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1. Se tomaron 4 tubos de ensayo, a cada uno se le agrego una de las siguientes soluciones: 2ml
de caseína, 2ml de almidón, 2ml de sacarosa, y 2ml de aceite. Después de ello procedimos a
marcar cada uno con el nombre de la solución correspondiente y con respecto al siguiente
diagrama, se le agrego a cada tubo 1ml del reactivo según la biomolecula correspondiente
2. Se macero el maíz con el mortero y el pistilo hasta conseguir una masa homogénea y se
distribuyó 1 gr de esta en los 4 tubos de ensayo. A cada tubo de ensayo se le agrego uno de
los siguientes reactivos: 2ml de biuret, 2ml de benedict, 2ml de lugol, y 2 ml de sudan III.
Se marcó cada tubo con la solución y el reactivo correspondiente.
La solución benedict + maíz se colocó en baño de maría por 20 minutos.
Marco teórico
BIURET
E s un grupo químico con formula R2NC(O)NHC(O)NHR2 formada a partir de 2 de urea;
así el biuret corresponde a un grupo funcional, obteniéndose mediante la trimerizacion de
isocianatos
Se conoce como el test de biuret a una reacción que permite poner en evidencia las proteínas
y las uniones peptídicas.
La presencia de proteínas en una mezcla se puede determinar mediante la reacción del
biuret, ya que el reactivo de biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina. La reacción
se basa en la formación de un complejo de color violeta, debido a la formación de un
complejo de coordinación entre iones Cu”+ y los pares de electrones no compartidos del
nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos presentando un máximo de absorción a
540 nm, por ende da positiva esta reacción en todos los compuestos que tengan dos o más
enlaces peptídicos consecutivos en sus moléculas.
(1)
Lugol
El lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro de potasio Kl en agua destilada ,
el cual tiene en su consistencia 20 gramos de yodo metálico y 40 gramos de yoduro de
potasio, disueltos en 1 litro de agua destilada.
Su aplicación es básicamente para detectar la presencia de almidón en alimentos , a su vez
es empleado como indicador en la prueba de yodo, que funciona para la identificación de
polisacáridos , formando un complejo de inclusión termolabi que se caracteriza por la
presencia de distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula de
polisacárido . Algo muy importante a resaltar es que el lugol no reacciona con azucares
como la glucosa o la fructosa , al ser estos azucares simple.(2)
Benedict
Una de la reacciones más comunes en la identificación de carbohidratos es la reacción de
benedict, su objetivo es la identificación de azucares reductores, como la lactosa, la glucosa,
la maltosa y la celobiosa. En soluciones alcalinas reducen el Cu2+ que tiene color azul Cu+
que precipita la solución alcalina como Cu2O de color naranja.
El color que da los polisacáridos con el lugol (solución I2y de IK) se debe a que el I ocupa
espacios vacíos en las hélices de la cadena de unidades de glucosa, formando un compuesto
de inclusión que altera las propiedades físicas del polisacárido, especialmente la absorción
lumínica. Esta unión del I 2 a la cadena es reversible , y por calentamiento desaparece el
color, que al enfriarse reaparece. El lugol da con el almidón color azul y con el glucógeno
color rojo caoba. (3)
Sudan II
El Sudán III es un tinte diazo del tipo lisocromo (tinte soluble en grasa) usado para manchar
de triglicéridos en secciones congeladas, y algunos lípidos y lipoproteínas encuadernados de
la proteína en secciones de la parafina. Tiene el aspecto de cristales rojizos y una absorción
máxima en 507 (304) nanómetros.
El sudan II es una técnica utilizada generalmente para demostrar la presencia de grasas
mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos.(4)
http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf
Materiales
Estufa
12 tubos de ensayo
Vaso de precipitado 6000 ml
Pinza para tubo de ensayo
1 gradilla
1 pipeta de 5ml
Agitador de vidrio
Mortero y pistilo
Marcador
Reactivo biuret
Reactivo lugol
Reactivo sudan III
Reactivo benedict
Solución de glucosa
Solución de almidón
Solución de caseína
Papa 50 gr
Maní 50 gr
Maíz 50 gr
Informe de laboratorio
Moléculas inorgánicas
20152010622
20152010067
Ingeniería forestal
2015
*WILLIAM ARIZA