Desarrollo experimental

I. MATERIALES Y MÉTODOS
• Reactivos: Ácidos sulfúrico y nítrico concentrados, NaOH al 10%, sulfato de
cobre al 0,5% ninhidrina al 0.2%, alcohol, cloroformo, acetona, agua destilada.

• Muestras: Ovoalbúmina diluida y filtrada en gasa, aceite de diversas

procedencias.

• Tubos de ensayo, picetas, gradillas, pipetas de 1, 5 y 10 mL, marcador de

vidrio, mecheros

de gas o cocinas de plancha.

A. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
1. REACCIÓN DE BIURET
PROCEDIMIENTO

En un tubo de ensayo coloque 2 mL de una solución de albúmina diluida,

agregue unas gotas de NaOH al 20%, mezclar bien y añadir 1 o 2 gotas de
CuSO 4 al 0,5%, agitar y observar la aparición de la coloración violeta.
2. REACCIÓN XANTOPROTEÍCA
PROCEDIMIENTO

En un tubo de ensayo colocar 2 mL de solución de ovoalbúmina diluida,

agregar gota a gota ácido nítrico concentrado, calentar hasta ebullición y
observar la aparición de la coloración (tener cuidado al calentar).

3. REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

PROCEDIMIENTO

En un tubo de ensayo colocar 1 mL de solución de ovoalbúmina diluida y

agregar gotas de ninhidrina al 0.2%, llevar al baño maría y observar la
aparición de un color púrpura.
B. IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
1. PRUEBA DE SUDAN III
FUNDAMENTO

El colorante Sudán III es específico para identificar grasas, reacciona

dando una coloración rojo rosada.

PROCEDIMIENTO

En un tubo de ensayo colocar una muestra de aceite o muestra problema y

agregar gotas del colorante Sudán III. Agita suavemente. Observa y anota
si se producen variaciones de coloración con el tiempo. Analiza los resultados
y concluye acerca de la existencia de lípidos en la solución problema.

2. SOLUBILIDAD
Se basa en la propiedad de los lípidos de ser solubles en solventes
orgánicos. Solubilidad es la cualidad de soluble (que se puede disolver). Se
trata de una medida de la capacidad de una cierta sustancia para disolverse en
otra. La sustancia que se disuelve se conoce como soluto, mientras que la
sustancia donde se disuelve el soluto recibe el nombre de solvente o
disolvente. La concentración por otra parte, hace referencia a la
proporción existente entre la cantidad de soluto y la cantidad ddisolvente
en una disolución.

PROCEDIMIENTO

Proceder de acuerdo al cuadro

3. EMULSIÓN DE LÍPIDOS
Proceder de acuerdo al cuadro

REACCIONES QUIMICAS
1. REACCIÓN DE BIURET
FUNDAMENTO

El reactivo de Biuret contiene CuSO 4 en solución acuosa alcalina de NaOH.

La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a
la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu 2+ y los pares
de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces
peptídico, dando un complejo de color violeta.
2. REACCIÓN XANTOPROTEÍCA
FUNDAMENTO

Se basa en la capacidad de los aminoácidos que contienen anillo aromático

(bencénico), Phe, Trp, y Tyr para formar por interacción con ácido nítrico
concentrado compuestos dinitroderivados de color amarillo

3. REACCIÓN CON LA NINHIDRINA

FUNDAMENTO

Se basa en la interacción de la ninhidrina con el grupo amino de los

aminoácidos, péptidos y proteínas con la formación de un complejo de color
azul-violeta. La ninhidrina reacciona con el α-aminoácido formando una base
de Schiff. Esta base se descompone con la liberación de anhídrido carbónico y
por hidrólisis da el compuesto 2 amino-1,3- diceto hidrindeno y un aldehído.
RESULTADOS
DISCUSIÓN DE RESULTADOS

¿Por qué el aceite se disuelve en el agua?

El agua disuelve más sustancias que cualquier otro líquido, por lo que se le suele

llamar solvente universal, pero existe una familia de sustancias que el agua aborrece y

rehuye invariablemente: los aceites. Ni tan siquiera se arrima lo suficiente a una gota

de aceite como para mojarla.

La razón de ello se encuentra en lo más íntimo de su ser, en su propia

naturaleza. Cada molécula de agua está compuesta por tres átomos: dos de hidrógeno

y uno de oxígeno (H2O). La atracción que experimentan entre sí, la fuerza de cohesión

que las mantiene unidas, es muy especial: deriva de la polaridad que caracteriza a las

moléculas, como si de un montón de minúsculos imanes se tratase, con sus polos

negativos y sus polos positivos.

Por su parte el aceite está formado por grandes moléculas integradas por muchos

átomos de carbono e hidrógeno, careciendo de átomos de oxígeno. No son en

absoluto sustancias polares, no poseen ningún atractivo para tentar a una molécula de

agua.