Discusión 5-TINCIONES, PRUEBAS BIOQUIMICAS

En la presente práctica se sembró una muestra bacteriológica proporcionada en

diferentes medios, también se realizó una tinción de Gram y algunas pruebas bioquímicas
para su identificación.

La tinción de Gram es un tipo de tinción diferencial después de la coloración de contraste

las células Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen
violetas., esto debido a que las células Gram negativas, los lípidos de la pared (más
abundantes que en las células Gram positivas) se disuelven por este tratamiento, lo que
permite el escape del complejo de cristal violeta con yodo, que al someter al calor y la
decoloración hace que se fije el colorante de contraste (safranina). Se realizaron tinciones
de dos colonias: amarilla donde se observaron ambos tipos de microorganismos gran
positivos y Gram negativos, colonia naranja: se observaron mayormente bacterias Gram
negativas.

Agar nutritivo: Medio de cultivo usado rutinariamente, en donde crece todo tipo de
bacteria. Se hicieron 3 cajas con este medio, caja1: control donde no creció ningún
microorganismo, caja 2: se hizo el sembrado donde se apreció el crecimiento de colonias
blancas y amarillas con tonos naranjas y también se presentó contaminación por hongos,
caja 3: Se apreció crecimiento de colonias blancas y amarillas, también se presentó una
contaminación por hongos de tamaño considerable.

Agar dextrosa papa: Este medio es recomendado para realizar el recuento colonial.
También puede ser utilizado para promover el crecimiento de hongos y levaduras de
importancia clínica. Se hicieron 3 cajas de este medio, caja 1: control donde no hubo
crecimiento, caja2: Se observó crecimiento de colonias blanquecinas donde se realizó el
sembrado lo que indica que no hubo extensión, también hubo contaminación por hongos,
caja2: se observó crecimiento en un solo cuadrante.

Caldo nutritivo: Medio no selectivo, es similar al agar nutritivo pero sin agar, promueve la
fácil observación de la movilidad del microorganismo. Se realizaron 3 tubos de los cuales;
tubo1: control, no se observó crecimiento, tubo2 y 3: tampoco se observó algún tipo de
crecimiento en el medio lo que pudo indicar que no se tomaron las precauciones para la
siembra, hubo alguna condición que evito su crecimiento.
Caldo lactosado: Si se produce la fermentación se produce ácido y gas, lo que es posible
ver con el uso de las campanas Durham. Se realizaron 3 tubos donde; tubo1: control
donde no hubo crecimiento, tubo2: se presentó turbidez en el medio y un sedimentado en
el fondo, tubo3: no se observó ningún tipo de crecimiento o cambio en el medio.

Caldo bilis verde brillante: Medio que propicia el desarrollo de coliformes, mediante la
fermentación de lactosa con producción de acidez y gas. Se realizaron 3 tubos donde;
tubo1: control donde no hubo crecimiento, tubo2 y tubo3: no se observó ningún tipo de
crecimiento o cambio en el medio, lo que indica negativo para este microorganismo.

Citrato de Simmons: Medio de cultivo diferencial, por cambio de pH producción de

alcalinidad, observado con el indicador azul de bromotimol, se hicieron tres tubos, tubo1:
control donde no hubo crecimiento, tubo2 y tubo3: no se reportó ningún crecimiento o
cambio en los tubos, lo que indica que la prueba es negativa para el microorganismo
sembrado.

Kligler: Medio de cultivo indicador para la producción de ácido sulfúrico, fermentación de

azucares y además la producción de gases. Se hicieron tres tubos, tubo1: control donde
no hubo crecimiento, tubo2 y tubo3: no se reportó ningún crecimiento o cambio en los
tubos, lo que indica que la prueba es negativa para el microorganismo sembrado.

SIM: El medio de cultivo tiene consistencia semisólida, la movilidad se observa por el

crecimiento de microorganismos en todo el tubo. Únicamente se realizó sembrado en el
tubo viable donde no se observó ningún tipo de crecimiento o cambio en el medio, lo que
indica negativo para este microorganismo.

Los medios agar extracto de malta y BHI no fue posible hacer un sembrado ya que no
estaban en las condiciones indicadas, pues a los dos no se les añadió el agar suficiente
quedando líquidos e inutilizables para el sembrado e identificación,