células T efectoras intestinales grandes
( 47 ). La mayoría de las Treg de GATA3 + en el colon expresan ST2, que
está regulada por la expresión de GATA3 de forma directa ( 108 ). Las
alarmas como la IL33 se producen en el daño tisular local ( 126, 127 ) y,
por tanto, limitan la autolesión en parte activando GATA3 + ST2 + Tregs
( 108 ). ST2 + Tregs muestran una producción y activación mejoradas de
IL10 y TGFβ ( 128 ). IL23, por otra parte, parece regular el efecto de IL33
en Tregs derivadas de timo a través de la señalización STAT3 ( 108 ).

CD4 + Foxp3 + RORγt + Tregs en el intestino es otro subconjunto de Tregs

especializado en inmunidad microbiana. Estos comprenden
aproximadamente el 50% del total de Tregs en el colon, que se pierden
fácilmente en ratones con GF o durante el tratamiento con antibióticos
( 107 , 129 ) (Figura 3 ). También se encuentra una pequeña población que
consta de aproximadamente 10 a 15% de Tregs en el intestino delgado
( 107 ) (Figura 4 ). La mayoría de los RORγt + Tregs no expresan Helios
( 107 , 129 ) o Nrp1 ( 130), lo que sugiere su origen extra-tímico. Sin
embargo, estas células han reducido sustancialmente la metilación de
CpG dentro de la región potenciadora de CNS2 del locus Foxp3 , que se
sabe que está bien correlacionada con la expresión estable de Foxp3
( 130 , 131 ). No todas las bacterias pueden provocar una población similar
de RORγt + Tregs, ya que se encontró que existe una gradación de la
capacidad de inducción de Treg ( 107). Mechanistic insights on why
certain bacteria have superior capacity of inducing intestinal Tregs than
others have started to emerge only recently. It has been reported that
short chain fatty acids produced upon fermentation of starch and other
dietary fibers by clostridia strains, mainly butyrate and propionate but not
acetate, can contribute to colonic Treg generation. Mechanistically, this is
attributed to their histone deacetylase inhibitory properties ( 132) resulting
in increased acetylation of Foxp3 locus (133, 134) (Figure 3). Apart from
directly acting on T-cells, butyrate also affects DC ability to induce Treg
differentiation. Knockdown of Relb, which encodes NFκB subunit, has
been shown to generate tolerogenic DCs by inhibiting their maturation
(135, 136). Indeed, in vitrotreatment with butyrate represses
lipopolysachharide response genes, including Il12, Il6, and Relbin DCs
(133) (Figure 3). On a translational note, in human IBD patients, colonic
butyrate producing bacteria are decreased (137) and mucosal butyrate
transporter, monocarboxylate transporter 1, is downregulated (138). It is
also possible that colonic Tregs are generated in an antigen-specific
manner. Indeed, colonic Treg TCRs have been reported to interact with
colonic bacteria in vitro ( 113 ). Muy recientemente, se ha demostrado
que las células T colónicas con TCR relacionadas con los epítopos de
un Helicobacter hepaticus patobionte inducen pTregs en condiciones
homeostáticas ( 139 ). Este estudio establece el papel de los pTregs
colónicos en la inducción y el mantenimiento de la tolerancia a los
patobiontes también. Sorprendentemente, se encontró que aunque tales
Treg son RORγt + , sus capacidades supresoras funcionales principales se
implementan mediante la expresión del factor de transcripción cMAF
( 139 ) (Figura 3 ). cMAF compensa la polarización Th17 produciendo IL10
corriente abajo a la señalización TGFβ1-STAT3 ( 140 ). H. hepaticuslos
ratones colonizados con deleción de Rorc específica de Treg no tuvieron
un aumento significativo en las células Th17 colónicas mientras que los
ratones con deleción de Mafespecífica de Treg tuvieron células Th17
significativamente altas ( 139 ). Por lo tanto, RORγt +pTregs en el colon
establecen tolerancia a los comensales, así como a los patobiontes y
suprimen la inflamación de una manera dependiente de cMAF.

El tercer subtipo Treg (CD4 + Foxp3 + RORγt - ) fue identificado muy

recientemente. La mayoría de estas células expresan niveles bajos de Nrp1
y, por lo tanto, son pTregs. Estas células constituyen aproximadamente el
50% de Silp Tregs y 15% de Tregs colónica ( 109 ) (figuras 3 y 4 A). Su
localización sugiere que estos se generan principalmente contra antígenos
dietéticos. De hecho, el tratamiento antibiótico a largo plazo de los
ratones SPF no pudo reducir su número en el intestino, mientras que
RORγt + Nrp1 lo pTregs se redujeron varias veces. Por otro lado, el destete
de los ratones SPF a la dieta AF redujo drásticamente el RORγt - Nrp1 -
pTregs (109 ). La transferencia adoptiva de células T CD4 + OTII
vírgenes en ratones con dieta de AF provoca principalmente la respuesta
inmune de las células Th1, mientras que las respuestas Th17 y Th2 fueron
comparables a los animales con SPF. Sin embargo, los pTregs generados
en este modelo fueron principalmente RORγt + Nrp1 - pTregs, lo que
sugiere que los antígenos de la dieta también pueden generar
RORγt + pTregs en ausencia de microbiota ( 109 ).

Si bien TGFβ es, con mucho, el factor más importante en lo que respecta a
la generación y acumulación intestinal de pTregs ( 141 - 143 ), una
modulación generalizada de pTregs intestinales puede lograrse por varios
otros factores como la vitamina A dietética, la vitamina D, la niacina
(Vitamina B3), ácido fólico (vitamina B9) y triptófano [revisado en la
ref. ( 144 )]. El ácido retinoico todo trans, un metabolito de la vitamina A,
producido por las CD facilita la generación de novo de Foxp3 + Tregs de
poblaciones de células T CD4 + CD25 - vírgenes en ratones ( 121 , 145 )
(Figura 3). También juega un papel importante en la regulación al alza de
los marcadores CCR9 y CD103 (integrina αE) de tripa en pTregs
( 146 ). Alimentar a los ratones con una dieta deficiente en vitamina A o un
tratamiento con inhibidores de RAR reduce el RORγt + pTregs en el colon,
mientras que GATA3 + Tregs no se ven afectados ( 129 ). Del mismo modo,
RORγt - pTregs en el intestino delgado tampoco se ven afectados por la
vitamina A o la AR ( 109 ). El metabolito 1 de la vitamina D, 25-
dihidroxivitamina D3 se une al receptor nuclear de la vitamina D3 en las
células T CD4 + y promueve la expresión de Foxp3 ( 147 )
(Figura 3). Recientemente, se demostró que en pacientes humanos con
colitis ulcerosa, un agonista de la vitamina D3 puede convertir las
células T CD4 + en pTregs ( 148 ).
Funciones de las Tregs Intestinales
Foxp3 + GATA3 + Treg intestinales expresan alto nivel de ST2 ( 108 ). Estas
células T reguladoras expresan altos niveles de factor de reparación de
tejidos, un factor de crecimiento similar a EGF Amphiregulin ( 108 , 149 )
(Figuras 3 y 4 A). Parece que la reparación tisular mediada por la
anfirregulina podría ser un mecanismo generalizado empleado por los
Treg residentes en el tejido, como lo demuestra su función evolutiva en el
residente del pulmón y los Treg intratumorales
( 150 , 151 ). Foxp3 + RORγt + Tregs expresan niveles elevados de ICOS,
CTLA4 y las nucleotidasas CD39 y CD73 en conjunto, lo que indica
funciones reguladoras sólidas (107 , 129 ). Curiosamente,
Foxp3 +RORγt + Treg se ha implicado en la regulación de la inmunidad
mediada por Th2 y Th1 / Th17 en dos estudios independientes, lo que
implica que las condiciones de alojamiento de los animales son un factor
determinante importante del tipo de respuesta inmune ( 107 , 129 ). siLP
Foxp3 + RORγt -Tregs trabaja principalmente para contener la inmunidad
Th1. Cuando las células T OTII se transfieren a ratones AF, las células T se
convierten principalmente en células IFNγ + OTII y las Treg inducidas son
principalmente Tbet + , aunque la extensión de dicho RORγt -La inducción
de pTreg en condiciones de FA se vio gravemente comprometida en
comparación con las condiciones de SPF ( 109 ). Como consecuencia, en
un modelo experimental de alergia a los alimentos, donde los ratones SPF
BALB / c fueron destetados en una dieta de aminoácidos, se informaron
casos de diarrea más altos que los ratones en comida normal ( 109 ). Si
bien estos resultados ponen de relieve una función importante de RORγt -
pTregs para frenar la alergia a los alimentos, otros análisis
transcriptómicos y fenotípicos podrían proporcionar pistas adicionales
sobre sus funciones.
Es de destacar que una función más de siTregs se identificó recientemente
al observar la población de IEL. Se observó que las Treg LP también
migran al compartimiento epitelial, donde una fracción de ellas pierden la
expresión de Foxp3 ( 152 ). Además, estos Tregs luego renuncian a la
expresión de ThPOK que conduce a la represión del locus Cd8 y, por lo
tanto, se convierten en un CD4 +CD8αα + IEL ( 152 ) (Figura 4 B). Los IEL
tienen una maquinaria citotóxica e inmunorreguladora que sugiere un
papel tanto en el mantenimiento de la barrera mucosa como en la
eliminación de células epiteliales intestinales estresadas ( 153 ).

Piel Tregs: mantiene tu cabello en

La piel es el órgano más grande que representa casi el 15% del peso
corporal humano adulto. Al ser nuestro exterior, siempre está expuesto a
agresiones ambientales, microbianas, físicas y químicas. La piel también
alberga más de 10 12 bacterias / m 2 ( 154 ) en la superficie de los espacios
intercorneocíticos.
Arquitectura de la piel
Anatómicamente, la piel se compone de tres capas, la epidermis externa,
la dermis media y la capa interna de tejido subcutáneo ( 155 ). Los
queratinocitos diferenciados terminalmente en la epidermis sintetizan la
proteína queratina protectora, parecida a una hebra larga, y forman una
barrera física. Los productos de diversas sudor y glándulas sebáceas
intercalados en la unión epidérmica-dérmica junto con los péptidos
antimicrobianos desarrollan una piel hidrófila ácida que actúa como una
barrera bioquímica ( 154). La unión epidérmica-dérmica también alberga
folículos pilosos. El componente celular de la epidermis se compone de
células de Langerhans (CD especializadas en la piel) y linfocitos T. La
dermis está compuesta por capas de fibras de colágeno gruesas y delgadas
que proporcionan un marco mecánico para albergar los vasos sanguíneos
y varias células inmunitarias como las CD dérmicas, las células T αβ y γδ,
las células NK, las células B, los macrófagos y las células cebadas
( 154). Comprensiblemente, dada la naturaleza expuesta de la piel, es
altamente vulnerable a las respuestas inmunes excesivamente celosas
contra los comensales de la piel y los antígenos propios. Las Treg son un
componente importante para establecer la tolerancia y la homeostasis en
la piel. De hecho, tanto los pacientes con IPEX de ratón de escurf como
los humanos presentan respuestas inmunes fulminantes en la piel. Un
estudio que examinó a niños con síndrome de IPEX informó que más del
70% de los niños presentaron dermatitis atópica y eccema con 1,5 meses
como edad promedio de aparición de los síntomas ( 156).
Origen y acumulación de piel Treg
Normalmente, 30–50% y 20–30% del total de células T CD4 + son Tregs
en piel de ratón y humana, respectivamente ( 157 , 158 ). Es difícil
establecer el origen de las Treg cutáneas, dada la escasez de información
específica. Sin embargo, se ha demostrado que una onda de Tregs puebla
la piel en el período neonatal temprano en un modelo de colonización
bacteriana de la piel en ratones ( 159 ). Además, la restricción de la
emigración linfoide de las células T mediante el tratamiento con el
antagonista del receptor de esfingosina-1-fosfato FTY720 dio lugar a una
acumulación preferencial de Treg en el timo en lugar de LN que drenan la
piel, lo que sugiere su migración directamente desde el timo ( 159). En los
seres humanos, las células Treg y Tconv cutáneas comparten muy pocas
secuencias TCRβ y estas Treg presentan
una región FOXP3 CNS2 completamente desmetilada , lo que sugiere su
estabilidad y origen tímico ( 157 , 160 , 161 ). Esto es poco sorprendente ya
que los Tregs de la piel establecen tolerancia no solo a los autoantígenos
sino también a los comensales. ¿Cómo se generan las Treg comensales
específicas de antígeno en el timo? Una posibilidad parece ser las DC
plasmocitoides (pDC) que se ha demostrado que son capaces de absorber
antígenos periféricos inocuos al timo ( 162 ) y los LN ( 163 ) para inducir
tolerancia. En general, los pDC no están presentes en la piel pero pueden
acumularse en presencia de afecciones inflamatorias ( 164, 165 ). Otra
probabilidad es que algunos tTregs tengan TCR con suficiente reactividad
cruzada a los antígenos microbianos y, por lo tanto, pueden expandirse y
acumularse específicamente en los sitios donde el antígeno está
presente. Sin embargo, si las Treg de piel son tímicas por su origen, los
mecanismos relativos quedan por aclarar.

El modelado de la expresión inducible de un autoantígeno, al fusionar el

dominio transmembrana del receptor de transferrina, la GFP y los
aminoácidos 230-359 de la ovoalbúmina de pollo en la epidermis de
ratón, reveló que las Treg circulantes no son capaces de suprimir la
respuesta inmune primaria contra OVA, aunque inició la activación de
Tregs ( 166 ). La inflamación se resolvió espontáneamente y cualquier
expresión posterior de antígeno condujo a una respuesta inmunitaria
corta y atenuada. Un análisis adicional reveló que una fracción de Treg
persistía en la piel que expresaba un bajo nivel de CD25 pero un mayor
KLRG1, CTLA4 y CD127, similar a las células T de memoria ( 166 ). Cabe
señalar aquí que un estudio reciente que examina los cambios
transcripcionales, epigenómicos y funcionales en la inflamación
experimentó Tregs que emplean el Foxp3 El sistema DTR presentó que los
Treg revierten la mayoría de los cambios inducidos por la activación y
pierden la capacidad de supresión acentuada con el tiempo ( 167 ). Un
informe anterior reveló que las Treg cutáneas expresan CCR4 y la
molécula de adhesión Integrina αE, CD103 ( 168 ). En un estudio mixto de
quimera de médula ósea, las Treg deficientes en CCR4 no pudieron
reconstituir el compartimiento Treg de la piel ( 168 ). CCL17 y CCL22 son
ligandos de quimiocinas conocidos para CCR4 ( 169 , 170 ), que se
expresan diferencialmente en la piel inflamada principalmente por células
endoteliales y CD dérmicas, respectivamente ( 171). Estas moléculas
manejan secuencialmente la localización de células T en la piel, donde
CCL17 promueve el reconocimiento vascular y la extravasación y CCL22
guía la migración posterior en la piel ( 172 ). Más del 70% de las Treg en la
piel expresan GATA3, aunque su eliminación en las Treg no altera el perfil
de Treg ni causa un fenotipo manifiesto relacionado con la piel en
condiciones homeostáticas ( 110 ).

Debido a que la piel está muy expuesta a comensales y patógenos, es

imperativo especular que un ajuste fino de efector y respuestas inmunes
supresoras ha evolucionado. La microbiota comensal que reside dentro de
la piel ha demostrado calibrar la inmunidad de barrera ( 173 , 174 ). Para
identificar los mecanismos detrás del desarrollo de la tolerancia a los
comensales de la piel, Scharschmidt et al. realizó algunos experimentos
elegantes con antígeno peptídico modelo que expresa Staphylococcous
epidermidis , un comensal de piel humana que coloniza eficazmente la
piel de ratón ( 159).). Sorprendentemente, la colonización de la piel en
ratones adultos no evocó ninguna tolerancia a las bacterias, como se ve
por la respuesta inflamatoria al volver a desafiar. Sin embargo, cuando los
ratones neonatales se colonizaron durante una semana durante la
segunda semana postnatal, hubo una atenuación apreciable de la
respuesta inflamatoria al volver a la prueba después de 3 a 4 semanas. La
respuesta moderada se asoció con un marcado enriquecimiento de las
Treg específicas de antígeno en la piel y el drenaje de LN y la tolerancia
podría revertirse con el tratamiento con FTY720 ( 159 ). Otro estudio
también ha demostrado que las Treg, generadas muy temprano en la vida
en una ventana perinatal definida, desempeñan un papel muy distinto en
el mantenimiento de la tolerancia propia ( 175). Así, en ratones, se
produce una ola abrupta de infiltración de Treg en un período postnatal
temprano definido para establecer la tolerancia dominante hacia los
comensales de la piel ( 159 ) (Figura 5 ).
FIGURA 5
Figura 5. Las células T reguladoras cutáneas (Tregs) facilitan la
morfogénesis del cabello y establecen tolerancia a los comensales de la
piel. Las Treg de la piel colonizan la piel del ratón en el período postnatal
temprano, coincidiendo con la colonización microbiana inicial y el
desarrollo del folículo piloso. Los microbios de la piel entran en el folículo
piloso que induce la producción de quimiocina CCL20 a partir de células
infundibulares que atraen a un gran número de Treg que expresan el
receptor CCR6 correspondiente. Los Treg acumulados posteriormente
establecen tolerancia a estos comensales. Además, durante la fase de
reposo del crecimiento del cabello (telógeno) que inicialmente coincide
con la entrada comensal en el folículo piloso, se observa un gran número
de Treg en contacto con las células madre del folículo piloso (HFSC) en el
bulbo del folículo. Estos Tregs proporcionan un ligando de muesca
Jagged1 a las células madre. La señalización de Notch desencadena la fase
activa del ciclo de crecimiento del cabello (anágeno). Tregs se reducen en
fase anágena alrededor de HFSCs.

Tanto los Treg como los comensales de la piel están localizados en los
folículos pilosos y en el ratón, el momento de la infiltración de Treg
(semana 2 postnatal) coincide con el desarrollo del folículo piloso
( 176 , 177 ). Por lo tanto, se especuló que los folículos pilosos podrían tener
un papel en el ingreso de Treg en la piel. Se ha demostrado que las
quimiocinas de diferentes partes de los folículos pilosos como CCL2 de
istmo, CCL20 de infundíbulo y CCL8 de queratinocitos de abultamiento
generan un tipo específico de células de Langerhans ( 178 ). De manera
similar, en un modelo de ratón de arresto por morfogénesis del folículo
piloso específico de la piel, la población de Treg de piel se redujo sin
afectar la población de Treg en el intestino o el drenaje de LN en ratones
neonatales ( 179). Investigaciones adicionales revelaron que la piel de
ratón SPF neonatal produce una alta cantidad de quimiocina CCL20 cuyo
receptor CCR6 se encontró enriquecido en Tregs cutáneos (Figura 5 ). Se
confirmó mediante experimentos de transferencia adoptiva que las Treg
deficientes en CCR6 estaban en desventaja competitiva para reconstituir
el compartimento de células T de la piel ( 179 ). Las Tregs en neonatos
también expresan CCR8 alto y su ligando CCL22 se expresa, a su vez, en la
piel. Sin embargo, su contribución en el establecimiento y / o
mantenimiento de las Tregs de la piel aún no se ha examinado. La
expresión de ARNm de CCL20 también aumenta en explantes de piel fetal
humana tras la exposición a comensales cutáneos y componentes
bacterianos ( 179). Por lo tanto, se muestra que la morfogénesis del tejido
(generación de folículos pilosos y la posterior producción de
quimioquinas por las células del folículo piloso) y los comensales
cooperan en el desarrollo de una tolerancia inmune específica del
tejido. Sería interesante extrapolar este modelo a otros sistemas de
órganos habitados por microbios. Se desconoce si estos mecanismos
sostienen a lo largo de la vida, particularmente en la vida
adulta. Anteriormente, se informó que los ratones GF de 8 a 12 semanas
de edad tenían aproximadamente dos veces más Treg cutáneos que los
animales con SPF ( 180 ). Es posible que otros factores desconocidos,
además de los comensales, aumenten la población de Treg en la piel de la
GF adulta o la falta de respuesta inmune sintonizada contra los
comensales desvíe los recursos inmunitarios hacia antígenos propios y, a
su vez, enriquezca los Treg específicos para el autoantígeno en la piel.

La exposición a rayos ultravioleta (UVB) de longitud de onda corta

también enriquece y acumula Treg en la piel del ratón ( 181 ). La
exposición a UVB daña el auto-ARN en los queratinocitos, que es
detectado por TLR3 para generar una respuesta inflamatoria ( 182 ). De
hecho, los Treg que acumularon la exposición post-UVB fueron
Nrp1 + con Foxp3 CNS2 altamente desmetilado ( 181 ). Estas Tregs
expresaron moléculas homing como CD103, CCR4 y P-lig y, por lo tanto,
también pudieron migrar a las partes de la piel no expuestas a UVB ( 181 )
(Figura 6 ). Curiosamente, la fototerapia con UVB es un tratamiento eficaz
en afecciones cutáneas autoinmunes, como la psoriasis ( 183 ) y la
dermatitis atópica (184 ).
FIGURA 6

Figura 6 . Las células T reguladoras cutáneas (Tregs) reparan

activamente el daño del tejido de la piel. Las Treg migran a la piel en
virtud de las interacciones secuenciales de las quimiocinas CCL17 y
CCL22 con su receptor CCR4. CCL17 es secretada por células endoteliales
en la piel inflamada y ayuda en la extravasación de Tregs, CCL22 gestiona
la migración posterior de Tregs. En caso de inflamación inducida por una
herida en la piel, las Treg adquieren un fenotipo altamente activado con
una mayor expresión en la superficie de CTLA4 e ICOS. Estos Tregs
suprimen activamente la producción de IFNγ de
los macrófagos inflamatorios Ly6C . Además, los Tregs expresan una
+

gran cantidad de EGFR, lo que ayuda en su capacidad de reparación de

tejidos. En el caso de daño cutáneo inducido por la luz UVB de onda corta,
CD103 capta el ARNm propio de los queratinocitos Células dendríticas
+ .

(CD) que inducen la inflamación cutánea. Estos DC se suprimen por Tregs

que tienen una alta expresión superficial de CD103 y P-lig y, por lo tanto,
pueden migrar a la piel no inflamada, luego de la exposición a los rayos
UV.
Adaptaciones del tejido y funciones homeostáticas
Fieles a la naturaleza de las Treg residentes en los tejidos, donde se ha
demostrado que no solo desarrollan tolerancia inmunológica sino que
también se acostumbran y ayudan a la fisiología local, se ha descubierto
que las Treg cutáneas en los folículos pilosos modulan las células madre
del folículo piloso (HFSC), además de Estableciendo tolerancia a
comensales. En la piel del ratón, se encontró una gran cantidad de Tregs
durante la fase telógena del crecimiento del folículo piloso, que se
caracteriza por la quiescencia, seguida solo por una fase de proliferación
activa llamada anágena. La población de Treg disminuye durante la fase
anágena. Y a medida que estas fases se alternan en la piel del ratón,
también lo son los números de Treg asociados con el folículo piloso ( 158 )
(Figura 5 ). Los animales con agotamiento transitorio de Treg durante
telogen, no progresaron a la fase anágena y no pudieron volver a crecer
pelos (158 ). No se relacionó con la inflamación, ya que el agotamiento
transitorio de las Treg no provocó ningún evento inflamatorio importante
en la piel y el co-agotamiento de los efector CD4 + , CD8 + , neutrófilos que
expresan Gr-1 o células mieloides CD11C + no rescató la proliferación de
HFSC ( 158 ). Esto sugirió un papel no inmune de los Treg en la
proliferación de HFSC. Al igual que las Treg en el sistema hematopoyético
que forman un sitio con privilegios inmunitarios para proporcionar un
nicho de protección a las células madre hematopoyéticas ( 185 ), se
encontró que las Treg del folículo piloso co-localizaban con las
HFSC. Estos Treg expresan altamente " jagged1 " que codifica un ligando
para la vía de señalización de muesca responsable de la proliferación de
HFSC ( 158) (Figura 5 ).

Las células T reguladoras también desempeñan un papel importante en la

cicatrización de heridas cutáneas. Se acumulan en grandes cantidades en
el sitio poco después de una lesión en la piel ( 186). Estas Treg son de
fenotipo activado con alta expresión de CD25, CTLA4 e ICOS y limitan las
células T productoras de IFNγ y los macrófagos inflamatorios en las
heridas ( 186 ). Las Treg involucradas en la cicatrización de heridas
cutáneas demostraron ser dependientes de la vía del EGFR ( 186 ) como
en las Treg de cicatrización pulmonar y muscular ( 150 , 187 , 188 )
(Figura 6 ).

Células T Reguladoras Infiltrantes De

Tumores (TI-Tregs): Una Batalla Ganada,
Guerra Perdida
Los tumores son heridas que no sanan ( 189 - 191 ). Los tumores sólidos,
en particular, se entregan heterogéneamente en varias etapas de la
cicatrización de heridas, que proporcionan factores de crecimiento
esenciales para el crecimiento del tumor. Este secuestro de procesos
naturales da como resultado un aumento de la inflamación y su posterior
resolución en el microentorno del tumor, presumiblemente creando un
círculo vicioso. La inflamación por un lado proporciona oportunidades de
crecimiento y metástasis; La resolución de la inflamación ayuda al tumor
a escapar de la inmunidad antitumoral. Por lo tanto, no es sorprendente
que muchos tumores sólidos, incluyendo hepatocelular ( 192 ), gástrico
( 193 ), pulmón ( 194 ), mama ( 195 ), ovario ( 196), cervical (197 ), y los
melanomas ( 198 ) convocan números comparativamente grandes de Treg,
que a veces representan incluso más del 50% del compartimiento de
células T CD4 + ( 199 ). Para la mayoría de los tumores, la presencia de un
gran número de Treg indica un pronóstico precavido a grave. Sin
embargo, varios estudios informaron un papel favorable de las células
T FOXP3 + en los carcinomas colorrectales (CCR) ( 200 - 202 ). Es de notar
que la expresión de Foxp3 no es exclusivo de bona fide Tregs en los seres
humanos, a menudo, células T efectoras expresan FOXP3, aunque
transitoriamente ( 203 , 204). Sobre la base de los niveles de expresión de
FOXP3 y proteína tirosina fosfatasa isoforma A (CD45RA), FOXP3 sangre
periférica humana + CD4 + células T se pueden clasificar en
FOXP3 hi CD45RA - bona fide Tregs que son eTregs altamente supresores y
fenotípicamente; Células T no expuestas de FOXP3 lo CD45RA + y células T
efectoras de FOXP3 loCD45RA - que no son supresivas en un ensayo de
supresión in vitro ( 203 ). De hecho, el análisis cuidadoso de los TIL en el
CRC humano por Saito et al. ( 205) reveló la heterogeneidad de la
expresión de FOXP3. Los autores identificaron que el CRC, donde la
mayor expresión de FOXP3 se asoció con resultados favorables, en
realidad se infiltró más con las células T efectoras de FOXP3 loCD45RA + y
los genes inflamatorios regulados al alza como Il12a, Il12b,
Tgfb1 y Tnf . Mayor infiltración de FOXP3 hi CD45RA - células dieron lugar
a un mal pronóstico y una menor supervivencia libre de enfermedad
( 205 ) según lo informado por otros tumores.
Origen y Acumulación de TI-Tregs.
Como los tTregs y los pTregs difieren en su estabilidad, la información
concluyente sobre el origen de TI-Tregs puede ser muy valiosa para
diseñar terapias específicas de TI-Treg en cánceres. Los tumores dirigen
las respuestas inmunitarias contra los antígenos propios asociados a los
tumores, así como contra los antígenos neo propios. Por lo tanto, en
teoría, las Treg contra los antígenos propios (tTregs) y las pTregs contra
los antígenos neo-auto son posibles. La presencia de altos niveles de TGFβ
en la mayoría de los tumores sólidos refuerza la idea de la generación de
pTregs en microambientes tumorales ( 206 , 207 ). Sin embargo, se ha
demostrado que las TI-Tregs en varios tumores murinos expresan altos
niveles de proteínas Nrp1 y Helios, lo que sugiere un origen tímico
( 208 ). Intentos de conversión in situ de CD4 + convencionalLas células T
a Treg contra tumores que expresan antígenos modelo dieron como
resultado la generación de pTregs intratumorales ( 209 , 210 ), pero las
poblaciones monoclonales de células T específicas de antígeno no
recapitulan las condiciones fisiológicas donde las células T específicas de
antígeno representan menos del 5% de TILs ( 211 - 213 ). Los análisis de
repertorio de TCR no revelaron casi ninguna superposición en Foxp3 + y
Foxp3 : células T en tumores de próstata autóctonos ( 214 ), tumores
inducidos por carcinógenos ( 215 ) y en tumores heterotópicos
trasplantados en ratones ( 216).). Además, estos estudios confirmaron que
hay enriquecimiento y expansión de TCR que llevan Tregs dentro del
microambiente tumoral ( 214 , 216 ). En los cánceres de mama humanos
( 217 ) y en los carcinomas hepatocelulares positivos para el virus de la
hepatitis B (CHC) ( 192 ), el repertorio de TCR muy bajo se superpone
entre las TI-Treg y las células T convencionales sugiere poca o ninguna
conversión de las células T CD4 + convencionales en Treg (
Figura 7 A). Malchow et al. ( 214 ) desarrollaron un ratón transgénico que
expresaba el modelo del antígeno SV40 T del oncogén en la próstata y una
cadena TCRβ fija (TRAMP-Foxp3 eGFP TCRβ Tg). Encontraron que las Treg
que expresan un solo TCR (MJ23), reactivo a un antígeno de próstata
expresado normalmente, poblaron consistentemente los tumores
( 214 ). Este TCR fue capaz de impulsar el desarrollo de un clon tTreg. Sin
embargo, una deficiencia del regulador autoinmune del factor de
transcripción abolió el desarrollo de estos clones ( 214 ), lo que sugiere que
al menos en estas configuraciones experimentales, se generan TI-Tregs en
el timo contra un auto-antígeno expresado en tejido normal
(Figura 7UNA). Recientemente, se descubrieron dos ligandos
autoantigénicos naturales restringidos por MHCII de Tregs MJ23. Ambos
ligandos son péptidos no superpuestos que se originan a partir de la
misma proteína prostática (Tcaf3) y mientras que uno se expresa en
tumores de próstata de ratón (MJ23), el otro está asociado con lesiones
autoinmunes de próstata (SP33) ( 218 ). Otro estudio que se centró en las
características epigenéticas de las tTregs encontró que las TI-Tregs habían
hipometilado Foxp3 CNS2 en varios modelos de tumores transplantados
ortotópicos y heterotópicos, incluso en diferentes momentos del
crecimiento tumoral ( 219 ). Estos hallazgos se confirmaron aún más en
las TI-Treg de diferentes tumores humanos. Cabe señalar que ha habido
informes equívocos acerca de que el CNS2 desmetilado es específico para
los tTregs, ya queLa región Foxp3 CNS2 en pTregs también se ha
demostrado que está desmetilada ( 220 , 221 ), muy probablemente luego
de una estabilización posterior a su inducción de novo .
FIGURA 7

Figura 7 . Origen, acumulación y potenciación funcional de las células T

reguladoras infiltrantes de tumores (Tregs). (A) Los antígenos específicos
del tumor pueden expresarse por células epiteliales tímicas de forma
dependiente de Aire , que luego seleccionan los Treg específicos del
antígeno tumoral. Estas Treg se expanden luego en los ganglios linfáticos
que drenan los tumores (LN) con la ayuda de células dendríticas
(DC). Los Treg también pueden ser reclutados directamente para tumores
y experimentar expansión allí. Si bien es probable la conversión
intratumoral de las células T efectoras en pTregs, no se comprende
completamente hasta qué punto esto ocurre en condiciones
fisiológicas. (B) Un alto número de TI-Tregs son apoptóticos debido a la
expresión suprimida de Nrf2. Estas Treg, al igual que las células
tumorales moribundas, liberan grandes cantidades de ATP, que se
convierte en adenosina por las ectoenzimas CD39 y CD73 de Treg de
manera secuencial. La adenosina resultante es altamente supresora de las
células T efectoras CD8 infiltrantes de tumores . Además, las Treg
+

también producen anfirregulina en ciertos tipos de tumores, lo que ayuda

en la progresión del tumor. (DO)Más del 50% de las TI-Tregs expresan
neuropilina 1 (Nrp1) de superficie, que es un receptor para la Semaforina
4a. Tras la ligadura con Semaphorin4a, Nrp1 activa la fosfatasa lipídica y
el homólogo a la tensina (PTEN), que de pronto desfosforila el AKT, lo
que permite su secuestro en el citosol y la retención nuclear de los factores
de transcripción de Foxo1 / 3 que ayudan a la estabilización y
supervivencia de Tregs. Una pérdida de Nrp1 hace que Treg sea altamente
susceptible a IFNγ y tales Tregs también producen una gran cantidad de
IFNγ y HIF1α (Tregs “frágiles”). El entorno alto de IFNγ resultante,
recíprocamente, puede inducir "fragilidad" en otros Treg con suficiente
Nrp1 también, estableciendo un círculo vicioso.

En general, las evidencias disponibles apuntan en gran medida hacia un

mayor enriquecimiento y expansión de tTregs dentro de tumores
sólidos. Sin embargo, ¿por qué no deberían los niveles más altos de TGFβ
y un entorno de tumor activador impulsar la generación y expansión de
pTreg? Probablemente, los experimentos de rastreo de linajes más
concluyentes en los tumores pueden demostrarse más perspicaces.
TI-Tregs añade otra capa de diversificación
Estudios recientes que analizan el transcriptoma de TI-Tregs de cánceres
humanos han identificado que aunque TI-Tregs son muy similares a los
Treg residentes en tejidos normales, estos tienen algunas características
específicas y patrones moleculares que pueden utilizarse para la terapia
selectiva ( 192 , 217 , 222 ) . Plitas et al. ( 217 ) encontraron que los cánceres
de mama, con un fenotipo bastante agresivo, estaban enriquecidos para
las Treg, que eran altamente supresivas en un ensayo de microsupresión y
eran altamente proliferativas basadas en el aumento de la expresión de la
proteína nuclear Ki67, un marcador celular para la proliferación
( 223).). Un análisis adicional del transcriptoma de las TI-Treg de cáncer
de mama y cáncer gástrico, así como las metástasis cerebrales de CPNM y
metástasis hepáticas de CCR, sugirieron un conjunto de genes distintivos
para estas células ( 222 ). TI-Tregs expresó BATF, CCR8, CD30, IL1R2,
IL21R, PDL1 y PDL2 junto con FOXP3 e IL2Ra a un nivel muy alto
( 222 ). Recientemente, se demostró que BATF estaba involucrado en la
expresión de conjuntos de genes dependientes del contexto en tejidos
Treg ( 224). En los pacientes con IPEX, una mutación de ganancia de
función en el locus FOXP3 (A384T) da como resultado especificidades de
unión a ADN expandidas de FOXP3. Su enlace alterado
al locus BATF reprimió la expresión de BATF, lo que condujo a la
expresión reprimida de GATA3, ST2 y CCR4 en Tregs ( 224). Estos genes
son significativos en la conversión de cTregs en eTregs, por lo tanto, su
expresión disminuida condujo a una autoinmunidad específica de tejido
generalizada ( 224 ).

Los análisis de transcriptomas de todo el genoma identificaron MAGEH1 ,

gen de la familia H1 del antígeno del melanoma, que codifica una putasa
ubiquitina E3 putativa que regula potencialmente la supervivencia y la
función de TI-Treg; Receptor de quimiocina (motivo CC) 8 (CCR8),
receptor conocido para quimiocinas CCL1 ( 225 ), CCL8 ( 226 ), CCL16
( 227 ) y CCL18 ( 228 ) en seres humanos; CD177, una glucoproteína de la
superficie celular unida al glicosilfosfatidilinositol que puede unirse a la
molécula de adhesión de células endoteliales plaquetarias-1 y es conocida
por la transmigración y supervivencia de los neutrófilos ( 229 ); y LAYN ,
que codifica un nuevo layilin del receptor de superficie de lectina de tipo
c, un receptor propuesto para el hialuronano ( 230). Sin embargo,
posteriormente, se ha encontrado que la layilina es altamente expresada
en células T CD8 + citotóxicas infiltrantes de tumores , particularmente
aquellas con un fenotipo exhaustivo ( CTLA4,
PDCD1 y HAVCR2 ) exhaustivo ( 192 ). El enriquecimiento de LAYN,
MAGEH1 y CCR8 en muestras de tumores completos se correlacionó
significativamente con una reducción de la tasa de supervivencia a los 5
años de los pacientes con CCR y CPNM ( 222 ). La expresión de CCR8 se
enriqueció exclusivamente en TI-Tregs, mientras que las expresiones
CCR2, CCR4 y CCR5 se encontraron también en otras células Tconv
infiltrantes de tumores y / o en sangre periférica. De hecho, se ha
demostrado que un anticuerpo reductor de CCR4 reduce tanto las células
Treg como las células Tconv ( 231). Algunos Tregs en el drenaje de LN
también expresaron CCR8 alto, que podrían ser marcados para la
infiltración del tumor o Tregs en micrometástasis dentro de los LN
( 217 ). Como la Tregs de sangre periférica y / o LN no expresan CCR8, no
se aprecia su importancia en el reclutamiento de Treg para tumores. Es
posible que CCR8 se exprese para retener Treg en tumores. De hecho, los
ligandos de CCR8 como CCL1 y CCL18 se transcriben altamente en células
mieloides infiltrantes de tumores ( 217 ). Si la expresión CCR8 es un
indicador de TI-Treg altamente supresivas o tiene una importancia
funcional adicional, aún no se conoce. Sin embargo, las Treg humanas
expuestas al ligando CCR8 CCL1 y no a CCL8, CCL16 o CCL18 inducen la
expresión de CCR8 en la superficie a través de una vía mediada por
STAT3 ( 232). Dichas células, posteriormente, aumentan su expresión de
FOXP3, CD39, Granzyme B e IL10 y son funcionalmente más supresivas
en un ensayo de microsupresión y en un modelo de esclerosis múltiple en
ratones ( 232 ).
Función de TI-Tregs
There is a repertoire of known and yet unknown mechanisms which Tregs
utilize to suppress an immune response. TI-Tregs also use similar
mechanisms which include production of immunosuppressive cytokines
like IL10 and TGFβ (233, 234); sequestration of IL2 (235); direct cytolysis
of target lymphocytes using granzyme B and perforin (236); contact based
immunosuppression using surface inhibitory molecules like CTLA4 ( 237),
PD1 (238, 239), LAG3 (240), TIM3 (241), and CD39/CD73-generated
adenosine-mediated T-cell suppression viaadenosine receptor 2A
(242, 243). However, how the TI-Tregs have highly accentuated
suppressive response is not very well understood. A large accumulation of
Tregs might help in a collective exaggerated suppression, but it cannot
explain individual potentiation. Recently, it was shown that TI-Tregs are
highly apoptotic on account of comparatively low expression of the
transcription factor Nuclear factor like 2 (NRF2) (244). NRF2 regulates
antioxidant defense system in macrophages and epithelial cells (245). A
lack of NRF2 makes TI-Tregs more apoptotic in high oxidative stress
tumor microenvironment. But, owing to increased release of ATP and
high CD73/CD39 expression, apoptotic TI-Tregs generate large amount of
adenosine and thus, become even more suppressive (244) (Figure 7 B). Sin
embargo, se debe tener en cuenta que la apoptosis inducida por Imatinib
de TI-Tregs mejoró la inmunidad antitumoral ( 246 ).

TI-Tregs en cánceres de mama humanos ( 217 ) y HCC ( 192 ) expresan

altamente el gen Il1r2 que codifica un receptor IL1 señuelo. Además, se
encontró que las TI-Tregs son altamente estables debido a la expresión
aumentada de la fosfatasa lipídica y el homólogo de la tensina (PTEN) y el
receptor de VEGF Nrp1 ( 199 , 238 , 247 ). La unión de Nrp1 a su ligando
Semafhorin4a incrementó la localización nuclear de Foxo1 y Foxo3
mediante la inhibición de la fosforilación de AKT que estabilizó los genes
distintivos de Treg y los genes antiapoptóticos ( 247 ) (Figura 7DO). La
desfosforilación de AKT se logró mediante la activación de PTEN por
Nrp1. De hecho, los ratones con eliminación de PTEN específica para Treg
generan una respuesta inmune antitumoral acentuada ( 238 ). La
expresión de Nrp1 es principalmente importante para TI-Tregs, ya que la
pérdida de Nrp1 incluso de una fracción de Tregs en condiciones
experimentales apropiadas, hizo que todas las Tregs (incluidas aquellas
que eran Nrp1 suficientes) fueran "frágiles" ( 199 ). Esta observación
enfatiza que las Treg no solo pueden modular otras células inmunitarias,
sino que también pueden influir fenotípicamente en otras Treg. Se
demostró que la fragilidad TI-Treg se induce por la producción de IFNγ
por Treg deficientes en Nrp1 y IFNγ exógeno ( 199 ) (Figura 7DO). Los
autores muestran además que HIF1α fue un factor importante inducido
en Tregs frágiles y deficientes en Nrp1, y tanto HIF1α como IFNγ pueden
ser inducidos por hipoxia ( 199 ). Sin embargo, como la mayoría de los
tumores sólidos se vuelven progresivamente hipóxicos ( 248 , 249), queda
por ver si este fenómeno es prevalente en los tumores progresivos y, de
ser así, si es eficaz para una regeneración significativa de la respuesta
inmune antitumoral. Se ha demostrado que las TI-Tregs expresan
altamente el activador del receptor del factor nuclear κB ligando
(RANKL), que al unirse a su receptor RANK expresado en células de
carcinoma mamario aumenta la metástasis pulmonar ( 250 ). RANKL
también se ha implicado en la renovación de células progenitoras de
cáncer de mama ( 251) y metástasis de los cánceres de próstata ( 252 )
mediante la modulación del inhibidor de la proteína quinasa del factor
nuclear κB quinasa α (IKKα). En general, estos hallazgos sugieren que
existe una identidad fenotípica y funcional específica para TI-Treg y, por
lo tanto, es posible seleccionarlos de manera selectiva para desencadenar
una inmunidad antitumoral eficiente.

Otros Tregs en la inflamación del tejido y la

homeostasis
A medida que la diversidad en las características y funciones de las Treg
tisulares se está desentrañando, se han descrito varias otras poblaciones
interesantes que merecen una caracterización fenotípica y funcional más
detallada.
Central de regeneración
Se informó anteriormente que en un modelo no inflamatorio de la
alveologénesis regenerativa, las Treg aumentaban la proliferación
epitelial. Un cocultivo de Treg con células alveolares de tipo II (AT2)
aumentó su proliferación de manera dependiente de CD103 ( 253 ). De
acuerdo con estos hallazgos, una población distinta de Tregs que expresan
altos niveles de citoquinas proinflamatorias IL18 (IL18R) y ST2 se ha
descrito en los pulmones ( 150 ). Las Treg IL18R + seexpanden temprano en
el curso de una lesión pulmonar y mejoran la reparación del tejido al
producir una gran cantidad de proteína de reparación tisular de
anfiregulina de manera "innata", independientemente del compromiso
del TCR ( 150 ) (Figura 8UNA). En animales con deficiencia de
anfirregulina específica de Treg, se observó una disminución rápida de las
funciones pulmonares en la infección por el virus de la influenza
intranasal, mientras que la respuesta inmune antiviral estaba intacta
( 150 ). El análisis transcriptómico reveló que estas "Treg de reparación"
tienen un patrón de expresión génica distinto que indica su competencia
en la remodelación de la matriz extracelular y la reparación de tejidos
( 150 ).
FIGURA 8

Figura 8 . Las evidencias emergentes resaltan un requisito obligatorio de

células T reguladoras (Treg) en la regeneración y reparación de
tejidos. (A) Tanto los pulmones como los músculos contienen una
población de Treg que proliferan vigorosamente en la lesión tisular. Las
Treg reparadoras del pulmón responden tanto a la IL18 inflamatoria
como a la IL33 de alarmina y producen anfirregulina de manera
independiente de TCR. Las Treg musculares responden a la IL33
producida en el daño muscular y producen anfiregulina para su
reparación posterior. (B)En el pez cebra,
mamífero Foxp3 ortholog Foxp3aLas Treg que expresan (zTregs) están
presentes principalmente en el riñón. Sin embargo, al lesionarse el tejido,
pronto se acumulan en el lugar de la lesión. Además de la producción de
IL10 antiinflamatoria, los zTregs co-localizan con las células progenitoras
de los órganos y proporcionan factores de crecimiento específicos del
tejido a los progenitores como la neurotrofina3 para los progenitores
neurales en la médula espinal, la neuregulina1 para cardiomiocitos en el
corazón y el factor de crecimiento similar a la insulina1 a las células gliales
de Müller en la retina.

Otra población treg de tejido único se ha encontrado en los músculos

esqueléticos, donde en virtud de la secreción de anfirregulina, ayudan en
la regeneración muscular y la curación. Estas células, que generalmente
representan el 10% de las células T musculares en un estado estable,
proliferan vigorosamente después de la administración intramuscular de
cardiotoxina, que induce una lesión aguda inducida por hipercontracción
y muerte de miofibrillas ( 254 ), que llega a cerca del 50% de las células T
musculares. población ( 188 ). La alta expresión de Nrp1 y Helios y un
repertorio exclusivo y restringido de TCR sugieren el origen tímico de las
Treg musculares y la reactividad a un antígeno muscular local ( 188). Estas
Treg tienen un transcriptoma único en comparación con las Treg de
órganos linfoides con varios genes expresados diferencialmente. Tienen
transcripciones reguladas al alza involucradas en la supresión mediada
por Treg ( Il10, Gzmb , etc.), reparación de tejidos ( Il1rl1, Areg , etc.) y
regeneración muscular ( 255 ) ( Ccr2 ), así como genes que codifican
proteínas encontradas en la función muscular contráctil ( 256 ) como
nebulina y proteínas similares a nebulina ( Neb, Nebl). El agotamiento de
las Treg durante un episodio de lesión muscular retrasa la curación
muscular, muy probablemente debido a la pérdida de la anfiregulina Treg
generada. Además, los progenitores fibro / adipogénicos en los músculos
esqueléticos producen altos niveles de IL33, cuyo receptor ST2 se expresa
altamente en Tregs musculares. Por lo tanto, las Treg musculares parecen
estar involucradas en un proceso de reparación inducida por alarmina
(Figura 8 A). Curiosamente, la población de Treg muscular disminuye en
ratones de la vejez, lo que resulta en un deterioro del proceso de
reparación y regeneración ( 257 ).
Recientemente, un estudio muy elegante y detallado ( 258 ) en pez cebra
ha elaborado capacidades de regeneración de Treg aún desconocidas y
espectaculares (Figura 8 B). Los autores encontraron que un ortólogo
de Foxp3 de mamíferos , Foxp3a , que se expresaba exclusivamente en
una subpoblación de células T de pez cebra, estaba regulado al alza de
manera más prominente en distintos órganos regeneradores. Tregs de
peces cebra (zTregs) se encontraron predominantemente en los riñones,
pero se infiltraron y proliferaron vigorosamente en los tejidos en
regeneración. Al igual que en las contrapartes de los mamíferos, estas
células expresaron altos niveles de Nrp1a y Helios en comparación con las
zTregs de riñón ( 258 ). Se ha reportado que la región CNS1
de Foxp3locus, responsable de la generación de pTreg, no se encuentra en
el pez cebra ( 259 ). Para la identificación del papel de zTreg en la
regeneración de órganos, la eliminación puntual y continua
de Foxp3a dio como resultado una regeneración reducida y retardada en
los modelos de lesión de corazón, médula espinal y retina ( 258 ). De
hecho, la eliminación de zTregs redujo las células precursoras específicas
del tejido y disminuyó su proliferación ( 258 ). De hecho, se encontraron
zTregs cerca de los progenitores, a veces incluso en contacto cercano
( 258). Sin embargo, el hallazgo más sorprendente de este estudio es que
los zTregs que presumiblemente provienen de un grupo imparcial común,
se volvieron plásticos en un contexto regenerativo específico del tejido y
produjeron factores de regeneración específicos de células precursoras de
tejido como la Neurotrophin 3 para los progenitores neurales en la
médula espinal en regeneración, Neuregulin 1 para cardiomiocitos en el
corazón lesionado y factor de crecimiento similar a la insulina 1 para
células progenitoras de la retina Müller glia ( 258 ) (Figura 8 B). El hecho
de que los zTregs son la fuente principal de estos factores de crecimiento
se confirmó mediante el rescate de la regeneración en tejidos agotados
con zTreg mediante factores de crecimiento recombinantes específicos del
tejido ( 258). El potencial de regeneración de zTregs fue independiente de
su potencial inmunosupresor o al menos no dependía de su producción de
IL10, ya que las células deficientes en IL10 eran capaces de inducir la
proliferación de células precursoras. Sin embargo, el potencial de
regeneración dependió de Foxp3a, ya que el proceso de regeneración se
redujo significativamente en los tejidos de Foxp3a - / - junto con los niveles
de expresión del factor de crecimiento ( 258 ). Por otro lado,
la expresión Areg no era dependiente de Foxp3a y su papel en la
regeneración era limitado. Sería interesante extrapolar y confirmar
hallazgos similares en tejidos murinos y humanos.
Tolerancia Feto-Materna
Se ha descrito una población igualmente fascinante de Treg que se
acumula en la placenta murina para inducir la tolerancia materna al feto
( 259 ). Decir que los Treg son extremadamente importantes desde el
comienzo del embarazo no será un rebasamiento [revisado en
Ref. ( 260 , 261)]. De hecho, el apareamiento en sí mismo expande las Treg
uterinas e induce una "tolerancia" transitoria a los aloantígenos paternos
( 260 ). Tanto en humanos como en ratones, el plasma seminal contiene
TGFβ y prostaglandina E, que son potentes inductores de Treg. De hecho,
el fluido seminal en humanos y roedores contiene los niveles más altos de
TGFβ medidos entre los fluidos biológicos ( 260 ). Las mujeres con
abortos espontáneos recurrentes han reducido la población de Treg
( 262). La decidual femenina y el útero que drenan LN Treg es
dependiente de CNS1 ( 259 ) y se observó un aumento de la reabsorción
fetal y la infiltración placentaria de células T en ratones deficientes en
CNS1. Aparte de su origen periférico más probable, no se sabe si estas
Tregs tienen un perfil fenotípico y funcional distinto, cuyo esclarecimiento
podría ser muy informativo sobre el mejoramiento de la infertilidad, la
preeclampsia y otros trastornos abortivos espontáneos. Muy
recientemente, un elegante estudio sobre células presentadoras de
antígeno fetal humano ( 263 ) ha encontrado que las contrapartes fetales
de DC son principalmente tolerógenas en su respuesta. Y, la respuesta
primaria es la generación de Treg, incluso más que las CD de adultos, en
un ensayo de diferenciación de Treg in vitro ( 263).). Estas CD se
encontraron en varios tejidos fetales, incluidos el bazo, el timo, la piel, el
intestino y los pulmones ( 263 ). Desafortunadamente, los autores no
describieron si las Treg también estaban presentes en estos
tejidos. Anteriormente, se ha demostrado que los Treg fetales humanos
promueven la tolerancia a los antígenos maternos no hereditarios ( 264 ),
pero solo recientemente, salió a la luz que los Treg también son necesarios
para la supresión de la autoinmunidad en el útero . Dos niños con
síndrome de IPEX, que murieron poco después de nacer, presentaron
evidencias histológicas de estructuras linfoides terciarias, cambios
inflamatorios crónicos y autoinmunidad específica del páncreas exocrino
( 265).). Esto significa que en los entornos desconcertantes de un
embarazo, los Treg son fundamentales para establecer la tolerancia en
ambos extremos de la relación materno-fetal.

Conclusión y perspectivas
La utilidad traslacional de muchos procesos biológicos se ve empañada
por la falta de especificidad. Un dilema similar existe para los biólogos de
Treg también; sin embargo, en el caso de los Treg, la selección terapéutica
selectiva parece ser alcanzable en virtud de aprovechar su diversidad
fenotípica y funcional gradualmente establecida. Estudios recientes han
proporcionado evidencia de que incluso para los órganos como los
testículos y los ojos, que se consideran convencionalmente privilegiados
para la inmunidad; hay poblaciones de Treg que mantienen la tolerancia
dominante y / o la homeostasis del tejido. Mientras está en el testículo,
donde el autoantígeno privilegiado se escapa de los túbulos seminíferos,
solo para generar tolerancia sistémica a través de Tregs ( 266), la retina
recluta activamente Treg, que no solo atenúa la inflamación, sino que
también repara la vasculatura, salvando las cegadoras retinopatías
neovasculares ( 267 ). Otra capa de especificidad se agrega por el
descubrimiento de Treg residentes en el tejido y sus características
únicas. Sin embargo, la mayoría de la información, excepto los informes
recientes sobre Treg residentes en la piel y TI-Tregs, son de tejidos de
ratón. Hay varias diferencias en la estructura, así como la fisiología entre
ratones y humanos. Por ejemplo, la piel del ratón contiene una capa
muscular delgada paniculus carnosus , que es vestigial en los humanos
( 268). Esto ayuda en la contracción, revascularización y curación de
heridas sin formación de cicatrices en ratones. Por otro lado, la piel
humana se cura por segunda intención dejando cicatrices. Por lo tanto, es
importante identificar Tregs de tejido humano para un esfuerzo
informado hacia el uso terapéutico.

Existe la necesidad de establecer de manera concluyente el origen y los

factores acumulativos de las Treg tisulares. Una de las preguntas más
apremiantes sobre casi todos los Tregs de tejidos es la identificación de
sus ligandos naturales o antígenos tisulares. Aunque se ha demostrado
que, en ciertos casos, los Treg no necesitan la estimulación de TCR para
algunas de sus funciones ( 150), Los Treg con un subconjunto más
pequeño del repertorio específico de TCR pueblan varios tejidos así como
tumores malignos. Por lo tanto, es probable que los ligandos afines que
ayudan en la supervivencia y proliferación de Treg en estos tejidos tengan
una contribución significativa en las modulaciones específicas del tejido
de catering. Los estudios de prueba de concepto proporcionan evidencia
de que las Treg con especificidad de antígeno definida (Treg receptor de
antígeno quimérico, Treg-CAR) tienen potentes funciones
inmunosupresoras junto con la ventaja de no inducir inmunosupresión
generalizada ( 269 ).

La pregunta sigue siendo cómo los Treg se comunican con adipocitos

específicos de células tisulares para establecer un canal de comunicación
con el medio ambiente. Más allá de la adaptación al contexto inflamatorio,
existen características de la biología de Treg, que también modulan su
efecto temporalmente en la vida. Por ejemplo, la acumulación de Treg en
el envejecimiento WAT induce resistencia a la insulina ( 79 ), mientras que
su acumulación en el WAT obeso joven la mejora ( 83). Los mecanismos
que impulsan tales resultados específicos deben ser estudiados en
detalle. Esta acentuada capacidad de adaptación a veces se vuelve
contraproducente también como se ve en los tumores donde la capacidad
supresora aumenta incluso en comparación con las Treg residentes en
tejidos normales y, a su vez, es utilizada por los tumores para su
supervivencia y escape inmune. Aún no se han identificado los
mecanismos mediante los cuales los Treg pueden empujar los límites de
sus capacidades funcionales.

Un aspecto importante de la adaptación del tejido es ajustar el

metabolismo celular de acuerdo con el entorno del tejido. Existen grandes
lagunas en nuestra comprensión tanto del metabolismo de los linfocitos
Tn como de los linfoides y los tejidos. En Tregs diferenciados in
vitro (iTregs), se demostró que Foxp3 suprime la glucólisis mediante la
represión de Myc y ayuda a desarrollar resistencia a L- lactato ( 270 ). De
manera similar, Foxp3 contadores PI (3) K-Akt-mTORC1 para disminuir
la glucólisis en iTregs ( 271 ). Por el contrario, se demostró que el Splenic y
el TI-Tregs absorben más 2NBDG, un análogo de glucosa fluorescente,
mientras que las células T efectoras intratumorales mostraron una
carencia de glucosa que conduce a una producción reducida de metabolito
glicolítico fosfoenol piruvato, lo que resulta en funciones efectoras
comprometidasa través de la reducción de señalización de calcio-NFAT
( 272 ). Más recientemente, se descubrió que la glucólisis era instrumental
en el tráfico de Treg y la migración a tejidos inflamados. La inducción de
la enzima glucolítica glucoquinasa GCK y el reordenamiento del
citoesqueleto por su asociación con actina demostró ser crítica para el
proceso ( 273 ). Estos hallazgos subrayan la necesidad de estudios
extensivos para delinear la reprogramación metabólica no solo de las
Tregs tisulares sino también de las Treg linfoides en condiciones de
estado estable y activadas.

Uno solo puede sorprenderse por la diversidad y la plasticidad funcional

de los Tregs. Por lo tanto, siempre surge una pregunta sobre por qué los
Treg son los elegidos. Aún está por verse si las diversidades similares
entre otros tipos de células inmunitarias aún están a la espera de
descubrimientos, o si Foxp3 y presumiblemente otros factores
desconocidos proporcionan algún grado de singularidad funcional a los
Tregs. Sin embargo, considerando la diversidad de respuestas que van
desde el mantenimiento de la tolerancia inmune hasta la reparación de
tejidos, hasta convertirse en un actor principal en el mantenimiento de la
función fisiológica de los tejidos, es probable que se diga que los Treg son
el proverbial "Jack de todos los oficios", y ciertamente , "Maestro" de
algunos.