UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

PROYECTO DE INVESTIGACIÓN FORMATIVA

CURSO
BIOQUIMICA I

TEMA
Efecto del extracto seco del rizoma de Cúrcuma longa “azafrán”
sobre el perfil lipídico de Rattus rattus var. albinus con
hipercolesterolemia inducida.

ASESORES:

Dra. Anabel González Siccha

Dr. Alva Bazán, Salomón
AUTORES:

Trujillo – Perú
2016
 PROYECTO DE INVESTIGACIÓN

I. GENERALIDADES

1. TÍTULO:

Efecto del extracto seco del rizoma de Cúrcuma longa “azafrán” sobre el perfil lipídico de
Rattus rattus var. albinus con hipercolesterolemia inducida.

2. PERSONAL DE INVESTIGACION

2.1 AUTORES

 Jenner Omar Gil Velásquez

Alumno del V ciclo de la facultad de Farmacia y Bioquímica.

Universidad Nacional de Trujillo.

Código: 1011101011

2.2 ASESORES:

 Dra. Anabel González Siccha

Cátedra: Bioquimica I

Departamento Académico de Bioquimica

Facultad de Farmacia y Bioquímica, UNT

3. TIPO DE INVESTIGACIÓN:

3.1 De acuerdo a la orientación: Aplicada.

3.2 De acuerdo a la técnica de orientación: Experimental.

4. RÉGIMEN DE INVESTIGACIÓN:

Orientada

5. ÁREA DE INVESTIGACIÓN:
 Metabolismo de lípidos o Enfermedades Cardiovasculares.

6. LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:

Aterosclerosis

7. INSTITUCIÓN A LA QUE PERTENECE EL PROYECTO

7.1 Departamento Académico de Bioquímica.

7.2 Facultad de Farmacia y Bioquímica.

7.3 Universidad Nacional de Trujillo

8. LOCALIDAD E INSTITUCIÓN A LA QUE PERTENECE EL PROYECTO

8.1 Localidad: Provincia de Trujillo, Departamento de La Libertad.

8.2 Institución: Universidad Nacional de Trujillo.

Facultad de Farmacia y Bioquímica.

9. CRONOGRAMA DE EJECUCIÓN DEL PROYECTO

TIEMPO

ETAPAS INICIO TÉRMINO (HORAS SEMANALES)

Elaboración 01/04/2016 14/07/2016 03

del proyecto
Recolección 14/07/2016 14/08/2016 01
de datos

Análisis de 01/08/2016 01/10/2016

datos 02

Redacción de 01/10/2016 12/12/2016 02

informe

10.FECHA DE INICIO Y DE TERMINO:

10.1 Fecha de inicio: 01/04/2016

10.2 Fecha de término: 12/12/2016

 11. RECURSOS DISPONIBLES:

11.1 RECURSOS HUMANOS:

-Personal investigador (autores)

11.2 MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO:

9.2.1 Materiales de uso común en laboratorio:

 Fiolas de 10; 50; 100; 1000 mL

 Vasos de precipitación 10; 50; 100; 250; 1000 mL

 Pipetas 1; 5; 10 mL

 Varillas de vidrio

 Balones 100; 250; 500 mL

 Papel filtro

9.2.2 Equipos:

- Balanza Analítica OHAUS GA 200 (precisión 0.0001 g)

- Cocina eléctrica

- Estufa THELCO H. W. Kessel Model 17.

9.2.3 Ambientes:

- Laboratorio de Bioquímica.

- Bioterio de la facultad de farmacia y bioquimica UNT

10 RECURSOS NO DISPONIBLES:

10.1. Reactivos y Solventes

 Solventes:

- Agua destilada Dropaksa.

- Alcohol etílico.
11. PRESUPUESTO:

PARTIDA CONCEPTO CANTIDAD PRECIO TOTAL

UNITARIO
2.3 BIENES Y SERVICIOS
2.3.11.1 ALIMENTOS Y BEBIDAS PARA EL CONSUMO
2.3.11.11 Almuerzo 140 S/. 5.00 S/. 700.00
Bebidas 140 S/. 1.00 S/. 140.00
SUB-TOTAL S/. 840.00
2.3.15.1 MATERIALES Y USO DE OFICINA
2.3.15.12 Papel bond A4 1M S/. 24.00 S/. 24.00
Memoria USB 1u S/. 25.00 S/. 25.00
Lapiceros pilot 4u S/. 1.00 S/. 4.00
Lápiz Faber Castell 4u S/. 0.50 S/. 2.00
Corrector Faber Castell 1u S/. 2.50 S/. 2.50
Borrador Faber Castell 4u S/. 0.50 S/. 2.00
Calculadora científica Cassio 1u S/. 35.00 S/. 35.00
Folder manila A4 5u S/. 0.50 S/. 2.50
Cuaderno de notas 1u S/. 1.50 S/. 1.50
Tajador Faber Castell 1u S/. 0.50 S/. 0.50
Marcador indeleble 1u S/. 2.50 S/. 2.50
Etiquetas 1u S/. 1.00 S/. 1.00
Papel lustre lila 1u S/. 0.30 S/. 0.30
SUB-TOTAL S/. 102.80

2.3.15.31 ASEO LIMPIEZA Y TOCADOR

Detergente Ace × 35g 1u S/. 3.30 S/. 3.30
Lejía Clorox × 625 ml 1u S/. 1.50 S/. 1.50
Jabón líquido × 400ml 1u S/. 5.00 S/. 5.00
Papel toalla Elite 2u S/. 7.00 S/. 14.00
Toalla de manos 4u S/. 1.50 S/. 6.00
Jabonera 1u S/. 5.00 S/. 5.00
SUB-TOTAL S/. 34.80
2.3.17.1 ENSERES
Frasco de color ámbar (20ml) 5u S/. 2.50 S/. 12.50
SUB-TOTAL S/. 12.50
2.3.18.2 MATERIAL INSUMOS, INSTRUMENTAL Y ACCESORIOS MEDICOS,
QUIRURGICO ODONTOLOGICOS Y DE LABORATORIO
Mascarillas 1caja S/. 20.00 S/. 20.00
Guantes estériles 1caja S/. 15.00 S/. 15.00
Kit de colesterol y standar S/. 180.00 S/. 180.00
SUB-TOTAL S/. 215.00

2.3.110.1 SUMINISTRO PARA USO AGROPECUARIO, FORESTAL Y VETERINARIO

2.3.110.12 Curcuma longa 500g S/. 3.00
Rattus rattus var. Albinus 16 u S/. 20.00 S/.320.00
Grasa de pollo 500g S/. 3.50
SUB-TOTAL S/. 326.50
2.3.199.1 COMPRA DE OTROS BIENES

2.3.199.1 Acohol 70˚ GL dropaksa 1Lt S/. 8.00 S/. 3.50

Rosuvastatina 4u S/. 6.00 S/. 24.00
SUB-TOTAL S/. 27.50

2.3.21.2 VIAJES DOMESTICOS

2.3.21.21 Pasaje urbano 48u S/. 0.70 S/. 3.50

SUB-TOTAL S/.177.60

2.3.27.11 OTROS SERVICIOS

2.3.27.11.99 SERVICIOS DIVERSOS
Impresiones 400u S/. 0.10 S/. 40.00
Fotocopias 200u S/. 0.05 S/. 10.00
Encuadernación 4u S/. 12.00 S/. 48.00
SUB-TOTAL S/.198.00
2.3.22.2 SERVICIO DE TELEFONIA E INTERNET
2.3.22.21 Telefonía móvil 10R.V S/. 10.00 S/.100.00
2.3.22.23 Servicio de internet 64hrs S/. 1.00 S/. 64.00
SUB-TOTAL S/.164.00

TOTAL: S/. 1758.70

13. RESUMEN FINANCIERO

Según el clasificador de gastos del presupuesto del sector público vigente desde el 2016.

PRESUPUESTO TOTAL
 2.3.11.1 ALIMENTOS Y BEBIDAS PARA EL CONSUMO S/. 840.00

2.3.15.1 MATERIALES Y USO DE OFICINA S/. 102.80

2.3.15.31 ASEO LIMPIEZA Y TOCADOR S/. 34.80

S/. 12.50
2.3.17.1 ENSERES

2.3.18.2 MATERIAL INSUMOS, INSTRUMENTAL Y S/. 215.00

ACCESORIOS MEDICOS, QUIRURGICO
ODONTOLOGICOS Y DE LABORATORIO

2.3.110.1 SUMINISTRO PARA USO AGROPECUARIO, S/. 326.50

FORESTALY VETERINARIO

2.3.199.1 COMPRA DE OTROS BIENES S/. 27.50

2.3.21.2 VIAJES DOMESTICOS S/. 177.60

2 .3.2 7.11 OTROS SERVICIOS S/. 198.00

2.3.22.2 SERVICIO DE TELEFONIA E INTERNET S/. 164.00

S/.2096.70
TOTAL

14. FINANCIAMIENTO:

 Recursos propios.

 Recursos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.

I. PLAN DE INVESTIGACIÓN

1. REALIDAD PROBLEMÁTICA

El colesterol (3-hidroxi-5,6 colesteno) es una molécula indispensable para la vida, desempeña

funciones estructurales y metabólicas que son vitales para el ser humano. Se encuentra anclado
estratégicamente en las membranas de cada célula donde modula la fluidez, permeabilidad y en
consecuencia su función.(MALDONADO,2012) Esta regulación implica que el contenido en
colesterol de las membranas modifica la actividad de las enzimas ancladas en ellas, así como la de
algunas proteínas transportadoras y de receptores de membrana.(NAVARRO,2009,360) El colesterol
proviene de la dieta o es sintetizado por nuestras células (principalmente en los hepatocitos); es
precursor de otras biomoléculas fisiológicamente importantes tales como, las hormonas esteroideas
(andrógenos, estrógenos, progestágenos, gluco y mineralcorticoides), ácidos biliares y la vitamina
D.(PASQUALLINI,2005,401)Sin embargo, la acumulación excesiva de colesterol en nuestros tejidos
y altas concentraciones en sangre (hipercolesterolemia), pueden tener consecuencias patológicas
altamente prevalentes en la población. Esto es particularmente cierto para las células endoteliales que
forman la pared arterial, donde la acumulación de colesterol inicia la enfermedad cardiovascular
aterosclerótica. (WANG,2006,174)

El colesterol presente en nuestro organismo, se obtiene principalmente de dos fuentes: De la dieta

(colesterol exógeno) y la síntesis endógena (colesterol endógeno). Prácticamente todos los tejidos que
contienen células nucleadas son capaces de sintetizar colesterol. La fracción microsómica (retículo
endoplásmico) del citosol es responsable de su síntesis.El colesterol se desplaza por la sangre
mediante unas moléculas denominadas lipoproteínas. Los tres tipos principales son: Las lipoproteínas
de baja densidad (LDL) o “colesterol malo”; se cree que causan enfermedades arteriales. Las LDL
transportan el colesterol desde el hígado a las células y pueden causar una acumulación nociva si hay
más de lo que las células pueden usar. Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) o “colesterol bueno”;
se cree que previenen las enfermedades arteriales. Las HDL se llevan el colesterol de las células y lo
devuelven al hígado donde se descompone y se elimina como residuo corporal. Los triglicéridos se
forman en el hígado y están presentes en productos lácteos, carne y aceites. La obesidad y la
alimentación rica en grasas aumentan el riesgo de tener niveles altos de triglicéridos.(ZELADA,2008)

Es conocido que el colesterol acumulado en las diferentes lesiones ateroscleróticas proviene en su

mayoría de las partículas de lipoproteínas de baja densidad (LDL) circulantes. Lo mismo sucede con
la hipercolesterolemia y con los bajos niveles de lipoproteínas de alta densidad (HDL).La
aterosclerosis es la condición en la que las capas internas de la pared de la arteria, conocida como la
íntima, se vuelven gruesas e irregulares debido a los depósitos de grasas (principalmente en forma de
colesterol y otra grasa llama fosfolípido) y otras sustancias. Se puede desarrollar en diferentes partes
del cuerpo, pero cuando se producen depósitos en las arterias que suministran sangre al corazón, la
afección se denomina específicamente la aterosclerosis coronaria. A medida que la acumulación
crece, la arteria se estrecha y se reduce el flujo de sangre al músculo del corazón.Al igual que
cualquier otro músculo, el corazón necesita sangre para proporcionarle oxígeno. Cuando que el flujo
sanguíneo se reduce o se bloquea totalmente, algunas de las células en el músculo del corazón puede
sofocarse y morir. (FERNANDEZ, 1999,75) La aterosclerosis no se produce rápidamente. En la
mayoría de los casos, las acumulaciones de grasa que se puede reducir, se desarrolla
"silenciosamente" durante décadas. Los patólogos dividen los signos de aterosclerosis en dos tipos
principales, los primeros depósitos, llamadas estrías grasas, y los depósitos más avanzados, llamadas
placas. Las estrías grasas, que contienen alrededor del 25 por ciento de grasa, se pueden ver incluso
en las arterias de los niños. Durante el desarrollo de estrías grasas, las células que recubren las arterias
son estimuladas a tomar más colesterol de lo que pueden manejar. Aunque este proceso no se entiende
completamente, puede comenzar cuando se producen daños en el endotelio, la capa delgada de células
que recubren el interior de la arteria. Hay varios factores que son sospechosos de causar estos daños,
incluyendo el tabaquismo y la hipertensión arterial. El proceso clave, sin embargo, es un cambio
químico en el colesterol LDL, mediante el cual se oxida. El LDL se oxida cuando los radicales libres,
una forma de oxígeno que ha sido modificado químicamente en una sustancia muy inestable, se
encuentran con LDL. Esto estimula la ateroesclerosis de varias maneras. En primer lugar, el LDL
oxidado es tóxico para las paredes de las arterias y crea a una lesión mayor. En segundo lugar, envía
señales de peligro químicos que hacen que más células especiales que se encuentran en la sangre,
llamada monocitos, acudan a la arteria. Los monocitos luego penetran en el endotelio, donde tratan
de "limpiar" el problema por la ingestión de las LDL oxidadas. Desafortunadamente, a medida que
se tragan las LDL dañadas, los propios monocitos comienzan a hincharse en el endotelio. Esto crea
un círculo vicioso en la respuesta del cuerpo a esta lesión cuando se inicia y al continuar con este
proceso. Los depósitos visibles, primeros se denominan estrías grasas, que están presentes en alguna
medida en todos nosotros. Pero las estrías grasas por sí solas no obstruyen el flujo de sangre. Se
convierten en un problema en las personas que tienen malos hábitos alimenticios, lo que hace que las
estrías grasas crezcan en placas ricas en colesterol, que son peligrosas y potencialmente mortales .La
placa es el sello distintivo de la aterosclerosis coronaria. Se forma a medida que más y más colesterol
se deposita en el sitio de la estría grasa. Una placa simple puede convertirse en algo complicado
cuando se acumula el calcio y la placa se endurece, y cuando los coágulos de sangre se desarrollan.
(FALASCO,2002)

Los coágulos son una complicación muy temida, y si la tapa o cubierta, se rompe, se producirá un
sangrado abundante. Esto produce un coágulo local llamado un trombo, que puede obstruir la arteria
y causar un ataque al corazón (también conocido como una trombosis coronaria). Durante un ataque
al corazón, el suministro de sangre se corta en una parte del músculo del corazón, y provoca que esta
zona del corazón muera. Si una cantidad suficiente del corazón se ve afectado, o si el corazón
comienza a latir rápidamente y sin control (llamado arritmia), la víctima puede morir. Cuando la placa
crece más lentamente, con el tiempo puede reducir el flujo sanguíneo a través de las arterias
coronarias. Si una arteria se estrecha y si se reduce al 30 por ciento o menos de su diámetro normal,
la situación es descrita clínicamente como angina de pecho, un dolor o malestar en el pecho o
dificultad para respirar. (FALASCO, 2002)
El papel fisiológico de las LDL circulantes es aportar el colesterol a las células hepáticas. Las células
extrahepáticas incorporan las LDL mediante los receptores de membranas, los ésteres del colesterol
son hidrolizados en los lisosomas, mientras que el colesterol no esterificado lo usan estas células para
la síntesis de las membranas celulares. Las LDL circulantes del plasma para llegar a las células
extrahepáticas tienen que atravesar el endotelio capilar y penetrar en el fluido intersticial. La
concentración de LDL en los líquidos es casi siempre 1/10 menor que la del plasma; fisiológicamente
esto se debe, a que los receptores de membrana captan muy bien a las LDL y como resultado de esta
captación intensa se produce la baja concentración en esta localización. La ruta más eficiente para
eliminar las LDL en los tejidos es su degradación local, mediada por sus receptores localizados en las
células parenquimatosas. Éste es el paso crítico para regular la concentración de las LDL en los
líquidos extracelulares. El exceso de LDL no degradado por su no-incorporación a las células, es
drenado hacia el exterior por los capilares linfáticos locales y después regresa al torrente circulatorio.
Como existe un gradiente de presiones entre el torrente sanguíneo y el fluido intersticial, la captación
celular y el drenaje linfático deben remover las LDL del líquido intersticial más rápido de lo que el
endotelio capilar les permite entrar, por lo tanto el endotelio capilar es de hecho una barrera funcional
para el paso de las LDL entre los compartimientos intracelular y extracelular. También algunas LDL
del plasma penetran a la íntima arterial para garantizar la nutrición de las células del parénquima
intimal, como son entre otras las células musculares lisas (CML) que allí se encuentran.
(MARTINEZ,2012,154)

Las VLDL se elaboran en las células del parénquima hepático mediante un mecanismo análogo al
que se da en los enterocitos. En este caso, la apolipoproteína constituyente es la apo B-100 y los
triglicéridos han sido sintetizados en el propio hepatocito a partir de ácidos grasos endógenos. La tasa
de síntesis de VLDL es muy variable y depende fundamentalmente de la cantidad de ácidos grasos
de que dispone el hígado: los de síntesis propia (lipogénesis) y los procedentes del tejido adiposo
(lipolisis). Las VLDL son segregadas al plasma y sufren una serie de cambios semejantes a los que
ocurrían con los quilomicrones. (CHAMPE, 2008,180)

Las HDL nacientes sintetizadas en el hígado y en el intestino remueven eficientemente colesterol

libre desde las células de los tejidos periféricos por mecanismos dependientes de la actividad del
transportador ABCA1. Enseguida, las partículas de HDL son procesadas por la enzima LCAT para
generar la formación de HDL enriquecidas en ésteres de colesterol. Estas partículas de HDL maduras
tienen al menos tres destinos metabólicos: 1) la enzima CETP estimula la transferencia de ésteres de
colesterol desde HDL a VLDL, las cuales se transforman en LDL y son catabolizadas por vía del
receptor de LDL o el receptor LRP; 2) las partículas de HDL son fuente directa de ésteres de colesterol
para la célula por medio de receptores endocíticos de la familia del receptor de LDL o receptores
específicos de HDL todavía desconocidos (no mostrado); y 3) las HDL entregan colesterol
directamente al hígado y los tejidos esteroidogénicos a través del proceso de captación selectiva de
colesterol HDL mediado por el receptor SR-BI. El flujo del colesterol desde los tejidos periféricos
por medio de las HDL plasmáticas hacia el hígado se conoce como transporte reverso de colesterol.
Mientras el colesterol HDL removido por el hígado puede ser destinado para secreción biliar, el
colesterol captado desde las HDL en los tejidos esteroidogénicos se utiliza para la síntesis de
hormonas esferoidales. (CHAMPE, 2008,180)

Actualmente para combatir el colesterol se hace uso de las estatinas. Las estatinas son inhibidoras de
la 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A (HMG-CoA) reductasa. Esta enzima cataliza la conversión
de la HMG-CoA a mevalonato, que es un metabolito clave en la biosíntesis de colesterol. Su bloqueo
se produce debido al gran parecido estructural que exhiben estos fármacos con el HMG-CoA. La
afinidad de las estatinas por la enzima es de 1.000 a 10.000 veces la del sustrato natural.

En la que una molécula de HMG-CoA se reduce mediante la actuación de la HMG-CoA reductasa y

la coenzima NADPH dando como resultado mevalonato y CoA. La inhibición de las estatinas se
realiza de forma competitiva, parcial y reversible. El bloqueo de la síntesis hepática del colesterol
produce una activación de las proteínas reguladoras SREBP (sterol regulatory elements-binding
proteins), que activan la transcripción de proteínas y, por tanto, producen una mayor expresión del
gen del receptor de LDL y un aumento en la cantidad de receptores funcionales en el hepatocito.
(SIGRID, 2008)

Una de las estatinas mas utilizado es la rosuvastatina es un inhibidor de la HMG-CoA reductasa, que
se utiliza como hipolipemiante efectivo para el tratamiento de las dislipidemias. Como otros
inhibidores de la HMG-CoA reductasa (atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pravastatina y
simvastatina), la rosuvastatina inhibe la formación del colesterol endógeno con la consiguiente
reducción de los depósitos intracelulares hepáticos de colesterol. La rosuvastatina tiene alta afinidad
por el sitio activo de la HMG-CoA reductasa, con una inhibición constante de aproximadamente 0,1
nmol/L. La rosuvastatina es una de las estatinas más potentes con una IC50 de la actividad enzimática
del orden de 5.4 nmol/L tanto en estudios in vitro como en cultivos de hepatocitos. Además, la
inhibición de la síntesis de colesterol con rosuvastatina es más prolongada que la lograda por las
demás estatinas: siete horas después de la administración oral en ratas, la rosuvastatina inhibió la
síntesis hepática de colesterol en un 62%, frente a un 13% con simvastatina y un 7% con atorvastatina.
Adicionalmente, el metabolito principal de la rosuvastatina N-desmetil rosuvastatina, tiene actividad
inhibitoria frente a la HMG-CoA reductasa (1/6 de la rosuvastatina nativa) lo que podría explicar en
parte, la larga duración del efecto de este fármaco. (MESA, 2000,371)

La Cúrcuma longa L., es una planta de origen asiático muy usada comúnmente como una especia en
la cultura asiática. El principal componente es la curcumina, uno de los ingredientes activos
responsables de su actividad biológica. Se sabe que esta sustancia es estable en el estómago y en el
intestino delgado; su elevada lipofilia le permite una rápida absorción gastrointestinal por difusión
pasiva. Tras su administración, es metabolizada y excretada principalmente por bilis y heces, y
también por orina. Sus principales metabolitos también son bioactivos. Desde antiguo, se han descrito
muchas propiedades para los extractos de Curcuma longa y para la curcumina. Se conoce su actividad
antibacteriana, antifúngica y antiparasitaria, y recientemente se ha demostrado su capacidad para
inhibir la integrasa del HIV-1. También se han demostrado efectos específicos en otros tejidos y
órganos, como la piel, el sistema gastrointestinal y respiratorio y en el hígado. Todas estas
propiedades son debidas a distintos mecanismos de acción. Se ha demostrado que la cúrcuma posee
efectos antiinflamatorios, a través de la modulación del metabolismo de los eicosanoides, tiene
capacidad inmunomoduladora, principalmente alterando el perfil de las citoquinas Thl de los
linfocitos T helper, y actividad hipolipidémica, disminuyendo el colesterol, los triglicéridos y los
fosfolípidos plasmáticos así como en las LDL. Hay muchos estudios que demuestran la capacidad de
la cúrcuma para estabilizar membranas y para prevenir la peroxidación lipídica, un proceso
fundamental en el establecimiento, la progresión y las complicaciones de muchas patologías como
las enfermedades hepáticas, renales, cardiovasculares, neurodegenerativas, en la diabetes y en las
cataratas.(VADEMECUM,2013)

2. ANTECEDENTES:

Existen algunas investigaciones acerca de los extractos de cúrcuma longa en ratas tales como la
efectuada en Departamento de Bioquímica y Biología Molecular. Instituto de Nutrición y Tecnología
de Alimentos de Granada –España en donde se ha comprobado la actividad hipocolesterolémica de
la Curcuma comosa, que acelera la movilización del colesterol desde los tejidos periféricos al hígado,
aumentando su excreción biliar Asimismo Se demostro la actividad hipocolesterolémica e
hipolipidémica de la curcumina, cuando se administraba a las ratas durante 7 semanas, a dosis de
0.15% de la dieta (Hussain y Chandrasekhara, 1992). Posteriormente, Deshpande et al. estudiaron el
efecto de un extracto etanólico en humanos, y observaron una disminución importante en los
triglicéridos plasmáticos y algo menos drástica del colesterol total. El efecto hipolipidémico del
extracto se acompañó con una disminución de la peroxidación lipídica plasmática. ).
(MESA, 2000,371).

Además otro estudio realizado Instituto de Nutrición y Tecnología de Alimentos, Universidad de

Granada-España se comprobó que La curcumina inhibe la ateroesclerosis en investigación con
animales Esto se debe a la inhibición de la peroxidación de lípidos, la mejora de la función endotelial
vascular, la inhibición de la proliferación de células musculares lisas en la pared vascular y una mejor
vasodilatación; la curcumina reduce el nivel de colesterol LDL y de triglicéridos, mejora el de
colesterol HDL, inhibe la oxidación de LDL y la agregación plaquetaria, reduce los niveles excesivos
de fibrinógeno y mejora la proporción entre apolipoproteína B (apo B), desfavorable, y apo A,
favorable.(TORTOSA,2002)

Asimismo en el centro de Toxicología y Biomedicina, Santiago de Cuba, Cuba. Se demostró que

el extracto etanólico del rizoma de esta planta, por un lado, redujo las tasas sanguíneas de colesterol
y triglicéridos en ratas y, por otro, disminuyó los niveles de lípidos peroxidados en sangre,
lipoproteínas oxidadas y fibrinógeno, de manera que constituye un coantioxidante de elección para
prevenir y retardar la aterosclerosis; también se plantea que la cúrcuma puede reducir los niveles de
la lipoproteína de baja densidad (LDL) y el colesterol total en sangre, pero se necesitan estudios en
humanos antes de hacer una recomendación. (ONEYDA, 2011)

Se dice, entonces, que la cúrcuma reduce los niveles en sangre del llamado colesterol malo y aumenta
los del bueno. Además, reduce los niveles de triglicéridos y fosfolípidos. (DISCOVERY DSALUD,
2008)

3. PROBLEMA

¿Cuál es el efecto del extracto seco de cúrcuma longa sobre el perfil lipídico en Rattus rattus

var. Albinus con hipercolesterolemia inducida?

4. HIPÓTESIS

El extracto seco de Cúrcuma longa disminuye los niveles de hipercolesterolemia modificando

el perfil lipídico en Rattus rattus var. albinus.

5. OBJETIVOS
5.1 OBJETIVO GENERAL

1. Demostrar la disminución de la hipercolesterolemia inducida con el extracto seco de

cúrcuma longa en Rattus rattus var albinus.

5.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1. Evaluar el efecto del extracto seco de cúrcuma longaa la dosis de 400 y 600 mg/kg en

la hipercolesterolemia deRattus rattus var albinus

2. Comparar el efecto hipercolesterolemia del extracto seco de cúrcuma longa y

Rosuvastatina

6. MATERIAL Y METODO
6.1 MATERIAL
 Material botanico

- Se empleará los rizomas de Curcuma longa, obtenida en el mercado “La Hermelinda”

distrito de Trujillo –Trujillo -La Libertad.

Sera adquirida a las horas de 8:00 am a 9:00 am. Luego se procederá a la identificación

taxonómica en el herbario de la Universidad Nacional De Trujillo.

 Material biológico

- Se utilizaran 20 animales de experimentación Rattus rattus var. albinus, Machos

adultos, aparentemente sanos, con un peso corporal promedio de 250 a 300 g

procedentes del bioterio de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad

Nacional de Trujillo-La Libertad.

6.2METODO:

6.2.1VARIABLES
 Variable dependiente
Niveles los niveles altos de colesterol en Rattus rattus var albinus.

Variable independiente
Extracto seco de cúrcuma longa

6.2.2 TIPO Y DISEÑO DE ESTUDIO

Tipo de estudio: Experimental

Diseño de estudio: Con estímulo creciente

S
GB GBS
XS
GR GDX
Z1
GP1 GPZ1
Z2
GP2 GPZ2

Leyenda:

 GB: Grupo Blanco, Conformado por 5 ratas que recibirá 5ml/kg de suero

fisiológicovíaoral de forma interdiaria por un mes.

 GD: GrupoRosuvastatina, Conformado por 5 ratas que recibirá 5mg/kg derosuvastatina

via oral de forma incendiaria por un mes

 GP1: Problema 1, conformado por 5 ratas que recibirá 400mg/kg de extracto seco

decúrcuma longa vía oral de forma interdiaria por un mes

 GP2: Problema 2, conformado por 5 ratas que recibirá 600mg/kg de extracto seco de

cúrcuma longa vía oral de forma interdiaria por un mes.

 s: cloruro de sodio 0.9 %

 x: Rosuvastatina a 5 mg/kg

 z1: cúrcuma longaa concentración 400 mg/kg

 z2: cúrcuma longa a concentración 600 mg/kg

6.2.3 METODOLOGIA DEL TRABAJO

1) Procesamiento de la planta

a. Adquisición.

La planta(rizoma) será Adquirida en el mercado “La Hermelinda”-Trujillo a las horas

aproximadas de 8.00 a 9.00 de la mañana

b. Lavado y selección

Posteriormente será llevada al laboratorio de bioquímica en donde se procederá a lavar,

desinfectar y seleccionar los rizomas Curcuma Longa en mejor estado.

c. Secado y molienda

- Los rizomas seleccionados pasaran a ser deshidratadas en el estado natural bajo

sombra por un periodo de siete días, a continuación se estabilizara en una estufa a 40⁰C

por espacio de 24 horas.

- Luego las raíces serán sometidas a una molienda utilizando un molino mecánico y se

almacenara en un recipiente apropiado.

d. Preparación del extracto seco:

La muestra se llevara a un tratamiento con rota evaporador para eliminar el solvente (etanol)

y se obtendrá un extracto blando más concentrado. Finalmente se distribuirá la muestra en

placas Petri o frascos apropiados para eliminar la humedad restante a temperatura ambiente.

El extracto seco se almacenara en las mismas placas o frascos en un ambiente que mantenga

su esterilidad, oscuro y seco para su conservación. Finalmente, para su utilización, se pesará

la cantidad necesaria que se administrara empleando solución salina fisiológica.

2) Hipercolesterolemia inducida
 a) Alimentación de las ratas

- A las 20 ratas adquiridas se procederá a brindar una alimentación en BASE A GRASA

DE RES diluida por via oral por un periodo cuatro semanas aproximadamente

b) Medición de comprobación

- Pasadas las cuatro semanas se procederá a medir su colesterol esperando encontrar

hipercolesterolemia en las ratas.

3) Fase Experimental

a) Administración de extractos

- Comprobada la hipercolesterolemia en las ratas se procederá a la administración de la

solución salina, extracto vegetal y el fármaco correspondiente según grupo por via oral

por laxo de un mes

b) Medición del perfil lipídico

- Determinación de colesterol en sangre

Procedimiento
1. Extraer una muestra de sangre de la rata en tres capilares . Centrifugarlo por 10
minutos.
2. En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas B (Blanco), S (Standard) y P
(Problema) colocar:

B S P
Estándar o patrón - 10ul -
Muestra de suero - - 10ul
Reactivo de trabajo 1.0ml 1.0ml 10ul

3. Mezclar y esperar 10 a 15 minutos en baño de agua a 37°C.

4. Medir la absorbancia de los tres tubos en 500 nm de longitud de onda.
5. Anotar y calcular los resultados.
Calculos: Factor = 200mg/dl/lectura del estándar
Colesterol g/l = D x factor

- Determinación de HDL

Procedimiento
 1. En un tubo medir 500 ul de suero y agregar 50ul de reactivo precipitante.
Homogenizar durante 20 minutos y dejar por 30 minutos en temperatura (4-10°C)
2. Centrifugar por 15 minutos a 3000 rpm y utilizar el sobrenadante impio como
muestra
3. En tres tubos o marcados: B (Blanco), S (Standard) y P (Problema) colocar:

B S P
Sobrenadante-Rvo pp - - 50ul
Estándar - 10ul -
Reactivo de trabajo 1.0ml 1.0ml 1.0ml

4. Mezclar y esperar 10 a 15 minutos en baño de agua a 37°C.

5. Medir la absorbancia de los tres tubos en 500 nm de longitud de onda.
6. Anotar y calcular los resultados.
Calculos: HDL-Colesterol g/L = lectura problema x factor
Factor (HDL-Rvo PP) =0.457/Lectura Estándar g/L

- Determinación de LDL y VLDL

Procedimiento
1. En un tubo medir 200 ul de suero y agregar 100ul de reactivo precipitante.
Homogenizar durante 20 minutos y dejar por 30 minutos a baño de agua 20-25°C
2. Centrifugar por 15 minutos a 3000 rpm y utilizar el sobrenadante impio como
muestra
3. En tres tubos o marcados: B (Blanco), S (Standard) y P (Problema) colocar:

B S P
Sobrenadante - - 50ul
Estándar - 10ul -
Reactivo de trabajo 1.0ml 1.0ml 1.0ml

4. Mezclar y esperar 10 a 15 minutos en baño de agua a 37°C.

5. Medir la absorbancia de los tres tubos en 500 nm de longitud de onda.
6. Anotar y calcular los resultados.
Calculos: LDL-Colesterol g/L = colesterol total(*)-(D x f) F=0.624/S
(*) = valor obtenidocon Colestat enzimático

- Determinación de VLDL
 VLDL = TG/5 o VLDL = CT – ( LDL + HDL)

7. ANALISIS ESTADISTICO
Se aplicara el análisis de varianza (ANOVA), para realizar la comparación entre los 4 grupos
con un nivel de significancia menor a 0.05.(BARRON 2005,28)

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variable numérica entre varios grupos. Disponible:
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