CARACTERIZACION QUIMICA DE LIPIDOS

CHEMICAL CHARACTERIZATION OF LIPIDS

Ballestas A., Tibaquira C., Castillo M., Rodríguez K.
Corporación Tecnológica de Bogotá, Tecnología en Química Industrial
Bioquímica
29/03/2019
RESUMEN
Los lípidos son moléculas químicas caracterizadas por su insolubilidad en solventes
polares, especialmente el agua, sin embargo muchos tienen un carácter anfótero; además
poseen buena energía por el número de enlaces carbono-hidrogeno. Estos compuestos están
presentes en alimentos y son consumidos para aumentar las reservas de energía.
La yema de huevo consta de una composición lipídica importante, por tanto el objetivo de
la práctica es reconocer su composición química por medio de diferentes ensayos
cualitativos, los cuales evidencian la presencia de; colesterol, triglicéridos y fosfolípidos.
Posteriormente, la cromatografía de capa fina, separa los componentes enunciados
anteriormente, confirmando el resultado, además de brindar el índice de refracción
respectivo.
PALABRAS CLAVE: Colesterol, Triglicéridos, Fosfolípidos, Cromatografía, Capa Fina.

ABSTRACT
Lipids are chemical molecules characterized by their insolubility in polar solvents,
especially water, however many have an amphoteric character; they also possess good
energy by the number of carbon-hydrogen bonds. These compounds are present in food and
are consumed to increase energy reserves.
The yolk of egg consists of an important lipid composition, therefore the objective of the
practice is to recognize its chemical composition by means of different qualitative tests,
which show the presence of; cholesterol, triglycerides and phospholipids. Subsequently,
thin-layer chromatography separates the components listed above, confirming the result, in
addition to providing the respective refractive index.
KEY WORD
Cholesterol, Triglycerides, Phospholipids, Chromatography, Thin Layer
INTRODUCCION
La presencia de colesterol, triglicéridos y
fosfolípidos en la yema del huevo,
pretende evidenciarse, por medio de los
ensayos cualitativos, basados en el
líquido y sólido extraídos de la yema del
huevo, por medio de la filtración y
evaporación por duplicado,
respectivamente. Posteriormente, la
siembra en la placa para la cromatografía
de capa fina, consta de cinco sustancias;
aceite, colesterol, solución uno (líquido),
solución dos (sólido mezclado con éter),
colesterol y lecitina, de manera que los
resultados sean proporcionales a los
obtenidos por las pruebas cualitativas.
(Gil, A. 2010)
Según, Gil, A. (2010); ̈ los lípidos se
encuentran en un 68.5% en la yema de
huevo formando parte de las
lipoproteínas, las cuales tienen una gran Los lípidos tienen como característica
cantidad de colesterol de baja densidad principal el ser hidrófobos (insolubles en
(LDL), por lo tanto constituyen la agua) y solubles en disolventes orgánicos.
estructura en forma de gotitas, en la Se los llama incorrectamente grasas, ya
yema, al igual que el colesterol de alta que las grasas son solo un tipo de lípidos
densidad (HDL), ya que se asemeja a los procedentes de animales. Cumplen
glóbulos de grasa. Por otra parte, contiene diversas funciones en los organismos
triglicéridos, los cuales son vivientes. Los lípidos son un conjunto
principalmente; ácido oleico, palmítico, de moléculas orgánicas (la mayoría
esteárico y linoleico. Por otro lado, la biomoléculas) compuestas principalmente
vitamina A, ácido pantoténico y tocoferol, por carbono e hidrógeno y, en menor
están presentes en la yema, la cual tiene medida,oxígeno; aunque también pueden
alrededor del 1% de hidratos de carbono, contener fósforo, azufre y nitrógeno. Los
los cuales incluyen, glucosa, manosa lípidos cumplen funciones diversas en los
galactosa, arabinosa, xilosa y ribosa, no organismos vivientes, entre ellas la de
obstante el color anaranjado se debe a la reserva energética (como los
presencia de carotenos asociados a triglicéridos), la estructural (como los
lipoproteínas y xantofilas (luteína y fosfolípidos de las bicapas) y la
zeaxantina). (Gil, A. 2010) reguladora (como las hormonas
esteroides). (Anónimo; 2014)
Los lípidos son moléculas muy diversas;
unos están formados por cadenas
alifáticas saturadas o insaturadas, en
general lineales, pero algunos tienen
anillos (aromáticos). Algunos son
flexibles, mientras que otros son rígidos o
semiflexibles hasta alcanzar casi una total
flexibilidad mecánica molecular; algunos
comparten carbonos libres y otros forman
puentes de hidrógeno.
La mayoría de los lípidos tiene algún tipo
de carácter no polar, es decir, poseen una
gran parte apolar o hidrofóbico ("que le
teme al agua" o "rechaza el agua"), lo que
significa que no interactúa bien con
solventes polares como el agua, pero sí
con la gasolina, el éter o el cloroformo.
(Anónimo, 2014)
Los lípidos son hidrofóbicos, esto se debe
a que el agua esta compuesta por un
átomo de oxígeno y dos de hidrógeno a su
alrededor, unidos entre sí por un enlace de
hidrógeno. El núcleo de oxígeno es más
grande que el del hidrógeno, presentando
mayor electronegatividad. Como los
electrones tienen mayor carga negativa, la
transacción de un átomo de oxígeno tiene
una carga suficiente como para atraer a
los de hidrógeno con carga opuesta,
uniéndose así el hidrógeno y el agua en
una estructura molecular polar.
(Anónimo, 2014)
Los lípidos son largas cadenas de
hidrocarburos y pueden tomar ambas
formas: cadenas alifáticas saturadas (un
enlace simple entre diferentes enlaces de
carbono) o insaturadas (unidos por
enlaces dobles o triples). Esta estructura
molecular es no polar.
Los enlaces polares son más
enérgicamente estables y viables, por eso
es que las moléculas de agua muestran
una clara afinidad por los demás. Pero por
el contrario, las cadenas de hidrocarburos
no son capaces de establecer un grado
sustancial de afinidad con las moléculas
de agua y entonces no se mezclan. Los
lípidos son insolubles en agua porque no
hay adhesión entre las moléculas de agua
y la sustancia lipídica. (Anónimo; 2014)
Los lípidos son un grupo muy
heterogéneo que usualmente se subdivide
en dos, atendiendo a que posean en su
composición ácidos grasos (lípidos
saponificables) o no los posean (lípidos
insaponificables):
Lípidos saponificables Simples. Son los
que contienen carbono, hidrógeno y
oxígeno.
Los acilglicéridos; Son ésteres de ácidos
grasos con glicerol. Cuando son sólidos
se les llama grasas y cuando son líquidos
a temperatura ambiente se llaman aceites.
Los céridos son ceras. (Anónimo; 2014)
Lípidos saponificables Complejos. Son
los lípidos que, además de contener en su
molécula carbono, hidrógeno y oxígeno,
contienen otros elementos como
nitrógeno, fósforo, azufre u otra
biomolécula como un glúcido. A los
lípidos complejos también se les llama
lípidos de membrana pues son las
principales moléculas que forman las
membranas celulares.
Fosfolípidos, Fosfoglicéridos,
Fosfoesfingolípidos, Glucolípidos,
Cerebrósidos, Gangliósidos. (Anónimo;
2014)
Lípidos insaponificables. Terpenoides,
Esteroides, Prostaglandinas. (Anónimo;
2014)
Los lípidos desempeñan diferentes tipos
de funciones biológicas:
- Función de reserva energética. Los térmicos del organismo, evitando que este
triglicéridos son la principal reserva de pierda calor. (Anónimo; 2014)
energía de los animales ya que un gramo
Las grasas son fuentes de ácidos grasos
de grasa produce 9,4 kilocalorías en las
esenciales, nutrientes que no se pueden
reacciones metabólicas de oxidación,
sintetizar en el cuerpo humano. Juegan un
mientras que las proteínas y los glúcidos
papel vital en el mantenimiento de una
solo producen 4,1 kilocalorías por gramo.
piel y cabellos saludables, en el
aislamiento de los órganos corporales
- Función estructural. Los fosfolípidos,
contra el shock, en el mantenimiento de la
los glucolípidos y el colesterol forman las
temperatura corporal y promoviendo la
bicapas lipídicas de las membranas
función celular saludable. Además, sirven
celulares. Los triglicéridos del tejido
como reserva energética para el
adiposo recubren y proporcionan
organismo. Las grasas son degradadas en
consistencia a los órganos y protegen
el organismo para liberar glicerol y ácidos
mecánicamente estructuras o son aislantes
grasos libres. (Anónimo; 2014).
térmicos.
El contenido de grasas de los alimentos
- Función reguladora, hormonal o de
puede ser analizado por extracción. El
comunicación celular. Las vitaminas
método exacto varía según el tipo de
liposolubles son de naturaleza lipídica
grasa a analizar. Por ejemplo, las grasas
(terpenos, esteroides); las hormonas
poliinsaturadas y monoinsaturadas son
esteroides regulan el metabolismo y las
analizadas de forma muy diferente.
funciones de reproducción; los
Las grasas también pueden servir como
glucolípidos actúan como receptores de
un tampón muy útil de una gran cantidad
membrana; los eicosanoides poseen un
de sustancias extrañas. Cuando una
papel destacado en la comunicación
sustancia particular, sea química o biótica,
celular, inflamación, respuesta inmune,
alcanza niveles no seguros en el torrente
etc.
sanguíneo, el organismo puede
efectivamente diluir (o al menos mantener
- Función transportadora. El transporte de
un equilibrio) estas sustancias dañinas
lípidos desde el intestino hasta su lugar de
almacenándolas en nuevo tejido adiposo.
destino se realiza mediante su emulsión
(Anónimo; 2014).
gracias a los ácidos biliares y a las
lipoproteínas. El tejido adiposo o graso es el medio
utilizado por el organismo humano
- Función biocatalizadora. En este papel para almacenar energía a lo largo de
los lípidos favorecen o facilitan las extensos períodos de tiempo.
reacciones químicas que se producen en Dependiendo de las condiciones
los seres vivos. Cumplen esta función las fisiológicas actuales,
vitaminas lipídicas, las hormonas los adipocitos almacenan triglicéridos der
esteroideas y las prostaglandinas. ivadas de la dieta y el metabolismo
hepático o degrada las grasas
- Función térmica. En este papel los almacenadas para proveer ácidos grasos y
lípidos se desempeñan como reguladores
glicerol a la circulación. (Anónimo; Para la prueba cualitativa No.1 se
2014). agregaron las cantidades correspondientes
a la siguiente tabla:

MATERIALES Y METODOS

En una cámara cromatografía se coloca

aproximadamente 5 ml de una solución
de n-hexano: éter etílico: ácido acético
glacial (70:25:1) y se deja saturar por 20 Para la prueba cualitativa No.2 se
minutos. agregaron las cantidades correspondientes
en la siguiente tabla:
- Preparación de la muestra
En un mortero se agregaron 4 g de yema
de un huevo previamente cocido; a este se
agregan 20mL de la solución de etanol:
éter: cloroformo (2:1:2)
Se macero suavemente y filtro a través de
A los tubos anteriores se calentaron
papel filtro, recogiendo el filtrado en un
levemente a la llama y se detectó el olor
vaso de precipitados.
desprendido en cada tubo.
Por medio de calentamiento leve se
Para la prueba cualitativa No.3 se
evaporo el solvente agitando el vaso
agregaron las cantidades correspondientes
constantemente, hasta obtener un extracto
a la siguiente tabla:
viscoso pero seco. Una vez seco, se le
agrego a la muestra 10 mL de éter, y 30
mL de acetona para formar un
precipitado, este se dejó decantar
colocando el vaso de precipitados en
forma vertical. De allí se tomó la fase 1 Frasco lavador
líquida y se colocó en un vaso de 1 churrusco
precipitado de 50mL, este se calentó 1 gradilla tubo de ensayo grande
cuidadosamente dejando reducir su 1 maya de cerámica
volumen a 10 mL esta se toma como 1 microespátula
solución 2* 1 pipeteador
1 tripode
La fase sólida se dejó secar y se disolvió
1 vidrio reloj
el sólido en 10 mL de éter etílico esta se 12 tubos de ensayo grande
tomó como solución 1* 2 celdas de vidrio redondas
2 vasos precipitado 100ml
3 pipeta graduada de 5ml
3 pipetas graduadas de 1 ml
3 vasos precipitado 50 ml
5 pipetas pasteur
Agitador magnético
Cámara cromatografíca
Mortero
Plancha
Agrego 1 mL de las soluciones y 2 mL de Tubo 1.4 = 1ml Molibdato de amonio +
ácido sulfúrico concentrado a los tres 1ml H2SO4 + 1ml Acido Ascorbico
tubos anteriores y a un cuarto tubo vacío
(control negativo).
SEPARACIÓN DE LÍPIDOS POR
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA
Sobre las placas cromatografías se marca
con un lápiz suavemente una línea
dejando una distancia de 1 cm desde la
base de la placa.
se siembro cada muestra asegurandonos
de de marcar cada punto sembrado; luego
se coloco la placa en la cámara
previamente saturada y se tapo hasta que
la fase movil quedo a un 1 cm de la parte
superior de la placa.
Luego de subir la fase movil se saco la 1.4 1,3 1,2 1,1
placa y se marco con lápiz la zona hasta
donde llego la fase movil se dejo secar la Ilustración 1. Prueba cualitativa lecitina
placa, y se agrego la solucion reveladora
de sulfato de amonio 10%; se dejo secar y
se coloco la placa sobre una plancha de
calentamiento a 70°C y de alli se retiro
una vez se empezaron a revelar colores
sobre esta.

ANALISIS DE RESULTADOS
- PRUEBA CUALITATIVA No. 1
Tubo 1.1 = 1ml Sln1 + 1ml Molibdato de
amonio + 1ml H2SO4 + 1ml Acido
Ascorbico
Tubo 1.2 = 1ml Sln2 + 1ml Molibdato de
amonio + 1ml H2SO4 + 1ml Acido
Ascorbico
Tubo 1.3 = 1ml Lecitina + 1ml
Molibdato de amonio + 1ml H2SO4 +
1ml Acido Ascorbico
Ilustración 2. Estructura de la lecitina
A cada uno de los tubos se les adiciona
molibdato de amonio y ácido sulfúrico
obteniendo la reacción:
Principalmente la molécula lecitina posee
fosfato inorgánico (Ilustración 2. ) y al ser
sometida al medio ácido, en este caso ácido
sulfúrico junto al molibdato se origina un
compuesto llamado fosfomolibdato que es
reducido por la adición posterior del ácido
ascórbico generando la coloración azul de
molibdeno en los tubos de ensayo de la
solución 1, 2 y en el control negativo, lo cual
indica un resultado positivo para la presencia
de la lecitina en la yema del huevo por
especialmente el grupo fosfato unido a la
lecitina. Teóricamente se dice que la La
lecitina, también conocida como
fosfatidilcolina compone la yema del huevo
en un 26 % que incluye colina, ácidos grasos
y fosfatos, presenta una gran importancia en
el cuerpo humano debido a que interviene en
las funciones del cerebro como la memoria, el
pensamiento y el control muscular.

- PRUEBA CUALITATIVA No.2 Ilustración 3. Prueba cualitativa glicerol

Tubo 2.1 = 1ml Sln1 + KHSO4 (Bisulfato de

Potasio solido en pequeña cantidades).
Tubo 2.2 = 1ml Sln2 + KHSO4 (Bisulfato de
Potasio solido en pequeña cantidades).
Tubo 2.3 = 1ml Glicerina + KHSO4
(Bisulfato de Potasio solido en pequeña
cantidades).
Ilustración 5. Reacción del glicerol con
Tubo 2.4 = KHSO4 (Bisulfato de Potasio
KHSO4
solido en pequeñas cantidades).
Cuando se calienta el glicerol con KHSO4 se
produce deshidratación y se forma el aldehído
acroleína, el cual tiene un olor característico,
esta reacción ocurre tanto con el glicerol libre
como con los ésteres del glicerol.

Ilustración 3. Estructura química glicerol

La acroleína es un líquido incoloro o
amarillento, con un penetrante olor
desagradable que causa lagrimeo. Según con
lo reportado se ha encontrado en algunos
componentes o subproductos de la mezcla de
glicerina y las soluciones que se prepararon a
partir de la yema del huevo, cuando se ponen
al calor, dan mucha acroleína este se
identifica con su olor característico.
 - PRUEBA CUALITATIVA No.3
Tubo 3.1 = 1ml Sln1 + 3ml de FeCl3 + 1ml
de Acido Sulfúrico.
Tubo 3.2 = 1ml Sln2 + + 3ml de FeCl3 +
1ml de Acido Sulfúrico.
Tubo 3.3 = 1ml Colesterol + 3ml de FeCl3 +
1ml de Acido Sulfúrico.
Tubo 3.4 = 3ml de FeCl3 + 1ml de Acido
Sulfúrico.
colesta-hexano-sulfonico cromóforo,
produciendo la tonalidad verdosa (romero,
2010). Debido a que hubo más presencia de
ergosterol y menor presencia de colesterol se
obtuvo esta tonalidad.
La coloración final de la reacción fue
amarillo con segmentos marrones ya que las
sustancias que dan este color, tienen como
núcleo un ciclo pentanoperhidrofenantreno.
- CROMATOGRAFIA DE CAPA
FINA

3.2
3.1 3.3 3.4

Ilustración 6. Prueba cualitativa colesterol

Ilustración 7. Estructura colesterol

Se evidencio cambios en la coloración, puesto
que el control positivo (ilustración 6) se tornó PLACA 1
amarillo con un precipitado café. El colesterol
es un esterol insaturado al entrar en contacto Solución 1 = / 5,0 =
con el ácido sulfúrico y el cloruro férrico Solución 2 = / 5,0 =
debido a que inicialmente se protona el OH Patrón de colesterol = / 5,0 =
del colesterol, desprendiéndose agua y PLACA 2
obteniéndose el ion carbonio 3, 5-
Patrón de Lecitina = / 5,0 =
colestadieno. Posteriormente la oxidación del
ion carbonio por el SO2 produce un ácido Aceite vegetal = / 5,0 =
CONCLUSIONES

Se puedo verificar la identificación de los
fosfolípidos derivados del huevo tomando
como patrones la lecitina, glicerina y
colesterol estos lípidos son completamente
apolares.
Los lípidos se solubilizan con solventes
orgánicos por la presencia de ácidos grasos
(glicéridos o triglicéridos) saturados o
insaturadas que forman los lípidos simples o
compuestos los solventes orgánicos son
moléculas apolares de manera se solubilizan
con ellos en relación con el agua (molécula
polar) tienen apatía o no afinidad por ser
esteres de ácidos grasos con un alcohol
llamado glicerol.
Se evidenció la lecitina en la yema de huevo
debido a que al analizar la prueba cualitativa
en los tubos con solución se tornaron de
coloración azul por la presencia del grupo
fosfato unido a la lecitina.
Se evidenció que debido al alto contenido de
ergosterol y al bajo contenido de colesterol se
obtuvo una coloración inadecuada.
BIBLIOGRAFIA
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(1994). Métodos recomendados para
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otros especímenes biológicos.
Sociedad española de bioquímica
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Practica de identificación y
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