PROGRAMAs MÀSTER

“Biotecnología molecular y Microbiología avanzada”

Dado el carácter y la finalidad de esta presentación, exclusivamente docente y
eminentemente ilustrativa de las explicaciones de clase, la autora se acoge al
articulo 32 de la Ley de Propiedad Intelectual vigente respecto al uso parcial de
obras ajenas como imágenes, gráficos o otro material contenidas en las diapositivas.
 BIOINDICADORES u ORGANISMOS CENTINELA

• Permiten diferenciar lugares contaminados de los no contaminados y

grado de contaminación

• Pueden permitir hacer una estimación de la cantidad de contaminante

• Pueden permitir hacer una estimación del impacto de la contaminación

 BIOINDICADORES CONTAMINACIÓN ATMOSFÉRICA

LÍQUENES (hongos en simbiosis con algas micro. eucariotas o cianobacterias)

BIOINDICADORES CONTAMINACIÓN ATMOSFÉRICA
PLANTAS BIOINDICADORAS

Nicotiana tabacum (Bel W3)

• Alteraciones debidas al ozono

troposférico (en los primeros metros
sobre tierra)

• El ozono destruye la clorofila y origina

manchas marrones en las hojas

• La superficie de estas manchas es

proporcional a la concentración de
ozono

• Se trata de una variedad muy sensible

que presenta estas alteraciones a
concentraciones muy por debajo de
las consideras peligrosas para la salud
humana
BIOINDICADORES CONTAMINACIÓN ATMOSFÉRICA
PLANTAS BIOINDICADORAS

Tradescancia
(Tradescantia clon #4430)

• Alteraciones debidas a los productos

mutagénicos de la atmósfera

• Exposición 30 horas

• Aumento del número de micro núcleos en

las células madre de los granos de polen
BIOINDICADORES DEL MEDIO MARINO

• Praderas de Posidonia oceanica

BIOINDICADORES DEL MEDIO MARINO

• Alga marrón Cistoseira

• Regresión en litorales
contaminados
BIOINDICADORES DEL MEDIO MARINO

• Peces de fondos rocosos

BIOINDICADORES DE SUELOS
 BIOINDICADORES u ORGANISMOS CENTINELA

• Organismos enteros

• Parámetros morfológicos o histológicos

• Parámetros hematológicos (marcadores moleculares)

• Parámetros bioquímicos (marcadores moleculares)

• Parámetros inmunológicos (marcadores moleculares)

• Parámetros genéticos

BIOMARCADORES
 BIOMARCADORES

Cambios medibles, ya sean bioquímicos, fisiológicos o

morfológicos, que se asocian a la exposición a un contaminante.

Por ejemplo; el nivel de colinesterasa en sangre se modifica por

exposición a plaguicidas. Un nivel anormalmente bajo de colinesterasa es
un biomarcador de la exposición a plaguicidas organofosforados.

Se utilizan para:

• detectar la presencia de una exposición

• determinar las consecuencias biológicas de la exposición
• detectar los estados iniciales e intermedios de un proceso patológico
• identificar a los individuos sensibles de una población
• fundamentar la decisión de intervenir, tanto a nivel individual como
ambiental.
TRANSGÉNICOS
 OBTENCIÓN DE UNA VARIEDAD GMO
Backcrossing and selection (6- 8 generations)

Transgenic Commercial
line variety
Commercial Transgenic Line
Biotechnology
FITOEXTRACCIÓN Y PLANTAS TRANSGÉNICAS
PLANTAS TRANSGÉNICAS Y MERCURIO
PLANTAS TRANSGÉNICAS Y TNT
 TRANSGÉNICOS (Normativa comunitaria)

Directiva 2001/18/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, sobre la

liberación intencional en el medio ambiente de organismos modificados
genéticamente.

Directiva 2015/412 del Parlamento Europeo y del Consejo, por la que se

modifica la Directiva 2001/18/Ce en lo que respecta a la posibilidad de que
los estados miembros restrinjan o prohíban el cultivo de Organismos
Modificados Genéticamente (OMG) en su territorio.
 TRANSGÉNICOS (Normativa nacional)

• Ley 9/2003, por la que se establece el régimen jurídico de la utilización confinada,

liberación voluntaria y comercialización de organismos modificados genéticamente.
• RD 178/2004, por el que se aprueba el Reglamento general para el desarrollo y
ejecución de la Ley 9/2003.
• Corrección de errores del Real Decreto 178/2004, por el que se aprueba el Reglamento
general para el desarrollo y ejecución de la Ley 9/2003.
• RD 367/2010, de modificación de diversos reglamentos en el área de medio ambiente
para su adaptación a la Ley 17/2009, de 23 de noviembre, sobre libre acceso a las
actividades de servicios y su ejercicio, y a la Ley 25/2009, de 22 de diciembre, de
modificación de diversas leyes para su adaptación a la Ley de libre acceso a actividades
de servicios y su ejercicio. (El Capítulo V modifica el Real Decreto 178/2004).
• RD 191/2013, por el que se modifica el Real Decreto 178/2004, de 30 de enero, por el
que se aprueba el Reglamento general para el desarrollo y ejecución de la Ley 9/2003
• Texto consolidado del Real Decreto 178/2004 (incluye las modificaciones del Real
Decreto 367/2010 y del Real Decreto 191/2013)
• Orden ARM/2616/2010, por la que se establece la composición y funcionamiento del
Comité de Participación en el marco del Consejo Interministerial de Organismos
Modificados Genéticamente
• RD 364/2017, por el que se modifica el Reglamento general para el desarrollo y
ejecución de la Ley 9/2003, de 25 de abril, por la que se establece el régimen jurídico de
la utilización confinada, liberación voluntaria y comercialización de organismos
modificados genéticamente, aprobado mediante Real Decreto 178/2004, de 30 de enero
 RIESGOS ECOLÓGICOS

Afectación a la biodiversidad: riesgo de contaminación por el

polen de plantas transgénicas hacia otras no transgénicas del mismo
cultivo, pudiendo alterar la diversidad biológica. También se incluyen
los efectos a largo plazo de los cultivos de plantas transgénicas con
acción insecticida sobre enemigos naturales (depredadores y
parásitos), sobre insectos polinizadores y sobre otros insectos.

Cruzamiento lejano: riesgo de transferencia de la resistencia a

herbicidas hacia especies silvestres afines. Se ha descrito una caso
en el que la resistencia a herbicidas se ha transferido desde la colza
transgénica a plantas de rábano cultivadas en su proximidad.

Contaminación: como consecuencia del riesgo de transferencia

antes citado, la resistencia a herbicidas puede difundirse en plantas
silvestres que, si son indeseables para los cultivos, podrían dar lugar
a un incremento de usos de herbicidas, con el riesgo de
contaminación de suelo y del aguas. La aparición de resistencia en
malas hierbas como consecuencia de la hibridación con plantas
cultivadas está documentada para los herbicidas denominados
triazinas, habiéndose solucionado con otros herbicidas.
La normativa comunitaria ha introducido en el ordenamiento
jurídico una serie de aspectos importantes para garantizar la
seguridad biológica de los organismos modificados
genéticamente y sus productos:

• Metodología de evaluación de riesgos para la salud y el medio

ambiente (ERMA), por aplicación del principio de cautela.
• Seguimiento a largo plazo de los efectos de los OMG en el medio
ambiente. Información pública. Sistema comunitario de etiquetado
y trazabilidad de todos los productos que se pongan en el
mercado.
• Mecanismos de inspección y control.
• Primera aprobación de OMG limitada a diez años.
• Consulta obligatoria a los Comités Científicos.
Utilización confinada
El material genético se modifica con medidas de confinamiento que
limitan su contacto con la población y el medio ambiente. En función
de la evaluación previa de los riesgos para la salud humana y el
medio ambiente hay actividades de riesgo nulo o insignificante, de
bajo riesgo, de riesgo moderado y de alto riesgo.
El primer uso de instalaciones específicas para la utilización
confinada de organismos modificados genéticamente requiere de
comunicación previa a la Administración.
Cualquier actividad de utilización confinada de OMG, salvo que
sean de riesgo nulo o insignificante, necesita ser comunicada a la
Administración. Si la actividad es de bajo riesgo necesitará
autorización administrativa si la Administración solicita más
información o si modifica las condiciones de la utilización confinada
propuesta.
Las actividades clasificadas como de riesgo moderado o alto están
sometidas a autorización administrativa.

Liberación voluntaria
El material genético se introduce deliberadamente en el ambiente
sin adoptarse medidas específicas de confinamiento. Está sometida
a un régimen de autorización administrativa de la Administración.
 EVALUACIÓN DEL RIESGO
PARA EL MEDIO AMBIENTE (ERMA)

El objetivo de una ERMA es, caso por caso, identificar y evaluar efectos
adversos potenciales del OMG, ya sean directos o indirectos, inmediatos
o diferidos, sobre la salud humana y el medio ambiente que la liberación
intencional o la comercialización de OMG puede tener.

La ERMA deberá llevarse a cabo con objeto de identificar si hay una

necesidad de gestión del riesgo y, en caso afirmativo, los métodos más
apropiados que deben utilizarse.
 PRINCIPIOS ERMA
Anexo II de la Directiva Europea

La evaluación del riesgo para el medio ambiente deberá consistir también en la

necesidad de realizar un análisis de los «efectos acumulados a largo plazo»
relativos a la liberación y a la comercialización.

efectos acumulados a largo plazo: efectos acumulados que las autorizaciones puedan tener
en la salud humana y el medio ambiente, incluidos, entre otros elementos la flora y la fauna, la
fertilidad del suelo, la capacidad del suelo para degradar materias orgánicas, la cadena alimentaria
tanto para los animales como para el ser humano, la diversidad biológica, la salud animal y los
problemas de resistencia a los antibióticos.

efectos directos: principales efectos en la salud humana o el medio ambiente que son
consecuencia del propio OMG y no de una cadena de acontecimientos.

efectos indirectos: efectos en la salud humana o el medio ambiente que son consecuencia de
una cadena de acontecimientos causal, a través de mecanismos tales como interacciones con otros
organismos, transferencia del material genético, o cambios en el uso o la gestión. Es probable que las
observaciones de efectos indirectos tarden en ser realizadas.

efectos inmediatos: efectos en la salud humana o el medio ambiente que se observan durante el
período de la liberación de los OMG. Los efectos inmediatos pueden ser directos o indirectos.

efectos diferidos: efectos en la salud humana o el medio ambiente que no se observan durante el
período de la liberación de los OMG pero que se manifiestan como efectos directos o indirectos bien
en una fase posterior o bien una vez concluida la liberación en cuestión.
 PRINCIPIOS ERMA
Anexo II de la Directiva Europea

• las características identificadas del OMG y su uso, que tengan un potencial

de efectos adversos, deberán compararse a los que presente el organismo
no modificado del cual se deriva y su uso en situaciones similares
• la ERMA deberá llevarse a cabo en condiciones de seguridad y
transparencia científica, basándose en los datos científicos y técnicos
disponibles
• la ERMA deberá llevarse a cabo caso por caso, de forma que la
información requerida pueda variar en función del tipo de los OMG de que
se trate, de su uso previsto y del medio ambiente de recepción potencial,
teniendo en cuenta, entre otras cosas, los OMG que ya se encuentren en el
medio ambiente
• en caso de disponer de nueva información sobre el OMG y sus efectos en
la salud humana o el medio ambiente puede que sea necesario realizar una
nueva ERMA para:
a) determinar si el riesgo ha cambiado;
b) determinar si es necesario modificar en consecuencia la gestión del
riesgo.
 Características OMG y liberaciones

En función del caso, la ERMA tiene que tener en cuenta los detalles
técnicos y científicos que guarden relación con las características:

• del (de los) organismo(s) receptor(es) o parental(es);

• de la (de las) modificación(es) genética(s), por inclusión o supresión de
material genético, y la información pertinente sobre el vector y el donante;
• del OMG;
• de la liberación intencional o el uso, inclusive su escala;
• del medio ambiente de recepción potencial;
• de la interacción entre dichas características.

La información relativa a las liberaciones de organismos similares y de

organismos de rasgos similares y su interacción con entornos similares
pueden ser útiles para la ERMA.
 MEDIDAS

• Distancias de aislamiento

• Remoción de las flores

• Aislamiento de las flores

• Aislamiento temporal

• Extracción del cultivo antes de la floración

• Trampas de captura del polen arrastrado por el viento

• Medidas de prevención de la dispersión de las semillas

 PARTICIPACIÓN Y COMUNICACIÓN

Birner and Alcaraz (2004) han revisado distintas formas de fomentar y

canalizar la participación en los procesos de evaluación de la Biotecnología en
Europa:

• small-scale citizen juries (Switzerland).

• national-level dialogue among organized stakeholders (Germany),
• internet platforms with self selected participants followed by conferences
(France, EU),
• large-scale public deliberation (United Kingdom).
« Currently, here is what we know about GMOs…
Thus there is no rational reason to be frightened! »
 COMPUESTOS INORGÁNICOS

free cyanides low degradability aerobic

complex cyanides low degradability
ammonium high degradability aerobic/anaerobic
nitrate high degradability anaerobic
sulphate high degradability anaerobic
heavy metals* low degradability
radioisotopes* low degradability

* Transformación más que degradación

 CIANUROS NATURALES

Cyanide and chemically related compounds are formed, excreted and degraded in
nature by hundreds of species of bacteria, algae, fungi, plants and insects. Low levels
of cyanide can appear in naturally occurring surface or groundwater samples.

At least 1,000 species of plants and micro-organisms from 90 families have been
shown to contain one or more of nearly twenty compounds capable of producing
cyanide.

Fungi and bacteria are prevalent producers of cyanide. Insects have been shown
also to produce cyanide. Species of centipedes, millipedes, beetles, moths and
butterflies synthesise and excrete cyanide for defensive purposes.

About 800 species of higher plants from 70 to 80 families, including agriculturally

important species such as the cassava (mandioca, yuca), flax (lino), sorghum,
alfalfa, bamboo, peach, pear, cherry, plum, corn, potato, cotton, almond, and
beans are cyanogenic.
La intoxicación por cianuro del
ganado con sorgo forrajero y
otras plantas cianogénicas está
bien documentada.
Los cianuros no se suelen encontrar en aguas naturales en
concentraciones superiores a 0.2 mg/L
 FORMAS QUÍMICAS

Son sustancias que se caracterizan porque poseen una unión

carbono-nitrógeno (C-N) que se combina con una gran variedad de
compuestos orgánicos e inorgánicos.

Se presentan en el ambiente principalmente como cianuro de

hidrógeno (HCN) y cianuros alcalinos como por ejemplo el cianuro
sódico (NaCN) y el cianuro potásico (KCN).

El HCN es un gas incoloro, con un olor típico a almendra, miscible con el agua y
levemente soluble en éteres. Los cianuro sódico y potásico son sólidos de color blanco,
solubles en agua y también en alcohol. Pueden tener un olor muy similar al cianuro de
hidrógeno, y también a amoniaco, cuando se encuentran en contacto con el agua.

CN-
HCN
CuCN, AgCN, or Zn(CN)2.

A pH < 9.2 predominan CN- o HCN.

AM(CN)x,
A álcali,
M (Fe2+, Fe3+, Cd, Cu, Ni, Ag, Zn,…).
Los cianuros alcalinos son utilizados fundamentalmente
en los procesos de extracción de oro y plata,
procedimientos de síntesis química y para el tratamiento
de superficies metálicas.
2000
 CIANUROS
The forms of cyanide most often monitored are:

• free cyanide: HCN and CN-

•weak acid dissociable (WAD) cyanide (all forms of
cyanide except cyanide bound to iron), toxicologically
significant.
•total cyanide: all forms of free and metal bound cyanides,
including the non-toxic and stable iron cyanides.
Debido al origen natural del cianuro, algunos microorganismos
han desarrollado mecanismos de resistencia e incluso de
asimilación de este tóxico, utilizándolo como fuente de
nitrógeno.

Existen distintas rutas de asimilación de cianuro descritas.

P. pseudoalcaligenes CECT5344 es una bacteria cianotrofa que

presenta la peculiaridad de ser alcalófila, lo que permite que
dicho microorganismo pueda crecer en medios alcalinos y evitar
así la formación de HCN volátil a partir del anión cianuro soluble
(Luque-Almagro et al., 2005).

Esta característica le confiere un elevado potencial para poder

ser utilizada en la descontaminación de residuos industriales
cianurados.
 Cianuro en P. pseudoalcaligenes CECT5344

El cianuro inhibe la citocromo c oxidasa (CcO), lo que genera estrés oxidativo y

desencadena mecanismos de defensa frente a las especies reactivas de oxígeno (ROS),
pero induce la oxidasa alternativa (AOX) y la malato:quinona oxidorreductasa
(MQO) para mantener la respiración aeróbica (NDH, NADH deshidrogenasa; UQ,
ubiquinona). El oxalacetato generado por la MQO se une al cianuro formando una
cianhidrina, que es asimilada mediante una nitrilasa. Esto permite utilizar el cianuro
como fuente de nitrógeno para el crecimiento. El cianato es asimilado por la cianasa,
enzima que también se induce por cianuro.

Durante el crecimiento con cianuro la bacteria puede acumular polihidroxialcanoatos

(PHA), polímero utilizable para fabricar bioplásticos.
 Requerimientos

• El organismo cianotrofo debe tener una respiración insensible

al cianuro, lo que requiere una oxidasa alternativa a la
citocromo c oxidasa.
• Debe producir sideróforos o sistemas de captación de hierro,
ya que la biodisponibilidad de este metal es muy baja en
medios con cianuro debido a su elevada afinidad por los
metales, con los que forma complejos muy estables.
• Finalmente, se requiere una ruta bioquímica que permita la
transformación del cianuro en amonio, un compuesto
nitrogenado fácilmente asimilable.

Se han descrito varias rutas con diferentes enzimas que pueden

agruparse en cuatro categorías:
• hidrolíticas (cianidasa, cianuro hidratasa/formamidasa),
• reductivas (nitrogenasa),
• oxidativas (cianuro dioxigenasa, cianuro
monooxigenasa/cianasa),
• De sustitución/adición (rodanasa/tiocianato hidrolasa,
nitrilasas, nitrilo hidratasa/amidasa).

Es necesario que el organismo sea alcalófilo, ya que a un pH

inferior a 9 el cianuro volatiliza como ácido cianhídrico (HCN).
Las reacciones enzimáticas son:

• substitución
• hidrolisis
• oxidación
• reducción
DEGRADACIÓN DE CIANUROS
CIANUROS COMPLEJOS
 NITROGEN CYCLE
Major processes involved

1. Ammonification
Conversion of organic forms of nitrogen (for example, nitrogen in proteins in dead
plants and soil animals) to ammonium. The ammonification process is carried out by
a wide range of soil organisms. Different types of bacteria and fungi are involved.

2. Nitrification
Nitrification is the conversion of ammonium to nitrate (another inorganic form of
nitrogen) by a specific group of bacteria.

3. Denitrification
Denitrification is the conversion of different forms of nitrogen in soil to forms of
gaseous nitrogen. One example is nitrous oxide and another is nitrogen gas.

4. Nitrogen fixation
Nitrogen fixation is the conversion of nitrogen gas (N2) to ammonium - either by free
living bacteria in soil or water, or by bacteria in symbiotic association with plants
(legume symbiosis).

5. Nitrogen immobilization
This is the process whereby nitrogen is taken up by soil organisms and retained in
the 'microbial pool' of nitrogen.
 Fuentes de nitrógeno

• Mineral fertilizer
NH4NO3 + 2O2  2NO3- + 2H+ + H2O

• Liquid manure
R-NH2 + 2O2  R-OH + NO3- + H+

• Atmospheric deposition
NOx + ¼(5-2x)O2 + ½H2O  NO3- + H+
NH3 + 2O2  NO3- + H+ + H2O

• Mineralization of organic matter

R-NH2 + 2H2O  R-OH + NH4+ + OH-
Denitrification has been found recently also in halophilic
and hyperthermophilic archaea, and in the mitochondria of
fungi, raising intriguing evolutionary vistas.
 FIJACIÓN DEL NITRÓGENO

N2 + 8H+ + 8e + 18 ATP --> 2NH3 + H2 + 18 (ADP + Pi)

 PHOSPHORUS

Inorganic phosphorus is negatively charged in most soils. Because of its particular

chemistry, phosphorus reacts readily with positively charged iron (Fe), aluminum (Al), and
calcium (Ca) ions to form relatively insoluble substances. When this occurs, the
phosphorus is considered fixed or tied up. In this regard, phosphorus does not behave like
nitrate (NO3-), which also has a negative charge but does not form insoluble complexes.

The solubility of the various inorganic phosphorus compounds directly affects the
availability of phosphorus for plant growth. The solubility is influenced by the soil pH.

Soil phosphorus is most available for plant use at pH values of 6 to 7. When pH is less
than 6, plant available phosphorus becomes increasingly tied up in aluminum phosphates.
As soils become more acidic (pH below 5), phosphorus is fixed in iron phosphates. When
pH values exceed 7.3, phosphorus is increasingly made unavailable by fixation in calcium
phosphates.
 TRANSFORMATIONS of metals

Factors that affect the type, rate, and extent of microbial activity, and hence,
these transformations.

• form of the metal (elemental, oxide, sulfide, ionic, inorganic complex, organic
complex, co-precipitate)

• availability of electron donors

• nutrients (nitrogen, phosphorus)

• presence of electron acceptors (Fe3+, Mn4+, NO3-, SO42-, organic compounds)

• environmental factors (pH, Eh, temperature, moisture)

DONORS ACEPTORS
 H3AsO4 + 2H+ + 2e- H3AsO3 + H2O
Arsenate – As(V) Arsenite – As(III)
TheMain factorsof
problem limiting bioavailability
bioavailability

microbial Long
activity soil water
distances

dissolution of
separate phase desorption
pollutant

Soil particle
soil particle

unsaturated zone

Hindered
diffusion
Sorption

Hydrophobic
pollutant
 DISSOLUTION OR IMMOBILIZATION OF
RADIONUCLIDES AND METALS

(i) oxidation-reduction of metals which affect their valence state

and solubility;
(ii) changes in pH and Eh which affect the ionic state of the
metals and their solubility;
(iii) solubilization, and leaching of elements by microbial
metabolites and decomposition products, such as organic
acid metabolites or production of specific sequestering
agents;
(iv) volatilization due to alkylation reactions (biomethylation);
(v) immobilization leading to formation of stable minerals or
bioaccumulation by microbial biomass and biopolymers;
(vi) biotransformation of metal/radionuclide organic complexes
(vi) transport of radionuclides as biocolloids
The reduction of uranium was reported in axenic cultures of
iron-reducing bacteria, fermentative bacteria, sulfate-
reducing bacteria, and cell-free extracts of Micrococcus
lactilyticus, and in uranium wastes by Clostridia.
• Fe(III) → Fe(II)
• Mn(IV) → Mn(II) increases its solubility
• Pu(IV) → Pu(III)

• Cr(VI) → Cr(III)
• U(VI) → U(IV) decreases their solubility
• Pu(VI) → Pu(IV)
COMPLEXES
 PROCESOS DE INMOVILIZACIÓN DE IONES METÁLICOS
POR MICROORGANISMOS

● Procesos Activos

Ej. Producción de sulfuro por bacterias anaerobias sulfato-reductoras.

El sulfuro forma un complejo insoluble con los iones metálicos en solución

● Procesos Pasivos:

Bioabsorción: asociación de iones metálicos a células bacterianas y a sus exopolímeros.

Se da tanto en células vivas como en muertas.

Se debe, principalmente, a los grupos funcionales cargados negativamente de la pared

bacteriana y a los exopolímeros (carboxilato, fosfato).

Eficacia similar a la de las resinas de intercambio iónico.

Eliminan eficientemente bajas concentraciones de metales pesados (Cu2+, Zn2+, Cd2+, Ni2+,
y Pb2+) en presencia de Ca2+ y Mg2+.
 BIOSENSORES

ANALIT
Dispositivos de análisis que incorporan
un elemento de reconocimiento biológico
(ácido nucleico, enzima, anticuerpo,
receptor, tejido,...) asociado a un sistema ELEMENT DE
de transducción (transformación de un RECONEIXEMENT

tipo de señal o energía en otra de distinta

TRANSDUCTOR
naturaleza) que permite procesar una
señal producida por la interacción entre
SENYAL
el elemento de reconocimiento y el AMPLIFICADOR
analito.
 BIOSENSORES AMBIENTALES

ELEMENTO BIOLÓGICO
TRANSDUCTOR FÍSICO
DE RECONOCIMIENTO

Electroquímico
Enzimas
Óptico-electrónico
Anticuerpos
Óptico
Microorganismos
Acústico
 CLASIFICACIÓN

Biosensores catalíticos:
La respuesta proviene de la actividad catalítica de microorganismos o
directamente de enzimas.

Biosensores no catalíticos:
La señal proviene de la unión, normalmente irreversible de anticuerpos
(inmunosensores) o ácidos nucleicos con la molécula (o moléculas) objeto de
análisis.

Biosensores de comportamiento:
La respuesta proviene de la alteración del comportamiento o del cambio en
determinados estímulos de los organismos expuestos al contaminante.
 CARACTERÍSTICAS

• alta sensibilidad • manipulación simple

• alta selectividad
• alta fiabilidad
• tiempo de vida larga
• bajo coste
• tiempo de análisis corto
• no se necesita pretratamiento
• capaces de análisis en tiempo real
• portátiles (permiten análisis “in situ”)
• automatizables
• miniaturitzables
• pocos requerimientos de mantenimiento
• con capacidad multi-análisis
GFP
Chip surface mRNA (expressed gene)

Genetic fingerprint
 Strong Weak
estrogens estrogens
17- estradiol Endosulfan
(65 ng/L) (590 ng/L)

Control
Ethinylestradiol Methoxychlor
(100 ng/L) (5.6 ug/L)

Diethylstilbestrol Nonylphenol
100 ng/L 11.8 ug/L
Percent Measured Effect VENTAJAS

100 Reversible Irreversible

effects effects

50

Concentration x Time of Exposure

13