UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

NÚCLEO UNIVERSITARIO “RAFAEL RANGEL”

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA

ANÁLISIS FARMACEUTICO II. ESPECTROSCOPÍA UV-V. ANÁLISIS MOLECULAR

1. Señale los diferentes tipos de especies moleculares que absorben radiación UV-Visible con
aplicación en la espectroscopia analítica.
2. Respecto a la radiación electromagnética responder:
a) Parámetros que la caracterizan con sus respectivas unidades.
b) Propiedades ondulatorias y corpusculares de la misma.
c) ¿Cuál es la longitud de onda de un fotón que tiene tres veces más energía que otro fotón
cuya longitud de onda es 500 nm?.
d) Calcular la energía de cada uno de los fotones anteriores. h = 6.6254x10-34 J.s

3. Señalar las características más importantes que debe tener una fuente de radiación
electromagnética para que pueda ser utilizada en espectroscopia óptica.
4. Por qué es indispensable que la radiación electromagnética utilizada en la espectroscopia de
absorción deba ser lo más monocromática posible.

5. Respecto a la radiación electromagnética responder:

a) Definición.
b) Parámetros.
c) Propiedades ondulatorias.

6. A continuación se le indica el nombre de algunos compuestos químicos, señale para cada

uno, el tipo de transición electrónica responsable de que presente absorción en el UV-Vis.
Benceno Piridina Acetona Metanol Propanona Ácido butanoico Nitrato de cobre
7. Respecto de los selectores de longitud de onda responder: Clasificación y tipos de cada uno.

8. Una solución de 10,0 mg/L de hidrocloruro de procaína tiene una absorbancia de 0,65 a 290
nm. ¿Cuál es la concentración de una solución que tiene una absorbancia de 0,93?. Calcule
la absortividad molar del hidrocloruro de procaína a 290 nm. Si su peso molecular es de
272,8 g/mol. Asuma un camino óptico de un centímetro (1,00 cm).

9. Una cantidad desconocida de riboflavina (100 tabletas) fue disuelta en 1 L de agua. Un

mililitro de la solución obtenida fue diluido a 1 litro. La fluorescencia medida de la solución
resultante fue de 42 % T. Un patrón que contiene 9,05 mg/L de riboflavina fluorece con
intensidad de 32 % T. ¿Cuál es la cantidad promedio de riboflavina en cada tableta?

10.La vitamina D2 (calcífero/C28H44O), tiene una absorción máxima a 264 nm en alcohol y obedece
la ley de Beer en un amplio rango de concentraciones con una absortividad molar de ε = 18.200
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L/mol*cm. ¿Que rango de concentraciones expresada en g/L, puede ser usado para el análisis,
sí se quiere medir absorbancias entre 0,4 y 0,9?. Asuma que b = 1,0 cm.

11.Una solución 1,28 x 10-4 M de permanganato de potasio tiene una transmitancia de 0,5 a una
longitud de onda de 525 nm usando una celda de 1cm. a) Determine la absorbancia de la
solución. b) Si la concentración es el doble, cuál será la absorbancia y la transmitancia. R:
A=0,602; T=0,25.

12. A. Indique el valor de absorbancia correspondiente a un valor de T = 45.0 %.

B. Si una disolución de concentración 0,0100 M tiene una T = 45.0 % a una longitud de onda
dada, ¿cuál será el valor de transmitancia que corresponde a una disolución 0,0200 M de la
misma sustancia?
Respuesta:
a. 0,347.
b. 20,25 %.
13.Un volumen de 5 mL de una solución de KMnO4 de concentración desconocida dio una señal de
absorbancia de 0,318. A esta solución se le añadieron 2 mL de una solución patrón de KMnO4
de 5 ppm, y la absorbancia medida a la misma longitud de onda es de 0,356. Calcule la
concentración de KMnO4 en la solución desconocida. Además, determine la concentración de la
muestra si se agregan 0,002 ml del estándar. R: 3,52 ppm.
14. La transmitancia T (a 520 nm) de una solución de MnO4- (5 ppm), es de 27 % usando una
celda de 1,00 cm.
a) Calcule la absorbancia de la solución.
b) Calcule la absorbancia y el porcentaje de transmitancia de una solución que contiene 3,2
ppm de KMnO4.
c) Si 0,10 g de un acero es disuelto, oxidado a MnO4- y diluido en 100 mL y la absorbancia de
la solución es de 0,52. Cuál es la masa de MnO4- en la muestra original.
d) Determine la absortividad molar de la solución de KMnO4.

15.Determine para un ácido débil el valor de la absortividad molar, la Ka y el porcentaje de

transmitancia a pH 4 a partir de los datos presentados en la tabla siguiente: pH

pH 4 5 6 7 8 9 10 11
Absor 0,00 0,00 0,10 0,75 1,00 1,15 1,25 1,25
bancia
Considere que todas las soluciones buffer contienen 1 mM de la muestra y todas las soluciones
fueron medidas bajo las mismas condiciones. El anión del ácido, es la única especie que
absorbe a la longitud de onda usada.
R: =1.250 L/cm*mol, Ka=1,5x10-7, T=100 %.
16.Un indicador ácido-base bicolor tiene una forma ácida que absorbe a una longitud de onda de
410 nm, con una absortividad molar de 347 L/mol*cm. Mientras que la forma básica del
indicador tiene una banda de absorción con un máximo a 640 nm y una absortividad molar de
100 L/mol*cm. Por otra parte, la forma ácida no absorbe significativamente a 640 nm y la
forma básica no presenta absorción significativamente a 410 nm. Una pequeña cantidad del
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indicador se añadió a una solución acuosa y se determinó que los valores de absorbancia son
0,118 y 0,267 a 410 y 640 nm, respectivamente. Se utilizó una celda de 1cm. Asuma que el
indicador tiene un pKIn de 3,90 y calcule el pH de la solución acuosa. R: pH=4.80.
17.El hierro es convertido en un complejo con la 1,10 fenantrolina mediante la reacción 1. Una
solución contiene 3 mg de hierro por litro, se le agrega el acomplejante y la absorbancia de la
solución en una celda de 2 cm es de 1,20. La masa molecular del complejo es 596 g/mol.
Calcule: a) La absortividad, b) La absortividad molar del complejo ferroso.

Reacción 1. Complejo de Fe+2 y la 1,10 fenatrolina conocido como ferroina.

18.Al hacer reaccionar el ligando B- con el metal M+2 forman un complejo fuertemente coloreado.
En un experimento se mantuvo constante la concentración del metal en 2x10-4 M y se varió la
concentración del ligando, midiéndose la absorbancia de cada solución, se obtuvieron los
resultados siguientes:

[B-]x10-4, M 0,25 0,5 0,75 1,0 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5
Absorbancia 0,055 0,112 0,162 0,216 0,438 0,456 0,457 0,458 0,465 0,470
Grafique la absorbancia, en función de la relación molar ligando/catión. Determine: a) La
absortividad molar del complejo. b) La estequiometria del complejo. c) La constante de formación
del complejo e indique que método, se utilizó para el estudio de la reacción de formación del
complejo. R: =2.350 L mol-1 cm-1 y Kf=9,5x105.

19.El método de variación continua, es un procedimiento comúnmente utilizado para determinar

el número de ligandos coordinados a un ión metálico. Este método fue empleado para
identificar un complejo formado entre hierro (II) y 2,2- bipiridina, obteniéndose los resultados:

Fracción molar de Fe (II) Absorbancia a 522 nm

0,08 0,232
0,12 0,346
0,17 0,491
0,22 0,632
0,26 0,64
0,36 0,615
0,45 0,531
0,56 0,422
0,65 0,334
0,75 0,241
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0,85 0,140
a) Grafique la absorbancia en función de la fracción molar de Fe(II). b) Determine la fórmula del
complejo entre Fe (II) y el 2-2, bipiridina. c) Asuma que en las porciones lineales de la gráfica, el
metal está totalmente acomplejado y la suma de las concentraciones de Fe(II) y 2-2, bipiridina (en
todas sus formas en solución) en este experimento permanecieron constantes en 2,74x10 -4 M y se
uso una celda de 1 cm. Determine la absortividad molar promedio del complejo. R:10.500
L/mol*cm d) Determine la Kf para el complejo, con los datos de la relación estequiométrica.

20.Durante un experimento realizado para determinar la cantidad de tiamina (vitamina B1) en un

preparado farmacéutico, se leyó inadvertidamente en la escala de transmitancia en lugar de
hacerlo en la escala de absorbancia del espectrofotómetro. La primer muestra da una lectura
de T1 = 82,2 % y la segunda T2 = 50,7 % a la longitud de onda de máxima absorbancia. ¿Cuál es
la relación de concentraciones entre las concentraciones de tiamina en ambas muestras?
Respuesta: 3,47.

21.El ión cobre (I) forma un complejo coloreado con la neocupreína el cual presenta un máximo de
absorbancia a 454 nm. Dicho complejo puede extraerse con alcohol isoamílico, el cual no es
soluble en agua. Suponga que aplica el siguiente procedimiento: 1) una roca que contiene
cobre se pulveriza y los metales se extraen con un ácido fuerte. La disolución ácida se
neutraliza con una base, y la disolución resultante se lleva a 250 mL. 2) una alícuota de 10 mL
de la misma se trata con 10 mL de agente reductor para pasar todo el cobre a ión cuproso,
agregándose 10 mL de buffer para mantener el pH en un valor adecuado para la formación del
complejo. 3) Se toman 15 mL de esta disolución, se agregan 10 mL de neocupreína y 20 mL de
alcohol isoamílico. Luego de agitar fuertemente, las dos fases se separan y el complejo de
cobre está en su totalidad en la fase orgánica. Se mide la absorbancia de la fase orgánica a 454
nm en una celda de 1,00 cm. El blanco preparado presenta una absorbancia de 0,056.
(a) Si la muestra de roca tiene un miligramo de cobre, ¿cuál es la concentración del mismo
presente en la fase orgánica?
(b) Si  = 7,90 x 103 M-1.cm-1 para el complejo, ¿cuál será el valor de absorbancia medido?
(c) Si se analiza una roca diferente y se obtiene una absorbancia no corregida de 0,874 ¿Cuántos
miligramos de cobre hay en la roca?
PA (Cu) = 63,546 g.mol-1
Respuesta:
a. 1,57 x 10-5 M.
b. 0,180.
c. 6,58 mg.

22.El ión nitrito se emplea como conservador para el tocino y otros alimentos, generándose una
controversia con relación a su potencial efecto carcinogénico. En una determinación
espectrofotométrica de nitrito, se llevan a cabo una serie de reacciones que concluyen con la
formación de un producto coloreado con absorbancia máxima a 520 nm. El procedimiento
seguido para desarrollar color puede abreviarse de la siguiente manera:
a. a 50,00 mL de la disolución problema que contiene nitrito, se le agrega 1.00 mL de disolución
de ácido sulfamílico (reacción 1:1).
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b. luego de 10 minutos, se agregan 2,00 mL de disolución de 1- aminonaftaleno (reacción 1:1) y

1,00 mL de disolución buffer.
c. 15 minutos más tarde, se lee la absorbancia a 520 nm en una celda de b = 5,00 cm.
Con esta técnica se analizan 3 soluciones:

Disolución Volumen y características A520

50 mL de extracto de alimento con
A 0,153
cantidad despreciable de nitritos
50 mL de extracto de alimento del que
B 0,622
se sospecha tiene nitrito
Idem que B, con el agregado de 10 μL de
C 0,967
disolución de NaNO2 7,50 x 10-3 M

a. Calcule la absortividad molar del producto coloreado.

b. ¿Cuántos microgramos de nitrito están presentes en los 50,0 mL del extracto de alimento B?
PM (NO2-) = 46,004 g/mol
Respuesta:
a. 49701,71 M-1.cm-1.
b. 4,69 μg.

23. Los espectros infrarrojos (IR) suelen registrarse en términos de porcentaje de transmitancia de
forma que tanto las bandas débiles como las fuertes caigan dentro de escala. En la siguiente figura
se muestra el espectro IR de los compuestos A y B en una región próxima a los 2000 cm-1.
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Note que la absorción corresponde a un pico hacia abajo en este caso. Los espectros fueron
tomados usando celdas de 0.00500 cm de espesor y una disolución 0.0100 M de cada compuesto.
Una mezcla de A y B de composición desconocida produce una transmitancia de 34 % a 2022 cm-1
y de 38.3 % a 1993 cm-1 empleando la misma celda. Encuentre las concentraciones de A y B.

Respuesta: [A] = 9,11 x 10-3 M ; [B] = 4,67 x 10-3 M.

24. Los espectros mostrados en la figura corresponden a disoluciones de MnO4- 1,00 x 10-4 M,
Cr2O7 1,00 x 10-4 M y una mezcla de ambos de composición desconocida.
2-

En la tabla se muestran las absorbancias obtenidas a diferentes longitudes de onda, halle la

concentración de cada especie en la mezcla.

λ (nm) MnO4- patrón Cr2O72- patrón Mezcla

266 0,042 0,410 0,766
288 0,082 0,283 0,571
320 0,168 0,158 0,422
350 0,125 0,318 0,672
360 0,056 0,181 0,366
Respuesta: [Cr2O7 ] = 1,78 x 10 M; [MnO4 ] = 8,14 x 10-5 M.
2- -4 -

25. El amoníaco puede ser determinado espectrofotométricamente mediante su reacción con

fenol en presencia de hipoclorito, dando lugar a una sustancia de color azul que tiene su
absorción máxima a 625 nm. Una muestra de 4,37 mg de proteína se digiere químicamente
para convertir en amoníaco todo el nitrógeno presente, y al final del tratamiento el volumen
de la muestra es de 100,00 mL. Una alícuota de 10,00 mL de esta disolución se trata con
5,00 mL de fenol y 2 mL de hipoclorito de sodio, y la muestra se diluye a 50 mL, midiéndose
su absorbancia a 625 nm en una celda de 1,00 cm de espesor después de 30 minutos. Se
prepara también una disolución de referencia patrón con 1,00 x 10 -2 g de cloruro de amonio
disueltos en un litro de agua; una alícuota de 10 mL de esta disolución patrón se trata de la
misma manera que la disolución problema. El blanco se prepara usando agua destilada en
lugar del problema.
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PM (NH4Cl) = 53,50 g.mol-1

PA (N) = 14,006 g.mol-1

Muestra A 625 nm
blanco 0,140
referencia 0,308
problema 0,582

a. Calcule la absortividad molar del producto azul.

b. Calcule el porcentaje en masa de nitrógeno en la proteína.
Respuesta:
a. 4494 M-1.cm-1.
b. 15,76 %.

26. Indique la forma que tendrá la curva de titulación espectrofotométrica idealizada para cada
una de las siguientes situaciones hipotéticas. Además, muestre cuantitativamente la
expresión general, de cómo varía la absorbancia con el volumen añadido de titulante (Vt).
Inicialmente, se tienen 5,0 mL (V0) de A 0,001 M y se titula con una solución de B 0,01 M.
Usando una celda de 1 cm.
a) La titulación de A con B de acuerdo a la reacción:
A + B ↔ C + D Considere que la sustancia titulada A, es la única especie que absorbe.
b) La titulación de A con B de acuerdo a la reacción: A + B ↔ C + D
El reactante A y el producto D absorben ambas a la misma longitud de onda, pero la
absortividad molar de A es el doble que la de D (εA = 2εD)
c) La titulación de A con B de acuerdo a la reacción: A + B ↔ C + D El titulante B y el
producto C absorben ambos a la longitud de onda seleccionada, pero la absortividad molar
de B es el doble que la de C.
d) La titulación de A con B de acuerdo a la reacción: A + B ↔ C + D La sustancia titulada A y
el titulante B absorben ambos a la misma longitud de onda, pero la absortividad de A es el
doble que la de B (εA = 2εB).
e) La titulación de A con B de acuerdo a la reacción: A + B ↔ C + D Considera que el
producto D es la única especie que absorbe a la longitud de onda seleccionada.

R: c) Si AT= b[B] + Cb[C] donde, [B]=[B]Vt – [B]VPE/V0+Vt y [C]=Vt[B]/V0+Vt

27. averiguar el Ka de un ácido.

Datos: pH=1 Abs= 1,473

pH=4 Abs= 0,966

pH=8 Abs= 0,187

b= 1 cm C= 5*10-3M
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28. Se desea determinar el número de iones Cl- asociados al Bi(III) en solución ácida. Utilicelos
datos mostrados en la tabla 1 y determine la fórmula del ion complejo empleando el
método de la razón molar.
Razon molar ligando Abs Razón molar ligando Abs
a metal a metal
1,50 0,210 7,5 1,00
3,00 0,425 9,00 1,12
4,50 0,645 10,50 1,14
6,00 0,852 12,00 1,15

29. Determine la razón ligando a metal para el sistema Ni(II)-2,3-quinoxalinditiona con los
siguientes datos de variaciones continuas. Explique la forma de la curva.
A Razón molar ligando A Razón molar ligando
a metal a metal
0,10 0,1 0,67 0,6
0,22 0.2 0,76 0,7
0,33 0,3 0,67 0,8
0,45 0,4 0,33 0,9
0,56 0,5 0,00 1,0

30. Se pipetean varias alícuotas de 25 mL de una muestra de agua mineral en matraces aforados
de 50,0mL. A cada uno se le adicionan exactamente 0,0; 1,5; 2,0; 2,5 y 3,0 mL de una
disolución patrón que contiene 200 mg de Fe3+ L-1 seguido de un exceso de ion tiocianato
para dar el complejo rojo Fe(SCN)2+ y se enrasa hasta la marca. Las señales del fotómetro
para las cinco disoluciones fueron 0,740; 0,937; 1,121; 1,309 y 1,509, respectivamente.
Determinar la concentración de Fe en la muestra de agua mineral.

31. Una solución 100 ppm de nitrito produce una absorbancia de 0,550 a 180 nm y 0,350 a250
nm. Una solución 180 ppm de nitrato tiene una absorbancia de 0,250 a 180 nm y de 0,650 a
250 nm. Una mezcla de ambas especies dio una absorbancia de 0,450 y 0,850 a 180 y 250
nm, respectivamente. ¿Cuál es la concentración de nitrito y nitrato en la mezcla?